中国明对虾精子超低温冷冻保存方法的建立及超微结构损伤研究

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作者 刘莹 于超勇 +4 位作者 刘朋 高蓓 李泽邦 宋爱环 邹琰 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第8期3744-3752,共9页

【目的】本研究旨在建立中国明对虾雄虾精子超低温冷冻保存方法,同时摸清超低温冷冻对中国明对虾精子超微结构的损伤。【方法】采用曙红B染色法检测超低温冷冻保存后精子存活率,通过研究9种稀释液(灭菌天然海水、人工海水、去钙人工海... 【目的】本研究旨在建立中国明对虾雄虾精子超低温冷冻保存方法,同时摸清超低温冷冻对中国明对虾精子超微结构的损伤。【方法】采用曙红B染色法检测超低温冷冻保存后精子存活率,通过研究9种稀释液(灭菌天然海水、人工海水、去钙人工海水、去镁人工海水、去钾人工海水、5%氯化钠、生理盐水、D-Hanks、Hanks)、3种不同浓度渗透性冷冻保护剂(二甲基亚砜、甘油和丙三醇)、5种非渗透性抗冻保护剂(海藻糖、葡萄糖、麦芽糖、维生素C、牛血清蛋白)、4种降温程序和4种复苏温度(25、30、35和40℃)对中国明对虾精子超低温冷冻保存的效果筛选最适保存方法,同时,应用透视电镜观察超低温冷冻后精子的超微结构。【结果】(1)灭菌天然海水、人工海水组冻精复苏后精子存活率显著高于其余各组(P<0.05)。(2)采用甘油作为渗透性保护剂的试验组冻精存活率显著优于其他试验组(P<0.05),其中15%甘油组冻精存活率最高。(3)添加海藻糖、维生素C非渗透性保护剂的试验组冻精复苏后精子存活率显著高于其余各组(P<0.05)。(4)采用慢速降温的P-1与P-2程序的试验组冻精复苏后精子存活率显著高于其余各组(P<0.05),其中在0℃至-20℃慢速降温、-20℃至-80℃区间中速降温、-80℃至-180℃区间快速降温的P-1试验组冻精存活率最高。(5)35℃水浴解冻组冻精复苏后精子存活率显著高于其余各组(P<0.05)。(6)采用最优方法制备的冻精复苏后正常精子占79%,结构异常的精子主要表现为棘突脱落、膜间腔增大、细胞膜肿胀、顶体脱落、细胞核空泡化等。【结论】以灭菌天然海水作为稀释液、15%甘油为保护液、添加0.25mol/L海藻糖,采用程序降温仪三步法慢速降温,冻精以35℃水浴解冻是最优的中国明对虾超低温冷冻保存方法,可以有效降低中国明对虾精子在超低温冷冻保存中的结构损伤。 展开更多

关键词 中国明对虾 精子 超低温冷冻保存 超微结构

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台湾泥鳅精子超低温冷冻保存技术研究 被引量：1

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作者 汪吟杰 汪品 采克俊 《水产科学》 CAS CSCD 北大核心 2024年第6期915-924,共10页

