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洋葱伯克霍尔德菌GD1-1的分离鉴定及对香蕉枯萎病的生防潜力
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作者 朱杰 郑利乐 +5 位作者 钟鸣鸾 童灵洁 李洁玲 李华平 李云锋 聂燕芳 《华南农业大学学报》 北大核心 2025年第1期72-80,共9页
【目的】从香蕉根际土壤中筛选出对香蕉枯萎病具有良好防治效果的生防菌。【方法】采用对峙培养法,从健康香蕉根际土壤中筛选对尖孢镰刀菌古巴专化型热带4号小种(Fusarium oxysporum f. sp. cubense tropical race 4,Foc TR4)具有拮抗... 【目的】从香蕉根际土壤中筛选出对香蕉枯萎病具有良好防治效果的生防菌。【方法】采用对峙培养法,从健康香蕉根际土壤中筛选对尖孢镰刀菌古巴专化型热带4号小种(Fusarium oxysporum f. sp. cubense tropical race 4,Foc TR4)具有拮抗作用的生防菌株,根据菌落形态和生理生化特征并利用分子生物学技术对生防菌株进行鉴定。通过显微观察分析该菌株对Foc TR4菌丝生长和分生孢子萌发的影响,通过对峙培养法分析其抑菌谱,通过盆栽试验分析该菌株对香蕉枯萎病的防治效果和促生潜力。【结果】筛选出了1株对Foc TR4具有显著抑制作用的拮抗菌GD1-1,鉴定为洋葱伯克霍尔德菌Burkholderia contaminans。菌株GD1-1对Foc TR4菌丝生长的抑制率为72.5%,对分生孢子萌发的抑制率为99.8%,并可以导致Foc TR4菌丝膨大变粗、畸形等。菌株GD1-1具有解钾、解磷、产蛋白酶和产铁载体的能力,对10种植物病原真菌均具有较好的抑制效果,表现出广谱抑菌作用。盆栽试验结果表明,菌株GD1-1对香蕉枯萎病的防效为55.6%,且对香蕉植株具有良好的促生作用。【结论】洋葱伯克霍尔德菌GD1-1对Foc TR4具有明显的抑制作用,对香蕉枯萎病具有良好的防治效果,对香蕉植株具有促生作用。作为优质的生防菌源,菌株GD1-1具有一定的开发应用潜力。 展开更多
关键词 香蕉枯萎病 尖孢镰刀古巴专化型 洋葱伯克霍尔德菌 拮抗作用 生物防治
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类鼻疽伯克霍尔德菌非编码RNA BprsB的生物学功能初步评价
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作者 谭君 李雪苗 +6 位作者 罗妮妮 王彦双 陈垂这 邓泽芳 罗江慧 方俊德 夏乾峰 《海南医科大学学报》 北大核心 2025年第6期401-407,共7页
目的:探讨Hfq相关sRNA(BprsB)对类鼻疽伯克霍尔德菌的生长速率、泳动能力、生物被膜形成以及耐药性等多方面生物学功能的影响。方法:以依赖Hfq蛋白的类鼻疽伯克霍尔德菌BprsB为靶标,利用同源重组技术构建BprsB缺失株(ΔBprsB);选取野生... 目的:探讨Hfq相关sRNA(BprsB)对类鼻疽伯克霍尔德菌的生长速率、泳动能力、生物被膜形成以及耐药性等多方面生物学功能的影响。方法:以依赖Hfq蛋白的类鼻疽伯克霍尔德菌BprsB为靶标,利用同源重组技术构建BprsB缺失株(ΔBprsB);选取野生型类鼻疽伯克霍尔德菌菌株(HNBP001)作为对照组,ΔBprsB作为实验组;通过酶标仪测定细菌的生长曲线,从而评估生长速率的变化;采用点板培养法和测量群区直径进而评价细菌泳动能力;通过结晶紫染色法测量生物膜形成情况;最后,通过MIC试验判断细菌对抗菌药物的敏感情况。结果:ΔBprsB生长速率低于HNBP001;与HNBP001相比,ΔBprsB的群区直径小(P<0.0001);ΔBprsB的生物被膜形成比HNBP001少(P<0.0001);与HNBP001相比,ΔBprsB对喹诺酮类抗菌药物(左氧氟沙星、诺氟沙星、环丙沙星)以及β‑内酰胺类抗菌药物(氨曲南)的敏感性升高。结论:BprsB促进了类鼻疽伯克霍尔德菌的生长速率、泳动、生物被膜形成和耐药,为进一步研究BprsB在类鼻疽伯克霍尔德菌致病机制中所扮演的角色提供了证据。 展开更多
关键词 类鼻疽伯克霍尔德菌 SRNA 基因敲除 生物学功能
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湛江地区类鼻疽伯克霍尔德菌特征与流行病学研究 被引量:9
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作者 黄云平 聂晓辉 +3 位作者 黄妙儿 李艳 陈华英 郭晓华 《中国感染控制杂志》 CAS 2008年第4期268-271,共4页
