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NIH3T3-CD40L-IL-2-IL-4-IL-21-BAFF细胞系的稳定建立及其在体外培养B细胞中的应用
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作者 韩玉洁 梁思辛 +8 位作者 郑瑞 董昊 赵晓娟 王鹏举 李琰龙 杨建勋 杨安钢 阎博 左百乐 《中国免疫学杂志》 北大核心 2026年第1期180-185,共6页
目的:将CD40L、IL-2、IL-4、IL-21及BAFF表达于NIH3T3细胞,进一步优化B细胞体外培养条件。方法:利用分子克隆技术构建包含CD40L、IL-2、IL-4、IL-21、BAFF基因的慢病毒表达载体,制备慢病毒并感染NIH3T3细胞,流式细胞术检测CD40L、BAFF表... 目的:将CD40L、IL-2、IL-4、IL-21及BAFF表达于NIH3T3细胞,进一步优化B细胞体外培养条件。方法:利用分子克隆技术构建包含CD40L、IL-2、IL-4、IL-21、BAFF基因的慢病毒表达载体,制备慢病毒并感染NIH3T3细胞,流式细胞术检测CD40L、BAFF表达,ELISA检测IL-2、IL-4、IL-21分泌水平,并对其作为饲养细胞与B细胞在体外共培养16 d,显微镜观察B细胞增殖情况,ELISA检测IgG分泌水平。结果:成功构建了NIH3T3-CD40L-IL-2-IL-4-IL-21-BAFF细胞系,该细胞系能够稳定表达CD40L、BAFF,分泌高水平的IL-2、IL-4、IL-21,与B细胞体外共培养16 d能够支持低密度B细胞高效扩增,并诱导B细胞分化为浆细胞,且其抗体分泌量高达517 ng/mL。结论:本研究成功构建了能够支持B细胞体外增殖与活化的饲养细胞系,为单克隆抗体制备奠定了良好基础。 展开更多
关键词 饲养细胞 CD40L BAFF NIH3T3细胞 体外培养
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窦前卵泡体外培养在反刍动物中的研究进展
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作者 郭芷函 李阳 +6 位作者 王绍雄 韩志强 李肖 崔冰冰 吕洁 张光磊 徐超 《中国畜牧兽医》 北大核心 2026年第2期532-542,共11页
窦前卵泡是卵泡从静息状态向主动生长阶段转变的关键时期,在反刍动物卵巢中数量丰富,具有较高的发育潜能和重要的应用价值。随着体外生殖技术的发展,窦前卵泡体外培养作为一种辅助繁殖手段,已成为反刍动物生殖生物学研究的重要方向。该... 窦前卵泡是卵泡从静息状态向主动生长阶段转变的关键时期,在反刍动物卵巢中数量丰富,具有较高的发育潜能和重要的应用价值。随着体外生殖技术的发展,窦前卵泡体外培养作为一种辅助繁殖手段,已成为反刍动物生殖生物学研究的重要方向。该技术不仅有助于提高家畜繁殖效率,还为濒危物种的生殖资源保存与种群恢复提供了新的思路。然而,目前反刍动物窦前卵泡体外发育仍受多种因素制约,卵泡结构复杂、培养体系稳定性不足以及卵母细胞可育性较低等问题限制了其进一步应用。反刍动物窦前卵泡在体外条件下已可实现一定程度的生长与发育,部分研究获得了桑椹胚等早期胚胎,但整体成熟率和发育潜能仍有限。文章系统综述了反刍动物窦前卵泡的分离方法与体外培养体系,包括机械分离与酶解法、原位培养、二维培养与三维培养,并比较了不同方法和体系在卵泡完整性、适用性及发育效果方面的差异。未来研究应聚焦于分离方法标准化、培养体系优化以及卵泡长期存活与体外成熟机制的解析,以期建立更为高效和稳定的培养体系,推动该技术在家畜生产与濒危物种保护中的应用转化。 展开更多
关键词 反刍动物 窦前卵泡 体外培养 分离技术
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大黄鱼源贪食迈阿密虫(Miamiensisavidus)的分离鉴定、体外培养及药物敏感性研究