为建立台湾泥鳅精子超低温冷冻保存方法,采用显微镜观察精子活率,流式细胞术检测质膜完整性,研究4种稀释液[Hank′s平衡盐溶液(HBSS)、D-15、D-17、鱼用任氏液],5种抗冻剂(甲醇、乙二醇、丙二醇、二甲基亚砜、N,N-二甲基甲酰胺)在4个体... 为建立台湾泥鳅精子超低温冷冻保存方法,采用显微镜观察精子活率,流式细胞术检测质膜完整性,研究4种稀释液[Hank′s平衡盐溶液(HBSS)、D-15、D-17、鱼用任氏液],5种抗冻剂(甲醇、乙二醇、丙二醇、二甲基亚砜、N,N-二甲基甲酰胺)在4个体积分数(2.5%、5.0%、7.5%、10.0%),不同平衡时间、熏蒸高度和时间、解冻温度和时间对台湾泥鳅精子超低温冷冻保存的影响。试验结果显示:以Hank′s平衡盐溶液为稀释液的精子活率最高,为(45.28±5.75)%;以5%甲醇作为抗冻剂的台湾泥鳅精子活率和质膜完整比例最高,分别为(51.25±5.03)%和(81.70±2.35)%;最佳平衡时间为30 min,最佳熏蒸高度和时间为9 cm和10 min,最后将冻精在37℃水浴锅中解冻10 s的解冻效果更佳。用冷冻复苏的台湾泥鳅精子进行人工授精,受精率达(68.94±6.22)%。综上,用Hank′s平衡盐溶液稀释台湾泥鳅鲜精,与甲醇1∶1混合至终体积分数为5%,放于4℃平衡30 min,而后装入麦管,在液氮面上方9 cm处熏蒸10 min后投入液氮保存可作为台湾泥鳅精子超低温冷冻的保存方法,解冻时在37℃水浴锅中解冻10 s,可获得更好的解冻效果。 展开更多

关键词 台湾泥鳅 精子 超低温冷冻保存 流式细胞术 碘化丙啶

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超低温冷冻保存对大黄鱼精子酶活性的影响 被引量：7

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作者 黄晓荣 章龙珍 +4 位作者 庄平 刘鉴毅 张涛 冯广朋 赵峰 《海洋渔业》 CSCD 北大核心 2012年第4期438-443,共6页

研究超低温(-196℃)冷冻保存对大黄鱼(Pseudosiaena crocea)精子内总ATP酶、肌酸激酶(CK)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽还原酶(GR)等酶活性的影响。运用试剂盒分别测定了冷冻... 研究超低温(-196℃)冷冻保存对大黄鱼(Pseudosiaena crocea)精子内总ATP酶、肌酸激酶(CK)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽还原酶(GR)等酶活性的影响。运用试剂盒分别测定了冷冻前后大黄鱼精子内酶活性的变化。结果表明,经过超低温冷冻保存后,大黄鱼精子的活力下降,精子内GR活性从(4.42±0.29)U·L-1增加到(58.93±2.26)U·L-1(P<0.05);其它几种酶的活性均显著下降(P<0.05),总ATP酶、CK、SDH的活性分别从冻前的(60.16±5.88)U·mL-1、(11.91±0.76)U·mL-1和(51±2.16)U·mL-1下降到(3.54±0.37)U·mL-1、(10.22±0.32)U·mL-1和(31.5±2.08)U·mL-1;LDH、SOD和CAT活性从冻前的(7 806.44±110.11)U·L-1、(42.65±1.56)U·mL-1和(119.91±8.10)U·mL-1下降到(2 654.13±70.06)U·L-1、(31.99±1.57)U·mL-1和(55.87±2.32)U·mL-1。超低温冷冻保存对大黄鱼精子活力和精子酶活性均有显著影响。 展开更多

关键词 超低温冷冻保存 大黄鱼 精子 酶活性

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青虾精子超低温冷冻保存技术的研究 被引量：9

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作者 廖馨 葛家春 +3 位作者 丁淑燕 陈婵娟 陆全平 黄亚红 《南京大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2008年第4期421-426,共6页

本文对青虾精子的超低温冷冻保存技术进行了研究.采用台盼兰染色法检测低温冷冻后青虾精子的活力,研究了3种稀释液(壬氏液,Kurokura extender,D-20)和3种冷冻保护剂(8%DMSO,12.5%甘油,10%甲醇)对青虾精子在超低温冷冻保存时的保护效果,... 本文对青虾精子的超低温冷冻保存技术进行了研究.采用台盼兰染色法检测低温冷冻后青虾精子的活力,研究了3种稀释液(壬氏液,Kurokura extender,D-20)和3种冷冻保护剂(8%DMSO,12.5%甘油,10%甲醇)对青虾精子在超低温冷冻保存时的保护效果,以及不同保存时间后青虾精子活力的变化.结果表明,青虾精子以壬氏液为稀释液,添加8%DMSO作为抗冻保护剂,4℃平衡30 min,-20℃平衡15 min,-80℃平衡15 min后投入液氮中保存,解冻时将冷冻管浸入55℃水浴中10~15 s至半融取出自然解冻,精子能维持60%的存活力.本研究为青虾精子冷冻保存库的建立提供了实验依据和理论基础. 展开更多

