伯氏疟原虫静息巯基氧化酶表达阶段的确定 被引量：1

1

作者 郑文琪 冯学敏 +3 位作者 刘飞 曹雅明 韩艳秋 王俊瑞 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第7期731-739,共9页

目的观察伯氏疟原虫静息巯基氧化酶(PbQSOX)的表达阶段及表达特点。方法分别采用SignalP-5.0 Server与TMHMM Server 2.0在线软件对PbQSOX蛋白的信号肽与跨膜区进行预测分析。利用同源重组技术,将PbQSOX-HA标签型打靶质粒经限制性内切酶... 目的观察伯氏疟原虫静息巯基氧化酶(PbQSOX)的表达阶段及表达特点。方法分别采用SignalP-5.0 Server与TMHMM Server 2.0在线软件对PbQSOX蛋白的信号肽与跨膜区进行预测分析。利用同源重组技术,将PbQSOX-HA标签型打靶质粒经限制性内切酶NotⅠ酶切使其线性化,将线性化的质粒电转染至伯氏疟原虫株内并感染小鼠。经乙胺嘧啶筛选耐药型疟原虫血症小鼠,取小鼠外周血进行PCR鉴定,获取PbQSOX-HA标签型疟原虫。培养纯化裂殖体、配子体与动合子阶段的PbQSOX-HA标签型疟原虫,采用蛋白质印迹法与间接免疫荧光实验检测PbQSOX蛋白在伯氏疟原虫中的表达阶段与表达特点。结果生物信息学分析发现PbQSOX蛋白存在信号肽,不存在跨膜区,蛋白均在细胞膜外表达。经PCR鉴定,PbQSOX-HA标签型打靶质粒与伯氏疟原虫同源重组正确,并成功获得了PbQSOX-HA标签型疟原虫及纯化的PbQSOX-HA标签型裂殖体、配子体与动合子。蛋白质印迹法检测显示PbQSOX蛋白主要在配子体与动合子阶段表达,间接免疫荧光实验结果显示PbQSOX表达于配子体、雄配子、合子、retort与动合子表面。结论PbQSOX是伯氏疟原虫在有性生殖阶段表达的蛋白,主要表达于配子体、雄配子、合子、retort与动合子表面。 展开更多

关键词 伯氏疟原虫 基因打靶 表达阶段 伯氏疟原虫静息巯基氧化酶

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伯氏疟原虫氯喹敏感株和抗性株感染的免疫差异 被引量：11

2

作者 严继舟 宋关鸿 +1 位作者 龚志锦 陶文照 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第3期154-157,F003,共5页

目的：探讨伯氏疟原虫氯喹抗性与免疫的关系。方法：比较氯喹敏感株（Ｎ）和抗性株（ＲＣ）感染ＩＣＲ鼠和ＢＡＬＢ／ｃ裸鼠后的感染和再感染过程、肝脾组织学改变和血清ＩｇＧ抗体水平。结果：ＢＡＬＢ／ｃ裸鼠和ＩＣＲ鼠感染Ｎ株后，... 目的：探讨伯氏疟原虫氯喹抗性与免疫的关系。方法：比较氯喹敏感株（Ｎ）和抗性株（ＲＣ）感染ＩＣＲ鼠和ＢＡＬＢ／ｃ裸鼠后的感染和再感染过程、肝脾组织学改变和血清ＩｇＧ抗体水平。结果：ＢＡＬＢ／ｃ裸鼠和ＩＣＲ鼠感染Ｎ株后，分别于４～５ｄ和７～１０ｄ死亡；大量被吞噬疟色素沉积在脾边缘区和肝脾血窦内。低剂量氯喹延长Ｎ株感染时间（３１ｄ）的ＩＣＲ鼠（ＮＣＣ），血清ＩｇＧ抗体水平增高（１∶２５６），但不能抵抗Ｎ株和ＲＣ株再感染。ＩＣＲ鼠感染ＲＣ株后，８３％在感染２８～３６ｄ自愈，自愈前脾索内淋巴细胞、浆细胞和单核－巨噬细胞不断增多；随着原虫血症迅速下降，红髓结构逐渐恢复正常，白髓生发中心形成，ＩｇＧ抗体呈强阳性（１∶４０９６）；自愈ＩＣＲ鼠能不同程度地抵制ＲＣ和Ｎ株再感染。裸鼠感染ＲＣ株４５～５６ｄ后死亡，肝脾增生浸润不明显。结论：Ｎ株引起肝脾巨噬细胞和内皮细胞的吞噬及损伤；ＲＣ株则刺激正常胸腺鼠单个核细胞增生浸润，表现为肝脾局部迟发型超敏炎症。 展开更多

