猪伪狂犬病毒变异株HN1201 gB蛋白单克隆抗体的制备与鉴定 被引量：3

1

作者 程璇 付朋飞 +3 位作者 杜永坤 褚贝贝 杨国宇 王江 《河南农业科学》 北大核心 2020年第10期137-142,共6页

为获得用于伪狂犬病毒(PRV)临床检测和实验室研究所需的PRV gB特异性抗体,以PRV变异病毒株PRV HN1201免疫小鼠,取免疫后小鼠脾脏细胞与SP/20细胞融合,制备抗PRV gB蛋白的单克隆抗体。经免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)和间接免疫荧光... 为获得用于伪狂犬病毒(PRV)临床检测和实验室研究所需的PRV gB特异性抗体,以PRV变异病毒株PRV HN1201免疫小鼠,取免疫后小鼠脾脏细胞与SP/20细胞融合,制备抗PRV gB蛋白的单克隆抗体。经免疫过氧化物酶单层细胞试验(IPMA)和间接免疫荧光试验(IFA)筛选出1株稳定分泌PRV gB蛋白抗体的单克隆细胞系,经鉴定该细胞系所分泌抗体为IgG1亚型,腹水纯化抗体的IFA效价为2^-11;细胞培养上清和腹水纯化抗体用于Western blot的最佳稀释比分别为1∶50和1∶5000;杂交瘤细胞诱导小鼠腹水的中和效价为1∶25。IPMA、IFA及Western blot试验结果显示,制备的单克隆抗体能特异性识别PRV gB蛋白。 展开更多

关键词 伪狂犬病毒变异株hn1201 gB蛋白 单克隆抗体 Western blot 免疫过氧化物酶单层细胞试验 间接免疫荧光试验

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天津地区猪伪狂犬病毒变异株的分离鉴定及主要相关毒力基因分析 被引量：3

2

作者 程宁 杨程 +7 位作者 李欣蕾 孙久英 王凯月 韩俊平 李文军 王欢欢 邵笑 孙英峰 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第9期902-908,共7页

为了鉴定猪伪狂犬病病毒(PRV)流行株及其携带毒力基因的变异情况,本研究采集1份天津地区某猪场免疫过Bartha-K61疫苗但患严重神经症状的仔猪脑组织样品,采用荧光定量PCR(q PCR)检测PRV g E基因,并将检测为PRV的阳性样品接种PK-15细胞分... 为了鉴定猪伪狂犬病病毒(PRV)流行株及其携带毒力基因的变异情况,本研究采集1份天津地区某猪场免疫过Bartha-K61疫苗但患严重神经症状的仔猪脑组织样品,采用荧光定量PCR(q PCR)检测PRV g E基因,并将检测为PRV的阳性样品接种PK-15细胞分离培养,并传3代后采用Reed-Muench法测定分离病毒的TCID_(50),采用q PCR和间接免疫荧光试验(IFA)进一步鉴定分离病毒。结果显示,经q PCR检测仔猪脑组织样品出现扩增曲线,阳性样品分离培养后测得病毒滴度为10^(7.57)TCID_(50)/m L,分离病毒的q PCR结果出现扩增曲线,且其感染的细胞出现绿色荧光。表明分离到一株PRV,命名为TJbd2023株。采用PCR分别扩增TJbd2023株主要相关毒力基因g B、g C、g D、g E、g G、g I和TK,采用Meg Align软件分析分离病毒与Gen Bank登录的PRV参考株上述各毒力相关基因序列的同源性,通过Neighbor-Joining(NJ)法构建上述各毒力相关基因的进化树,采用Meg Align软件分析各毒力基因编码氨基酸主要位点的变异情况。结果显示,分别扩增到TJbd2023株的各相应毒力基因;各毒力基因的同源性分析结果显示,TJbd2023株与国内2012年后流行变异株的相似性高达98.4%~100.0%,与疫苗株(Bartha-K61)的相似性为89.6%~93.2%。进化树结果显示,这7个毒力基因均与国内GD0304株(MH582511)、BJYT株(KC981239)和DL1408株(KU360259)等PRV变异株位于同一分支,与疫苗株(Bartha-K61)未在同一分支。g B、g C、g E氨基酸序列除出现PRV变异株相同的突变位点外,g B还出现R^(223)H和E^(836)K的突变、g D出现R^(320)S和g E出现T^(242)A的突变。将TJbd2023株分别以5个剂量(10^(2.57)TCID_(50)/m L~10^(6.57)TCID_(50)/m L)感染6周龄KM小鼠,通过小鼠的临床症状、死亡率、死亡小鼠各组织的病理变化评估该病毒的致病性。结果显示,在5 d的观察期内,感染组小鼠陆续出现奇痒及神经症状,各实验组小鼠的死亡率分别为60%、80%、100%及100%,对照组小鼠均健活。死亡小鼠各组织病变观察可见肺组织浸润性出血、肝组织血管充血及淋巴细胞增多、脑胶质细胞增多及血管周围炎性细胞聚集形成血管套等病变,对照组小鼠各组织均无明显病变。上述结果表明,本研究在天津地区分离到一株PRV变异株,其毒力因子发生了独特的氨基酸位点突变,对小鼠的致病性较强,该结果丰富了PRV的致病性及其毒力因子变异的特征,为PR的综合防控提供参考。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病毒 变异株 分离鉴定 遗传进化分析 致病性