关键词 青虾 精子 超低温冷冻保存

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点带石斑鱼精子超低温冷冻保存研究 被引量：6

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作者 王小刚 骆剑 +1 位作者 尹绍武 陈国华 《海洋科学》 CAS CSCD 北大核心 2014年第9期13-19,共7页

为建立点带石斑鱼（Epinephelus malabaricus）精子冷冻保存技术,保存点带石斑鱼种质资源,作者通过选用TS-19、TS-2、Hank’s、MPRS、Cortland、0.75%NaCl等作为稀释液及10%～25%二甲亚砜、甘油、甲醇作为抗冻液,对繁殖季节中3个不同时... 为建立点带石斑鱼（Epinephelus malabaricus）精子冷冻保存技术,保存点带石斑鱼种质资源,作者通过选用TS-19、TS-2、Hank’s、MPRS、Cortland、0.75%NaCl等作为稀释液及10%～25%二甲亚砜、甘油、甲醇作为抗冻液,对繁殖季节中3个不同时期的点带石斑鱼精液进行超低温冷冻保存研究。研究结果表明：（1）Hank’s溶液为点带石斑鱼精子冷冻保存最适冷冻稀释液;（2）Hank’s溶液与10%～15%DMSO溶液为点带石斑鱼精子保存的最适冷冻保护液组合,可以获得60%以上的冻精成活率,而使用不同浓度的MeOH作为抗冻液时,冻精成活率均为0%;（3）以10%～25%Gly作为抗冻液时,冷冻前未加天然海水时均能激活点带石斑鱼精子正常运动,其效果与天然海水相似,加入天然海水后精子运动效果急剧下降,精子冷冻保存后也存在同样现象;（4）为保证获得更高的冻精成活率,点带石斑鱼精液冷冻保存样品的最佳获取时期是在亲鱼自然繁殖期前进行为宜。 展开更多

关键词 点带石斑鱼(Epinephelus malabaricus) 精子 超低温冷冻保存 稀释液 抗冻液

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黄颡鱼精子超低温冷冻保存技术 被引量：10

6

作者 夏良萍 陈梦婷 +2 位作者 陈悦萍 徐丹丹 采克俊 《江苏农业科学》 北大核心 2013年第10期196-198,共3页

以解冻后的精子活力为指标,研究了不同稀释液、不同抗冻剂、平衡时间、液氮熏蒸高度、稀释液pH值和不同糖类对黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)精子超低温冷冻保存的影响。结果显示,最佳防冻液为10%甲醇与CCSE2组合,最佳平衡时间为30 m... 以解冻后的精子活力为指标,研究了不同稀释液、不同抗冻剂、平衡时间、液氮熏蒸高度、稀释液pH值和不同糖类对黄颡鱼(Pelteobagrus fulvidraco)精子超低温冷冻保存的影响。结果显示,最佳防冻液为10%甲醇与CCSE2组合,最佳平衡时间为30 min,最佳熏蒸高度为7 cm,稀释液pH值为6.0和7.0时较合适,添加麦芽糖的冻精活力较好。 展开更多

关键词 黄颡鱼 精子 超低温冷冻保存 活力

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海洋贝类配子及胚胎的低温冷冻保存 被引量：10

7

作者 张岩 陈四清 +1 位作者 于东祥 孙珊 《海洋水产研究》 CSCD 2004年第6期73-78,共6页

综述了海产贝类配子及胚胎的低温冷冻保存技术的发展现状 ,对目前的文献进行了汇总和分析 ,讨论了冷冻保存的降温程序、抗冻剂配方以及评价保存效果的指标等方面的问题 ,并对目前在海产贝类配子和胚胎的低温冷冻研究方面存在的问题和解... 综述了海产贝类配子及胚胎的低温冷冻保存技术的发展现状 ,对目前的文献进行了汇总和分析 ,讨论了冷冻保存的降温程序、抗冻剂配方以及评价保存效果的指标等方面的问题 ,并对目前在海产贝类配子和胚胎的低温冷冻研究方面存在的问题和解决的途径进行了探讨。 展开更多

