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转基因小鼠支持细胞体外重编程为诱导多能性干细胞的研究
1
作者
杜军慧
曹文广
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2014年第11期184-190,共7页
试验旨在研究利用4种特定转录因子将转基因小鼠支持细胞体外重编程为诱导多能性干细胞(induced pluripotent stem cells,iPS)。通过逆转录病毒载体将4种特定转录因子Oct4、Sox2、c-Myc及Klf4导入转基因小鼠支持细胞,同时以绿色荧光蛋白(...
试验旨在研究利用4种特定转录因子将转基因小鼠支持细胞体外重编程为诱导多能性干细胞(induced pluripotent stem cells,iPS)。通过逆转录病毒载体将4种特定转录因子Oct4、Sox2、c-Myc及Klf4导入转基因小鼠支持细胞,同时以绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)空载体检测病毒感染情况。感染的支持细胞3d左右表达GFP蛋白,同时细胞开始缩小聚集,失去原有支持细胞形态,逐步形成突起样克隆,16d左右感染的支持细胞不表达GFP蛋白,形成具有典型干细胞特征的iPS细胞。碱性磷酸酶染色表明iPS细胞处于未分化状态;反转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测iPS细胞可表达胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESC)特异性基因;体外悬滴培养可形成拟胚体(embryoid body,EBs),可分化为三胚层来源的多种细胞。
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关键词
转红色荧光蛋白基因小鼠
支持细胞
体外诱导重编程
诱导
多能性干细胞
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题名
转基因小鼠支持细胞体外重编程为诱导多能性干细胞的研究
1
作者
杜军慧
曹文广
机构
中国农业科学院北京畜牧兽医研究所
出处
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2014年第11期184-190,共7页
基金
国家转基因重大专项"优质转基因肉羊新品种培育"(2013ZX08008-003
2014ZX08008-003)
文摘
试验旨在研究利用4种特定转录因子将转基因小鼠支持细胞体外重编程为诱导多能性干细胞(induced pluripotent stem cells,iPS)。通过逆转录病毒载体将4种特定转录因子Oct4、Sox2、c-Myc及Klf4导入转基因小鼠支持细胞,同时以绿色荧光蛋白(green fluorescence protein,GFP)空载体检测病毒感染情况。感染的支持细胞3d左右表达GFP蛋白,同时细胞开始缩小聚集,失去原有支持细胞形态,逐步形成突起样克隆,16d左右感染的支持细胞不表达GFP蛋白,形成具有典型干细胞特征的iPS细胞。碱性磷酸酶染色表明iPS细胞处于未分化状态;反转录聚合酶链式反应(reverse transcription-polymerase chain reaction,RT-PCR)检测iPS细胞可表达胚胎干细胞(embryonic stem cells,ESC)特异性基因;体外悬滴培养可形成拟胚体(embryoid body,EBs),可分化为三胚层来源的多种细胞。
关键词
转红色荧光蛋白基因小鼠
支持细胞
体外诱导重编程
诱导
多能性干细胞
Keywords
transgenic mice with red fluorescence protein
sertoli cells
in vitro induced reprogramming
induced pluripotent stem cells
分类号
Q813.5 [生物学—生物工程]
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作者
出处
发文年
被引量
操作
1
转基因小鼠支持细胞体外重编程为诱导多能性干细胞的研究
杜军慧
曹文广
《中国畜牧兽医》
CAS
北大核心
2014
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