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基于甲基化核酸内切酶的甲基转移酶活性的电化学检测研究被引量：1: 1; 作者白雪娇鲁理平康天放《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1079-1085,共7页; 由DNA甲基转移酶(DNMT1)催化的DNA甲基化在许多生物过程中起重要作用,包括基因转录,基因组印记和细胞分化[1]。本文利用特异性酶切法成功开发了一种有效的测定DNMT1的电化学方法。首先,将硫醇修饰的双链DNA(dsDNA)自组装固定在金电极上... 展开更多; 关键词 dna甲基化甲基转移酶活性特异性酶切法亚甲基蓝; 在线阅读下载PDF 职称材料

子宫颈鳞状细胞癌组织中DNMT1 mRNA表达和E-cad甲基化检测被引量：6: 2; 作者赵先兰张会利饶燕玲《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第3期558-561,共4页; 目的:探讨宫颈鳞状细胞癌组织中DNA甲基化转移酶(DNMT1)mRNA的表达和上皮钙粘附素(E-cadherin)的甲基化状况,分析其与宫颈鳞状细胞癌发生发展的关系。方法:应用原位杂交技术检测20例正常宫颈、60例CIN(CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ各20例)和40... 展开更多; 关键词宫颈鳞状细胞癌 dna甲基化转移酶1 上皮钙粘附素甲基化甲基化特异性PCR; 在线阅读下载PDF 职称材料

5-氮杂-2-脱氧胞苷对里氏木霉产纤维素酶的影响被引量：5: 3; 作者周娇娇佘炜怡 +2 位作者王浩入谢宁田生礼《深圳大学学报（理工版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第2期122-131,共10页; 为探究脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid,DNA)甲基化修饰对丝状真菌里氏木霉(Trichoderma reesei,T.reesei)产纤维素酶基因表达的表观遗传调控机制,利用不同浓度(0~1.0 mmol/L)的化学修饰剂5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycyti... 展开更多; 关键词丝状真菌里氏木霉 5-氮杂-2-脱氧胞苷 dna甲基化 dna甲基化转移酶甲基化特异性PCR; 在线阅读下载PDF 职称材料

DNMTl siRNA对人胰腺癌PaTu8988细胞周期的调控机制研究被引量：2: 4; 作者徐岷高军 +6 位作者高道键张玉琦杜奕奇刘枫龚燕芳吴洪玉李兆申《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期21-23,共3页; 目的研究沉默DNA甲基转移酶1(DNMTl)基因对人胰腺癌PaTu8988细胞增殖和细胞周期的影响及可能机制。方法培养的人胰腺癌PaTu8988细胞分为空白对照组、阴性siRNA(15nmol/L)组、阴性siRNA(30nmol/L)组、DNMT1 siRNA(15nmol/L)组和DNMT1 siR... 展开更多; 关键词位点特异性dna甲基转移酶(胞嘧啶特异性) RNA干扰胰腺肿瘤细胞周期; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名基于甲基化核酸内切酶的甲基转移酶活性的电化学检测研究被引量：1: 1; 作者白雪娇鲁理平康天放; 机构北京工业大学环境与能源工程学院; 出处《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心 2019年第6期1079-1085,共7页; 基金国家自然科学基金项目(21876005)资助; 文摘由DNA甲基转移酶(DNMT1)催化的DNA甲基化在许多生物过程中起重要作用,包括基因转录,基因组印记和细胞分化[1]。本文利用特异性酶切法成功开发了一种有效的测定DNMT1的电化学方法。首先,将硫醇修饰的双链DNA(dsDNA)自组装固定在金电极上,随后DNMT1识别dsDNA半甲基化序列并实现完全甲基化,最后通过甲基化特异性限制酶(BSSHⅡ)剪切,未发生完全甲基化的碱基序列将被剪切并移除电极表面。利用差分脉冲伏安法(DPV)分别测定剪切前后的亚甲基蓝(MB)还原电流。在最佳优化条件下,该方法线性范围为0.5 nM^50 nM,检测限为0.5 nM。这种方法可以简单有效地检测DNA甲基化和DNMT1活性,在DNA甲基化快速检测和基因毒理分析方面具有一定的实际意义。