关键词 疟原虫 氯喹抗性 免疫耐受 伯氏疟原虫

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伯氏疟原虫哌喹抗性系的建立及其抗性表型特征观察 被引量：5

3

作者 郭虹 周利民 +4 位作者 潘在用 黄宪希 薛伟玲 吴金燕 易国辉 《海南医学院学报》 CAS 2011年第7期865-869,875,共6页

目的:建立伯氏疟原虫(P.b.)抗哌喹(PQR)系鼠疟模型;比较其抗性表型基本特征。方法:采用鼠-鼠间血传、药物剂量递增法对P.b.ANKA哌喹敏感株(PQS)进行抗性培育,通过测定PQS ED50和PQR ED50计算抗性指数及抗性稳定性;显微镜观察虫体形态变... 目的:建立伯氏疟原虫(P.b.)抗哌喹(PQR)系鼠疟模型;比较其抗性表型基本特征。方法:采用鼠-鼠间血传、药物剂量递增法对P.b.ANKA哌喹敏感株(PQS)进行抗性培育,通过测定PQS ED50和PQR ED50计算抗性指数及抗性稳定性;显微镜观察虫体形态变化、计数原虫率,记录分析小鼠接种后存活时间及肝、脾及体重变化等特征。结果:磷酸哌喹(PQ)起始剂量7 mg/kg,传14代,历时8个月,PQ浓度达35 mg/kg时,抗性指数大于敏感株>186倍;P.b.PQR光镜下形态变化显著,原虫率上升缓慢、致病力下降,感染鼠存活时间延长、贫血程度较轻,肝脾肿大显著等。去除药物压力传代6次后,RI仍>100,抗性表型无明显改变。结论:建立了P.b.ANKA株PQR系,该系抗性相对稳定,抗性表型特征明显。该模型的建立,为深入研究PQ抗性分子机制及抗性相关免疫调节机制奠定了实验基础。 展开更多

关键词 伯氏疟原虫 哌喹 抗性系 鼠疟模型

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伯氏疟原虫抗哌喹系小鼠IFN-γ、TNF-α及IL-4分泌细胞的抗性免疫调控作用 被引量：4

4

作者 黄宪希 周利民 +2 位作者 易国辉 薛伟玲 郭虹 《海南医学院学报》 CAS 2015年第5期577-581,587,共6页

目的:通过检测及比较伯氏疟原虫(Pb)ANKA株抗哌喹(PQR)系及敏感(PQS)系感染小鼠脾细胞中γ-干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白介素-4(IL-4)细胞因子分泌细胞水平的动态变化,探讨哌喹抗性相关免疫调节机制。方法:80只昆明小... 目的:通过检测及比较伯氏疟原虫(Pb)ANKA株抗哌喹(PQR)系及敏感(PQS)系感染小鼠脾细胞中γ-干扰素(IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)及白介素-4(IL-4)细胞因子分泌细胞水平的动态变化,探讨哌喹抗性相关免疫调节机制。方法:80只昆明小鼠随机分为A(PbPQS)、B(PbPQR)和C(对照组,NC)3组,应用ELISPOT技术测定各组小鼠脾细胞分泌IFN-γ、TNF-α和IL-4的斑点形成细胞数(SFCs)。结果:在PbPQS或PbPQR感染小鼠后3、6d时IFN-γSFCs A、B两组均显著增高,3d时A组高于B组(P=0.05),而6d时B组明显高于A组(P=0.002),TNF-αSFCs的增加B组明显高于A组(3d:P<0.001,6d:P=0.037),IL-4SFCs A、B两组增高无显著性差别。B组3种细胞因子SFCs 22d间的动态变化结果显示:6d时IFN-γSFCs及TNF-αSFCs增至峰值,9d时IL-4SFCs增至峰值,22d时3种细胞因子SFCs再度增加。结论:感染早期Th1免疫反应的有效活化、其后向Th2免疫反应的偏移以及感染后期3种细胞因子的协同抗原虫作用是影响PbPQR感染小鼠早期原虫增殖低下、其后原虫率上升以及最终疾病转归恢复的重要因素,抗性的产生与宿主免疫密切相关。 展开更多

关键词 伯氏疟原虫 哌喹抗性 细胞因子 酶联免疫斑点法

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伯氏疟原虫再感染过程中树突状细胞表面分子表达水平的实验观察 被引量：2

