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利用低温聚合酶链式反应技术提高大豆超氧化物歧化酶活性
1
作者
张丽媛
马红丹
+4 位作者
赵邯郸
徐丹丹
曲静
关淑艳
王丕武
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2015年第5期126-130,共5页
目的:利用低温聚合酶链式反应对大豆超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性进行改良。方法:将6种在较低退火温度下扩增出的超氧化物歧化酶基因插入到表达载体p REP5N上,构建p PM1、p PM2、p PM3、p PM4、p PM5、p PM6表达载体...
目的:利用低温聚合酶链式反应对大豆超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性进行改良。方法:将6种在较低退火温度下扩增出的超氧化物歧化酶基因插入到表达载体p REP5N上,构建p PM1、p PM2、p PM3、p PM4、p PM5、p PM6表达载体,转入大肠杆菌后得到工程菌,诱导其在大肠杆菌中进行蛋白表达,并进行酶活力测定,筛选高酶活力菌株。结果:将已克隆的目的基因序列与已知的大豆Mn SOD基因序列比对分析,一致性平均为86.57%,氨基酸序列同源性平均为82.58%。对已获得的6种工程菌进行蛋白质提取,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示表达产物的分子质量约为26 k D。经1%差异水平分析,改良后的SOD酶活力均有极显著提高,平均比对照菌株的酶活力提高1.95倍。结论:本实验证明低温聚合酶链式反应是改变酶活性的一种有效方法,为超氧化物歧化酶在生产中的应用提供了技术支持。
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关键词
超氧化物歧化
酶
基因
低温聚合酶链式反应
酶
活力
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题名
利用低温聚合酶链式反应技术提高大豆超氧化物歧化酶活性
1
作者
张丽媛
马红丹
赵邯郸
徐丹丹
曲静
关淑艳
王丕武
机构
吉林农业大学生命科学学院
吉林农业大学农学院
出处
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2015年第5期126-130,共5页
基金
农业科技成果转化资金项目(2013GB2B100125)
吉林省科技支撑计划项目(20120215)
吉林农业大学启动基金项目(201242)
文摘
目的:利用低温聚合酶链式反应对大豆超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的活性进行改良。方法:将6种在较低退火温度下扩增出的超氧化物歧化酶基因插入到表达载体p REP5N上,构建p PM1、p PM2、p PM3、p PM4、p PM5、p PM6表达载体,转入大肠杆菌后得到工程菌,诱导其在大肠杆菌中进行蛋白表达,并进行酶活力测定,筛选高酶活力菌株。结果:将已克隆的目的基因序列与已知的大豆Mn SOD基因序列比对分析,一致性平均为86.57%,氨基酸序列同源性平均为82.58%。对已获得的6种工程菌进行蛋白质提取,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示表达产物的分子质量约为26 k D。经1%差异水平分析,改良后的SOD酶活力均有极显著提高,平均比对照菌株的酶活力提高1.95倍。结论:本实验证明低温聚合酶链式反应是改变酶活性的一种有效方法,为超氧化物歧化酶在生产中的应用提供了技术支持。
关键词
超氧化物歧化
酶
基因
低温聚合酶链式反应
酶
活力
Keywords
superoxide dismutase gene
low temperature polymerase chain reaction
enzyme activity
分类号
Q946.5 [生物学—植物学]
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题名
作者
出处
发文年
被引量
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1
利用低温聚合酶链式反应技术提高大豆超氧化物歧化酶活性
张丽媛
马红丹
赵邯郸
徐丹丹
曲静
关淑艳
王丕武
《食品科学》
EI
CAS
CSCD
北大核心
2015
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