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传染性胰腺坏死病毒VP3蛋白在干酪乳杆菌的表面表达被引量：5: 1; 作者刘敏赵丽丽 +4 位作者葛俊伟乔薪瑗刘巍巍赵永欣李一经《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期19-22,共4页; 为获得传染性胰腺坏死病毒(IPNV)VP3蛋白在菌体表面表达,本研究将IPNV VP3基因定向插入乳酸杆菌表面表达型载体pPG1,构建的重组质粒pPG1-VP3电转化干酪乳杆菌,获得了重组干酪乳杆菌表达系统pPG1-VP3/Lactobacillus casei393。经1%糖诱... 展开更多; 关键词传染性胰腺坏死病毒 VP3蛋白干酪乳杆菌表面表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

传染性胰腺坏死病毒VP3蛋白的干酪乳杆菌表达系统构建被引量：3: 2; 作者刘敏赵丽丽 +5 位作者葛俊伟欧笛王相清刘弈张伟李一经《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2008年第5期30-34,共5页; 根据传染性胰腺坏死病毒(IPNV)VP3蛋白的全基因序列,设计并合成引物,以IPNV(ATCC VR-1318)细胞培养毒提取的核酸为模板,对传染性胰腺坏死病毒VP3蛋白的干酪乳杆菌表达系统进行了构建研究。结果显示:进行RT-PCR扩增得到截短的VP3基因约61... 展开更多; 关键词传染性胰腺坏死病毒 VP3基因干酪乳杆菌(Lactobacillus casei) 表达载体系统; 在线阅读下载PDF 职称材料

传染性胰腺坏死病毒VP3基因的分段表达及其抗原表位区域分析被引量：3: 3; 作者刘巍巍赵丽丽 +5 位作者赵永欣王健楠李一经葛俊伟乔薪瑗刘敏《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2011年第4期61-65,共5页; 采用PCR方法克隆了传染性胰腺坏死病毒（IPNV）VP3四段相互重叠的基因片段L1、L2、L3和L4,将PCR产物分别连接到原核表达载体pGEX-6P1和pET32a上,经酶切、PCR、测序鉴定,获得重组质粒pGEX-6P1-VP3（L1）、pET32a-VP3（L2）、pGEX-6P1-VP3... 展开更多; 关键词传染性胰腺坏死病毒 VP3基因原核表达抗原表位; 在线阅读下载PDF 职称材料

抗传染性胰腺坏死病毒VP3蛋白单克隆抗体的制备被引量：2: 4; 作者刘立月刘巍巍 +4 位作者赵丽丽葛俊伟唐立杰刘敏李一经《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2013年第3期56-60,共5页; 利用纯化后的传染性胰腺坏死病毒(IPNV VP3)重组蛋白免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合技术,采用间接ELISA和有限稀释法筛选杂交瘤细胞,利用染色体鉴定、蛋白印迹和免疫荧光等方法对单克隆抗体进行鉴定,共得到2株能稳定分泌特异性抗体的阳性... 展开更多; 关键词传染性胰腺坏死病毒 VP3蛋白单克隆抗体; 在线阅读下载PDF 职称材料

传染性胰腺坏死病毒VP2蛋白单克隆抗体的制备及应用: 5; 作者吴敏邵轶智 +2 位作者卢彤岩赵景壮徐黎明《大连海洋大学学报》 2025年第4期575-584,共10页; 为了建立传染性胰腺坏死病毒(infectious pancreatic necrosis virus,IPNV)快速诊断方法,通过对IPNV病毒VP2蛋白进行抗原表位预测,筛选出抗原性强、保守性好,且位于蛋白表面第178~191位和第380~393位的两个肽段,分别制备了针对VP2蛋白... 展开更多; 关键词传染性胰腺坏死病毒抗原表位单克隆抗体抗原捕获ELISA; 在线阅读下载PDF 职称材料