5

作者 刘英杰 潘艳艳 +3 位作者 李莹 冯永辉 刘军 曹雅明 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期403-406,共4页

目的探讨疟疾感染早期根治性治疗对再感染过程中树突状细胞（dendritic cells,DCs）成熟和功能的影响。方法用伯氏疟原虫（Plasmodium bergheiANKA,PbA）感染DBA/2小鼠,感染后3d进行根治性治疗,并于初次感染后90d进行再感染。通过吉姆... 目的探讨疟疾感染早期根治性治疗对再感染过程中树突状细胞（dendritic cells,DCs）成熟和功能的影响。方法用伯氏疟原虫（Plasmodium bergheiANKA,PbA）感染DBA/2小鼠,感染后3d进行根治性治疗,并于初次感染后90d进行再感染。通过吉姆萨薄血膜染色法计数红细胞感染率,流式细胞术检测再感染前（0d）和再感染后（1d、3d、5d）不同时间点脾细胞中表达CD80、CD86、CD40和MHC-II分子的DCs以及活化性T细胞的百分含量。结果同种疟原虫再感染后,根治性治疗小鼠仅出现短暂的低水平虫体血症;表达CD80、CD86、CD40和MHC-II分子的DCs百分率均于再感染后第3d出现了有意义的升高;再感染后第1-5d活化性T细胞百分率持续升高。结论初次感染早期根治性治疗后,同种疟原虫再攻击可诱导DCs的成熟和功能的发挥。 展开更多

关键词 伯氏疟原虫 再感染 树突状细胞 树突状细胞表面分子

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伯氏疟原虫丝/苏氨酸磷酸酶5抗血清对有性阶段生长抑制作用的研究 被引量：3

6

作者 孙林 洪明阳 +1 位作者 曹雅明 朱晓彤 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第8期921-926,共6页

目的:探讨伯氏疟原虫丝/苏氨酸磷酸酶5(PP5)作为传播阻断疫苗候选抗原的可行性。方法:PCR扩增PP5的功能区(407-711 aa),克隆入p ET32a(+)载体。IPTG诱导PP5重组蛋白表达后,纯化重组蛋白并免疫小鼠。ELISA方法检测抗PP5免疫血清效价。实... 目的:探讨伯氏疟原虫丝/苏氨酸磷酸酶5(PP5)作为传播阻断疫苗候选抗原的可行性。方法:PCR扩增PP5的功能区(407-711 aa),克隆入p ET32a(+)载体。IPTG诱导PP5重组蛋白表达后,纯化重组蛋白并免疫小鼠。ELISA方法检测抗PP5免疫血清效价。实验观察免疫血清对配子体出丝、动合子转化率和蚊胃内卵囊形成的影响。结果:成功表达PP5重组蛋白,抗PP5免疫血清抗体滴度可达1∶256 000,且对配子体出丝的抑制呈剂量依赖性,在1∶5和1∶10倍稀释时,配子体出丝数目分别减少75%和45%,与对照组相比差异具有显著统计学意义0. 05)。免疫血清可显著抑制动合子形成数目,在1∶5倍稀释时,动合子转化率减少14. 79%(P<0. 05),蚊感染率和胃内卵囊密度分别减少26. 05%和74. 19%(P<0. 05)。结论:PP5蛋白具有良好的免疫原性和抗原性。抗PP5免疫血清具有明显的传播阻断效果。 展开更多

关键词 伯氏疟原虫 丝/苏氨酸磷酸酶5 传播阻断 配子体出丝

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IL-12对伯氏疟原虫红内期感染小鼠IFN-γ、TNF-α、IL-10水平的影响 被引量：2

7

作者 陈姝 陆惠民 +2 位作者 张山鹰 高琪 唐学恒 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2005年第6期537-538,共2页

关键词 IL-12 疟原虫红内期 IFN-γ TNF-α IL-10 感染 小鼠 水平 NK细胞毒活性 免疫保护作用 细胞因子 毒副反应 生物学活性 伯氏疟原虫 TH细胞 T细胞 Th1 CD2

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IL-12在抗伯氏疟原虫感染中的免疫佐剂作用 被引量：2

8

作者 陈姝 陆惠民 +2 位作者 张山鹰 高琪 唐学恒 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2004年第7期601-604,共4页