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猪伪狂犬病毒变异毒株的特性及其疫苗的研究现状 被引量：13

3

作者 李国新 童武 +1 位作者 郑浩 童光志 《猪业科学》 2016年第1期52-53,共2页

猪伪狂犬病是由伪狂犬病毒引起的高死亡率的急性传染病。该病在我国发生较为严重，是严重危害我国养猪业的疫病之一。我国于20世纪70年代从匈牙利引进了伪狂犬疫苗Bartha-k61株，白20世纪90年代以来国内规模化猪场普遍使用该基因缺失疫... 猪伪狂犬病是由伪狂犬病毒引起的高死亡率的急性传染病。该病在我国发生较为严重，是严重危害我国养猪业的疫病之一。我国于20世纪70年代从匈牙利引进了伪狂犬疫苗Bartha-k61株，白20世纪90年代以来国内规模化猪场普遍使用该基因缺失疫苗，使猪伪狂犬病得到了很好的控制。但是，自2011年以来，一种由伪狂犬病毒变异毒株引起的猪伪狂犬病在我国暴发， 展开更多

关键词 猪伪狂犬病毒 变异毒株 狂犬疫苗 特性 基因缺失疫苗 急性传染病 规模化猪场 死亡率

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猪伪狂犬病毒变异株AH02LA单因子发病模型的建立 被引量：1

4

作者 毛爱民 范锋 +3 位作者 王继春 冯志新 华利忠 刘剑锋 《中国动物检疫》 CAS 2017年第4期86-89,共4页

2011年以来,猪伪狂犬病毒(PRV)变异株在我国多地区流行,造成了严重的经济损失。本研究以主要猪病病原为阴性的仔猪为基础,建立了PRV变异株AH02LA单因子发病模型,并研究了其主要病理学变化。研究发现PRV会引起仔猪非化脓性脑炎,这一病理... 2011年以来,猪伪狂犬病毒(PRV)变异株在我国多地区流行,造成了严重的经济损失。本研究以主要猪病病原为阴性的仔猪为基础,建立了PRV变异株AH02LA单因子发病模型,并研究了其主要病理学变化。研究发现PRV会引起仔猪非化脓性脑炎,这一病理变化将有助于猪伪狂犬病的临床快速准确诊断。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病毒 变异株 发病模型 病理学 猪