; 关键词 dna甲基化甲基转移酶活性特异性酶切法亚甲基蓝; Keywords dna methylation methyltransferase activity restriction endonuclease method methylene blue; 分类号 O657.1 [理学—分析化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名子宫颈鳞状细胞癌组织中DNMT1 mRNA表达和E-cad甲基化检测被引量：6: 2; 作者赵先兰张会利饶燕玲; 机构郑州大学第一附属医院妇产科; 出处《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第3期558-561,共4页; 文摘目的:探讨宫颈鳞状细胞癌组织中DNA甲基化转移酶(DNMT1)mRNA的表达和上皮钙粘附素(E-cadherin)的甲基化状况,分析其与宫颈鳞状细胞癌发生发展的关系。方法:应用原位杂交技术检测20例正常宫颈、60例CIN(CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ各20例)和40例宫颈鳞状细胞癌组织中DNMT1 mRNA的表达情况;利用甲基化特异性PCR(methylation specific polymerase chain reaction,MSP)方法检测E-cad基因启动子区甲基化状况,分析宫颈鳞状细胞癌中DNMT1 mRNA的表达与E-cad启动子区甲基化状况及2者之间的相关性。结果:DNMT1 mRNA在正常宫颈、CIN和宫颈鳞状细胞癌组织中表达逐渐增加,差异有统计学意义(P<0.05);DNMT1 mRNA在CINⅠ、CINⅡ、CINⅢ组织中表达的差异有统计学意义(P<0.05)。E-cad启动子甲基化率在正常宫颈、CIN、宫颈鳞状细胞癌组织中依次升高,差异有统计学意义(P<0.05)。E-cad启动子甲基化与DNMT1 mRNA的表达呈正相关(r=0.401,P<0.05)。结论:DNMT1 mRNA过表达和E-cad启动子异常甲基化与子宫颈鳞状细胞癌的发生发展关系密切;E-cad启动子甲基化过程可能是在DNMT1的催化作用下完成的。; 关键词宫颈鳞状细胞癌 dna甲基化转移酶1 上皮钙粘附素甲基化甲基化特异性PCR; Keywords cervical carcinoma DNMT1 E-cad methylation MSP; 分类号 R711.74 [医药卫生—妇产科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名5-氮杂-2-脱氧胞苷对里氏木霉产纤维素酶的影响被引量：5: 3; 作者周娇娇佘炜怡王浩入谢宁田生礼; 机构深圳大学生命与海洋科学学院; 出处《深圳大学学报（理工版）》 EI CAS CSCD 北大核心 2017年第2期122-131,共10页; 基金国家自然科学基金资助项目(31601014) 深圳市科技计划资助项目(JCYJ20150525092940997)~~; 文摘为探究脱氧核糖核酸(deoxyribonucleic acid,DNA)甲基化修饰对丝状真菌里氏木霉(Trichoderma reesei,T.reesei)产纤维素酶基因表达的表观遗传调控机制,利用不同浓度(0~1.0 mmol/L)的化学修饰剂5-氮杂-2-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine,5'-Aza)培养T.reesei QM9414.通过测定滤纸酶活性(filter paper enzymatic activities,FPA)和羧甲基纤维素钠酶活性(carboxymethyl cellulose-Na enzymatic activities,CMCA)确定纤维素酶活性的变化;利用实时荧光定量PCR(real-time fluorescent quantitative polymerase chain reaction,RT-q PCR)检测0.1 mmol/L 5'-Aza培养的T.reesei QM9414中纤维素酶基因cbh1、egl1、酶激活因子xyr1基因以及分解代谢阻遏因子cre1与ace1基因的表达水平;通过甲基化特异性PCR(methylation specific PCR,MS-PCR)分析cre1、ace1、cbh1、egl1和xyr1基因上游序列的甲基化状态;利用Western blot和DNA甲基化定量测定分析了DNA甲基转移酶和DNA的甲基化水平.结果显示,0.1mmol/L 5'-Aza处理后的T.reesei QM9414菌株的FPA和CMCA最高,比出发菌株T.reesei QM9414分别高30%和53%;RT-q PCR结果显示,处理后的T.reesei QM9414菌株中纤维素酶基因cbh1、egl1与酶激活因子xyr1基因的相对表达量均高于出发菌株,而分解代谢阻遏因子cre1和ace1基因的相对表达量与出发菌株无明显差异;MS-PCR结果显示,cbh1、egl1和xyr1基因的非甲基化状态高于出发菌株,而分解代谢阻遏因子cre1与ace1基因的非甲基化状态也无明显差异;Western blot和DNA甲基化定量测定结果分别显示,5'-Aza处理后菌株的DNA甲基转移酶表达比出发菌株明显降低,全基因组DNA甲基化程度也有下降.