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人乳头瘤病毒16型表位嵌合病毒样颗粒的构建及免疫原性研究
1
作者
郭健
张力
+5 位作者
陈力源
李玉华
杨皓杰
田一凡
朱洁
刘微
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第9期689-695,共7页
目的制备E749-57表位嵌合病毒样颗粒,并进行免疫原性分析。方法利用分子模拟软件Discovery Studio预测HPV16 L1的E749-57最佳嵌合位点,将E749-57表位嵌入预测位点。构建pET28a-16L1-E749-57重组质粒,于大肠杆菌中诱导表达HPV16L1-E749-5...
目的制备E749-57表位嵌合病毒样颗粒,并进行免疫原性分析。方法利用分子模拟软件Discovery Studio预测HPV16 L1的E749-57最佳嵌合位点,将E749-57表位嵌入预测位点。构建pET28a-16L1-E749-57重组质粒,于大肠杆菌中诱导表达HPV16L1-E749-57蛋白并利用镍柱进行亲和层析纯化。于体外重组VLPs后,进行动态光散射粒径和透射电镜分析。用E749-57嵌合VLPs免疫小鼠,假病毒中和试验检测免疫血清中和抗体滴度。流式多因子法检测Th1和Th2型细胞因子水平。结果HI loop区355/356为最佳表位嵌合位点。正确表达了HPV16 L1-E749-57蛋白并组装E749-57嵌合VLPs。E749-57嵌合VLPs免疫小鼠3次后,小鼠血清中和抗体滴度log10平均值达到4.23,略低于野生型VLPs(log10平均值为4.45)。但是,相对于野生型VLPs,E749-57嵌合VLPs诱导产生Th1型细胞因子(INF-γ,IL-2,TNF-α)的水平显著提高。结论本研究制备的E749-57嵌合VLPs能刺激机体同时产生较强的体液和细胞免疫应答,可能兼具预防和治疗双重功效,为宫颈癌治疗性疫苗的研制奠定基础。
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关键词
HPV16
嵌合病毒样颗粒
E7蛋白
宫颈癌疫苗
体液和细胞免疫
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职称材料
副猪嗜血杆菌TbpA对仔猪的免疫效力评价
被引量：
5
2
作者
姚焱彬
陈章
+3 位作者
储霞飞
魏建忠
孙裴
李郁
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第3期588-596,共9页
本研究旨在了解副猪嗜血杆菌(HPS)转铁结合蛋白A(TbpA)对仔猪的免疫保护性,从而为HPS新型疫苗的研发奠定基础。采用HPS血清型13型灭活全菌体以及浓度分别为0.5、0.25mg·4mL^(-1)的重组TbpA,经3次间隔期均为14d的免疫后,检测仔猪抗...
本研究旨在了解副猪嗜血杆菌(HPS)转铁结合蛋白A(TbpA)对仔猪的免疫保护性,从而为HPS新型疫苗的研发奠定基础。采用HPS血清型13型灭活全菌体以及浓度分别为0.5、0.25mg·4mL^(-1)的重组TbpA,经3次间隔期均为14d的免疫后,检测仔猪抗体(IgG)水平及细胞因子(IL-5、IL-10、IFN-γ、TNF-α)水平;以相同血清型菌株7LD50剂量,腹腔攻毒,检查病理学变化及其免疫保护率。结果显示:HPS的重组TbpA能诱导仔猪产生较高水平的特异性抗体IgG,并使细胞因子显著升高。重组TbpA和灭活全菌体在免疫后均能使仔猪获得免疫保护,其中0.5mg·4mL^(-1) TbpA和灭活全菌体的免疫保护率均为100%,组织切片病理变化与攻毒对照组之间差异明显。HPS的TbpA能激发仔猪的体液免疫和细胞免疫,产生较强的免疫保护力,可以作为一种新的疫苗候选抗原。
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关键词
副猪嗜血杆菌
转铁结合蛋白A
体液和细胞免疫
免疫
保护率
仔猪
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职称材料
腺病毒载体疫苗在恒河猴体内的长期毒性试验
被引量：
4
3
作者
卢觅佳
周国亮
+6 位作者
李峰
王湛
周玲
陈云祥
由振强
温磊
宣尧仙
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第7期953-958,共6页
目的探讨以5型腺病毒为载体的人用疫苗Ad5-LMP2在恒河猴体内的药效学作用和安全性。方法恒河猴经im给予4.5×1011、1.5×1011和0.5×1011v.p·(kg·次)-1的Ad5-LMP2和等体积的磷酸盐缓冲液(对照组),每5d给药1次,共...