疫苗及其在水生动物疾病预防中的应用(一) 被引量：4: 6; 作者王玉堂《中国水产》 2018年第7期82-86,共5页; 在人们对水产品质量安全越来越关注、环境保护的呼声日益高涨的今天,采用各种化学药物防治水产养殖动物病害的方式越来越多地受到质疑,由于不规范使用各种化学药物,甚至违禁用药而引发的水产品质量安全事件也时有发生,并已引起全社会的... 展开更多; 关键词水产品传染性胰腺坏死病毒水生动物疾病杀鲑气单胞菌杀鲑弧菌病海鱼弧菌草鱼出血病嗜水气单胞菌; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名传染性胰腺坏死病毒VP3蛋白在干酪乳杆菌的表面表达被引量：5: 1; 作者刘敏赵丽丽葛俊伟乔薪瑗刘巍巍赵永欣李一经; 机构东北农业大学; 出处《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第1期19-22,共4页; 基金黑龙江省自然科学基金(C200837); 文摘为获得传染性胰腺坏死病毒(IPNV)VP3蛋白在菌体表面表达,本研究将IPNV VP3基因定向插入乳酸杆菌表面表达型载体pPG1,构建的重组质粒pPG1-VP3电转化干酪乳杆菌,获得了重组干酪乳杆菌表达系统pPG1-VP3/Lactobacillus casei393。经1%糖诱导表达后,SDS-PAGE和western blot检测表明,有约31ku蛋白得到了表达,其大小与理论值相符;诱导表达的菌体进行间接免疫荧光试验表明,重组蛋白在菌体表面获得了表达。该病毒VP3蛋白在乳酸菌的表面表达为进一步探讨传染性胰腺坏死病毒VP3蛋白免疫原性及相关功能奠定了基础。; 关键词传染性胰腺坏死病毒 VP3蛋白干酪乳杆菌表面表达; Keywords IPNV VP3 protein Lactobacillus casei surface expression; 分类号 S852.65 [农业科学—基础兽医学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名传染性胰腺坏死病毒VP3蛋白的干酪乳杆菌表达系统构建被引量：3: 2; 作者刘敏赵丽丽葛俊伟欧笛王相清刘弈张伟李一经; 机构东北农业大学动物科学技术学院; 出处《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2008年第5期30-34,共5页; 文摘根据传染性胰腺坏死病毒(IPNV)VP3蛋白的全基因序列,设计并合成引物,以IPNV(ATCC VR-1318)细胞培养毒提取的核酸为模板,对传染性胰腺坏死病毒VP3蛋白的干酪乳杆菌表达系统进行了构建研究。结果显示:进行RT-PCR扩增得到截短的VP3基因约615 bp目的片段,将其克隆到pMD18-T Simple载体,经酶切、PCR扩增和序列测定后显示目的片段正确;将目的片段分别亚克隆到乳酸菌细胞表面表达型载体和分泌表达型载体,电转化于干酪乳杆菌,获得了阳性重组菌株。结果表明,通过本实验方法可构建表达传染性胰腺坏死病毒VP3蛋白的干酪乳杆菌表达系统,为实现IPNV VP3蛋白在乳酸菌中的表达及免疫原性研究奠定了基础。; 关键词传染性胰腺坏死病毒 VP3基因干酪乳杆菌(Lactobacillus casei) 表达载体系统; Keywords IPNV VP3 gene Lactobacillus casei expressional vectors system; 分类号 S943.122 [农业科学—水产养殖]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名传染性胰腺坏死病毒VP3基因的分段表达及其抗原表位区域分析被引量：3: 3; 作者刘巍巍赵丽丽赵永欣王健楠李一经葛俊伟乔薪瑗刘敏; 机构东北农业大学动物科学与技术学院东北农业大学动物医学学院; 出处《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2011年第4期61-65,共5页; 基金黑龙江省自然科学基金(C200837) 黑龙江省教育厅科技项目(11541019); 文摘采用PCR方法克隆了传染性胰腺坏死病毒（IPNV）VP3四段相互重叠的基因片段L1、L2、L3和L4,将PCR产物分别连接到原核表达载体pGEX-6P1和pET32a上,经酶切、PCR、测序鉴定,获得重组质粒pGEX-6P1-VP3（L1）、pET32a-VP3（L2）、pGEX-6P1-VP3（L3）和pGEX-6P1-VP3（L4）;将其分别转化感受态菌Rosetta和BL21,经1.0mmol/L的IPTG诱导,分别得到大小为32 kD、26 kD、30 kD和31 kD的目的蛋白。经Western-blo-ting分析,4段目的蛋白中,只有VP3（L1）和VP3（L4）基因片段所表达的融合蛋白能与IPNV阳性血清反应,说明VP3蛋白的免疫优势区域集中在该蛋白的1~70和143~206氨基酸之间。该融合蛋白可以作为诊断抗原用于建立ELISA诊断方法。本实验为进一步精确定位VP3蛋白抗原表位奠定了基础。