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抗伪狂犬病毒Ea株单克隆抗体的制备及鉴定
被引量：
4
1
作者
汪招雄
何启盖
+2 位作者
黄红亮
刘正飞
陈焕春
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第3期222-225,共4页
将伪狂犬病毒Ea株纯化后免疫雌性Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/O的骨髓瘤细胞融合,用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)进行筛选,获得了2株抗PRV的单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为3G7E3和4A6F5,其细胞培养上清及小鼠腹水效价(ELISA)分别为1...
将伪狂犬病毒Ea株纯化后免疫雌性Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/O的骨髓瘤细胞融合,用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)进行筛选,获得了2株抗PRV的单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为3G7E3和4A6F5,其细胞培养上清及小鼠腹水效价(ELISA)分别为1:212、1:212及1:100×212、1:100×212。特异性试验和免疫荧光结果显示,3G7E3和4A6F5仅与PRV反应,而与PPV、PRRSV、JEV和HCV等病毒不发生交叉反应;用单抗建立的夹心ELISA试验能检出伪狂犬病毒。表明本研究所获得的2株单抗是PRV特异性的。这2株分泌抗PRV单抗的杂交瘤细胞株的获得为进一步建立准确快速的抗原检测方法奠定了基础。
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关键词
伪狂犬病毒ea株
单克隆抗体
间接免疫荧光试验
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职称材料
检测伪狂犬病病毒双抗体夹心间接ELISA方法的建立与应用
被引量：
21
2
作者
汪招雄
何启盖
+3 位作者
刘丽娜
刘正飞
黄红亮
陈焕春
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期220-225,共6页
以猪伪狂犬病病毒(PrV)Ea株特异性单克隆抗体576株为捕获抗体,纯化的抗PrVIgG为检测抗体,建立了检测PrV抗原的双抗体夹心ELISA方法。最佳反应条件为,单克隆抗体576株的包被浓度为12.2μg/mL,IgG的工作浓度为16.0μg/mL,对PrV的检测灵敏...
以猪伪狂犬病病毒(PrV)Ea株特异性单克隆抗体576株为捕获抗体,纯化的抗PrVIgG为检测抗体,建立了检测PrV抗原的双抗体夹心ELISA方法。最佳反应条件为,单克隆抗体576株的包被浓度为12.2μg/mL,IgG的工作浓度为16.0μg/mL,对PrV的检测灵敏度达15.6ng(0.156μg/mL),与乙型脑炎病毒(JEV)、猪瘟病毒(HCV)、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)和猪流感病毒(SIV)等无交叉反应。批间和批内变异系数较小,分别为6.39%和4.1%。应用本方法对人工感染PrV的40日龄仔猪组织进行检测,肺和脑PrV抗原检出率最高,其次是脾、心、肝和肌肉。应用该方法和PrV对159份临床样本进行平行检测,发现二者的符合率可达到77.4%,比PCR敏感。实验结果表明:双抗体夹心间接ELISA方法具有敏感性高、特异性强和重复性好的特点,可广泛应用于动物组织中PrV的检测。
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关键词
双抗体夹心间接ELISA
单克隆抗体
猪
伪狂犬病毒ea株
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职称材料
题名
抗伪狂犬病毒Ea株单克隆抗体的制备及鉴定
被引量：
4
1
作者
汪招雄
何启盖
黄红亮
刘正飞
陈焕春
机构
华中农业大学动物医学院预防兽医学湖北省重点实验室农业微生物学国家重点实验室
出处
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005年第3期222-225,共4页
基金
国家"十.五"重大科技攻关专项-食品安全关键技术项目(2002BA514A-18)资助
文摘
将伪狂犬病毒Ea株纯化后免疫雌性Balb/c小鼠,取其脾细胞与SP2/O的骨髓瘤细胞融合,用间接酶联免疫吸附试验(ELISA)进行筛选,获得了2株抗PRV的单克隆抗体的杂交瘤细胞,分别命名为3G7E3和4A6F5,其细胞培养上清及小鼠腹水效价(ELISA)分别为1:212、1:212及1:100×212、1:100×212。特异性试验和免疫荧光结果显示,3G7E3和4A6F5仅与PRV反应,而与PPV、PRRSV、JEV和HCV等病毒不发生交叉反应;用单抗建立的夹心ELISA试验能检出伪狂犬病毒。表明本研究所获得的2株单抗是PRV特异性的。这2株分泌抗PRV单抗的杂交瘤细胞株的获得为进一步建立准确快速的抗原检测方法奠定了基础。
关键词
伪狂犬病毒ea株
单克隆抗体
间接免疫荧光试验
Keywords
PRV
ea
strain
monoclonal antibodies (MAbs)
indirect immunofluorescence assay (IFA)
分类号
S852.65 [农业科学—基础兽医学]
Q813 [生物学—生物工程]
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职称材料
题名
检测伪狂犬病病毒双抗体夹心间接ELISA方法的建立与应用
被引量：
21
2
作者
汪招雄
何启盖
刘丽娜
刘正飞
黄红亮
陈焕春
机构
华中农业大学动物医学院预防兽医学湖北省重点实验室农业微生物学国家重点实验室
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第2期220-225,共6页
基金
国家"十五"重大科技攻关专项-食品安全关键技术项目(2002BA514A-18)资助
文摘
以猪伪狂犬病病毒(PrV)Ea株特异性单克隆抗体576株为捕获抗体,纯化的抗PrVIgG为检测抗体,建立了检测PrV抗原的双抗体夹心ELISA方法。最佳反应条件为,单克隆抗体576株的包被浓度为12.2μg/mL,IgG的工作浓度为16.0μg/mL,对PrV的检测灵敏度达15.6ng(0.156μg/mL),与乙型脑炎病毒(JEV)、猪瘟病毒(HCV)、猪繁殖与呼吸障碍综合征病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)和猪流感病毒(SIV)等无交叉反应。批间和批内变异系数较小,分别为6.39%和4.1%。应用本方法对人工感染PrV的40日龄仔猪组织进行检测,肺和脑PrV抗原检出率最高,其次是脾、心、肝和肌肉。应用该方法和PrV对159份临床样本进行平行检测,发现二者的符合率可达到77.4%,比PCR敏感。实验结果表明:双抗体夹心间接ELISA方法具有敏感性高、特异性强和重复性好的特点,可广泛应用于动物组织中PrV的检测。
关键词
双抗体夹心间接ELISA
单克隆抗体
猪
伪狂犬病毒ea株
Keywords
double-antibody sandwich indirect ELISA
monoclonal antibody
pseudorabies virus
ea
strain
分类号
S852.655 [农业科学—基础兽医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
抗伪狂犬病毒Ea株单克隆抗体的制备及鉴定
汪招雄
何启盖
黄红亮
刘正飞
陈焕春
《华中农业大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2005
4
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
检测伪狂犬病病毒双抗体夹心间接ELISA方法的建立与应用
汪招雄
何启盖
刘丽娜
刘正飞
黄红亮
陈焕春
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
21
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