目的研究类鼻疽伯克霍尔德菌与常见其他伯克霍尔德菌间病原学特点及对药物敏感性的差异,为临床诊断、检验和治疗提供参考。方法对类鼻疽伯克霍尔德菌感染病例进行流行病学研究,并将其与常见医院感染皮氏伯克霍尔德菌、洋葱伯克霍尔德菌... 目的研究类鼻疽伯克霍尔德菌与常见其他伯克霍尔德菌间病原学特点及对药物敏感性的差异,为临床诊断、检验和治疗提供参考。方法对类鼻疽伯克霍尔德菌感染病例进行流行病学研究,并将其与常见医院感染皮氏伯克霍尔德菌、洋葱伯克霍尔德菌对常用抗菌药物的药敏结果进行比较分析。结果类鼻疽伯克霍尔德菌具有两端浓染,银白色菌落形态特征。在湛江,此菌感染以遂溪、廉江、吴川为主要疫区,好发于秋季,接触疫水、农民、免疫功能低下、年龄≥50岁为易感因素。其对复方磺胺甲口恶唑、头孢哌酮/舒巴坦、米诺环素、哌拉西林及其酶抑制复合制剂、头孢他啶、亚胺培南敏感率达100%,对氨基糖苷类、喹诺酮类和非抗假单胞菌属类药敏感性较差或耐药。结论类鼻疽伯克霍尔德菌感染属热带或亚热带地区传染病,水患易导致该菌流行;细菌具有染色、菌落形态特征,对药物的敏感性具有伯克菌属共同特征,易产生耐药,建议联合用药治疗。 展开更多
关键词 伯克霍尔德菌 类鼻疽伯克霍尔德菌 洋葱伯克霍尔德菌 皮氏伯克霍尔德菌 假鼻疽病 湛江
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2013—2023年临沂地区伯克霍尔德菌的临床分布、感染特征及耐药分析
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作者 彭善鑫 刘婷婷 +5 位作者 孙志清 朱晓松 左志文 廖瑞兰 付立芳 周卫萍 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期463-468,共6页
目的分析2013—2023年临沂地区检出伯克霍尔德菌的临床分布、感染特征和耐药情况,为该菌的抗感染治疗提供参考。方法回顾性分析2013—2023年临沂地区3家三甲医院分离鉴定的伯克霍尔德菌及其患者数据。结果共检出414株伯克霍尔德菌,洋葱... 目的分析2013—2023年临沂地区检出伯克霍尔德菌的临床分布、感染特征和耐药情况,为该菌的抗感染治疗提供参考。方法回顾性分析2013—2023年临沂地区3家三甲医院分离鉴定的伯克霍尔德菌及其患者数据。结果共检出414株伯克霍尔德菌,洋葱伯克霍尔德菌373株(90.10%);主要分离自重症监护室(ICU)和呼吸内科,在痰标本中的占比最高(75.12%,311/414)。伯克霍尔德菌引起的感染与患者年龄、基础疾病情况、接受有创操作和广谱抗菌药物的使用情况相关;伯克霍尔德菌感染患者以60岁以上老年人为主(53.67%,212/395);其他伯克霍尔德菌感染患者合并2型糖尿病的比例高于洋葱伯克霍尔德菌感染患者,差异有统计学意义(χ^(2)=11.120,P=0.001)。洋葱伯克霍尔德菌对复方磺胺甲恶唑、头孢他啶、左氧氟沙星和米诺环素的耐药变化虽各不相同,但均低水平耐药;对美罗培南的耐药率近3年呈上升趋势;对替卡西林/克拉维酸的耐药率高。不同的伯克霍尔德菌对头孢他啶、替卡西林/克拉维酸和美罗培南耐药性差异大。结论2013—2023年临沂地区检出的伯克霍尔德菌主要来自ICU,以痰标本为主,易感人群是60岁以上老人;2型糖尿病是其他伯克霍尔德菌感染的危险因素;伯克霍尔德菌对常用抗菌药物的耐药率变化不一,临床医生可根据药敏结果优先选用耐药率低的抗菌药物。 展开更多
关键词 伯克霍尔德菌 临床分布 感染特征 耐药性
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类鼻疽伯克霍尔德菌Ⅵ型分泌系统的Hcp1蛋白转位介导多核巨细胞形成
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作者 吴潘 饶承龙 +7 位作者 南栋琪 陈建高 张子元 刘文正 王民洋 闫晶敏 李倩 毛旭虎 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第15期1721-1728,共8页
目的探讨类鼻疽伯克霍尔德菌Ⅵ型分泌系统溶血素共调节蛋白1(hemolysin coregulatory protein 1,Hcp1)在感染宿主细胞引起多核巨细胞(multinucleated giant cells,MNGC)形成的作用及机制。方法分别采用同源重组和质粒回补技术构建类鼻疽... 目的探讨类鼻疽伯克霍尔德菌Ⅵ型分泌系统溶血素共调节蛋白1(hemolysin coregulatory protein 1,Hcp1)在感染宿主细胞引起多核巨细胞(multinucleated giant cells,MNGC)形成的作用及机制。