研究结果表明,5'-Aza处理T.reesei QM9414菌株后,纤维素酶活性明显增加,纤维素酶基因cbh1、egl1和激活因子xyr1基因表达水平的增加可能是通过DNA甲基转移酶影响DNA甲基化水平,最终调控基因的表达.; 关键词丝状真菌里氏木霉 5-氮杂-2-脱氧胞苷 dna甲基化 dna甲基化转移酶甲基化特异性PCR; Keywords filamentous fungus Trichoderma reesei （ T. reesei） 5-Aza-2＇-deoxycytidine （ 5＇-Aza ） dnamethylation dna methyltransferase methylation specific PCR （MS-PCR）; 分类号 Q934 [生物学—微生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名DNMTl siRNA对人胰腺癌PaTu8988细胞周期的调控机制研究被引量：2: 4; 作者徐岷高军高道键张玉琦杜奕奇刘枫龚燕芳吴洪玉李兆申; 机构第二军医大学长海医院消化病研究所; 出处《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第1期21-23,共3页; 基金国家科技支撑计划课题(2006BAI02A12) 上海市自然科学基金资助项目(06ZR14113); 文摘目的研究沉默DNA甲基转移酶1(DNMTl)基因对人胰腺癌PaTu8988细胞增殖和细胞周期的影响及可能机制。方法培养的人胰腺癌PaTu8988细胞分为空白对照组、阴性siRNA(15nmol/L)组、阴性siRNA(30nmol/L)组、DNMT1 siRNA(15nmol/L)组和DNMT1 siRNA(30nmol/L)组。转染48h后,采用real-time PCR和Western blotting评价沉默效率和细胞周期调控基因p21的表达情况;WST-8法检测细胞增殖情况;流式细胞技术检测细胞周期变化。结果转染48h后,15nmol/L和30nmol/L浓度的DN-MT1 siRNA均明显抑制了DNMT1 mRNA和蛋白的表达;DNMT1 siRNA转染后人胰腺癌PaTu8988细胞增殖受抑制,各组细胞增殖抑制率依次为0%±12.0%、13.7%±8.2%、23.4%±7.3%、17.1%±5.8%和36.9%±14.2%,其中DNMT1 siRNA(30nmol/L)组的细胞增殖抑制率明显高于其他各组(P<0.01);DNMT1 siRNA(15nmol/L)组和DNMT1 siRNA(30nmol/L)组的G2/M期细胞百分率均显著低于其他各组,S期细胞百分率明显高于其他各组(P<0.05);DNMT1 siRNA(30nmol/L)组细胞周期调控基因p21 mRNA相对表达量明显高于其他各组(P<0.01)。结论DNMTl siRNA能特异性抑制胰腺癌细胞DNMTl的表达,并抑制细胞增殖、促使细胞出现S期阻滞,其机制可能与上调细胞周期调控基因p21的表达有关。; 关键词位点特异性dna甲基转移酶(胞嘧啶特异性) RNA干扰胰腺肿瘤细胞周期; Keywords site-specific dna methyltransferases （cytosine-specific） RNA interference pancreatic neoplasms cell cycle; 分类号 R735.9 [医药卫生—肿瘤]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	基于甲基化核酸内切酶的甲基转移酶活性的电化学检测研究	白雪娇鲁理平康天放	《化学研究与应用》 CAS CSCD 北大核心	2019	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	子宫颈鳞状细胞癌组织中DNMT1 mRNA表达和E-cad甲基化检测	赵先兰张会利饶燕玲	《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心	2009	6	在线阅读下载PDF 职称材料
3	5-氮杂-2-脱氧胞苷对里氏木霉产纤维素酶的影响	周娇娇佘炜怡王浩入谢宁田生礼	《深圳大学学报（理工版）》 EI CAS CSCD 北大核心	2017	5	在线阅读下载PDF 职称材料
4	DNMTl siRNA对人胰腺癌PaTu8988细胞周期的调控机制研究	徐岷高军高道键张玉琦杜奕奇刘枫龚燕芳吴洪玉李兆申	《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2009	2	在线阅读下载PDF 职称材料