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猪伪狂犬病病毒新流行变异毒株的研究进展 被引量：44

5

作者 华利忠 刘剑锋 +2 位作者 冯志新 杨若松 邵国青 《江苏农业学报》 CSCD 北大核心 2017年第2期-,共5页

近30年内,猪伪狂犬活疫苗的应用对中国猪伪狂犬病的防控贡献巨大。2011年以来,中国许多免疫猪场相继暴发猪伪狂犬疫情,给养猪业造成了巨大的损失。研究显示最新流行的PRV毒株为变异株,部分商品化活疫苗不能对其提供完全的保护。本文详... 近30年内,猪伪狂犬活疫苗的应用对中国猪伪狂犬病的防控贡献巨大。2011年以来,中国许多免疫猪场相继暴发猪伪狂犬疫情,给养猪业造成了巨大的损失。研究显示最新流行的PRV毒株为变异株,部分商品化活疫苗不能对其提供完全的保护。本文详细介绍了2011年以来中国猪伪狂犬病的发病情况及其分子流行病学调查结果,分析了猪伪狂犬新变异株的分子生物学特性及其变异株来源,同时论述了针对PRV突变株新型疫苗的研究进展,最后对深入开展中国猪伪狂犬病控制与净化研究进行了展望。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病毒 变异株 分子生物学 疫苗

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伪狂犬病毒变异株HS01的分离鉴定及其对豚鼠的致病力研究 被引量：2

6

作者 昝晓慧 孙瑶 +8 位作者 王岩 马艳华 柴春霞 付存 王世荣 王镓磊 武有志 阴花 王炜 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第10期1040-1045,共6页

为了解内蒙古自治区伪狂犬病毒(PRV)的流行变异情况,本研究从内蒙古某猪场采集疑似患猪伪狂犬病(PR)的猪脑组织,处理后采用PRV gE基因特异性引物经PCR鉴定后将阳性样品分别接种MDBK细胞和Vero细胞,分别进行病毒的分离,对分离的病毒测定... 为了解内蒙古自治区伪狂犬病毒(PRV)的流行变异情况,本研究从内蒙古某猪场采集疑似患猪伪狂犬病(PR)的猪脑组织,处理后采用PRV gE基因特异性引物经PCR鉴定后将阳性样品分别接种MDBK细胞和Vero细胞,分别进行病毒的分离,对分离的病毒测定病毒含量(TCID_(50))。PCR结果显示,组织样品为PRV野毒感染。病料样品接种MDBK细胞和Vero细胞盲传4代后均产生明显的细胞病变,病毒含量为108.8 TCID_(50)/mL。表明分离到1株PRV,命名为HS01株。采用PCR分别扩增分离病毒的gE、gC和TK基因并进行同源性、遗传进化及主要氨基酸位点的变异分析。结果显示,HS01株gE、gC、TK基因序列与2011年后国内变异株相应基因的同源性分别为96.9%~99.7%、97.6%~99.6%和99.7%~100%;且他们的系统进化树结果显示,PRV HS01株与国内变异株属于同一分支,而与国内经典株遗传距离较远(gE、gC基因),或与部分国内经典株属于同一分支(TK基因),与同源性分析结果基本相符;HS01株gE基因在aa48和aa492各插入一个天冬氨酸,符合PRV变异株的特点。上述结果均表明,HS01为一株PRV变异株。将该株病毒经滴鼻接种豚鼠,进行致病力试验。结果显示接种12 h后豚鼠出现食欲不振、精神沉郁、瘙痒等临床症状,并于接种后66 h出现死亡。将感染组存活豚鼠迫杀后显示肺脏出血、充血,表明HS01株对豚鼠有致病性,并能致其死亡。本研究首次在内蒙古地区猪场分离到PRV变异株,并进行了豚鼠的致病力研究,为内蒙古自治区PRV新流行株遗传变异机制的研究及新型疫苗研发提供参考。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病毒 变异株 豚鼠 致病力 基因分析

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猪伪狂犬病毒Bartha株与变异株疫苗免疫后中和效价比较试验

7

作者 郭天成 杨彩娟 +1 位作者 刘苓钰 谢乐新 《广东畜牧兽医科技》 2017年第4期46-47,共2页

通当前由于伪狂犬病毒变异株在全国流行,引起人们对疫苗选择的关注,产生是否换用疫苗的不同看法。为了给生产提供疫苗选择的参考,本研究选用某进口猪伪狂犬病毒(PRV)Bartha株疫苗和某国产PRV变异株疫苗,分别免疫15头仔猪,经2次免疫后第... 通当前由于伪狂犬病毒变异株在全国流行,引起人们对疫苗选择的关注,产生是否换用疫苗的不同看法。为了给生产提供疫苗选择的参考,本研究选用某进口猪伪狂犬病毒(PRV)Bartha株疫苗和某国产PRV变异株疫苗,分别免疫15头仔猪,经2次免疫后第3周采血清,检测血清中和效价,并对结果进行统计分析。结果显示,变异株疫苗免疫后中和效价明显高于该进口Bartha株疫苗。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病毒 疫苗 Bartha株 变异株 中和抗体