方法分别采用同源重组和质粒回补技术构建类鼻疽菌hcp1基因缺失株(BPC006Δhcp1)和缺失回补株(BPC006Δhcp1::hcp1);分别用类鼻疽菌BPC006野生株、BPC006Δhcp1和BPC006Δhcp1::hcp1感染RAW264.7细胞,通过激光共聚焦分析Hcp1蛋白的定位情况;在293T细胞中转染Hcp1真核表达载体后进行细胞质膜分离进一步验证定位情况;在细胞感染模型上,通过吉姆萨染色检测抗Hcp1多克隆抗体封闭对MNGC形成的影响,探究Hcp1在类鼻疽菌感染导致的MNGC形成中的作用和生物学意义。结果Western blot检测结果显示BPC006Δhcp1不表达Hcp1蛋白,而BPC006Δhcp1::hcp1能恢复Hcp1蛋白的表达,成功构建类鼻疽菌BPC006Δhcp1和BPC006Δhcp1::hcp1。细胞免疫荧光共定位实验和质膜分离实验都表明Hcp1可以定位在宿主细胞膜上,且相较于对照组抗Hcp1多克隆抗体能抑制类鼻疽菌感染所诱导的MNGC形成(P<0.01)。结论类鼻疽菌感染RAW264.7细胞时Hcp1可转位至细胞膜,并在MNGC形成中发挥重要作用。 展开更多
关键词 类鼻疽伯克霍尔德菌 Hcp1 多核巨细胞 基因缺失与回补
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H-NS蛋白对泰国伯克霍尔德菌毒力作用的初探
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作者 卫蕾蕾 莫非 +1 位作者 王春燕 鲁卫平 《陆军军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第23期2581-2587,共7页
目的 构建泰国伯克霍尔德菌BPM的hns基因过表达菌株,探究hns基因过表达对细菌生长、运动、生物被膜形成能力和抗菌药物敏感性的影响。方法 将hns基因03253和05307分别克隆至表达载体pTAC-Cm上,获得重组载体pTAC-03253和pTAC-05307;将两... 目的 构建泰国伯克霍尔德菌BPM的hns基因过表达菌株,探究hns基因过表达对细菌生长、运动、生物被膜形成能力和抗菌药物敏感性的影响。方法 将hns基因03253和05307分别克隆至表达载体pTAC-Cm上,获得重组载体pTAC-03253和pTAC-05307;将两种质粒分别电转至BPM感受态菌株中获得重组菌株,对其生长、运动、生物被膜和药物敏感性的表型变化进行检测。结果 成功获得hns基因过表达菌株;和野生株BPM相比,hns基因过表达菌株的生长和运动能力受到明显抑制,生物被膜形成能力显著增强,对左氧氟沙星和米诺环素的敏感性下降。结论 H-NS蛋白在泰国伯克霍尔德菌BPM毒力和耐药性的调控中发挥重要作用,可成为泰国伯克霍尔德菌感染诊治的新靶点。 展开更多
关键词 泰国伯克霍尔德菌 H-NS蛋白 基因过表达 生物被膜 药敏试验
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海南省类鼻疽伯克霍尔德菌临床分离株的基因岛特征和毒力因子分析
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作者 符晓莹 李欢 +5 位作者 李沙 王立程 王崇圳 黎元莉 陈海 朱雄 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第4期359-368,390,共11页
目的分析类鼻疽伯克霍尔德菌(Burkholderia pseudomallei)临床分离株的基因岛(genomic island,GI)特征和毒力因子差异,为类鼻疽病的诊疗研究提供依据。方法收集B.pseudomallei临床分离株,PCR检测和测序分析毒力相关GI,在Islandviewr 4... 目的分析类鼻疽伯克霍尔德菌(Burkholderia pseudomallei)临床分离株的基因岛(genomic island,GI)特征和毒力因子差异,为类鼻疽病的诊疗研究提供依据。方法收集B.pseudomallei临床分离株,PCR检测和测序分析毒力相关GI,在Islandviewr 4平台上提交全基因组序列注释格式文件,整合SIGI-HMM与IslandPath-DIMOB两种算法预测GI,通过序列比对分析GI独特性和毒力因子差异。结果共收集到52株B.pseudomallei临床分离株,结果显示,52个基因组按进化距离分为3个分枝,其中82.69%(43/52)菌株集中在分枝1。52个B.pseudomallei基因组共识别出828个GI,按序列相似性聚类为157个GI cluster。GI在基因组中占比达2.05%~6.38%。GI cluster1和2存在全部菌株中,但84个(53.50%)GI cluster只聚类到单个基因组。10个GI cluster很可能是特有的,其中5个来源同属细菌,2个来源其他属,3个来源不确定。25个GI cluster与毒力相关,B.pseudomallei BP76和BP169含有其中8个,是所有菌株中毒力相关GI最多的。52株B.pseudomallei的毒力基因除了fhaB1、fhaB2、BPSL1661、cheY1、wzM、tssH-5/clpV、tssA-5、boaA和boaB存在差异,其余都表现一致。与泰国和澳大利亚B.pseudomallei临床菌株比较,boaA、boaB、cheY1和chbp在两个国家的菌株中都表现出差异,同时fhaB1、fhaB3和bimA在澳大利亚菌株中表现出差异。结论海南地区B.pseudomallei GI具有保守性和独特性,通过特有GI和毒力因子研究,可以发现菌株水平基因转移(Horizontal gene transfer,HGT)的来源和分子水平的毒力差异。 展开更多