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作者 薛谦玺 郭香 +5 位作者 袁家豪 韦海运 黄光亮 卓玉琛 陈新华 覃盼 《渔业研究》 2025年第5期598-608,共11页
【背景】大黄鱼(Larimichthyscrocea)作为中国特色海水养殖鱼种,具有重要经济价值和产业地位,已成为中国海水养殖产量较高的鱼类之一。然而,随着集约化养殖的快速发展,多种因素导致养殖环境恶化,造成病害频发,对大黄鱼养殖业造成重大经... 【背景】大黄鱼(Larimichthyscrocea)作为中国特色海水养殖鱼种,具有重要经济价值和产业地位,已成为中国海水养殖产量较高的鱼类之一。然而,随着集约化养殖的快速发展,多种因素导致养殖环境恶化,造成病害频发,对大黄鱼养殖业造成重大经济损失。其中,以盾纤毛虫病为代表的寄生虫病近年来日益严重。【目的】本研究旨在分离并鉴定感染大黄鱼的盾纤毛虫种类,研究其病原学特征,以期为盾纤毛虫病防控提供理论基础。【方法】本研究从宁德海区某大黄鱼养殖渔排采集锥体虫与盾纤毛虫共感染的鱼体样品,成功分离、培养并鉴定盾纤毛虫种类,建立稳定的体外培养体系。利用体外培养体系,评估盾纤毛虫在不同温度(0、10、20、25、26、28、30℃)、pH(5.5、6.5、7.4、8.5、9.0)及盐度(0、5、10、20、30)等培养条件下的增殖特性。同时,开展体外药物敏感性实验,评估常用水产抗虫药物的杀虫效果。【结果】形态学观察结合cox1和18SrRNA基因系统发育分析表明,本研究分离的盾纤毛虫为贪食迈阿密虫(Miamiensis avidus)。环境耐受性实验结果显示,虫体在温度为0℃条件下12h内全部死亡,在温度为30℃条件下种群密度逐渐下降;温度为10℃时仍可增殖但显著低于对照组(20℃),而在温度为25℃时与对照组差异不显著,提示该虫对高温(>25℃)较为敏感。盐度实验表明,虫体在淡水中无法存活,在盐度10条件下可增殖但密度显著低于对照组(盐度30),而盐度20条件下与对照组无显著差异,表明其具备较广的盐度耐受性。pH实验结果表明,虫体在pH5.5和pH9.0下仍能增殖,但密度显著低于对照组(pH7.4);在pH6.5和pH8.5下与对照组差异不显著,提示其具有较强的pH适应性。体外药物敏感性实验显示,香芹酚在低剂量(100mg/kg)即可显著杀灭贪食迈阿密虫。【结论】本研究首次从中鱼阶段的大黄鱼中分离出盾纤毛虫,并鉴定其为贪食迈阿密虫,系统阐明了环境因子对其增殖的影响,并在常用水产药物中筛选出高效抗虫药物香芹酚。这些研究结果不仅有助于理解大黄鱼源贪食迈阿密虫的生物学特性,也为盾纤毛虫病的科学防控提供了理论基础。 展开更多
关键词 大黄鱼 贪食迈阿密虫 种属鉴定 体外培养 环境因子 药敏实验
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不同体外培养条件对缺氧诱导原代心肌成纤维细胞活化的影响
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作者 付可威 曹梦菲 +1 位作者 罗洁 袁伟 《中华老年心脑血管病杂志》 北大核心 2025年第4期497-503,共7页
目的探讨不同浓度葡萄糖、血清体外培养对缺氧诱导的原代心肌成纤维细胞活化及Yes相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)表达的影响。方法采用酶消及差速贴壁法分离并纯化原代乳小鼠细胞,随机分为6组:低糖高血清组(1.0 g/L葡萄糖+10%血... 目的探讨不同浓度葡萄糖、血清体外培养对缺氧诱导的原代心肌成纤维细胞活化及Yes相关蛋白(Yes-associated protein,YAP)表达的影响。