目的　探讨IL - 12在抗伯氏疟原虫感染中的免疫佐剂作用。方法　BALB/c小鼠分别皮下用抗原sAg、IL - 12、抗原sAg联合IL - 12或抗原sAg联合弗氏佐剂进行免疫 ,共免疫 3次 ,每次间隔 2wk ,末次免疫后 1wk以 5× 10 5个感染P berghei... 目的　探讨IL - 12在抗伯氏疟原虫感染中的免疫佐剂作用。方法　BALB/c小鼠分别皮下用抗原sAg、IL - 12、抗原sAg联合IL - 12或抗原sAg联合弗氏佐剂进行免疫 ,共免疫 3次 ,每次间隔 2wk ,末次免疫后 1wk以 5× 10 5个感染P berghei的RBC攻击感染 ,观察各组小鼠原虫血症变化及存活时间。攻击感染后 1wk收集各组小鼠血清 ,采用ELISA检测血清中IFN -γ、IL - 4、IL - 10及IgG水平。结果　抗原sAg联合IL - 12免疫可较其它各免疫组及未免疫对照组显著延长小鼠存活时间 ,且全部小鼠在原虫血症达 5 0 %时开始死亡 ;而单独抗原sAg、单独IL - 12或抗原sAg联合弗氏佐剂免疫与未免疫比较 ,对小鼠原虫血症及存活时间均无明显影响 ,且半数以上小鼠均在原虫血症小于 2 5 %时死亡。抗原联合IL - 12免疫组小鼠血清中IFN -γ及IgG水平较单独抗原sAg、单独IL - 12及未免疫组显著升高。 结论　结果表明 ,IL - 12与sAg抗原共同免疫小鼠可诱导对P berghei攻击感染的部分抵抗力 ,具有一定的免疫佐剂活性。 展开更多

关键词 自细胞介素12 伯氏疟原虫 免疫佐剂 ELISA

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伯氏疟原虫氯喹抗性株红内期虫体的凋亡 被引量：3

9

作者 陈克强 宋关鸿 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期515-518,R002,共5页

目的 :研究伯氏疟原虫 (Plasmodium berghei)氯喹抗性 (RC)株红内期虫体细胞危机状态的性质。方法 :应用光学显微镜和透射电镜及基因组 DNA琼脂糖电泳技术 ,观察感染伯氏疟原虫 RC株或氯喹敏感 (N)株 ICR小鼠在原虫血症上升期和感染 RC... 目的 :研究伯氏疟原虫 (Plasmodium berghei)氯喹抗性 (RC)株红内期虫体细胞危机状态的性质。方法 :应用光学显微镜和透射电镜及基因组 DNA琼脂糖电泳技术 ,观察感染伯氏疟原虫 RC株或氯喹敏感 (N)株 ICR小鼠在原虫血症上升期和感染 RC株小鼠自愈期虫体的显微及超微结构 ,以及基因组 DNA琼脂糖电泳图谱。结果 :在光镜下 ,原虫血症上升期的 RC株和 N株虫体结构无异常 ;而 RC株感染小鼠自愈期虫体密度下降 ,大部分虫体固缩 ,周围呈空泡状。在电镜下 ,原虫血症上升期的 RC株和 N株红内期虫体胞膜结构完整 ,核位于一侧 ,胞质内可见各种细胞器 ,代谢窗明显。 N株滋养体可见食物泡和疟色素。但 RC株感染小鼠自愈期红内期虫体呈球形或椭圆形 ;胞膜完整 ,核固缩 ,胞质浓缩 ,线粒体和膜状结构消失 ,未见代谢窗结构。原虫血症上升期的 RC株和 N株红内期虫体基因组 DNA电泳均为一条带 ,而 RC株感染小鼠自愈期红内期虫体基因组 DNA电泳呈典型的梯形条带。 结论 :伯氏疟原虫 展开更多

关键词 伯氏疟原虫 氯喹 细胞凋亡 抗药性 微生物

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伯氏疟原虫的浓集和纯化 被引量：2

10

作者 缪为民 许传亮 管惟滨 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1991年第1期72-74,共3页

在进行疟原虫生物化学、免疫学及分子生物学研究时,疟原虫样品中宿主成分的污染常会影响实验结果。因此需要分离纯净的疟原虫作为实验材料。分离的方法有聚蔗糖、泛影葡胺及明胶溶液法。近年认为Percoll溶液是首选的分离介质,然而该液昂... 在进行疟原虫生物化学、免疫学及分子生物学研究时,疟原虫样品中宿主成分的污染常会影响实验结果。因此需要分离纯净的疟原虫作为实验材料。分离的方法有聚蔗糖、泛影葡胺及明胶溶液法。近年认为Percoll溶液是首选的分离介质,然而该液昂贵,需进口。 展开更多