关键词 类鼻疽伯克霍尔德菌 基因组 基因岛 毒力因子 水平基因转移
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误诊为结核且体内耐药的类鼻疽伯克霍尔德菌肺炎1例
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作者 周钱辉 高燕 梁彦超 《中南大学学报(医学版)》 CSCD 北大核心 2024年第9期1517-1522,共6页
类鼻疽伯克霍尔德菌是一种革兰氏阴性菌,沿海地区较多见,常因接触过病原菌污染的水源或土壤而感染。本文报告1例在外院误诊为肺结核,针对体外药敏试验结果用药耐药的慢性类鼻疽伯克霍尔德菌肺炎患者。患者为54岁男性,反复咳嗽,发现肺部... 类鼻疽伯克霍尔德菌是一种革兰氏阴性菌,沿海地区较多见,常因接触过病原菌污染的水源或土壤而感染。本文报告1例在外院误诊为肺结核,针对体外药敏试验结果用药耐药的慢性类鼻疽伯克霍尔德菌肺炎患者。患者为54岁男性,反复咳嗽,发现肺部结节1年余,口服抗感染药物症状可改善,但病情反复。2023年4月出现咳嗽加重、伴发热,肺部计算机断层扫描提示双肺多发结节,广谱抗生素治疗后肺部病灶部分进展,当地医院考虑结核可能。于中南大学湘雅医学院附属株洲医院进一步诊治,肺泡灌洗液及病变组织培养均提示类鼻疽伯克霍尔德菌阳性。依据药敏结果使用多西环素、阿莫西林克拉维酸钾等药物,但疗效欠佳,改用复方磺胺甲噁唑后疾病痊愈。该患者因直系家属有磺胺药物严重过敏史及自身耐药因素,在用药过程中经历多重波折。临床医师在处理相关情况时应警惕患者体内耐药可能。 展开更多
关键词 类鼻疽伯克霍尔德菌 肺炎 结核 误诊 耐药
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3种方法对鼻疽伯克霍尔德菌和类鼻疽伯克霍尔德菌的鉴定 被引量:2
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作者 康琳 高姗 +5 位作者 周阳 辛文文 杨浩 方瑶 毛旭虎 王景林 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第11期1205-1209,共5页
目的用3种检测方法对同源性较高的鼻疽伯克霍尔德菌和类鼻疽伯克霍尔德菌进行鉴定,比较该3种检测方法的鉴定效果。方法分别利用基于MALDI-TOF-MS的蛋白指纹图谱方法、双重荧光定量PCR方法和16S rRNA基因序列分析方法对5株鼻疽伯克霍尔... 目的用3种检测方法对同源性较高的鼻疽伯克霍尔德菌和类鼻疽伯克霍尔德菌进行鉴定,比较该3种检测方法的鉴定效果。方法分别利用基于MALDI-TOF-MS的蛋白指纹图谱方法、双重荧光定量PCR方法和16S rRNA基因序列分析方法对5株鼻疽伯克霍尔德菌和5株类鼻疽伯克霍尔德菌进行鉴定,综合判断鉴定结果,并与传统的形态学和生化鉴定结果比较,寻找更适合于该两种菌的鉴定方法。结果在10株受试菌株中,2株排除是鼻疽伯克霍尔德菌和类鼻疽伯克霍尔德菌的可能,剩余8株之中,MALDI-TOF-MS方法正确鉴定了6株,双重荧光定量PCR方法正确鉴定了8株,16S rRNA基因序列分析方法正确鉴定4株。结论 MALDI-TOF-MS的蛋白指纹图谱方法和双重荧光定量PCR方法对鼻疽伯克霍尔德菌和类鼻疽伯克霍尔德菌具有很好的鉴定能力,16S rRNA基因序列分析方法不适合用于该2种菌的鉴定。 展开更多
关键词 鼻疽伯克霍尔德菌 类鼻疽伯克霍尔德菌 MALDI-TOF-MS FQ-PCR 16S RRNA基因序列分析
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海南地区类鼻疽伯克霍尔德菌的药物敏感性分析 被引量:21
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作者 谭云芳 黄增光 +2 位作者 吴多荣 崔健 卓超 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2017年第5期401-407,共7页
