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题名茶尺蠖小RNA病毒全长cDNA克隆的构建
被引量：1
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作者
林美娟
谢键
张珈敏
叶姗
胡远扬
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机构
武汉大学生命科学学院病毒学国家重点实验室
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出处
《昆虫学报》
CAS
CSCD
北大核心
2010年第7期818-823,共6页
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基金
国家自然科学基金项目(30670084)
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文摘
为了初步研究茶尺蠖小RNA病毒(Ectropis oblique picorna-like virus,EoPV)的复制机制,从被EoPV感染致死的茶尺蠖幼虫中分离并纯化病毒粒子,提取病毒RNA,根据已公布的EoPV核苷酸序列,利用基因组上单一的酶切位点,设计特异性引物,应用RT-PCR扩增出5个覆盖全长的片段。随后采用融合PCR将5个片段拼接,最终将全长定向克隆到低拷贝质粒载体上,成功构建cDNA全长克隆p-EoPV。双酶切及测序鉴定证明全长克隆构建成功。与原序列比较发现,该克隆在氨基酸水平上有8个突变和1个缺失。本研究为深入探讨EoPV病毒生物学特性、病毒复制机理等奠定了基础。
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关键词
茶尺蠖小RNA病毒
全长CDNA克隆
传染性软化病毒科
反向遗传学
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Keywords
Ectropis oblique picorna-like virus
full-length cDNA clone
Iflaviridae
reverse genetics manipulation technique
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分类号
Q966
[生物学—昆虫学]
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