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伪狂犬病病毒变异株gE蛋白单克隆抗体的制备与鉴定 被引量：2

8

作者 武吉强 徐晶晶 +6 位作者 童武 王涛 叶超 郑浩 单同领 童光志 李国新 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2017年第3期23-27,共5页

为制备伪狂犬病病毒变异株gE蛋白的单克隆抗体,PCR扩增伪狂犬病病毒gE蛋白主要抗原表位区的基因片段,并将其克隆至原核表达载体p Cold-TF。经1 mmol/L IPTG低温诱导,表达了约90 k Da的gE融合蛋白。融合蛋白用镍离子金属亲和层析柱纯化后... 为制备伪狂犬病病毒变异株gE蛋白的单克隆抗体,PCR扩增伪狂犬病病毒gE蛋白主要抗原表位区的基因片段,并将其克隆至原核表达载体p Cold-TF。经1 mmol/L IPTG低温诱导,表达了约90 k Da的gE融合蛋白。融合蛋白用镍离子金属亲和层析柱纯化后,免疫6周龄BALB/c雌性小鼠,经细胞融合和筛选,获得了2株稳定分泌抗gE蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞(5B2和6E6)。间接免疫荧光试验(indirect immunofl uorescence assay,IFA)显示2株单克隆抗体均能与PRV变异株(JS-2012)反应,但与gE缺失的疫苗毒Bartha-K61株无反应。Western blot结果显示5B2和6E6与gE蛋白不反应,提示2株单克隆抗体针对的可能是gE蛋白的构象表位。本研究获得的gE蛋白单克隆抗体为伪狂犬病病毒变异株的鉴定与功能研究以及野毒株和疫苗株的鉴别诊断提供了良好的工具。 展开更多

关键词 伪狂犬病毒 变异株 gE蛋白 单克隆抗体

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应用Cre/loxp系统构建含有BAC序列的重组伪狂犬病毒 被引量：3

9

作者 王涛 童武 +8 位作者 叶超 于之清 梁超 李国新 高飞 单同领 于海 郑浩 童光志 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2017年第2期22-28,共7页

近年来我国出现伪狂犬病毒变异株,导致猪伪狂犬病重新爆发流行。为研究伪狂犬病毒变异株毒力增强与抗原变异的分子机制,需要建立该病毒的感染性克隆操作系统。本研究通过构建转移载体pTEGGF,利用同源重组将含有增强型绿色荧光蛋白(enhan... 近年来我国出现伪狂犬病毒变异株,导致猪伪狂犬病重新爆发流行。为研究伪狂犬病毒变异株毒力增强与抗原变异的分子机制,需要建立该病毒的感染性克隆操作系统。本研究通过构建转移载体pTEGGF,利用同源重组将含有增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)表达框及两翼各一个loxp位点,插入到伪狂犬病毒变异株PRV JS-2012 gG编码区下游,获得重组病毒rJS2012-gG/EGFP。将表达Cre重组酶的质粒pcDNA3.1-Cre转染BHK-21细胞,再感染rJS2012-gG/EGFP,筛选获得含有单一loxp位点的重组病毒rJS2012-gG/loxp。将rJS2012-gG/loxp基因组、含有EGFP标记基因的BAC载体p Belo BAC11-EGFP和pcDNA3.1-cre共转染BHK-21,获得含有BAC序列插入的重组病毒rJS2012-BAC。一步生长曲线与空斑试验显示,重组病毒rJS2012-BAC在体外生长略慢于亲本病毒。本研究成功构建了含有BAC载体的重组伪狂犬病毒,为进一步建立伪狂犬病毒变异株的感染性克隆操作系统,开展变异株的分子病原学研究打下良好基础。 展开更多

关键词 伪狂犬病毒变异株 细菌人工染色体 CRE/LOXP系统

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猪伪狂犬病病毒JSSQ2013株的分离鉴定及重要功能基因序列分析 被引量：7