目的探讨海南地区类鼻疽伯克霍尔德菌(BP)对常用抗生素的敏感性。方法以2008年1月—2013年3月在海南地区患者中分离的101株非重复类鼻疽伯克霍尔德菌作为研究对象,采用E-test法对目前国际上常用于治疗类鼻疽的抗生素进行药物敏感试验分... 目的探讨海南地区类鼻疽伯克霍尔德菌(BP)对常用抗生素的敏感性。方法以2008年1月—2013年3月在海南地区患者中分离的101株非重复类鼻疽伯克霍尔德菌作为研究对象,采用E-test法对目前国际上常用于治疗类鼻疽的抗生素进行药物敏感试验分析。结果本实验收集的101株类鼻疽菌中主要是以败血症为主,共有60人(59.4%),其次是肺部感染22人(21.8%),伤口及皮肤软组织感染有17人(16.8%),尿路感染2人(2.0%),受试者总死亡率为17.8%(18/101),其中72.2%(13/18)的死亡患者见于败血症患者。体外药敏试验结果显示,本次分离的所有类鼻疽对美罗培南、亚胺培南、左氧氟沙星、头孢他啶和阿莫西林/克拉维酸均显示良好的敏感性,敏感率分别为100%、100%、94.4%、92.1%和90.1%。对四环素和复方磺胺甲噁唑的敏感率分别为85.1%和84.2%。结论本研究和其他地区的报道都证实了类鼻疽伯克霍尔德菌对目前国际上常用于治疗该疾病的抗生素呈现良好的敏感性,其中以亚胺培南和美罗培南的敏感性最好,可作为治疗的首选。 展开更多
关键词 类鼻疽伯克霍尔德菌 药敏试验 抗生素
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156株洋葱伯克霍尔德菌的临床分布及耐药性分析 被引量:24
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作者 刘义刚 陶传敏 +4 位作者 陈文昭 陈慧莉 康梅 陈知行 范红 《中国感染与化疗杂志》 CAS 2008年第1期53-55,共3页
目的了解2003--2006年我院临床分离的洋葱伯克霍尔德菌的标本来源、临床分布和耐药性。方法用MicroScanWalkAway-4-0全自动微生物鉴定和药敏系统对我院临床分离的洋葱伯克霍尔德菌进行鉴定和药敏试验,并分析结果。结果20032006年共分离... 目的了解2003--2006年我院临床分离的洋葱伯克霍尔德菌的标本来源、临床分布和耐药性。方法用MicroScanWalkAway-4-0全自动微生物鉴定和药敏系统对我院临床分离的洋葱伯克霍尔德菌进行鉴定和药敏试验,并分析结果。结果20032006年共分离出156株洋葱伯克霍尔德菌,痰标本中分离菌株数占84.0%(131/156),血液中占5.1%(8/156)。药敏试验结果显示,多数测试的抗菌药物耐药率均大于50%;耐药率小于50%有哌拉西林他唑巴坦(4.8%~21.4%)、复方磺胺甲嗯唑(5.6%~23.8%)和头孢他啶(17.2%~40.0%)。结论洋葱伯克霍尔德菌对多数抗菌药物具有较高的耐药性,临床抗感染治疗应以分离菌株的体外抗菌药物敏感性为依据。 展开更多
关键词 洋葱伯克霍尔德菌 耐药性 抗生素
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洋葱伯克霍尔德菌医院感染的分布及耐药性分析 被引量:12
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作者 石娜 徐卫 +4 位作者 舒雪芹 周铁丽 徐莉珠 廖洪菊 金嵘 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第6期369-370,共2页
目的了解我院洋葱伯克霍尔德菌医院感染的分布及耐药趋势,为临床治疗及医院感染的控制提供参考.方法收集我院1999年1月~2003年12月洋葱伯克霍尔德菌医院感染共63例,采用全自动微生物鉴定仪进行细菌鉴定及药敏试验.结果洋葱伯克霍尔德... 目的了解我院洋葱伯克霍尔德菌医院感染的分布及耐药趋势,为临床治疗及医院感染的控制提供参考.方法收集我院1999年1月~2003年12月洋葱伯克霍尔德菌医院感染共63例,采用全自动微生物鉴定仪进行细菌鉴定及药敏试验.结果洋葱伯克霍尔德菌对多种抗菌药物耐药,对环丙沙星、头孢他啶、头孢噻肟、磺胺甲噁唑/甲氧苄啶的耐药率较低,分别为4.8%、10.2%、15.3%、18.2%.结论洋葱伯克霍尔德菌是一种高度天然耐药的细菌,治疗上应根据药敏结果选用抗菌药物. 展开更多
关键词 洋葱伯克霍尔德菌 医院感染 耐药性
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特异引物PCR鉴定类鼻疽伯克霍尔德菌方法的建立和优化 被引量:9
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作者 杨小敏 方瑶 +3 位作者 顾江 陈海 王海光 毛旭虎 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第14期1427-1431,共5页
