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题名大鼠原代脑微血管内皮细胞体外分离与培养的实验研究
被引量：12
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作者
李振
刘云会
薛一雪
刘丽波
王萍
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机构
中国医科大学附属盛京医院神经外科
中国医科大学基础学院神经生物学教研室
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出处
《中国医科大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2012年第10期873-876,共4页
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基金
国家自然科学基金资助项目(81172197
81171131
+4 种基金
30973079)
高等学校博士学科点专项科研基金资助项目(20092104110015
20102104110009)
沈阳市科学技术计划项目计划(F10-205-1-37
F10-205-1-22)
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文摘
目的探讨获取大鼠脑微血管内皮细胞（BMEC）的简单、有效方法,为构建体外血肿瘤屏障（BTB）模型提供材料。方法采集出生3~5 d的Wistar胎鼠大脑皮质,应用酶消化法及葡聚糖离心法获得脑微血管段后,接种于培养皿中进行原代培养,采用倒置显微镜对所培养的细胞进行形态学观察;以Ⅷ因子相关抗原免疫组化染色法鉴定细胞;将BMEC与C6脑胶质瘤细胞共培养,构建体外BTB模型,并采用免疫组化法和免疫荧光法检测BMEC间紧密连接相关蛋白occludin的表达。结果体外培养2 h时脑微血管段贴壁,12-48 h见圆形生发中心形成,2-3 d单层内皮细胞自生发中心长出,4-5 d见较大单层内皮细胞团,5-7 d可见融合成片的内皮细胞单层,外观呈＂铺路石＂样;第Ⅷ因子免疫组化结果显示＂铺路石＂样细胞胞质呈棕黄色染色;紧密连接相关蛋白occludin的免疫组化和荧光结果证明共培养的BMEC间表达BTB的特性。结论本方法能成功地进行大鼠原代BMEC培养,构建大鼠体外BTB模型,进而应用于BTB的生理、生化及药理学研究。
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关键词
大鼠
原代脑微血管内皮细胞
体外分离与培养
血肿瘤屏障
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Keywords
rat
prirrkary brain rnicmvascular endothelial cells
in vitro isolation and culture
blood tumor barrier
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分类号
Q813.11
[生物学—生物工程]
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