关键词 低温冷冻保存 海产贝类 配子 胚胎

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黄鳝精液-80℃超低温冷冻保存试验 被引量：4

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作者 闫秀明 张林达 张小雪 《四川动物》 CSCD 北大核心 2011年第2期207-211,共5页

采用-80℃超低温冷冻方法对黄鳝精液冷冻保存技术进行了研究。获得如下结果:黄鳝精子在冻存前不需低温平衡过程;10%DMSO作为抗冻保护剂效果最好,以200μL离心管为冻存容器,保存168h,精子相对活力可达79%;以细管为冻存容器,精子相对活力... 采用-80℃超低温冷冻方法对黄鳝精液冷冻保存技术进行了研究。获得如下结果:黄鳝精子在冻存前不需低温平衡过程;10%DMSO作为抗冻保护剂效果最好,以200μL离心管为冻存容器,保存168h,精子相对活力可达79%;以细管为冻存容器,精子相对活力可达88%。此结果为黄鳝精子冷冻保存库的建立提供了实验依据。 展开更多

关键词 黄鳝 精子 超低温冷冻保存

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长吻精子超低温冷冻保存 被引量：1

9

作者 采克俊 周志金 +3 位作者 曹访 朱俊杰 李景芬 叶金云 《江苏农业科学》 北大核心 2015年第10期290-291,共2页

以精子活力为研究指标,比较二甲亚砜、甘油、甲醇、乙二醇、丙二醇、乙二醇甲醚6种不同抗冻剂、平衡时间、熏蒸高度对长吻(Leiocassis longirostris)精子超低温冷冻保存的影响。防冻液组合为:10%乙二醇甲醚/HBSS条件下平衡30 min,熏... 以精子活力为研究指标,比较二甲亚砜、甘油、甲醇、乙二醇、丙二醇、乙二醇甲醚6种不同抗冻剂、平衡时间、熏蒸高度对长吻(Leiocassis longirostris)精子超低温冷冻保存的影响。防冻液组合为:10%乙二醇甲醚/HBSS条件下平衡30 min,熏蒸高度为11 cm时,长吻的冻精活力最高。 展开更多

关键词 长吻 精子 超低温冷冻保存 活力 平衡时间 熏蒸高度 乙二醇甲醚

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鱼类精子超低温冷冻保存技术及其应用 被引量：2

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作者 郝忱 严维辉 +2 位作者 丁淑燕 张军 殷悦 《水产养殖》 CAS 2014年第7期48-52,共5页

鱼类精子的超低温冷冻保存对鱼类种质资源保护、低温生物学、遗传育种和水产养殖业都具有重要的意义。鱼类精子超低温冷冻保存技术主要包括冷冻保存方法、抗冻保护液、降温、解冻速率、冷冻保存温度、抗冻剂去除等过程。本文就鱼类精子... 鱼类精子的超低温冷冻保存对鱼类种质资源保护、低温生物学、遗传育种和水产养殖业都具有重要的意义。鱼类精子超低温冷冻保存技术主要包括冷冻保存方法、抗冻保护液、降温、解冻速率、冷冻保存温度、抗冻剂去除等过程。本文就鱼类精子超低温冷冻保存技术及其应用进行了综述。 展开更多

关键词 鱼类 精子 超低温冷冻保存

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哺乳动物胚胎超低温冷冻保存的研究进展 被引量：7

11

作者 徐勇 张嘉保 《黑龙江动物繁殖》 2001年第1期15-17,共3页

关键词 哺乳动物 胚胎超低温冷冻保存 研究进展

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哺乳动物卵母细胞的超低温冷冻保存 被引量：1

12

作者 陈永昌 陈学进 《黑龙江动物繁殖》 2003年第2期7-10,共4页

叙述了哺乳动物卵母细胞超低温冷冻保存的研究进展,分析了影响卵母细胞超低温冷冻保存后存活率的关键因素,推荐了较为成熟的卵母细胞超低温冷冻保存方法,认为哺乳动物卵母细胞低温保存技术的应用潜力巨大。