目的探讨以5型腺病毒为载体的人用疫苗Ad5-LMP2在恒河猴体内的药效学作用和安全性。方法恒河猴经im给予4.5×1011、1.5×1011和0.5×1011v.p·(kg·次)-1的Ad5-LMP2和等体积的磷酸盐缓冲液(对照组),每5d给药1次,共给药6次。在停药次日和停药15d时进行尿常规、血液、眼科、心电图、脏器重量和系数、大体观和病理组织学检查;给药前后定期采取猴血清并从剖检猴的脾脏分离淋巴细胞,用ELISA、病毒中和试验和ELISPOT检测腺病毒载体和目的基因蛋白产物LMP2诱导的体液和细胞免疫应答;通过PCR扩增各器官总DNA中的lmp2基因来检测Ad5-LMP2在体内的生物分布。结果在整个试验期间试验猴均未出现任何异常反应,也无动物死亡;给药组动物在整个给药期间的摄食、饮水和体重增长及上述各项常规毒理学检测中均未出现明显异常。受试物在试验猴体内诱发了较高水平的抗腺病毒中和抗体,但目的蛋白LMP2诱导的特异性细胞免疫应答未受抗腺病毒中和抗体的明显抑制;在猴的心、肝、脾、肺、肾、脑、睾丸(或卵巢)及给药部位均可检测到Ad5-LMP2并维持到停药后15d。结论在保证受试物药理学作用的前提下,恒河猴连续1mon肌肉注射相当人临床拟用剂量37.5倍的Ad5-LMP2,未见明显不良反应,中毒靶器官和中毒剂量未明显显示,其安全剂量大于4.5×1011v.p·(kg·次)-1。
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关键词
腺病毒载体疫苗
恒河猴
长期毒性试验
体液和细胞免疫
生物分布
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职称材料
题名
人乳头瘤病毒16型表位嵌合病毒样颗粒的构建及免疫原性研究
1
作者
郭健
张力
陈力源
李玉华
杨皓杰
田一凡
朱洁
刘微
机构
吉林医药学院
吉林市中心医院
吉林大学生命科学学院
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第9期689-695,共7页
基金
国家自然科学基金项目(No.81901682)
吉林市创新科技发展计划项目(No.20190104127)
+1 种基金
吉林省大学生创新创业训练计划项目(No.201913706053)
吉林省抗体工程科技协同创新中心(No.20180623045TC)联合资助。
文摘
目的制备E749-57表位嵌合病毒样颗粒,并进行免疫原性分析。方法利用分子模拟软件Discovery Studio预测HPV16 L1的E749-57最佳嵌合位点,将E749-57表位嵌入预测位点。构建pET28a-16L1-E749-57重组质粒,于大肠杆菌中诱导表达HPV16L1-E749-57蛋白并利用镍柱进行亲和层析纯化。于体外重组VLPs后,进行动态光散射粒径和透射电镜分析。用E749-57嵌合VLPs免疫小鼠,假病毒中和试验检测免疫血清中和抗体滴度。流式多因子法检测Th1和Th2型细胞因子水平。结果HI loop区355/356为最佳表位嵌合位点。正确表达了HPV16 L1-E749-57蛋白并组装E749-57嵌合VLPs。E749-57嵌合VLPs免疫小鼠3次后,小鼠血清中和抗体滴度log10平均值达到4.23,略低于野生型VLPs(log10平均值为4.45)。但是,相对于野生型VLPs,E749-57嵌合VLPs诱导产生Th1型细胞因子(INF-γ,IL-2,TNF-α)的水平显著提高。结论本研究制备的E749-57嵌合VLPs能刺激机体同时产生较强的体液和细胞免疫应答,可能兼具预防和治疗双重功效,为宫颈癌治疗性疫苗的研制奠定基础。
关键词
HPV16
嵌合病毒样颗粒
E7蛋白
宫颈癌疫苗
体液和细胞免疫
Keywords
HPV16
chimeric virus-like particles
E7 protein
cervical cancer vaccine
humoral and cellular immunity
分类号
R373 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
副猪嗜血杆菌TbpA对仔猪的免疫效力评价
被引量：
5
2
作者
姚焱彬
陈章
储霞飞
魏建忠
孙裴
李郁
机构
安徽农业大学动物科技学院
出处
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018年第3期588-596,共9页
基金
国家星火计划重点项目(2014GA710002)
安徽省长三角联合科技攻关项目(1101c0603065)
安徽省生猪产业体系基金项目(皖农科[2016]84号)
文摘