方法采用酶消及差速贴壁法分离并纯化原代乳小鼠细胞,随机分为6组:低糖高血清组(1.0 g/L葡萄糖+10%血清),高糖高血清组(4.5 g/L葡萄糖+10%血清),低糖中血清组(1.0 g/L葡萄糖+5%血清),高糖中血清组(4.5 g/L葡萄糖+5%血清),低糖无血清组(1.0 g/L葡萄糖+0%血清),高糖无血清组(4.5 g/L葡萄糖+0%血清)。体外培养24 h观察细胞形态,Western blot检测α平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、转化生长因子(transforming growth factor beta,TGF-β)、Ⅰ型胶原及YAP表达,免疫荧光法观察α-SMA、YAP表达及定位,5-乙炔基-2′脱氧尿嘧啶核苷染色以及划痕实验分别评估细胞增殖、迁移能力。结果经1%O_(2)培养24 h后,随着培养液血清水平下降及葡萄糖浓度升高,细胞形态逐渐向肌成纤维细胞变化,以高糖无血清组细胞形态变化最为显著。与高糖高血清组比较,高糖无血清组Ⅰ型胶原、TGF-β、α-SMA及YAP表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与低糖高血清组比较,低糖无血清组α-SMA荧光强度明显升高[(9.23±2.45)%vs(2.40±2.04)%,P<0.05];与低糖无血清组比较,高糖无血清组Ⅰ型胶原、TGF-β、α-SMA及YAP表达明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与高糖高血清组和低糖无血清组比较,高糖无血清组α-SMA荧光强度、YAP入核、细胞迁移明显升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论在1%O_(2)缺氧条件下,选用高糖无血清培养对于构建缺氧诱导活化的体外细胞模型最为合适,并且YAP激活程度最为显著。 展开更多
关键词 缺氧 成纤维细胞 体外培养技术 Yes相关蛋白
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附红细胞体体外培养研究进展
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作者 丁晓欣 郭伟 贾杏林 《现代畜牧科技》 2025年第4期137-139,共3页
附红细胞体大量增殖的培养一直是未攻克的难题,给附红细胞体的探索带来障碍。该文主要对近20年对附红细胞体培养方法的改变,如血清添加量及种类、培养基选择、培养温度、氧气含量等进行概述。
关键词 附红细胞 体外培养 进展
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牛肝细胞体外培养及其去分化、凋亡机制研究进展
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作者 张凯凯 胡荣斌 +2 位作者 冉江 代国滔 赵元峰 《饲料工业》 北大核心 2025年第3期143-149,共7页
肝细胞是肝脏组织的主要组成部分,牛的生产、繁殖、健康和饲料转化效率均与肝脏密切相关,对牛肝细胞的代谢和解毒功能进行研究具有重要意义。但肝细胞存活时间短、特异性功能活性逐渐丧失,缺少成熟的细胞系用于牛肝细胞特异性功能研究... 肝细胞是肝脏组织的主要组成部分,牛的生产、繁殖、健康和饲料转化效率均与肝脏密切相关,对牛肝细胞的代谢和解毒功能进行研究具有重要意义。但肝细胞存活时间短、特异性功能活性逐渐丧失,缺少成熟的细胞系用于牛肝细胞特异性功能研究。文章系统阐述了牛肝细胞的体外培养方法,肝细胞的去分化机制、相关信号途径及应对肝细胞去分化的策略,分离过程肝细胞的凋亡机制,以及肝细胞的冷冻保存方法,以期建立便捷高效的肝细胞体外培养体系,为获得存活时间长、能稳定表达特异性活性的肝细胞提供理论基础。 展开更多
关键词 牛肝细胞 体外培养 去分化 细胞凋亡 冷冻保存
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牦牛颗粒细胞体外培养方案的优化
