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外周血内皮祖细胞体外培养分化研究 被引量:4
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作者 顾俊 王长谦 +4 位作者 范华骅 聂晓绚 何奔 王彬尧 黄定九 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期233-236,共4页
目的从人外周血中分离、培养和鉴定内皮祖细胞(EPCs),并观察其在体外增殖分化过程中各种细胞表型的变化。方法采用密度梯度离心方法获得外周血单个核细胞,体外进行诱导、分化和扩增,于培养第7天选择免疫荧光(DiI-acLDL/FITC-UEA-Ⅰ)鉴定... 目的从人外周血中分离、培养和鉴定内皮祖细胞(EPCs),并观察其在体外增殖分化过程中各种细胞表型的变化。方法采用密度梯度离心方法获得外周血单个核细胞,体外进行诱导、分化和扩增,于培养第7天选择免疫荧光(DiI-acLDL/FITC-UEA-Ⅰ)鉴定EPCs,并且用流式细胞仪和RT-PCR方法观察上述细胞在第0、4、10和21天的CD34、CD31、KDR和eNOS的表达变化。结果外周血单个核细胞在培养过程中出现梭形贴壁和铺路石样等形态;第7天免疫荧光染色表明,约70%的细胞呈双荧光阳性;流式细胞仪分析显示,CD31和KDR表达在体外培养过程中逐渐升高,至第21天分别达到(72.1±11.2)%和(81.0±12.5)%,而CD34在第10天达到高峰(38.0±13.4)%后,第21天下降为(28.3%±12.2)%;RT-PCR结果表明,第4、10和21天eNOS的表达逐渐增强。结论本试验成功从外周血单个核细胞中分离培养出EPCs,在其体外扩增分化为成熟内皮细胞的过程中,CD31、KDR和eNOS等内皮细胞标志表达逐渐增强,而CD34的表达在内皮祖细胞的成熟分化过程中略有下降。 展开更多
关键词 内皮祖细胞 内皮细胞 血管新生 周血 体外培养分化
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牛与小鼠胚胎在分化抑制培养系统中的行为比较
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作者 杨奇 安立龙 +3 位作者 窦忠英 高志敏 雷安民 杨春荣 《西北农业大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第2期33-37,共5页
在自制培养基中 ,以原代小鼠胎儿成纤维细胞为饲养层 ,观察比较了牛与小鼠胚胎在体外分化抑制培养体系中的生长行为。结果表明 ,牛囊胚一般培养 36~ 6 0 h后孵化脱带 ,96~ 12 0 h后贴壁 ,12 0~ 144 h为ICM传代的最佳时刻。小鼠囊胚... 在自制培养基中 ,以原代小鼠胎儿成纤维细胞为饲养层 ,观察比较了牛与小鼠胚胎在体外分化抑制培养体系中的生长行为。结果表明 ,牛囊胚一般培养 36~ 6 0 h后孵化脱带 ,96~ 12 0 h后贴壁 ,12 0~ 144 h为ICM传代的最佳时刻。小鼠囊胚一般培养 12~ 2 4h孵化脱带 ,2 4~ 48h贴壁 ,72~ 96 h为传代的最佳时刻。牛胚胎贴附于饲养层上生长 ,极易从饲养层上剥离 ;小鼠胚胎镶嵌在饲养层中 ,滋养层细胞与饲养层细胞间连接紧密。牛ICM色深发黑 ,集落隆起程度较低 ;小鼠 ICM呈暗黄色 ,有呈柱状增殖的趋势。牛滋养层呈网状 。 展开更多
关键词 小鼠 胚胎 分化抑制培养系统 生长行为 胚胎干细胞 ES细胞
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