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版纳微型猪近交系CPN10克隆、亚细胞定位、组织表达和生物信息学分析被引量：1: 1; 作者宋雪秦彩艳 +5 位作者霍金龙王配李罗刚张霞王淑燕王雪飞《云南农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2019年第2期255-262,共8页; 【目的】以版纳微型猪近交系(BMI)为材料克隆CPN10基因,从亚细胞、m RNA水平及生物信息学方面初步探索其结构及功能特性,为该基因在猪—人异种器官移植免疫排斥中的作用研究奠定基础。【方法】采用RT-PCR方法获得CPN10基因c DNA序列,应... 展开更多; 关键词伴侣蛋白10 (CPN10) 异种移植亚细胞定位组织表达生物信息学; 在线阅读下载PDF 职称材料

HIV-1Tat基因的融合构建及在大肠杆菌中的高效表达被引量：6: 2; 作者林剑萍王华 +4 位作者王玲卫红飞胡晓平王丽颖于永利《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期33-36,共4页; 目的: 在E.coliBL21(DE3)中高效表达Tat蛋白。方法: 用PCR方法构建HIV- 1Tat基因全序列, 同时将Tat基因进行定点突变(AAG28替换为CAG, AAG50替换为CAG),以消除天然Tat蛋白的转录活性。将突变的Tat基因与伴侣10(chap10)基因连接后, 共同... 展开更多; 关键词 HIV-1 TAT 伴侣10 表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

预测的SARS冠状病毒刺突蛋白S2亚基B细胞表位肽在大肠杆菌中的表达及其抗原性的鉴定: 3; 作者冯宇万敏 +3 位作者王宣军张培因于永利王丽颖《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期113-116,共4页; 目的研究预测的SARS冠状病毒刺突蛋白S2亚基B细胞表位肽在大肠杆菌中的表达及其模拟S2蛋白的抗原性。方法用DNAStar软件对S2亚基序列进行分析,预测B细胞表位所在肽段。通过4轮PCR反应人工搭建预测表位cDNA序列并克隆到含有伴侣10基因的p... 展开更多; 关键词 SARS冠状病毒剌突蛋白 B细胞表位预测伴侣10分子 S2亚基; 在线阅读下载PDF 职称材料