关键词 伯氏疟原虫 浓集 纯化

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伯氏疟原虫类巨噬细胞移动抑制因子在红内期的表达 被引量：1

11

作者 陈俊 刘忠湘 +4 位作者 赵亚 雷俊川 李淑梅 李珣 薛采芳 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期738-740,共3页

目的制备小鼠抗伯氏疟原虫类巨噬细胞移动抑制因子(PbMIF)的抗体,并检测PbMIF在伯氏疟原虫红内期的表达。方法用纯化的PbMIF蛋白免疫BABL/c小鼠,制备小鼠抗PbMIF的抗血清。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗体的效价,用免疫印迹(Western ... 目的制备小鼠抗伯氏疟原虫类巨噬细胞移动抑制因子(PbMIF)的抗体,并检测PbMIF在伯氏疟原虫红内期的表达。方法用纯化的PbMIF蛋白免疫BABL/c小鼠,制备小鼠抗PbMIF的抗血清。用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗体的效价,用免疫印迹(Western blotting)-二氨基联苯胺(DAB)底物显色法检测抗体的特异性。采用免疫印迹增强化学发光(ECL)的方法,用上述制备的抗血清检测PbMIF在红内期伯氏疟原虫的表达情况。结果ELISA测得小鼠抗PbMIF抗体的效价>1∶106,Western blotting显示该抗体可与原核表达的PbMIF蛋白特异性结合。ECL结果表明感染的红细胞中存在PbMIF。结论成功制备了小鼠抗PbMIF的抗体。红内期伯氏疟原虫表达PbMIF。 展开更多

关键词 伯氏疟原虫 巨噬细胞移动抑制因子 多克隆抗体 免疫印迹

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伯氏疟原虫氯喹敏感株和抗性株感染小鼠肝、肾、肺超微结构的比较 被引量：2

12

作者 陈克强 宋关鸿 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期508-511,共4页

目的 :研究伯氏疟原虫 (Plasmodium berghei)氯喹抗性 (RC)株与敏感 (N )株致病力和宿主对不同虫株感染反应的差异。 方法 :比较伯氏疟原虫 RC株和 N株感染 ICR小鼠后期 ,肝、肾、肺等重要脏器超微结构的病理学改变。 结果 :N株感染后... 目的 :研究伯氏疟原虫 (Plasmodium berghei)氯喹抗性 (RC)株与敏感 (N )株致病力和宿主对不同虫株感染反应的差异。 方法 :比较伯氏疟原虫 RC株和 N株感染 ICR小鼠后期 ,肝、肾、肺等重要脏器超微结构的病理学改变。 结果 :N株感染后期 ,肝血窦、肾间质和毛细血管、肺泡毛细血管含有较多的感染疟原虫红细胞 ,肺泡壁毛细血管内皮细胞有较多的突起与疟原虫感染红细胞相接触。较多的肝细胞、肾小球旁细胞、肾小管上皮细胞、肺泡 型和 型细胞出现膜破溃 ,细胞器和胞质流失等不可逆的坏死性病变 ,一些肝血窦、肾小管和肺泡内可见多量的细胞碎片。 RC株感染后期 ,肝血窦、肾间质充血 ,含有较多的感染疟原虫红细胞。肝细胞、肾小管上皮细胞的病变以线粒体肿胀为主的变性 ,可见肝脏部分变性肝细胞出现恢复状态 ,肾小球毛细血管内皮细胞下、基膜、系膜区可见电子致密物沉着 ,肺泡隔内可见较多的单个核细胞。 结论 :N株毒力较强 ,对宿主肝、肾和肺细胞超微结构的损害为不可逆的坏死性病变 ,呈急性变质性炎症过程 ;而 RC株毒力明显减弱 ,对宿主肝、肾和肺细胞超微结构的损害以变性为主 。 展开更多

关键词 伯氏疟原虫 氯喹 病理学 超微结构 抗药性 微生物 小鼠

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伯氏疟原虫氯喹敏感株和抗性株感染 ICR鼠病理变化的比较研究(英文) 被引量：2

13

作者 陈克强 宋关鸿 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期504-507,T001,共5页