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作者 舒适 《青海畜牧兽医杂志》 2025年第1期21-25,共5页
牦牛繁殖率低是制约牦牛经济效益的主要原因之一。为了深入研究牦牛繁殖的分子机制,本研究使用3种不同方案分别对牦牛颗粒细胞进行培养,最终优化筛选出生长速度快、传代效果好的牦牛颗粒细胞培养方案。相对于其他两种培养方案,用含有10... 牦牛繁殖率低是制约牦牛经济效益的主要原因之一。为了深入研究牦牛繁殖的分子机制,本研究使用3种不同方案分别对牦牛颗粒细胞进行培养,最终优化筛选出生长速度快、传代效果好的牦牛颗粒细胞培养方案。相对于其他两种培养方案,用含有10%双抗的生理盐水浸泡的方法将采集的卵巢带回实验室,并使用含有10%胎牛血清的完全培养基对颗粒细胞进行培养后的培养效果最佳。本研究为提高牦牛繁殖率的分子策略研究提供了理论依据和数据支撑。 展开更多
关键词 牦牛 颗粒细胞 体外培养 优化
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鸡胚胎体外培养的研究 被引量:2
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作者 李善刚 杜立新 《山东农业大学学报(自然科学版)》 CSCD 2000年第2期125-128,共4页
鸡胚体外培养系统包括 :将鸡胚从蛋壳中取出转入代用蛋壳Ⅰ中补加蛋清至满 ,用保鲜膜封口固定 ,38℃、翻蛋角 90°、RH40 %孵化 72h ,然后转入代用蛋壳Ⅱ中用保鲜膜封口固定 ,38℃、翻蛋角 40°、RH5 0 %孵化至 1 8d ,之后转入... 鸡胚体外培养系统包括 :将鸡胚从蛋壳中取出转入代用蛋壳Ⅰ中补加蛋清至满 ,用保鲜膜封口固定 ,38℃、翻蛋角 90°、RH40 %孵化 72h ,然后转入代用蛋壳Ⅱ中用保鲜膜封口固定 ,38℃、翻蛋角 40°、RH5 0 %孵化至 1 8d ,之后转入恒温箱停止翻蛋在 37 5℃、RH6 0 %的条件下孵化至出雏。通过以上培养系统 ,在手工翻蛋 (4次 /d)的情况下分两组处理 1 7只鸡胚 ,孵化率为 1 1 8% (2 /1 7) ,两只雏鸡中一只为弱雏 ;在自动翻蛋 (1次 /h)的情况下处理 40只鸡胚 ,孵化率为 2 2 5 % (9/4 0 )。孵出的小鸡经正常饲养能够长大并产卵。通过自动翻蛋体外培养系统可以获得满意的效果。实验过程中发现 ,两次转移对胚胎和卵黄造成的损伤、卵黄膜与代用蛋壳的粘连。 展开更多
关键词 翻蛋 代用蛋壳 孵化率 鸡胚 胚胎体外培养 卵黄 出雏 体外培养系统 固定 取出
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改良兔晶状体上皮细胞体外培养 被引量:1
9
作者 石广森 刘平 陈诗慧 《眼科研究》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期381-381,共1页
关键词 晶状上皮细胞 细胞体外培养 改良 体外培养方法 细胞分化 后囊混浊 cells 细胞学基础 白内障
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牛体外受精技术的研究——单层细胞预培养时间对牛早期胚胎体外培养效果的影响 被引量:3
10
作者 谭世俭 卢克焕 《广西畜牧兽医》 1993年第1期11-14,共4页