关键词 哺乳动物 卵母细胞 超低温冷冻保存 胚胎生物技术

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中国花鲈精子的超低温冷冻保存及酶活性检测 被引量：12

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作者 史应学 程顺 +1 位作者 竺俊全 吴雄飞 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1241-1247,共7页

精子超低温冷冻保存技术在种质资源保存、遗传育种及苗种生产上具有重要的应用价值^（[1,2]）。为了提高冷冻精子的实际应用效果,需要在提高冻精质量上进行深入研究。冻精质量的提高有赖于精子超低温冷冻保存技术参数的优化,诸如稀释液... 精子超低温冷冻保存技术在种质资源保存、遗传育种及苗种生产上具有重要的应用价值^（[1,2]）。为了提高冷冻精子的实际应用效果,需要在提高冻精质量上进行深入研究。冻精质量的提高有赖于精子超低温冷冻保存技术参数的优化,诸如稀释液种类、稀释比例、抗冻剂种类及浓度、降温方法及速率等技术参数均需要进行研究与优化选择。 展开更多

关键词 中国花鲈 超低温冷冻保存 精子 活力 酶活性

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中间球海胆精子超低温冷冻保存方法的研究 被引量：5

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作者 刘志丹 李霞 秦艳杰 《大连海洋大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期53-57,共5页

对中间球海胆Strongylocentrotus intermedius精子的超低温保存技术进行了研究。以煮沸消毒海水为基础液,添加体积分数为10%的DMSO、体积分数为6%的甘油以及25 mmol/L海藻糖配制成冷冻保护液,与鲜精液按体积比以1∶1混合,在4℃下平衡15 ... 对中间球海胆Strongylocentrotus intermedius精子的超低温保存技术进行了研究。以煮沸消毒海水为基础液,添加体积分数为10%的DMSO、体积分数为6%的甘油以及25 mmol/L海藻糖配制成冷冻保护液,与鲜精液按体积比以1∶1混合,在4℃下平衡15 min,于液氮面上方15、3 cm处分别停留3 min和5 min,然后浸入液氮保存。结果表明:用此方法保存的精子解冻后其存活率可达58.2%,受精率达24.7%;解冻后精子受精时,在受精海水中分别添加0、28、56、112、280 mmol/L的葡萄糖,56 mmol/L组的受精率高于其他组,受精率达26%;精子解冻后受精时,在受精海水中添加适量葡萄糖有助于提高受精率。本试验表明,冷冻过程中降温方式、冷冻保护液、平衡时间对精子的冷冻保存效果均有较大影响,各个因素通过优化组合可以大大提高解冻后精子的存活率和受精率。 展开更多

关键词 中间球海胆 精子 超低温冷冻保存 存活率 受精率

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棘皮动物精子超低温冷冻保存技术研究进展 被引量：2

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作者 许帅 孙景春 +4 位作者 刘石林 林承刚 张立斌 孙丽娜 杨红生 《渔业科学进展》 CSCD 北大核心 2021年第3期26-37,共12页

棘皮动物(Echinodermata)是无脊椎动物中进化地位最高等的类群,其海参纲(Holothurioidea)和海胆纲(Echinoidea)的一些物种具有非常高的经济价值和营养价值。由于受到人类活动的影响,很多棘皮动物物种数量和生物多样性遭到了严重破坏,种... 棘皮动物(Echinodermata)是无脊椎动物中进化地位最高等的类群,其海参纲(Holothurioidea)和海胆纲(Echinoidea)的一些物种具有非常高的经济价值和营养价值。由于受到人类活动的影响,很多棘皮动物物种数量和生物多样性遭到了严重破坏,种质资源保存迫在眉睫。超低温冷冻保存是种质资源长期保存的重要方法,具有突破地理隔离、实现远缘杂交、保护种质资源、解决种质退化和保护濒危物种等作用。本文综述了海胆、海参和海星3种主要棘皮动物的精子超低温冷冻保存研究进展,并展开描述了精子收集、稀释剂和抗冻剂制备、平衡、冷却、解冻和质量评价等精子冷冻保存过程的各个步骤,以期为棘皮动物种质资源保存的进一步研究及产业化应用提供参考。 展开更多