目的 :研究伯氏疟原虫 (Plasmodium berghei)的抗药性与致病力的关系。 方法 :比较伯氏疟原虫氯喹敏感株 (N)和抗性株 (RC)感染 ICR鼠的肝、脾、脑、心、肺、肾等重要脏器病理组织学的动态变化。结果 :N株感染后 ,小鼠肝、脾有较多的疟... 目的 :研究伯氏疟原虫 (Plasmodium berghei)的抗药性与致病力的关系。 方法 :比较伯氏疟原虫氯喹敏感株 (N)和抗性株 (RC)感染 ICR鼠的肝、脾、脑、心、肺、肾等重要脏器病理组织学的动态变化。结果 :N株感染后 ,小鼠肝、脾有较多的疟色素沉着 ,肺脏呈郁血性水肿 ;脑微血管充血和阻塞 ;各脏器呈急性炎症的病理变化特点。 RC株感染后 ,小鼠肝、脾脏的病理组织学改变与原虫血症的变化有关。肺脏呈间质性肺炎 ,各脏器呈慢性增生性炎症的病理变化特点。结论 :N株致病力较强 ,感染后引起宿主死亡的主要原因是感染疟原虫的红细胞对脑微血管内皮细胞的粘附 ,造成微血管阻塞 ;RC株致病力较弱 ,宿主的应答反应在感染早期可能是 CD4+ Th1相关的迟发型超敏炎症反应 ,而感染后期是 CD4+ Th2辅助作用下的抗体依赖性的免疫应答 。 展开更多

关键词 伯氏疟原虫 氯喹 药物抗性 病理组织学 ICR鼠

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伯氏疟原虫氯喹敏感株和抗性株虫体食物泡和疟色素形态及形成的比较 被引量：1

14

作者 陈克强 朱淮民 宋关鸿 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期387-389,共3页

目的:了解伯氏疟原虫氯喹敏感株(N)和抗性株(RC)红内期虫体在抗药性、致病力和诱导免疫应答方面差异的形态学基础。方法:应用超薄切片和透射电镜技术,比较N株和RC株虫体食物泡和疟色素形态及形成的差异。结果:N株滋养体具有单一的、大... 目的:了解伯氏疟原虫氯喹敏感株(N)和抗性株(RC)红内期虫体在抗药性、致病力和诱导免疫应答方面差异的形态学基础。方法:应用超薄切片和透射电镜技术,比较N株和RC株虫体食物泡和疟色素形态及形成的差异。结果:N株滋养体具有单一的、大型的食物泡,疟色素位于滋养体周边的质膜下;在裂体生殖中,疟色素发生聚合和中心化。RC株滋养体食物泡少见,其中多数虫体形成多个微型单层膜的食物泡样结构;疟色素形成明显少于N株滋养体;而且在裂体生殖中,未见疟色素聚合和中心化。结论:伯氏疟原虫RC株长期在氯喹压力下,形成了微型食物泡样结构的摄食方式,具有与N株疟原虫不同的对游离血红素的解毒机制,这可能是伯氏疟原虫N株和RC株在抗药性、致病力和诱导宿主免疫应答方面差异的基础。 展开更多

关键词 伯氏疟原虫 氯喹 敏感株 抗性株 虫体食物泡 疟色素形态 形成 比较

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伯氏疟原虫丝/苏氨酸磷酸酶6抗血清对原虫有性阶段发育抑制作用的研究 被引量：1

15

作者 孙林 洪明阳 +2 位作者 曹雅明 朱晓彤 崔立旺 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第10期1169-1173,共5页

目的:探讨伯氏疟原虫丝/苏氨酸磷酸酶6(PPP6)作为传播阻断疫苗候选抗原的可行性。方法:PCR扩增PPP6蛋白全长编码基因并克隆入pET32a(+)载体。IPTG诱导PPP6重组蛋白的表达,纯化后皮下免疫小鼠,收集抗PPP6免疫血清。ELISA和Westernblot检... 目的:探讨伯氏疟原虫丝/苏氨酸磷酸酶6(PPP6)作为传播阻断疫苗候选抗原的可行性。方法:PCR扩增PPP6蛋白全长编码基因并克隆入pET32a(+)载体。IPTG诱导PPP6重组蛋白的表达,纯化后皮下免疫小鼠,收集抗PPP6免疫血清。ELISA和Westernblot检测抗PPP6免疫血清效价和特异性。实验观察免疫血清对配子体出丝、动合子和囊合子发育的影响。结果:成功诱导PPP6重组蛋白表达,抗PPP6免疫血清抗体效价为1∶3200;与对照组相比,抗PPP6免疫血清可显著抑制配子体出丝(P<0.0001);动合子数目和动合子转化率分别显著降低65.3%和42.07%(P<0.0001);抗PPP6血清1∶5倍稀释时,囊合子形成数量减少68.91%(P<0.0001)。结论:PPP6蛋白具有良好的免疫原性和抗原性。抗PPP6免疫血清具有明显的传播阻断效果。 展开更多