早孕因子的生物学特性及其在动物繁殖领域中的应用被引量：8: 4; 作者权凯张改平《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第4期122-125,共4页; 早孕因子(early pregnancy factor,EPF)最初发现于孕鼠血清,是妊娠哺乳动物血清中存在的一种具有免疫抑制和生长调节作用的妊娠相关蛋白。EPF的氨基酸序列包括102个氨基酸残基,与伴侣蛋白10(chaperonin 10,Cpn10)高度同源,是Cpn10在细... 展开更多; 关键词早孕因子伴侣蛋白10 玫瑰花环抑制试验; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名版纳微型猪近交系CPN10克隆、亚细胞定位、组织表达和生物信息学分析被引量：1: 1; 作者宋雪秦彩艳霍金龙王配李罗刚张霞王淑燕王雪飞; 机构云南农业大学云南省版纳微型猪近交系重点实验室云南农业大学动物科学技术学院; 出处《云南农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2019年第2期255-262,共8页; 基金国家自然科学基金项目(31660650 31160439 +1 种基金 31460580 31660637); 文摘【目的】以版纳微型猪近交系(BMI)为材料克隆CPN10基因,从亚细胞、m RNA水平及生物信息学方面初步探索其结构及功能特性,为该基因在猪—人异种器官移植免疫排斥中的作用研究奠定基础。【方法】采用RT-PCR方法获得CPN10基因c DNA序列,应用分子克隆技术构建目的基因和报告基因EGFP的重组真核表达载体pEGFP-C1-CPN10,将其转染猪肾细胞PK15进行瞬时表达,通过EGFP示踪CPN10在PK15细胞中的表达和定位。进一步应用荧光定量技术明确其mRNA的多组织表达特征。最后利用生物信息学分析CPN10蛋白质的结构特征。【结果】得到BMI CPN10 CDS 309 bp序列(GenBank登录号:KM098149),成功构建了BMI CPN10基因的绿色荧光蛋白融合表达载体pEGFP-C1-CPN10,转染PK15细胞且主要在细胞质中检测到绿色荧光蛋白表达。多组织荧光定量表达分析表明:BMI CPN10 mRNA在皮肤中具有最高表达量,在肝和肾上腺中的表达量较高,在其余各组织中呈中低度表达或几乎不表达。生物信息学分析表明:CPN10编码102个氨基酸,其蛋白分子量为10.93 ku,等电点为8.89,含1个CPN10保守结构域和5个磷酸化位点,二级结构以延伸链结构为主,无跨膜螺旋结构和信号肽。【结论】CPN10基因定位在细胞质中,在皮肤中高表达,该研究结果为进一步研究该基因在免疫排斥方面的功能奠定了理论基础。; 关键词伴侣蛋白10 (CPN10) 异种移植亚细胞定位组织表达生物信息学; Keywords chaperonin 10(CPN10) xenotransplantation subcellular localization tissue expression bioinformatics; 分类号 S828.2 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名HIV-1Tat基因的融合构建及在大肠杆菌中的高效表达被引量：6: 2; 作者林剑萍王华王玲卫红飞胡晓平王丽颖于永利; 机构吉林大学基础医学院免疫学教研室吉林大学基础医学院分子生物学教研室; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期33-36,共4页; 基金国家高技术研究发展计划(863)资助(No. 2002AA214141); 文摘目的: 在E.coliBL21(DE3)中高效表达Tat蛋白。方法: 用PCR方法构建HIV- 1Tat基因全序列, 同时将Tat基因进行定点突变(AAG28替换为CAG, AAG50替换为CAG),以消除天然Tat蛋白的转录活性。将突变的Tat基因与伴侣10(chap10)基因连接后, 共同亚克隆入表达载体pET28a中,并在E.coli中表达, 表达产物用Westernblot进行鉴定。结果: 分别通过 3轮PCR, 成功地构建了Tat基因全序列。构建的重组质粒pET28a- chap10 Tat在E.coliBL21(DE3)中得到高效表达。Westernblot分析表明, 在相对分子质量 (Mr)为24 000处有 1条特异性的带。结论: chap10基因与HIV- 1Tat全基因的融合构建, 使Tat蛋白在大肠杆菌中得到高效表达,为其在爱滋病发病中作用研究奠定了基础。; 关键词 HIV-1 TAT 伴侣10 表达; Keywords HIV-1 Tat chaperone 10 expression; 分类号 R392.11 [医药卫生—免疫学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名预测的SARS冠状病毒刺突蛋白S2亚基B细胞表位肽在大肠杆菌中的表达及其抗原性的鉴定: 3; 作者冯宇万敏王宣军张培因于永利王丽颖; 机构吉林大学基础医学院分子生物学教研室吉林大学基础医学院免疫学教研室; 出处《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期113-116,共4页; 基金国家自然科学基金海外杰出青年基金项目(30328010); 文摘目的研究预测的SARS冠状病毒刺突蛋白S2亚基B细胞表位肽在大肠杆菌中的表达及其模拟S2蛋白的抗原性。方法用DNAStar软件对S2亚基序列进行分析,预测B细胞表位所在肽段。通过4轮PCR反应人工搭建预测表位cDNA序列并克隆到含有伴侣10基因的pET28a(+)载体中,构成重组载体pET28-chap10-S2epi。重组蛋白Chap10-S2epi在E.coliBL21(DE3)中表达并以SDS-PAGE和Westernblot进行鉴定。用纯化的chap10-S2epi免疫家兔制备抗血清,并通过ELISA判断Chap10-S2epi的抗原性。结果成功构建并在大肠杆菌中表达了Chap10-S2pei融合蛋白。Chap10-S2epi免疫的抗血清能识别真核细胞表达的SARS冠状病毒全长S2刺突蛋白。结论预测的SARS冠状病毒S2刺突蛋白B细胞表位肽能够诱导家兔产生针对S2蛋白的抗体,为研制抗SARS病毒基因工程疫苗奠定了基础。; 关键词 SARS冠状病毒剌突蛋白 B细胞表位预测伴侣10分子 S2亚基; Keywords SARS spike protein B cell epitope prediction chaperone 10 S2 subunit; 分类号 R373 [医药卫生—病原生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名早孕因子的生物学特性及其在动物繁殖领域中的应用被引量：8: 4; 作者权凯张改平; 机构郑州牧业工程高等专科学校河南省免疫学重点实验室; 出处《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2009年第4期122-125,共4页; 基金河南省基础与前沿技术研究(082300433201); 文摘早孕因子(early pregnancy factor,EPF)最初发现于孕鼠血清,是妊娠哺乳动物血清中存在的一种具有免疫抑制和生长调节作用的妊娠相关蛋白。EPF的氨基酸序列包括102个氨基酸残基,与伴侣蛋白10(chaperonin 10,Cpn10)高度同源,是Cpn10在细胞外发挥的效应,对温度、酸碱度的耐受性较强,无动物及品种特异性。其生物学特性主要体现在抑制免疫和生长调节两方面:①EPF具有抑制母体的免疫反应而使精子、胚胎免受免疫排斥的作用,也是目前最早确认妊娠的生化标志之一;②EPF能促进肿瘤细胞的生长,也能促进烧伤、溃疡等伤口的愈合。由于EPF能增强抗淋巴细胞血清抑制T细胞花环的形成,因此,玫瑰花环抑制试验是检测EPF活性的经典方法。EPF在动物繁殖领域可用于动物的早期、超早期妊娠诊断,妊娠中断的检测,胚胎移植后的成活情况检测,在评价雄性繁殖力和繁殖免疫疾病的治疗等方面有着重要价值。; 关键词早孕因子伴侣蛋白10 玫瑰花环抑制试验; Keywords early pregnancy factor chaperonin 10 rosette inhibition test; 分类号 S821.3 [农业科学—畜牧学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	版纳微型猪近交系CPN10克隆、亚细胞定位、组织表达和生物信息学分析	宋雪秦彩艳霍金龙王配李罗刚张霞王淑燕王雪飞	《云南农业大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心	2019	1	在线阅读下载PDF 职称材料
2	HIV-1Tat基因的融合构建及在大肠杆菌中的高效表达	林剑萍王华王玲卫红飞胡晓平王丽颖于永利	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2005	6	在线阅读下载PDF 职称材料
3	预测的SARS冠状病毒刺突蛋白S2亚基B细胞表位肽在大肠杆菌中的表达及其抗原性的鉴定	冯宇万敏王宣军张培因于永利王丽颖	《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心	2007	0	在线阅读下载PDF 职称材料
4	早孕因子的生物学特性及其在动物繁殖领域中的应用	权凯张改平	《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心	2009	8	在线阅读下载PDF 职称材料