关键词 棘皮动物 精子 超低温冷冻保存技术

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鱼类精子超低温冷冻保存技术研究进展 被引量：5

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作者 周洲 孔杰 +1 位作者 赵凤 蒋晓红 《贵州农业科学》 CAS 2019年第3期89-92,共4页

为给鱼类种质资源保护和鱼类遗传育种研究提供参考,综述了鱼类精子超低温冷冻保存技术的生物学原理、抗冻剂、稀释液、降温和解冻速率等,全面介绍了鱼类精子超低温冷冻保存技术的研究进展。

关键词 鱼类精子 超低温冷冻保存 抗冻剂 缓冲液 降温 解冻速率

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南美白对虾精子超低温冷冻保存技术研究 被引量：5

17

作者 杨春玲 赵永贞 +5 位作者 陈秀荔 李咏梅 彭敏 杨彦豪 何苹萍 陈晓汉 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第8期1382-1389,共8页

【目的】建立一种南美白对虾精子超低温冷冻保存方法,为南美白对虾优良种质的长期保存奠定基础。【方法】利用胰蛋白酶消化法获得游离的南美白对虾精子,分别使用灭菌天然海水、无钙人工海水、3%等渗NaCl溶液和0.9%生理盐水作为基础液,... 【目的】建立一种南美白对虾精子超低温冷冻保存方法,为南美白对虾优良种质的长期保存奠定基础。【方法】利用胰蛋白酶消化法获得游离的南美白对虾精子,分别使用灭菌天然海水、无钙人工海水、3%等渗NaCl溶液和0.9%生理盐水作为基础液,并以不同浓度的二甲基亚砜(DMSO)、甘油、甲醇及其与海藻糖的混合溶液作为抗冻剂,在4种不同降温程序下超低温冷冻保存南美白对虾精子,然后在不同的温度下复苏冷冻精子,以伊红—苯胺黑染色法检测精子存活率。【结果】使用1.00 g/L胰蛋白酶消化精荚5 min能获得大量游离的南美白对虾精子,以灭菌天然海水为基础液,以10%DMSO和0.25 mol/L海藻糖为抗冻剂,在P-1降温程序(4℃平衡30 min,以-5℃/min的速率降至-20℃;-20℃平衡5 min,以-10℃/min的速率降至-80℃;-80℃平衡5 min,然后置于液氮中保存)下超低温冷冻保存南美白对虾精子,经37℃水浴复苏后精子存活率最高。【结论】建立的南美白对虾精子超低温冷冻保存方法具有可行性,为南美白对虾精子冷冻保存库的建立提供了技术支撑。 展开更多

关键词 南美白对虾 精子 超低温冷冻保存 胰蛋白酶消化法 抗冻剂 存活率

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超低温冷冻保存对西伯利亚鲟精子酶活性的影响 被引量：3

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作者 周洲 李世凯 +2 位作者 赵飞 陈飞雄 孔杰 《贵州农业科学》 CAS 2020年第1期77-80,共4页