关键词 伯氏疟原虫 丝/苏氨酸磷酸酶6 传播阻断疫苗

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简化的差示PCR技术在伯氏疟原虫氯喹抗性基因分离中的应用 被引量：2

16

作者 严继舟 宋关鸿 《中国人兽共患病杂志》 CSCD 北大核心 2000年第6期13-16,共4页

目的　为探察伯氏疟原虫氯喹抗性株 (RC株 )和敏感株 (N株 )的遗传学差异。方法　先维持对 RC株连续大剂量氯喹治疗 (5 0 m g/ (kg.d) ,再通过简化逆转录差示多聚酶链反应技术 (s DDRT- PCR)寻找 RC株和 N株疟原虫 c DNA差异片段并对所... 目的　为探察伯氏疟原虫氯喹抗性株 (RC株 )和敏感株 (N株 )的遗传学差异。方法　先维持对 RC株连续大剂量氯喹治疗 (5 0 m g/ (kg.d) ,再通过简化逆转录差示多聚酶链反应技术 (s DDRT- PCR)寻找 RC株和 N株疟原虫 c DNA差异片段并对所产生的可疑差异片段进行反复的 DNA回收和 PCR鉴定 ,然后选其肯定的差异片段 (N2 5 和 R2 5 )作克隆测序和序列分析及同源性检索。结果　尽管差异片段 N2 5 和 R2 5 的克隆分子 N2 5 2 和 R2 5 1 的 DNA序列相同性为 99.8% ,但由于多点突变导致它们的编码氨基酸及其模拟二级结构出现很大差异。BL AST(2 .0 6 )检索未能在基因库中发现与 R2 5 1 和 N2 5 2 相似的基因序列 ,不过它们的部分核苷酸序列 (从 12 8nt到 189nt)与褐鼠磷脂酶 Bm RNA部分序列 (从 10 5 3nt到 1114nt)具有高度同源性 :在 R2 5 1 和N2 5 2 分别为 93.5 %和 91.9%。结论　简化的差示 PCR技术结合差异片段的反复验证和序列分析可用于氯喹抗性相关基因的分离。 展开更多

关键词 伯氏疟原虫 氯喹抗性 差示PCR 磷脂酶 基因分离

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伯氏疟原虫氯喹抗性株红内期虫体在肝内的清除 被引量：1

17

作者 严继舟 宋关鸿 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期512-514,共3页

目的 :探讨伯氏疟原虫 (Plasmodium berghei)氯喹抗性 (RC)株红内期虫体在宿主体内消亡的机制。方法 :电镜观察感染伯氏疟原虫 RC株和药物敏感 (N)株小鼠肝脏内白细胞和疟原虫的相互作用。结果 :感染 N株小鼠的肝脏内未见白细胞增生、浸... 目的 :探讨伯氏疟原虫 (Plasmodium berghei)氯喹抗性 (RC)株红内期虫体在宿主体内消亡的机制。方法 :电镜观察感染伯氏疟原虫 RC株和药物敏感 (N)株小鼠肝脏内白细胞和疟原虫的相互作用。结果 :感染 N株小鼠的肝脏内未见白细胞增生、浸润 ,感染 RC株小鼠肝脏的门管区和血窦内可见大量单核 -巨噬细胞和少量淋巴细胞及中性粒细胞增生、浸润 ,并伴有大量感染疟原虫的红细胞滞留。活化的单核 -巨噬细胞和感染疟原虫红细胞的表膜相互粘附 ,大量与吞噬细胞直接接触或未接触的感染疟原虫红细胞内的虫体出现危机状态 (crisis form )。偶见巨噬细胞吞噬游离的裂殖子 ,但未见吞噬整个感染疟原虫红细胞。 结论 :宿主可能主要通过活化单核 -巨噬细胞诱导疟原虫发生危机状态 ,清除 RC株红内期疟原虫 ,而并非依赖白细胞直接吞噬。 展开更多

关键词 伯氏疟原虫 氯喹 清除 单核-巨噬细胞 危机状态

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转基因伯氏疟原虫的建立及报告基因表达的初步研究

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作者 曹毅 张冬梅 +1 位作者 李树玲 潘卫庆 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第1期25-28,共4页