将2469枚经体外成熟、体外受精后获得的牛早期胚胎(2~8细胞阶段)随机放入7组不同日龄(分别预培养0~9天)的牛卵泡颗粒细胞单层细胞滴中进行“复合”培养,然后观察这些胚胎在体外培养条件下继续发育至囊胚和孵化囊胚阶段能力的差异。结... 将2469枚经体外成熟、体外受精后获得的牛早期胚胎(2~8细胞阶段)随机放入7组不同日龄(分别预培养0~9天)的牛卵泡颗粒细胞单层细胞滴中进行“复合”培养,然后观察这些胚胎在体外培养条件下继续发育至囊胚和孵化囊胚阶段能力的差异。结果随单层细胞预培养时间的延长(0~4天内),牛早期胚胎的囊胚发育率、发育速度及囊胚胎孵化率均呈逐渐升高的趋势;尔后,培养效果又稍有下降。经统计学检验,各组间囊胚发育率(31.7~39.2%)和囊胚孵化率(61.1~72.6%)及7日龄囊胚发育比率(41.8~58.5%)均无显著差异(P>0.05)。这表明,利用不同预培养时间(0~6天)的颗粒细胞单层与牛早期胚胎“复合”培养,都同样具有促进胚胎在体外条件下发育到囊胚和孵化囊胚阶段的能力,但以使用预培养2~4天单层细胞进行“复合”培养效果较佳。 展开更多
关键词 囊胚率 单层细胞 受精技术 培养时间 胚胎冷冻 早期胚胎 体外培养条件 成熟 胚胎体外培养 颗粒细胞
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大鼠脑的神经干细胞的体外培养、增殖和分化 被引量:23
11
作者 郑志竑 林玲 +2 位作者 胡建石 陈贻锴 林建银 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期33-36,共4页
采用无血清培养基分离和培养大鼠脑的神经干细胞,并通过免疫荧光细胞化学技术进行细胞自我更新能力、巢蛋白表达和多向分化潜能的鉴定。鉴定结果表明,所分离培养的细胞为大鼠神经干细胞,具有神经干细胞的特征,并可在体外大量增殖和较长... 采用无血清培养基分离和培养大鼠脑的神经干细胞,并通过免疫荧光细胞化学技术进行细胞自我更新能力、巢蛋白表达和多向分化潜能的鉴定。鉴定结果表明,所分离培养的细胞为大鼠神经干细胞,具有神经干细胞的特征,并可在体外大量增殖和较长期培养,可经诱导分化为神经元、星形胶质细胞、少突胶质细胞,是进行诱导分化的良好细胞模型。本文讨论了神经干细胞传代培养中应予以注意的问题和对策。 展开更多
关键词 大鼠 神经干细胞 体外培养 增殖 分化
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淫羊藿总黄酮对体外培养成骨细胞的影响 被引量:70
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作者 李勇 季晖 +1 位作者 李萍 谢林 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第1期48-50,共3页
目的 :观察淫羊藿总黄酮对体外培养成骨细胞的作用。方法 :取新生 1~ 3d SD大鼠头盖骨用酶消化法分离成骨细胞。第 3代细胞经 MTT法、茜素红染色法观察淫羊藿总黄酮对体外培养成骨细胞增殖、矿化结节形成的影响。结果 :淫羊藿总黄酮 1... 目的 :观察淫羊藿总黄酮对体外培养成骨细胞的作用。方法 :取新生 1~ 3d SD大鼠头盖骨用酶消化法分离成骨细胞。第 3代细胞经 MTT法、茜素红染色法观察淫羊藿总黄酮对体外培养成骨细胞增殖、矿化结节形成的影响。结果 :淫羊藿总黄酮 1~ 1 0 μg/ml浓度具有显著的促进成骨细胞增殖及提高矿化结节形成数量的作用。结论 展开更多
关键词 淫羊藿总黄酮 成骨细胞 体外培养 骨质疏松症
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体外培养的山羊乳腺上皮细胞形态研究 被引量:20
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作者 郑月茂 彭新荣 +2 位作者 徐永平 石玉强 张涌 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2004年第3期37-41,共5页