为西伯利亚鲟(Acipenser baerii)精子超低温冷冻保存体系优化及冷冻精子保存效果提供理论支撑,以西伯利亚鲟新鲜精子为对照,研究超低温冷冻保存(-196℃)条件下精子中总ATP酶(ATPase)、谷胱甘肽还原酶(GR)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH... 为西伯利亚鲟(Acipenser baerii)精子超低温冷冻保存体系优化及冷冻精子保存效果提供理论支撑,以西伯利亚鲟新鲜精子为对照,研究超低温冷冻保存(-196℃)条件下精子中总ATP酶(ATPase)、谷胱甘肽还原酶(GR)、肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)、琥珀酸脱氢酶(SDH)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)等的酶活性变化。结果表明:超低温冷冻前后西伯利亚鲟精子内的GR酶活性从(23.36±1.69)U/mL升至(94.61±4.13)U/mL,差异显著;CK酶、LDH酶、SDH酶、CAT酶及SOD酶的酶活性均显著降低,分别从(6.64±0.58)U/mL、(6695.78±123.47)U/L、(24.91±1.63)U/mL、(112.33±6.38)U/mL、(61.99±4.15)U/mL降至(5.27±0.23)U/mL、(4388.32±93.28)U/L、(17.45±0.94)U/L、(67.58±3.87)U/mL、(46.38±2.54)U/mL;总ATP酶从冻前的(18.77±1.23)U/mL降至(16.32±0.87)U/mL,差异不显著。超低温冷冻保存对西伯利亚鲟精子酶活性均有显著影响。 展开更多

关键词 超低温冷冻保存 西伯利亚鲟 精子 酶活性

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香港牡蛎精子超低温冷冻保存的研究 被引量：1

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作者 赵永贞 陈秀荔 +5 位作者 杨春玲 彭敏 李琼珍 罗帮 黎一键 李咏梅 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2014年第5期2229-2235,共7页

采用程序降温法对香港牡蛎(Crassostrea hongkongensis)精子进行超低温冷冻保存,利用两种抗冻保护液筛选最佳降温程序、稀释比、平衡时间和人工授精精卵比,建立了一套成熟的香港牡蛎精子超低温冷冻保存技术。结果表明,降温程序Ⅳ、精液... 采用程序降温法对香港牡蛎(Crassostrea hongkongensis)精子进行超低温冷冻保存,利用两种抗冻保护液筛选最佳降温程序、稀释比、平衡时间和人工授精精卵比,建立了一套成熟的香港牡蛎精子超低温冷冻保存技术。结果表明,降温程序Ⅳ、精液/抗冻保护液稀释比为1∶40及平衡时间为30 min时复苏精子的存活率和活力最高,而且以生理盐水为稀释液的抗冻保护液A的精子存活率明显高于以柠檬酸钠-甘氨酸为稀释液的抗冻保护液B,冻精人工授精精卵比为40∶1时受精率与鲜精水平接近(达83%)。研究成果为香港牡蛎优良种质的长期保存提供了科学依据和技术支持。 展开更多

关键词 香港牡蛎 精子 超低温冷冻保存 程序降温 人工授精

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热滞蛋白在低温冷冻保存卵母细胞和胚胎中的作用 被引量：3

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作者 朱化彬 《国外畜牧科技》 1995年第2期24-26,共3页

近来一些短期或长期保存卵母细胞和胚胎的研究结果表明,热滞蛋白(thermal hysteresis protein,THPs)或称抗冻蛋白(antifreeze proteins,AFPs),在低温(4C)和超低温(-130～-196℃)下,能与细胞膜相互作用,保护卵母细胞和胚胎。热滞蛋白的... 近来一些短期或长期保存卵母细胞和胚胎的研究结果表明,热滞蛋白(thermal hysteresis protein,THPs)或称抗冻蛋白(antifreeze proteins,AFPs),在低温(4C)和超低温(-130～-196℃)下,能与细胞膜相互作用,保护卵母细胞和胚胎。热滞蛋白的这种保护作用与其浓度和种类有关,在玻璃比快速冷冻中,所需THPs的最低浓度为40mg/ml,而在慢速冷冻或低温(4℃)短期保存(1～4天)胚胎中,其适宜浓度范围为0.1～1mg/ml,所需浓度取决于THPs的种类。THPs与玻璃化液相互作用,稳定玻璃化液;同时也与细胞膜相互作用,稳定细胞膜,而细胞膜正是玻璃化冷冻时首先受损伤的部位。THPs为冷冻保存人和动物配子提供了新的保护物质。 展开更多

关键词 热滞蛋白 低温冷冻保存 卵母细胞 胚胎 动物

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