目的以16S rRNA编码序列为靶基因,建立特异引物PCR鉴定类鼻疽伯克霍尔德菌方法并优化。方法以类鼻疽伯克霍尔德菌标准菌株K96243的16S rRNA编码序列为靶序列,通过Primer Premier 5软件搜索特异的引物,以该菌为模板,优化特异引物PCR的退... 目的以16S rRNA编码序列为靶基因,建立特异引物PCR鉴定类鼻疽伯克霍尔德菌方法并优化。方法以类鼻疽伯克霍尔德菌标准菌株K96243的16S rRNA编码序列为靶序列,通过Primer Premier 5软件搜索特异的引物,以该菌为模板,优化特异引物PCR的退火温度、退火时间和反应循环数等条件。得到最优PCR反应条件后,将该方法用于检测临床分离的类鼻疽伯克霍尔德菌菌株和常见细菌感染病原体(大肠杆菌、痢疾志贺菌、伤寒沙门菌、幽门螺旋杆菌、金黄色葡萄球菌、甲型链球菌和乙型链球菌),评价该方法的有效性和特异性。结果共设计3对引物,分别扩增16S rRNA编码序列283~672、760~1 061、771~1 193片段,优化后PCR反应条件为:94℃预变性4 min,94℃变性40 s,54.5℃退火20 s,72℃延伸40 s,24个循环,最后延伸1 min;特异性分析发现此方法能将类鼻疽伯克霍尔德菌与其他常见感染病原菌进行有效地鉴别诊断。结论成功建立并优化一种快速鉴定类鼻疽伯克霍尔德菌的方法,通过此方法能有效的从单个菌落中和基因组水平鉴定临床分离的8株类鼻疽伯克霍尔德菌。 展开更多
关键词 类鼻疽伯克霍尔德菌 16SRRNA基因 特异引物PCR
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14株伯克霍尔德菌的鉴定分析 被引量:13
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作者 王似锦 余萌 +1 位作者 胡昌勤 马仕洪 《中国抗生素杂志》 CAS CSCD 2019年第10期1214-1219,共6页
目的对从菌种保藏中心获得以及样品分离的14株伯克霍尔德菌进行鉴定分析,为该菌的鉴定和溯源分析提供参考。方法分别用生理生化(API20NE和Biolog碳源分析系统)、基因型(自动化核糖体分型、16SrDNA和recA序列分析)的方法对11株标准菌株和... 目的对从菌种保藏中心获得以及样品分离的14株伯克霍尔德菌进行鉴定分析,为该菌的鉴定和溯源分析提供参考。方法分别用生理生化(API20NE和Biolog碳源分析系统)、基因型(自动化核糖体分型、16SrDNA和recA序列分析)的方法对11株标准菌株和3株未知菌进行了鉴定,并对结果进行了分析比较。结果生理生化的方法能够鉴定到属的水平,Biolog能够区分BCC与非BCC类群微生物;16SrDNA序列分析能够鉴定到属水平,对于非BCC的部分菌可以鉴定到种水平,并且能够将BCC正确分类;recA序列分析能够将包含BCC的部分菌正确鉴定到种水平;Riboprinter技术能够鉴定到属水平,但是该技术能够对菌进行溯源分析。结论在进行该菌的鉴定时,可以参考中国药典2015年版四部9204微生物鉴定技术指导原则的要求,根据自身的需求、技术能力以及能够承担的成本,选择适宜的鉴定方法和技术,依据多相鉴定原则进行鉴定分析,第一步判断是否属于伯克霍尔德菌属,第二判断是否属于BCC,第三尽可能准确鉴定到种水平,有必要的情况下进行溯源分析以确认污染来源。 展开更多
关键词 洋葱伯克霍尔德菌 recA序列分析 核糖体分型 鉴定 溯源分析
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重症监护病房患者洋葱伯克霍尔德菌感染临床特点及耐药性 被引量:7
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作者 南玲 刘丁 +5 位作者 王豪 陈萍 李茂圆 黄庆宁 方清永 成瑶 《中国感染控制杂志》 CAS 北大核心 2015年第11期772-775,共4页
目的:了解重症监护病房(ICU)洋葱伯克霍尔德菌(BC)感染患者标本来源、临床特点及菌株耐药性,为指导临床合理用药提供依据。方法回顾性分析2011—2014年入住某院 ICU 发生 BC 感染患者的临床资料,并对菌株耐药性进行分析。结果共... 目的:了解重症监护病房(ICU)洋葱伯克霍尔德菌(BC)感染患者标本来源、临床特点及菌株耐药性,为指导临床合理用药提供依据。方法回顾性分析2011—2014年入住某院 ICU 发生 BC 感染患者的临床资料,并对菌株耐药性进行分析。结果共分离 BC 267株,主要标本来源为痰(80.15%,214株),血(14.23%,38株),尿(3.37%,9株)。2011—2014年药敏试验结果显示,BC 具有多重耐药性,对临床常用的多种抗菌药物因具有天然耐药性,如氨苄西林、头孢唑林、氨苄西林/舒巴坦、呋喃妥因、头孢呋辛耐药率均为100%;对头孢他啶、左氧氟沙星耐药率分别为4.12%,3.00%;对复方磺胺甲口恶唑耐药率呈升高趋势(χ2=5.885,P =0.015)。结论 ICU 检出 BC 逐年增多,耐药情况严重,应加强医院感染防控管理与目标性监测,根据药敏试验结果合理选择抗菌药物,减低细菌耐药压力。 展开更多