 通过有效的细胞培养方法获得山羊乳腺上皮细胞系,对这些细胞形态进行光镜观察,结果发现,细胞可形成闭合型和开放型细胞群,闭合型细胞群边界清晰,细胞之间结合紧密;开放型细胞群边界不清,细胞相互分散存在于一局限的范围内。乳腺上皮...  通过有效的细胞培养方法获得山羊乳腺上皮细胞系,对这些细胞形态进行光镜观察,结果发现,细胞可形成闭合型和开放型细胞群,闭合型细胞群边界清晰,细胞之间结合紧密;开放型细胞群边界不清,细胞相互分散存在于一局限的范围内。乳腺上皮细胞与成纤维细胞混生时分区生长,界线明显;细胞之间形成许多腔状结构。纯化的乳腺上皮细胞通过单细胞悬浮后传代,部分细胞形成岛屿状聚集,部分细胞以贴壁的自由单个细胞散在形式存在。上皮细胞增殖可形成圆顶型结构,呈乳头状(称之为乳球体);乳腺上皮细胞可产生并分泌乳汁,分泌到细胞外的乳汁流动形成网状结构。山羊乳腺上皮细胞含不同的细胞类型,大多数上皮细胞呈短梭形或多角形,细胞之间紧密相靠,互相衔接,连接成片,呈蜂窝状;细胞核呈圆形或椭圆形,核仁2~4枚;部分细胞呈圆饼状,体积较大;出现部分长形细胞;部分细胞表面出现绒毛状突起;接触抑制的上皮细胞形态不均一。 展开更多
关键词 体外培养 山羊 乳腺上皮细胞 细胞形态
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小鼠卵巢颗粒细胞的体外培养 被引量:23
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作者 王妍 赵晓娥 +3 位作者 杨培先 张仕强 苏利红 马保华 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2007年第8期11-14,共4页
为了探讨小鼠卵巢颗粒细胞体外生长的特点及增殖的调控因素,分别添加2μg/mL胰岛素、50ng/mL FSH和20 ng/mL EGF的培养液培养小鼠卵巢颗粒细胞,每隔24 h对细胞进行计数,研究其对小鼠卵巢颗粒细胞增殖的影响。此外,还对培养过程中出现的... 为了探讨小鼠卵巢颗粒细胞体外生长的特点及增殖的调控因素,分别添加2μg/mL胰岛素、50ng/mL FSH和20 ng/mL EGF的培养液培养小鼠卵巢颗粒细胞,每隔24 h对细胞进行计数,研究其对小鼠卵巢颗粒细胞增殖的影响。此外,还对培养过程中出现的卵巢颗粒细胞集落进行了AKP染色和C-kit免疫组化染色鉴定。结果显示,在培养的第4天添加EGF组和FSH组与对照组相比均具有显著的促增殖作用(P<0.05),添加胰岛素组促增殖作用不显著(P>0.05);卵巢颗粒细胞集落经AKP染色和C-kit免疫组化染色均呈阳性。提示EGF和FSH对小鼠卵巢颗粒细胞具有促增殖效应,小鼠卵巢颗粒细胞具有干细胞的部分特性。 展开更多
关键词 卵巢颗粒细胞 体外培养 细胞增殖 小鼠
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积雪草甙对体外培养的成纤维细胞的作用 被引量:65
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作者 谢举临 利天增 +3 位作者 祁少海 黎志明 梁惠珍 吴义方 《中山医科大学学报》 CSCD 北大核心 2001年第1期41-43,47,共4页
【目的】探讨积雪草甙治疗增生性瘢痕的作用机制。【方法】采用光镜、电镜、3 H TdR、3 H脯氨酸掺入及MTT比色等方法检测成纤维细胞核DNA合成和胶原蛋白的合成。【结果】积雪草甙不仅能影响成纤维细胞的超微结构 ,而且能抑制成纤维细胞... 【目的】探讨积雪草甙治疗增生性瘢痕的作用机制。【方法】采用光镜、电镜、3 H TdR、3 H脯氨酸掺入及MTT比色等方法检测成纤维细胞核DNA合成和胶原蛋白的合成。【结果】积雪草甙不仅能影响成纤维细胞的超微结构 ,而且能抑制成纤维细胞增殖及胶原蛋白的合成。【结论】积雪草在预防和治疗增生性瘢痕中有重要作用 ,其机制可能与抑制成纤维细胞增殖和胶原蛋白合成有关。 展开更多
关键词 积雪草甙 增生性瘢痕 药物疗法 治疗 成纤维细胞 体外培养
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IGF-1和EGF对辽宁绒山羊初级毛囊体外培养的影响 被引量:19