10

作者 孙雅鑫 韩剑锋 荣先锋 《中国兽药杂志》 2020年第4期1-10,共10页

为了解江苏省猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)野毒株的特点,本研究从2013年采自江苏省宿迁市的疑似PRV感染病料中分离纯化了一株PRV病毒,对其进行了PCR和间接免疫荧光法(IFA)鉴定,并进一步在Vero细胞上测定该分离株的病毒滴度TC... 为了解江苏省猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)野毒株的特点,本研究从2013年采自江苏省宿迁市的疑似PRV感染病料中分离纯化了一株PRV病毒,对其进行了PCR和间接免疫荧光法(IFA)鉴定,并进一步在Vero细胞上测定该分离株的病毒滴度TCID50和一步生长曲线,扩增其gB、gC、gD和gE基因进行序列比对及分子遗传进化分析,并将该分离株分别接种新西兰白兔和15日龄仔猪研究其致病性。结果显示,该病毒为一株PRV,命名为PRV JSSQ2013株,纯化后的病毒滴度为10^7.8 TCID50/ml;生长曲线测定显示在感染20h后病毒滴度即达到最高,为10^8.6 TCID50/ml。与我国近几年分离的PRV变异株序列相比,PRV JSSQ2013株的gB、gC、gD和gE基因核苷酸序列同源性分别为99.5~99.6%、99.5~99.6%、99.5~99.6%和98.7~99.7%,氨基酸序列同源性分别为98.9~99.0%、99.5~99.7%、99.0~99.2%和98.1~99.3%,均高于其与经典毒株(Ea、Fa和SC株)和欧美毒株(Becker、Kaplan、Bartha、Kolchis和NIA3)的同源性;基于gB、gC、gD和gE基因的遗传进化树分析均显示PRV JSSQ2013株与国内近几年分离的PRV变异株属同一分支。该病毒接种新西兰白兔后均出现典型的PR症状,如厌食、兴奋、啃咬或用爪挠接种部位等典型症状,且在48h内全部死亡;接种仔猪后第1天开始出现典型的PR症状,第5天全部死亡。以上结果证实,从江苏省宿迁市采集的疑似PRV感染病料中分离到一株强毒力的PRV变异株。本研究为了解江苏PRV分子流行特征、丰富我国PRV分子流行病学资料及新型疫苗的研制奠定了基础。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病毒 变异毒株 分离鉴定 遗传进化分析 致病性

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Neuropilin-1与Furin:决定伪狂犬病毒毒力的关键宿主基因 被引量：1

11

作者 CHEN MENG WANG MENG-HANG SHEN XUE-GANG 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第10期1132-1132,共1页

猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)是危害养猪业的重要动物传染病之一。猪是伪狂犬病毒的天然宿主。近年来,越来越多的证据表明PRV可实现跨种间传播感染人,对人类健康构成潜在的威胁,尤其是在2011年以后猪伪狂犬病毒变异毒株的爆... 猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)是危害养猪业的重要动物传染病之一。猪是伪狂犬病毒的天然宿主。近年来,越来越多的证据表明PRV可实现跨种间传播感染人,对人类健康构成潜在的威胁,尤其是在2011年以后猪伪狂犬病毒变异毒株的爆发。PRV完成生命周期的复制不仅依赖于病毒自身编码的关键蛋白,也依赖于重要的宿主蛋白来完成。因此,寻找与PRV编码蛋白相互作用的重要宿主蛋白对阐明PRV的发病机制以及抗病毒治疗至关重要。PRV gB是最保守的囊膜糖蛋白,与人单纯疱疹病毒1(HSV-1)的gB蛋白有50%的氨基酸序列同源性。 展开更多