关键词 重症监护病房 洋葱伯克霍尔德菌 临床特点 抗药性 微生物 合理用药
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院内下呼吸道感染洋葱伯克霍尔德菌的耐药性分析 被引量:8
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作者 石娜 徐卫 +3 位作者 薛利霞 舒雪芹 温鸿 陈永平 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第6期972-973,共2页
目的:了解院内洋葱伯克霍尔德菌下呼吸道感染的危险因素和耐药情况,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法:收集2004年1月至2006年6月院内洋葱伯克霍尔德菌下呼吸道感染139例,菌株采用全自动微生物鉴定仪进行细菌鉴定及药敏试验。结果:... 目的:了解院内洋葱伯克霍尔德菌下呼吸道感染的危险因素和耐药情况,为临床合理使用抗菌药物提供依据。方法:收集2004年1月至2006年6月院内洋葱伯克霍尔德菌下呼吸道感染139例,菌株采用全自动微生物鉴定仪进行细菌鉴定及药敏试验。结果:洋葱伯克霍尔德菌对多种抗菌药物耐药,仅复方新诺明、头孢吡肟、哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦、头孢他啶、美罗培南的耐药率较低,分别为5.8%、15.4%、16.5%、18.4%、24.5%、27.0%。结论:院内下呼吸道感染的洋葱伯克霍尔德菌高度耐药,治疗上应根据药敏选用抗菌药物。 展开更多
关键词 交叉感染 抗药性 洋葱伯克霍尔德菌 微生物
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重症监护室洋葱伯克霍尔德菌医院肺部感染及耐药性分析 被引量:17
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作者 袁小玲 高绍衍 +2 位作者 黄宇筠 区秀燕 缪炯矞 《中国抗感染化疗杂志》 2005年第2期102-105,共4页
目的调查重症监护室(ICU)洋葱伯克霍尔德菌医院肺部感染情况及病原菌耐药特点,为其防治提供依据.方法对2002年11月-2004年8月出院患者在ICU内洋葱伯克霍尔德菌医院肺部感染病例进行回顾性分析,用微量稀释法测定18种抗菌药物对洋葱伯克... 目的调查重症监护室(ICU)洋葱伯克霍尔德菌医院肺部感染情况及病原菌耐药特点,为其防治提供依据.方法对2002年11月-2004年8月出院患者在ICU内洋葱伯克霍尔德菌医院肺部感染病例进行回顾性分析,用微量稀释法测定18种抗菌药物对洋葱伯克霍尔德菌的MIC.结果37例洋葱伯克霍尔德菌医院肺部感染占同期医院肺部感染病例的3.3%.多发生于老年人,平均(64±10)岁,均有2~5种原发病或伴随疾病,所有患者均使用过抗菌药物,32例(86.5%)接受人工气道机械通气治疗,28例(75.7%)接受过纤维支气管镜(纤支镜)诊断及治疗性操作,31例(83.8%)入住ICU时间>2周,18种抗菌药物药敏试验结果显示哌拉西林-三唑巴坦、美罗培南和复方磺胺甲噁唑的体外活性最高,敏感率均为100.0%,其次为头孢他啶、头孢唑肟,敏感率分别是78.4%和61.1%,其余均<30%.结论洋葱伯克霍尔德菌具有多重耐药性,且往往与多种医院肺部感染菌并存,ICU洋葱伯克霍尔德菌医院肺部感染应引起足够重视,特别是对接受呼吸道侵袭性操作的患者,应重视对建立人工气道后早期病原学检查、呼吸管路和纤支镜的消毒管理及病原菌耐药性监测,并根据药敏试验结果选用如哌拉西林-三唑巴坦、美罗培南和复方磺胺甲噁唑、头孢他啶和头孢唑肟等敏感抗菌药物,不宜选用亚胺培南、氨基苷类及其他β内酰胺酶类抗菌药物. 展开更多
关键词 洋葱伯克霍尔德菌 医院肺部感染 重症监护室 耐药性
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海南省两所医院洋葱伯克霍尔德菌感染临床特点及耐药性 被引量:7
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作者 董素芳 丁悦雯 +2 位作者 符生苗 邬强 夏乾峰 《中国感染控制杂志》 CAS 北大核心 2018年第7期581-584,共4页
