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低分子量透明质酸的制备及其抗氧化活性的研究 被引量:6
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作者 柯春林 乔德亮 曾晓雄 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期107-111,共5页
首先研究了Fe2+-S2O2-8氧化体系硫酸根自由基(SO-4·)对透明质酸(HA)的氧化降解作用,初步确定了SO-4·氧化降解HA制备低分子量透明质酸(LMWHA)的实验条件。接着HA降解产物经过乙醇沉淀以及凝胶柱层析纯化,采用高效凝胶过滤色谱... 首先研究了Fe2+-S2O2-8氧化体系硫酸根自由基(SO-4·)对透明质酸(HA)的氧化降解作用,初步确定了SO-4·氧化降解HA制备低分子量透明质酸(LMWHA)的实验条件。接着HA降解产物经过乙醇沉淀以及凝胶柱层析纯化,采用高效凝胶过滤色谱法(HPGFC)测得纯化后LMWHA分子量为1.45×105Da。最后采用不同的体外抗氧化实验,并以HA为对照,研究了LMWHA的抗氧化活性,发现SO-4·降解后生成的LMWHA的抗氧化活性高于降解前的。本实验说明用SO-4·降解HA制备具有抗氧化活性LMWHA是可行的,为LMWHA抗氧化药物的开发提供了理论依据。 展开更多
关键词 根自由基 分子量透明质 抗氧化活性
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低分子量透明质酸对小鼠巨噬细胞和T细胞的免疫调节作用 被引量:2
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作者 柯春林 李作美 曾晓雄 《食品工业科技》 CAS CSCD 北大核心 2016年第15期349-353,359,共6页
低分子量透明质酸(LMWHA)由自由基氧化降解方法制备,通过体内动物实验和体外细胞实验研究了LMWHA对小鼠巨噬细胞和T细胞的免疫调节活性。在体内免疫抑制鼠实验中,察看了LMWHA对2,4-二硝基氟苯(DNFB)诱导的迟发型超敏反应(DTH)... 低分子量透明质酸(LMWHA)由自由基氧化降解方法制备,通过体内动物实验和体外细胞实验研究了LMWHA对小鼠巨噬细胞和T细胞的免疫调节活性。在体内免疫抑制鼠实验中,察看了LMWHA对2,4-二硝基氟苯(DNFB)诱导的迟发型超敏反应(DTH)的影响,测定了血清溶菌酶含量、脾脏以及胸腺指数。结果表明:LMWHA(20~120mg/kg·d)能够促进免疫抑制小鼠的DTH反应,改变血清溶菌酶含量、提高脾脏和胸腺指数,并呈作用剂量依赖关系。在体外细胞实验中,LMWHA(25-200ug/mL)加强了小鼠腹腔巨噬细胞的吞噬活性以及一氧化氮合酶(iNOS)活性,提高了一氧化氮(NO)的生成量,促进了脾脏T淋巴细胞的增殖。由此可见LMWHA能够调节小鼠的细胞免疫和非特异性免疫功能。 展开更多
关键词 分子量透明质 免疫调节活性 巨噬细胞 T淋巴细胞
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低分子透明质酸片段对红细胞聚集诱发作用及其种属特异性
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作者 郭田田 王家麒 +5 位作者 贾潇潇 LAZCANO SIL VEIRA Rayko HUI SHOFARO Jessica 王凤舞 马泽芳 惠觅宙 《青岛农业大学学报(自然科学版)》 2022年第2期96-108,共13页
旨在开发一种组织渗透性好的35 kDa透明质酸片段(HA35),探究HA35对红细胞的生物活性作用及其种属特异性。分别利用足量或轻度过量的重组人透明质酸酶PH20和牛提取透明质酸酶PH20,酶解切割平均分子量1600 kDa的透明质酸原料,制备一种能通... 旨在开发一种组织渗透性好的35 kDa透明质酸片段(HA35),探究HA35对红细胞的生物活性作用及其种属特异性。分别利用足量或轻度过量的重组人透明质酸酶PH20和牛提取透明质酸酶PH20,酶解切割平均分子量1600 kDa的透明质酸原料,制备一种能通过220 nm孔径的平均分子量35 kDa的透明质酸片段HA35,并进一步使用HA35与人和不同动物的红细胞共同孵育,研究HA35对红细胞的生物活性作用及其种属特异性。结果表明:HA35和其他平均分子量不同的透明质酸片段,通过CD44受体诱发人和多种实验动物的红细胞呈钱串状聚集,但存在种属特异性。HA35和其他平均分子量不同的透明质酸片段,诱发红细胞钱串状聚集的透明质酸片段的最小浓度与其分子量呈负相关,这种负相关关系首次被用来准确测定低分子透明质酸片段的分子量。HA35不仅诱发人和动物红细胞钱串状聚集,还诱发红细胞沉降率增加,被用于HA35产品的生产质控。 展开更多
关键词 低分子量透明质酸片段 分子量测定 红细胞钱串状聚集 CD44 红细胞沉降率
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透明质酸键合分枝状低分子量聚乙烯亚胺作为siRNA载体的研究
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作者 唐川 刘俊成 蒋革 《重庆理工大学学报(自然科学)》 CAS 北大核心 2020年第4期209-214,共6页
