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不同降解方法制备低分子量硫酸软骨素的比较 被引量:4
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作者 李燕妮 《化学与生物工程》 CAS 2014年第3期63-65,共3页
分别用过氧化氢降解法、草酸降解法和苹果酸降解法制备低分子量硫酸软骨素,通过测试降解速度、产品的分子量、收率和红外光谱进行比较研究。结果显示,过氧化氢降解法和草酸降解法所得产品的分子量较小;草酸降解法和苹果酸降解法所得产... 分别用过氧化氢降解法、草酸降解法和苹果酸降解法制备低分子量硫酸软骨素,通过测试降解速度、产品的分子量、收率和红外光谱进行比较研究。结果显示,过氧化氢降解法和草酸降解法所得产品的分子量较小;草酸降解法和苹果酸降解法所得产品的收率较高;苹果酸降解法的降解反应最温和,易于控制;3种方法所得产品的红外光谱未见明显差别。 展开更多
关键词 分子量 硫酸软骨素 降解方法
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低相对分子质量硫酸软骨素的制备及其性质 被引量:8
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作者 史敏娟 熊双丽 +1 位作者 王莹莹 姚小蕾 《精细化工》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第11期1088-1092,共5页
以过氧化氢+铜离子(Ⅱ)体系自由基法降解制备了低相对分子质量(简称分子量,下同)硫酸软骨素,并采用元素分析、红外光谱、原子力显微镜进行了结构表征和物化性质分析。结果表明,铜离子催化氧化降解后硫酸软骨素重均分子量从56 596降到6 9... 以过氧化氢+铜离子(Ⅱ)体系自由基法降解制备了低相对分子质量(简称分子量,下同)硫酸软骨素,并采用元素分析、红外光谱、原子力显微镜进行了结构表征和物化性质分析。结果表明,铜离子催化氧化降解后硫酸软骨素重均分子量从56 596降到6 906,己糖醛酸、氨基己糖及硫酸根等主要成分变化不大,差异不显著,降解前后热分解特性一致。原子力显微镜分析发现,降解前后硫酸软骨素在水中均以多股螺旋棒状形式存在,降解过程中,螺旋链部分断裂。结合红外光谱图,可以推测自由基引起的降解主要是造成硫酸软骨素二糖间β-1,4糖苷键断裂,而对β-1,3糖苷键无影响。 展开更多
关键词 分子量硫酸软骨素 制备 基本性质 结构表征 医药与日化原料
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硫酸软骨素裂解酶ABCⅡ的高效融合表达及其酶学性质研究
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作者 李晔 周朝 袁其朋 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2023年第5期88-97,共10页
目的:本研究旨在实现硫酸软骨素裂解酶ABCⅡ(chondroitinase ABCⅡ,ChSase ABCⅡ)的高效可溶性表达并研究其酶学性质,为ChSase ABCⅡ在药品和保健食品生产中的应用奠定基础。方法:在优化ChSase ABCⅡ基因原始序列的基础上,构建重组质粒p... 目的:本研究旨在实现硫酸软骨素裂解酶ABCⅡ(chondroitinase ABCⅡ,ChSase ABCⅡ)的高效可溶性表达并研究其酶学性质,为ChSase ABCⅡ在药品和保健食品生产中的应用奠定基础。方法:在优化ChSase ABCⅡ基因原始序列的基础上,构建重组质粒pET-28a-His-ChSase ABCⅡ并优化其表达条件;利用亲和层析得到带有多聚组氨酸标签(polyhistidine-tag,His-tag)的ChSase ABCⅡ融合蛋白后,研究了His-ChSase ABCⅡ的部分酶学性质。结果:构建的His-ChSase ABCⅡ融合蛋白表达系统能在大肠杆菌中实现可溶性表达;在表达宿主为E.coli BL21(DE3)和诱导剂(异丙基-β-D-硫代半乳糖苷)浓度为125μmol/L的优化条件下,发酵液酶活力可达到7206.83±184.27 IU/L;纯化后的His-ChSase ABCⅡ酶比活力为22.02±0.39 IU/mg蛋白,最适pH和温度分别为7.5和40℃,其在30~40℃条件下较为稳定,且半衰期在2 h以上。His-ChSase ABCⅡ能特异性有效分解硫酸软骨素,其K_(m)值为10.4±0.8μmol/L,Kcat值为9.4±0.2 s^(-1)。结论:本论文通过基因优化和融合表达等策略实现了His-ChSase ABCⅡ的高效表达和纯化。此外,His-ChSase ABCⅡ的酶学性质可基本满足其在医药和营养产品工业生产中的应用需求。 展开更多
关键词 硫酸软骨素裂解酶ABCⅡ 分子量硫酸软骨素(lmwcss) 酶学性质 融合表达 多聚组氨酸标签
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软骨素裂解酶的研究进展 被引量:1
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作者 肖梦圆 武瑞赟 李平兰 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2022年第15期409-417,共9页
硫酸软骨素(chondroitin sulfate,CS)是由葡萄糖醛酸和乙酰半乳糖胺交替连接的带负电荷的线性大分子多糖,具有多种生理活性,包括修复关节软骨、抗氧化、降血脂、抗凝血、抗血栓及抗肿瘤等,但CS的高分子量限制了其很多功能的有效发挥。... 硫酸软骨素(chondroitin sulfate,CS)是由葡萄糖醛酸和乙酰半乳糖胺交替连接的带负电荷的线性大分子多糖,具有多种生理活性,包括修复关节软骨、抗氧化、降血脂、抗凝血、抗血栓及抗肿瘤等,但CS的高分子量限制了其很多功能的有效发挥。软骨素裂解酶(chondroitinase,Chase)作为一类降解CS的裂解酶,可裂解CS产生低分子量CS,从而有效克服CS生物利用率低的缺点。本文结合笔者工作,简要介绍了CS和低分子量CS的生物活性,阐述了Chase裂解CS的催化机制,系统梳理了Chase的种类和来源、发酵生产和表征以及重组表达和应用方面的研究进展,以期深入理解低分子量CS和Chase的研究现状和发展趋势,促进Chase的工业化生产。 展开更多
关键词 分子量硫酸软骨素 软骨素裂解酶 重组表达 应用
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