目的 :通过转染含有绿色荧光蛋白 (GFP)和 Pbf MSP1片段的重组质粒 ,建立伯氏疟原虫转染技术和表达恶性疟原虫 MSP- 1 1 90 0 0片段 (Pf MSP1 - 1 9)的转基因伯氏疟原虫。方法 :构建重组转染质粒 Pyr Flu/Pbf MSP1。伯氏疟原虫 ANKA株... 目的 :通过转染含有绿色荧光蛋白 (GFP)和 Pbf MSP1片段的重组质粒 ,建立伯氏疟原虫转染技术和表达恶性疟原虫 MSP- 1 1 90 0 0片段 (Pf MSP1 - 1 9)的转基因伯氏疟原虫。方法 :构建重组转染质粒 Pyr Flu/Pbf MSP1。伯氏疟原虫 ANKA株经培养和分离后用电转化方法转入重组转染质粒 ,药物筛选转化原虫后进行 PCR检测 ,并于荧光显微镜下检测报告基因GFP的表达。结果 :构建了重组转染质粒 Pyr Flu/Pbf MSP1。荧光显微镜下观察到呈绿色荧光的伯氏疟原虫。PCR检测显示转染伯氏疟原虫存在 GFP和 Pbf MSP1基因。结论 :重组质粒已成功转染伯氏疟原虫并表达了 GFP报告基因 。 展开更多

关键词 转基因 伯氏疟原虫 基因表达 绿色荧光蛋白

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抗青蒿酯钠伯氏疟原虫核糖核酸含量测定及其寄生红细胞大小的测量

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作者 刘爱如 赵东坡 +1 位作者 吕丽莉 隋在云 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第4期350-350,共1页

抗青蒿酯钠伯氏疟原虫核糖核酸含量测定及其寄生红细胞大小的测量刘爱如，赵东坡，吕丽莉，隋在云（山东省中医药研究所，济南２５００１４）中心法认为：脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）、核糖核酸（ＲＮＡ）和蛋白质是生命规律的核心。在这三... 抗青蒿酯钠伯氏疟原虫核糖核酸含量测定及其寄生红细胞大小的测量刘爱如，赵东坡，吕丽莉，隋在云（山东省中医药研究所，济南２５００１４）中心法认为：脱氧核糖核酸（ＤＮＡ）、核糖核酸（ＲＮＡ）和蛋白质是生命规律的核心。在这三种生物大分子中，ＤＮＡ是遗传信息的... 展开更多

关键词 青蒿酯钠 伯氏疟原虫 DNA 红细胞

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伯氏疟原虫RC株和N株感染小鼠IFN-γ mRNA的表达及其对致病的影响

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作者 陈克强 朱淮民 宋关鸿 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期515-518,共4页

目的探讨伯氏疟原虫RC株和N株感染小鼠IFNγmRNA的表达及其对疟疾致病的影响。方法应用RT PCR技术,比较伯氏疟原虫RC株和N株感染后ICR小鼠脑、肝、脾组织IFNγmRNA表达的差异,并探讨其与原虫血症、体温和体质量等病理学参数之间的关系... 目的探讨伯氏疟原虫RC株和N株感染小鼠IFNγmRNA的表达及其对疟疾致病的影响。方法应用RT PCR技术,比较伯氏疟原虫RC株和N株感染后ICR小鼠脑、肝、脾组织IFNγmRNA表达的差异,并探讨其与原虫血症、体温和体质量等病理学参数之间的关系。结果N株感染小鼠后第10天,平均原虫血症达到(64.00±7.51)%,平均体质量降至(97.60±4.59)%,平均体温降至(27.87±2.95)℃,感染小鼠开始死亡;第12天小鼠全部死亡。RC株感染小鼠后第24天,平均原虫率达(61.10±6.56)%;第26天平均体质量和平均体温降至最低点;随后原虫率逐渐下降,第30天体质量和体温开始回升;感染后第36天,绝大多数感染鼠外周血涂片不能检出疟原虫,平均体质量和平均体温恢复正常;感染RC株小鼠的病死率仅为25%。感染N株小鼠在感染前期,肝、脾组织IFNγmRNA的转录明显增强,但持续时间较短;感染RC株小鼠在感染期间,肝和脾脏一直有IFNγmRNA转录,直到原虫被清除,小鼠完全康复。整个实验期间,正常对照小鼠肝和脾脏均未检测到IFNγmRNA。结论由N株和RC株疟原虫感染诱导小鼠肝、脾IFNγmRNA的表达可能具有不同的机制;RC株疟原虫感染可诱导小鼠肝、脾持续表达IFNγmRNA,对减轻疟原虫感染所造成的损害和感染鼠的康复有重要意义。 展开更多

关键词 伯氏疟原虫 RC株 N株 疟疾 干扰素

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