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作者 姚玉园 刘海英 +1 位作者 袁缨 丛玉艳 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期165-169,共5页
为研究不同剂量的IGF-1和EGF对辽宁绒山羊毛囊体外生长及毛囊形态的影响,采用显微分离法分离绒山羊初级毛囊,分别测定不同浓度IGF-1(0.1,1,10,100ng.mL-1)、不同浓度EGF(0.2,2,20,100ng.mL-1)和联合添加IGF-1与EGF(分别添加10ng.mL-1和2... 为研究不同剂量的IGF-1和EGF对辽宁绒山羊毛囊体外生长及毛囊形态的影响,采用显微分离法分离绒山羊初级毛囊,分别测定不同浓度IGF-1(0.1,1,10,100ng.mL-1)、不同浓度EGF(0.2,2,20,100ng.mL-1)和联合添加IGF-1与EGF(分别添加10ng.mL-1和20ng.mL-1)对毛囊形态变化及生长长度的影响。结果表明:IGF-1刺激毛乳头和毛母质细胞分裂增殖;EGF促进毛囊外根鞘细胞分化;联合添加刺激毛球部增大。IGF-1和EGF对毛囊体外生长均具有正向调节作用,作用大小与剂量有关,最适宜浓度IGF-1为10ng.mL-1,EGF为20ng.mL-1,10d后生长长度分别达1.075mm和1.117mm;IGF-1(10ng.mL-1)和EGF(20ng.mL-1)联合添加对毛囊生长促进作用优于单独添加,10d后生长长度达1.413mm。 展开更多
关键词 IGF-1 EGF 毛囊 体外培养 绒山羊
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和田羊睾丸支持细胞的体外培养与分离鉴定 被引量:11
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作者 王帅 贾琦珍 +2 位作者 张玲 王连群 陈根元 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2017年第8期1918-1922,共5页
【目的】研究和田羊睾丸支持细胞的体外培养特性。【方法】取新生和田羊睾丸组织,利用两步酶消化后,采用差速贴壁法纯化细胞进行体外培养,并通过形态学观察、HE染色、AKP染色、油红O染色、吖啶橙染色、罗丹明123染色、免疫组化染色、RT... 【目的】研究和田羊睾丸支持细胞的体外培养特性。【方法】取新生和田羊睾丸组织,利用两步酶消化后,采用差速贴壁法纯化细胞进行体外培养,并通过形态学观察、HE染色、AKP染色、油红O染色、吖啶橙染色、罗丹明123染色、免疫组化染色、RTPCR和MTT法检测细胞活性及纯度。【结果】培养基中加入2.00%血清浓度的DMEM/F-12可提高支持细胞纯度,在体外培养传至20代的和田羊睾丸支持细胞形态和核型均为正常;所培养的细胞内波形蛋白表达及标志基因SCF和GDNF的表达均为阳性。【结论】本试验成功建立了和田羊睾丸支持细胞体外培养模型。 展开更多
关键词 和田羊 睾丸 支持细胞 体外培养 鉴定
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原代肝细胞体外培养用于利福平和异烟肼肝毒性的研究 被引量:9
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作者 沈冲 徐小梅 +2 位作者 孟琴 苏关关 赵年丰 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第3期250-253,共4页