本研究旨在了解副猪嗜血杆菌(HPS)转铁结合蛋白A(TbpA)对仔猪的免疫保护性,从而为HPS新型疫苗的研发奠定基础。采用HPS血清型13型灭活全菌体以及浓度分别为0.5、0.25mg·4mL^(-1)的重组TbpA,经3次间隔期均为14d的免疫后,检测仔猪抗体(IgG)水平及细胞因子(IL-5、IL-10、IFN-γ、TNF-α)水平;以相同血清型菌株7LD50剂量,腹腔攻毒,检查病理学变化及其免疫保护率。结果显示:HPS的重组TbpA能诱导仔猪产生较高水平的特异性抗体IgG,并使细胞因子显著升高。重组TbpA和灭活全菌体在免疫后均能使仔猪获得免疫保护,其中0.5mg·4mL^(-1) TbpA和灭活全菌体的免疫保护率均为100%,组织切片病理变化与攻毒对照组之间差异明显。HPS的TbpA能激发仔猪的体液免疫和细胞免疫,产生较强的免疫保护力,可以作为一种新的疫苗候选抗原。
关键词
副猪嗜血杆菌
转铁结合蛋白A
体液和细胞免疫
免疫
保护率
仔猪
Keywords
Haemophilus parasuis
transferring-binding protein A
humoral and cellular immunity
immunoprotection
piglets
分类号
S855.12 [农业科学—临床兽医学]
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职称材料
题名
腺病毒载体疫苗在恒河猴体内的长期毒性试验
被引量：
4
3
作者
卢觅佳
周国亮
李峰
王湛
周玲
陈云祥
由振强
温磊
宣尧仙
机构
浙江省医学科学院国家新药安全评价研究重点实验室
中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所
出处
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第7期953-958,共6页
基金
浙江省科技厅重大科技攻关项目(No2004C13042)
文摘
目的探讨以5型腺病毒为载体的人用疫苗Ad5-LMP2在恒河猴体内的药效学作用和安全性。方法恒河猴经im给予4.5×1011、1.5×1011和0.5×1011v.p·(kg·次)-1的Ad5-LMP2和等体积的磷酸盐缓冲液(对照组),每5d给药1次,共给药6次。在停药次日和停药15d时进行尿常规、血液、眼科、心电图、脏器重量和系数、大体观和病理组织学检查;给药前后定期采取猴血清并从剖检猴的脾脏分离淋巴细胞,用ELISA、病毒中和试验和ELISPOT检测腺病毒载体和目的基因蛋白产物LMP2诱导的体液和细胞免疫应答;通过PCR扩增各器官总DNA中的lmp2基因来检测Ad5-LMP2在体内的生物分布。结果在整个试验期间试验猴均未出现任何异常反应,也无动物死亡;给药组动物在整个给药期间的摄食、饮水和体重增长及上述各项常规毒理学检测中均未出现明显异常。受试物在试验猴体内诱发了较高水平的抗腺病毒中和抗体,但目的蛋白LMP2诱导的特异性细胞免疫应答未受抗腺病毒中和抗体的明显抑制;在猴的心、肝、脾、肺、肾、脑、睾丸(或卵巢)及给药部位均可检测到Ad5-LMP2并维持到停药后15d。结论在保证受试物药理学作用的前提下,恒河猴连续1mon肌肉注射相当人临床拟用剂量37.5倍的Ad5-LMP2,未见明显不良反应,中毒靶器官和中毒剂量未明显显示,其安全剂量大于4.5×1011v.p·(kg·次)-1。
关键词
腺病毒载体疫苗
恒河猴
长期毒性试验
体液和细胞免疫
生物分布
Keywords
adenovirus vector vaccine
rhesus monkey
repeat administration toxicity study
humoral and cellular immune response
biological distribution
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
在线阅读
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人乳头瘤病毒16型表位嵌合病毒样颗粒的构建及免疫原性研究
郭健
张力
陈力源
李玉华
杨皓杰
田一凡
朱洁
刘微
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
副猪嗜血杆菌TbpA对仔猪的免疫效力评价
姚焱彬
陈章
储霞飞
魏建忠
孙裴
李郁
《畜牧兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2018
5
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
腺病毒载体疫苗在恒河猴体内的长期毒性试验
卢觅佳
周国亮
李峰
王湛
周玲
陈云祥
由振强
温磊
宣尧仙
《中国药理学通报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
4
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职称材料
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