关键词 伪狂犬病毒 动物传染病 囊膜糖蛋白 猪伪狂犬病病毒 变异毒株 养猪业 PRV 种间传播

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猪伪狂犬病病毒HP-SY2022株的分离鉴定

12

作者 李敏 向军 +4 位作者 孔雪英 徐静 曾红梅 龚文波 邢刚 《中国兽药杂志》 2023年第6期17-22,共6页

为了解猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)野毒株的特点,对沈阳一养殖场疑似感染PRV的组织病料进行PCR鉴定、病毒分离和纯化、gD和gE基因序列测定及分析、动物回归实验。结果显示:分离株能在ST细胞中产生典型的细胞病变,且PCR显示... 为了解猪伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)野毒株的特点,对沈阳一养殖场疑似感染PRV的组织病料进行PCR鉴定、病毒分离和纯化、gD和gE基因序列测定及分析、动物回归实验。结果显示:分离株能在ST细胞中产生典型的细胞病变,且PCR显示为PRV阳性;通过gD、gE基因进行序列分析发现,分离株与2011年后分离的PRV变异株位于同一进化分支;氨基酸位点分析发现分离株与PRV变异株具有相同的变异模式。感染仔猪出现典型的伪狂犬病症状,且在试验期内仔猪全部发病(5/5),其中4头死亡(4/5)。本研究成功分离到一株PRV变异株,命名为HP-SY2022,为丰富我国PRV分子流行病学及后续的免疫防控提供了参考。 展开更多

关键词 伪狂犬病毒 变异株 分离鉴定 遗传序列分析

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一起猪伪狂犬和高致病性蓝耳病变异株的混合感染的诊断和治疗 被引量：4

13

作者 许宗丽 李纪春 《广西畜牧兽医》 2018年第1期17-18,共2页

伪狂犬病毒（Pseudorabies,PR）是一种以急性脑脊髓炎、发热以及奇痒（猪除外）等为主要临床症状的急性传染病,是由伪狂犬病毒（Pseudorabies virus,PRV）引起的,可危害多种家畜和野生动物[1,2]。

关键词 猪伪狂犬 混合感染 高致病性 变异株 蓝耳病 伪狂犬病毒 急性传染病 治疗

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一例猪伪狂犬变异株的诊治 被引量：1

14

作者 张文通 魏凤 +4 位作者 李峰 王金良 苗立中 刘吉山 沈志强 《猪业科学》 2016年第9期72-73,共2页

为对山东省某养猪场疑似猪伪狂犬病进行诊断,采用发病情况调查、临床症状、病理剖检、病原分离、PCR鉴定及血清中和试验诊断,确诊病原为猪伪狂犬病毒变异株。根据确诊结果,按照猪伪狂犬病治疗措施操作,猪场发病情况得到有效控制。

关键词 猪伪狂犬病毒 变异株 诊治 发病情况调查 病原分离 试验诊断 PCR鉴定 临床症状

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江山市猪伪狂犬病的流行现状与防控建议 被引量：1

15

作者 王国栋 毛海玲 汪志凌 《浙江畜牧兽医》 2019年第6期31-32,共2页

猪伪狂犬病(Pseudorabies,PR)是由伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)引起的高度传染性疫病[1]。我国通过广泛推广应用PRV gE基因缺失疫苗以及配套的鉴别诊断技术曾一度有效控制了PRV的流行,但自2011年以来,PRV变异毒株开始在全国猪场... 猪伪狂犬病(Pseudorabies,PR)是由伪狂犬病毒(Pseudorabies virus,PRV)引起的高度传染性疫病[1]。我国通过广泛推广应用PRV gE基因缺失疫苗以及配套的鉴别诊断技术曾一度有效控制了PRV的流行,但自2011年以来,PRV变异毒株开始在全国猪场陆续暴发流行,其抗原性发生了改变,毒力和致病性均显著增强,传统疫苗对其不能提供完全保护[2],业界甚至普遍认为PRV将成为很长一段时间内严重威胁我国养猪产业的主要疫病之一。江山市隶属于浙江省衢州市,凭借其地域优势,具有良好的生态环境资源和丰富的劳力资源,具备发展畜牧业的良好环境条件,尤其是该市养猪业历史悠久,一直是全国生猪调出大县[3]。近年来,PRV对江山市养猪业健康发展产生的威胁不容忽视,鉴于此,笔者结合自身多年基层临床工作经验对江山市当前PRV的流行现状进行了总结与分析,并阐述其综合防控措施,对当前江山市的猪场制定PRV有效防控措施具有重要的参考价值。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病 传染性疫病 伪狂犬病毒 养猪业 变异毒株 防控建议 主要疫病 生态环境资源