通过构建透明质酸键合低分子量聚乙烯亚胺的低毒性siRNA载体,探究其转染si RNA的效果。利用核磁共振氢谱确定透明质酸与低分子量聚乙烯亚胺嫁接形成复合物的结构,并通过MTT方法检测其对细胞的毒性。采用凝胶电泳法确定siRNA与复合载体... 通过构建透明质酸键合低分子量聚乙烯亚胺的低毒性siRNA载体,探究其转染si RNA的效果。利用核磁共振氢谱确定透明质酸与低分子量聚乙烯亚胺嫁接形成复合物的结构,并通过MTT方法检测其对细胞的毒性。采用凝胶电泳法确定siRNA与复合载体的结合比,利用粒度仪对其粒径大小、带电量等进行表征,并通过透射电子显微镜观察其形态。通过复合载体在B16F1细胞内,观察其基因沉默效率。结果表明:当siRNA与复合载体的质量比为1∶20时,其表面带电量约为+0. 3 m V,粒子直径约为113. 7 nm,形态均匀呈球形,分散均匀。其对细胞毒性远远小于高分子量聚乙烯亚胺,但转染效果较好。因此,透明质酸键合低分子量聚乙烯亚胺是一种低毒、高效的新型非病毒载体。 展开更多
关键词 透明质 分子量 聚乙烯亚胺 siRNA载体 转染
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低分子量透明质酸通过CD44调控S100A4核转移促进心肌纤维化 被引量:3
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作者 马文杰 洪牮 +6 位作者 朱梦琳 孙燕 钱丽君 王凯 李钟鸣 刘先玲 许迪 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2021年第6期796-803,825,共9页
目的:研究低分子量透明质酸(low molecular weight hyaluronic acid,LMW-HA)对小鼠心脏成纤维细胞(cardiac fibroblast,CF)表型转化的促进作用,探讨CD44和S100A4在此过程中的作用。方法:从ICR乳小鼠的心脏中分离提取CF并培养,使用LMW-H... 目的:研究低分子量透明质酸(low molecular weight hyaluronic acid,LMW-HA)对小鼠心脏成纤维细胞(cardiac fibroblast,CF)表型转化的促进作用,探讨CD44和S100A4在此过程中的作用。方法:从ICR乳小鼠的心脏中分离提取CF并培养,使用LMW-HA进行刺激,采用CCK-8和EdU染色测细胞增殖程度,免疫印迹(Western blot,WB)、实时定量PCR、免疫荧光确定纤维化程度,对CD44和S100A4蛋白质核分离并通过WB和免疫荧光明确核转移。CD44抑制剂BRIC-235处理后再次检测上述指标。结果:CCK-8增殖与EdU染色实验确定LMW-HA的最佳刺激浓度为0.8 mg/mL。WB、PCR和免疫荧光表明LMW-HA的刺激使心脏纤维化标志物(α-SMA和Collagen 3)的水平显著增加,CD44保持不变,S100A4随时间逐渐增加,同时CD44和S100A4蛋白转移到细胞核内。CD44抑制剂BRIC-235能抑制这些改变。结论:LMW-HA的刺激能够促进小鼠CF的表型转化从而促进心肌纤维化,该过程是通过与CD44结合并促进S100A4转移入细胞核内激活下游通路实现的。 展开更多
关键词 分子量透明质 CD44 S100A4 心肌纤维化
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透明质酸氧化降解的研究进展
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作者 柯春林 曾晓雄 《化学与生物工程》 CAS 2009年第4期16-19,共4页
低分子量透明质酸(LMWHA)和透明质酸寡聚糖(o-HA)具有抗氧化、免疫调节、促进伤口愈合、促血管生成和抗肿瘤等生物活性,透明质酸(HA)可以氧化降解为LMWHA和o-HA。对HA的氧化降解进行了综述。
关键词 透明质 氧化降解 分子量 寡聚糖
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具有5+12优质亚基节节麦的低分子量谷蛋白基因序列分析 被引量:7
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作者 黄卓 龙海 +2 位作者 颜泽洪 魏育明 郑有良 《高技术通讯》 CAS CSCD 北大核心 2005年第7期67-72,共6页
根据低分子量谷蛋白亚基(LMW-GS)基因编码区保守序列设计引物,对具优质高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)5+12的节节麦材料AS63进行扩增,得到长度约为900bp和1000bp的DNA片段,克隆测序后获得3个LMW-GS基因序列LMWD-1(GenBank登录号AY841013)、... 根据低分子量谷蛋白亚基(LMW-GS)基因编码区保守序列设计引物,对具优质高分子量谷蛋白亚基(HMW-GS)5+12的节节麦材料AS63进行扩增,得到长度约为900bp和1000bp的DNA片段,克隆测序后获得3个LMW-GS基因序列LMWD-1(GenBank登录号AY841013)、LMWD-2(GenBank登录号AY841014)和LMWD-3(GenBank登录号AY841015).它们具有小麦低分子量谷蛋白基因的典型结构特征.其中,LMWD-1和LMWD-2具有完整编码区,长度分别为1065 bp和972 bp,可分别编码333和302个氨基酸残基的成熟蛋白,且第一个半胱氨酸残基均出现在重复区第13位.在重复区,LMWD-1的两个疏水单元为PIIIL和PVIIL,而LMWD-2的两个疏水单元为PIIIL和SVIIL.LMWD-1的重复区中还存在一个连续13个Q组成的短肽.LMWD-3由于编码区内存在提前终止密码子,为不表达的假基因.氨基酸序列比较发现,LMW-GS基因的N-末端区序列具有位点特异性,且LMWD-1和LMWD-2与普通小麦Glu-D3位点的LMW-GS基因有很高的一致性. 展开更多
关键词 分子量 基因序列分析 节节麦 优质亚基 LMW-GS基因 分子量谷蛋白亚基 基因编码区 DNA片段 氨基残基 终止密码子 位点特异性 序列设计 克隆测序 结构特征 蛋白基因 成熟蛋白 半胱氨 序列比较 普通小麦 登录 假基因
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