目的探讨海南省两所医院洋葱伯克霍尔德菌(Burkholderia cepacia,BC)的感染特点及耐药性,并比较其耐药性的差异。方法回顾性分析2012年1月—2016年12月该两所医院送检标本中分离出BC的59例感染住院患者病例,分析其感染的基本特征、药敏... 目的探讨海南省两所医院洋葱伯克霍尔德菌(Burkholderia cepacia,BC)的感染特点及耐药性,并比较其耐药性的差异。方法回顾性分析2012年1月—2016年12月该两所医院送检标本中分离出BC的59例感染住院患者病例,分析其感染的基本特征、药敏结果及菌株耐药性差异。结果 BC在痰(55.94%)和重症监护病房(18.65%)的检出率最高。两所医院BC感染患者均以心血管系统疾病为基础疾病的患者最多,分别为11例和13例;其中一所医院的BC对头孢他啶、左氧氟沙星、复方磺胺甲口恶唑的敏感率较高,均>90%,而另一所医院的BC除对左氧氟沙星(耐药率34.62%,中介率15.38%)外的抗菌药物耐药率>50%,两所医院的BC对头孢他啶、左氧氟沙星、复方磺胺甲口恶唑的敏感率比较差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论 BC感染患者多数伴有基础疾病;不同医院的BC对抗菌药物耐药性不同。 展开更多
关键词 洋葱伯克霍尔德菌 临床特点 药物 耐药性 抗药性 微生物
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98株洋葱伯克霍尔德菌临床分布及耐药性 被引量:13
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作者 付玉华 朱文秀 +1 位作者 杜希利 杜春辉 《中国感染控制杂志》 CAS 北大核心 2017年第3期215-217,共3页
目的分析临床分离的洋葱伯克霍尔德菌的耐药情况,为临床合理用药提供依据。方法回顾性分析2013年1月—2014年12月某院临床各科室送检标本中分离的洋葱伯克霍尔德菌,对其药敏结果进行统计分析。结果 2013年1月—2014年12月共检出洋葱伯... 目的分析临床分离的洋葱伯克霍尔德菌的耐药情况,为临床合理用药提供依据。方法回顾性分析2013年1月—2014年12月某院临床各科室送检标本中分离的洋葱伯克霍尔德菌,对其药敏结果进行统计分析。结果 2013年1月—2014年12月共检出洋葱伯克霍尔德菌98株,标本类型分布主要为痰(86株,占87.76%),科室分布以重症监护病房(ICU)检出最多(46株,占46.94%),洋葱伯克霍尔德菌对替卡西林/克拉维酸的耐药率最高,为73.47%,对哌拉西林/他唑巴坦和头孢哌酮/舒巴坦的耐药率均为16.33%,对米诺环素的耐药率最低,为5.10%。结论洋葱伯克霍尔德菌引起的感染耐药性高,应加强医院感染的预防与控制,及早进行病原学检查,治疗上应结合药敏结果合理用药。 展开更多
关键词 洋葱伯克霍尔德菌 临床感染 药敏试验 抗药性 微生物 耐药性
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一种快速定量检测类鼻疽伯克霍尔德菌的方法建立及评价 被引量:6
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作者 傅琼瑶 陈春羽 +5 位作者 邬娇 邬强 覃西 钱士匀 易国辉 夏乾峰 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第17期1734-1738,共5页
目的采用实时荧光定量PCR技术,建立并评价一种快速、准确、特异检测类鼻疽伯克霍尔德菌的定量检测方法。方法以类鼻疽伯克霍尔德菌Ⅲ型分泌系统保守基因序列设计引物和探针,构建重组质粒作为DNA标准品,优化荧光定量PCR体系,同时进行方... 目的采用实时荧光定量PCR技术,建立并评价一种快速、准确、特异检测类鼻疽伯克霍尔德菌的定量检测方法。方法以类鼻疽伯克霍尔德菌Ⅲ型分泌系统保守基因序列设计引物和探针,构建重组质粒作为DNA标准品,优化荧光定量PCR体系,同时进行方法学评价,并与以16S rRNA基因为靶序列的荧光定量PCR方法进行对比。结果建立了检测类鼻疽伯克霍尔德菌的荧光定量PCR方法,其线性范围为1×101~1×1010拷贝/μL;其灵敏度为10拷贝/μL;批内变异系数(CV)为1.43%~4.6%;对用24份模拟血液标本和67份稻田土壤标本分别采用本法和对照方法进行检测,本菌配制的模拟标本采用两种方法检测均为阳性,且能准确定量,阳性率为100%,而含有其他常见感染细菌的标本检测结果均为阴性;土壤标本中有12份标本采用本法和与细菌培养法均为阳性,但是对照方法未能检测出其中两份低浓度的土壤标本。结论建立的类鼻疽伯克霍尔德菌定量PCR方法具有快速、准确、灵敏度高等特点,可作为环境中该菌检测和疫区类鼻疽病诊断的有效工具。 展开更多
关键词 类鼻疽伯克霍尔德菌 实时荧光定量PCR 定量
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