目的:研究利福平(rifampicin,LFP)和异烟肼(isoniazid,INH)对体外大鼠肝细胞的毒性。方法:以乳酸脱氢酶(LDH)释放量反映肝细胞损伤,以尿素分泌量和大鼠白蛋白合成量反映肝功能。结果与结论:15mg/mL异烟肼(5mL)、10mg/mL利福平(5mL)以及... 目的:研究利福平(rifampicin,LFP)和异烟肼(isoniazid,INH)对体外大鼠肝细胞的毒性。方法:以乳酸脱氢酶(LDH)释放量反映肝细胞损伤,以尿素分泌量和大鼠白蛋白合成量反映肝功能。结果与结论:15mg/mL异烟肼(5mL)、10mg/mL利福平(5mL)以及相同剂量两药合用时LDH释放量分别为对照组的1.3倍、1.5倍和1.6倍,产生的白蛋白量分别为不加药时的25%、28%和28%,尿素产量也有相应下降但程度不如白蛋白显著。说明该剂量的利福平和异烟肼对大鼠肝细胞均有毒性作用,但两药合用并不增加毒性。进一步将此原代肝细胞模型与连续细胞系小鼠成纤维细胞株L929、与文献报道的动物模型比较,探索原代肝细胞模型在肝毒性研究中应用的可行性。 展开更多
关键词 肝细胞 体外培养 利福平 异烟肼 毒性
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黔岭藿对体外培养的破骨细胞作用的研究 被引量:66
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作者 陈坤 于世风 +1 位作者 史凤芹 庞淑珍 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 1996年第3期59-61,T002,共4页
从新生兔四肢长骨中分离的破骨细胞与牛骨片在体外培养后,加入不同浓度黔岭霍注射液再培养,并设立对照,用倒置相差显微镜观察黔岭霍对破骨细胞形成骨吸收陷窝的影响。结果显示黔岭著3个浓度组(0.15mg/ml、1.5mg/m... 从新生兔四肢长骨中分离的破骨细胞与牛骨片在体外培养后,加入不同浓度黔岭霍注射液再培养,并设立对照,用倒置相差显微镜观察黔岭霍对破骨细胞形成骨吸收陷窝的影响。结果显示黔岭著3个浓度组(0.15mg/ml、1.5mg/ml、15mg/ml)与对照组比较均能抑制破骨细胞在骨片上形成吸收陷窝的数量,增加药物浓度抑制作用亦趋增强(P<0.05)。 展开更多
关键词 破骨细胞 体外培养 成骨 长骨 对照组 新生兔 骨吸收 四肢 注射液 药物浓度
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胎鼠大脑皮质神经元的体外培养及鉴定 被引量:12
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作者 罗湘颖 杨志敏 +2 位作者 王廷华 刘苏 赵匡彦 《神经解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第5期505-508,共4页
为了建立SD大鼠大脑皮质神经元的分离、培养及免疫细胞化学鉴定技术,本研究通过分离孕15 d SD胎鼠大脑皮质组织,经机械吹打后,加入含有5%马血清、5%小牛血清的MEM培养基接种在24孔培养板中进行原代培养,并于第3 d在培养基中加入阿糖... 为了建立SD大鼠大脑皮质神经元的分离、培养及免疫细胞化学鉴定技术,本研究通过分离孕15 d SD胎鼠大脑皮质组织,经机械吹打后,加入含有5%马血清、5%小牛血清的MEM培养基接种在24孔培养板中进行原代培养,并于第3 d在培养基中加入阿糖胞苷抑制胶质细胞的生长,于第9 d将细胞固定后采用免疫细胞化学技术检测神经元特异性烯醇化酶(NSE)的表达。结果表明从孕15 d SD胎鼠大脑皮质分离的神经元纯度高,生长旺盛,形态典型,90%以上表达NSE免疫阳性。该结果提示我们建立的培养大鼠大脑皮质神经元的方法易于标准化操作,结果稳定,值得推广应用。 展开更多
关键词 大脑皮质神经元 胎鼠 NSE SD 表达 体外培养 免疫阳性 胶质细胞 原代培养 免疫细胞化学
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