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猪伪狂犬病净化案例 被引量：1

16

作者 祖海涛 张长莹 王爱国 《猪业科学》 2017年第2期77-79,共3页

2011年以来我国的猪伪狂犬病（PR）发病率明显增加，多篇报道显示猪伪狂犬病毒（PRV）发生了变异，变异毒株致病力增强，同时市场上产生了很多对Bartha—K61毒株疫苗保护力质疑的声音。随着国家颁布《中长期动物疫病防治规划（2012—202... 2011年以来我国的猪伪狂犬病（PR）发病率明显增加，多篇报道显示猪伪狂犬病毒（PRV）发生了变异，变异毒株致病力增强，同时市场上产生了很多对Bartha—K61毒株疫苗保护力质疑的声音。随着国家颁布《中长期动物疫病防治规划（2012—2020）》和各项鼓励政策的出台，以及养殖场自身竞争力和盈利能力需求的提升，猪伪狂犬病的净化已成为行业呼声。 展开更多

关键词 猪伪狂犬病毒 净化 案例 变异毒株 鼓励政策 防治规划 动物疫病 盈利能力

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基于CRISPR/Cas9技术快速构建PRV gE基因缺失病毒 被引量：3

17

作者 金铭 刘春羽 +8 位作者 张洪亮 杭天宇 孙雨茗 赵洪哲 乌冬高娃 李伊铭 张赫 王凤雪 温永俊 《中国动物检疫》 CAS 2020年第5期87-93,共7页

为快速、高效构建伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)糖蛋白E基因(gE)缺失病毒,基于CRISPR/Cas9基因编辑技术,首先将pSpCas9(BB)-2A-GFP荧光质粒转染至VERO细胞和PK-15细胞,选出转染效率较高的细胞系,同时于http://crispr.mit.edu/... 为快速、高效构建伪狂犬病病毒(pseudorabies virus,PRV)糖蛋白E基因(gE)缺失病毒,基于CRISPR/Cas9基因编辑技术,首先将pSpCas9(BB)-2A-GFP荧光质粒转染至VERO细胞和PK-15细胞,选出转染效率较高的细胞系,同时于http://crispr.mit.edu/网站设计并合成3个高评分的小导向RNA(small guide RNA,sgRNA),通过噬斑形成试验,筛选出高效sgRNA。其次将筛选出的针对PRV gE基因的sgRNA转染于PK-15细胞,然后接种PRV-1病毒,经过5轮噬斑克隆纯化获得PRV-1-ΔgE。结果显示:VERO细胞比PK-15细胞具有更好的转染效果;gE-sgRNA1和gE-sgRNA2可作为针对gE基因的高效sgRNA;获得了1株PRV gE基因缺失291 bp的病毒,将其命名为PRV-1-ΔgE。研究表明,CRISPR/Cas9基因编辑技术可作为一种高效编辑PRV-1缺失病毒基因的方法,同时也为后续快速应对PRV变异株研究提供了新思路。 展开更多

关键词 伪狂犬病毒 变异毒株 糖蛋白E基因 CRISPR/Cas9

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商品猪伪狂犬免疫程序探讨 被引量：1

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作者 李尚华 《今日养猪业》 2018年第5期36-38,共3页

本文通过2011年的试验数据和2011年后的试验数据进行对比,发现伪狂犬病毒确实发生了变异。虽然经典伪狂犬毒株对当前流行的毒株要产生足够保护,但是需要加大免疫剂量、免疫频率才能提高中和抗体水平,提高感染阈值。所以,不如直接采用变... 本文通过2011年的试验数据和2011年后的试验数据进行对比,发现伪狂犬病毒确实发生了变异。虽然经典伪狂犬毒株对当前流行的毒株要产生足够保护,但是需要加大免疫剂量、免疫频率才能提高中和抗体水平,提高感染阈值。所以,不如直接采用变异毒株伪狂犬疫苗。谈到伪狂犬（PR）的防疫,不得不提到2011年这个时间节点。 展开更多

关键词 猪伪狂犬 免疫程序 变异毒株 商品 试验数据 伪狂犬病毒 免疫剂量 抗体水平

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