; 关键词传染性胰腺坏死病毒 VP3基因原核表达抗原表位; Keywords infectious pancreatic necrosis virus VP3 gene expression epitop; 分类号 S942.2 [农业科学—水产养殖] Q74 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名抗传染性胰腺坏死病毒VP3蛋白单克隆抗体的制备被引量：2: 4; 作者刘立月刘巍巍赵丽丽葛俊伟唐立杰刘敏李一经; 机构东北农业大学动物医学学院东北农业大学动物科学与技术学院; 出处《淡水渔业》 CSCD 北大核心 2013年第3期56-60,共5页; 基金国家科技支撑计划(2012BAD25B02) 黑龙江省教育厅科技项目(11541019); 文摘利用纯化后的传染性胰腺坏死病毒(IPNV VP3)重组蛋白免疫BALB/c小鼠,通过细胞融合技术,采用间接ELISA和有限稀释法筛选杂交瘤细胞,利用染色体鉴定、蛋白印迹和免疫荧光等方法对单克隆抗体进行鉴定,共得到2株能稳定分泌特异性抗体的阳性细胞株,分别命名为2F1、4A7,亚类鉴定2株单抗均为IgG1亚类。ELISA检测其腹水效价,蛋白印迹检测表明获得的2株单抗均能特异性识别IPNV VP3蛋白;间接免疫荧光鉴定表明2株单抗均与IPNV发生反应;间接ELISA检测结果表明2株单抗均不与HSV、SVCV、HRV等病毒反应,与IPNV具有较强的特异性反应。; 关键词传染性胰腺坏死病毒 VP3蛋白单克隆抗体; Keywords infectious pancreatic necrosis virus VP3 protein monoclonal antibody; 分类号 S941.41 [农业科学—水产养殖]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名传染性胰腺坏死病毒VP2蛋白单克隆抗体的制备及应用: 5; 作者吴敏邵轶智卢彤岩赵景壮徐黎明; 机构天津农学院水产学院; 出处《大连海洋大学学报》 2025年第4期575-584,共10页; 基金中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(2023TD45) 黑龙江省重点研发计划项目(JD24A013)。; 文摘为了建立传染性胰腺坏死病毒(infectious pancreatic necrosis virus,IPNV)快速诊断方法,通过对IPNV病毒VP2蛋白进行抗原表位预测,筛选出抗原性强、保守性好,且位于蛋白表面第178~191位和第380~393位的两个肽段,分别制备了针对VP2蛋白的单克隆抗体VP2-178抗体和VP2-380抗体;对纯化后的抗体进行HRP标记,建立了针对IPNV病毒VP2蛋白的抗原捕获ELISA检测方法。结果表明:捕获抗体为VP2-178抗体,其最佳工作浓度为0.5μg/孔;检测抗体为VP2-380抗体,最佳稀释度为1∶2000;经检测条件优化后,该ELISA方法能够检测国内流行的1型和5型IPNV毒株,但与传染性造血器官坏死病毒、鲤春病毒血症病毒及病毒性出血性败血症病毒均无反应,表明该方法广谱性好、特异性强;灵敏度试验结果显示,该方法对IPNV的最低检测限为62.5 TCID_(50)/mL;重复性结果显示,批内和批间重复性变异系数均小于7%;利用本研究建立的抗原捕获ELISA检测方法与国标方法同时对40份临床样品进行检测,结果显示两者符合率为100%。本研究建立的ELISA检测方法可为IPNV的临床快速诊断提供技术支持。; 关键词传染性胰腺坏死病毒抗原表位单克隆抗体抗原捕获ELISA; Keywords infectious pancreatic necrosis virus(IPNV) epitopes monoclonal antibodies antigen capture ELISA; 分类号 Q785 [生物学] S917 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名疫苗及其在水生动物疾病预防中的应用(一) 被引量：4: 6; 作者王玉堂; 出处《中国水产》 2018年第7期82-86,共5页; 文摘在人们对水产品质量安全越来越关注、环境保护的呼声日益高涨的今天,采用各种化学药物防治水产养殖动物病害的方式越来越多地受到质疑,由于不规范使用各种化学药物,甚至违禁用药而引发的水产品质量安全事件也时有发生,并已引起全社会的广泛关注。因此,开发和使用疫苗来预防重大水生动物疾病就显得十分重要。因为疫苗在提高动物体特异性免疫水平的同时,亦能增强机体抗应激的能力,且符合不污染环境。; 关键词水产品传染性胰腺坏死病毒水生动物疾病杀鲑气单胞菌杀鲑弧菌病海鱼弧菌草鱼出血病嗜水气单胞菌; 分类号 S942 [农业科学—水产养殖]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	传染性胰腺坏死病毒VP3蛋白在干酪乳杆菌的表面表达	刘敏赵丽丽葛俊伟乔薪瑗刘巍巍赵永欣李一经	《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心	2010	5	在线阅读下载PDF 职称材料
2	传染性胰腺坏死病毒VP3蛋白的干酪乳杆菌表达系统构建	刘敏赵丽丽葛俊伟欧笛王相清刘弈张伟李一经	《淡水渔业》 CSCD 北大核心	2008	3	在线阅读下载PDF 职称材料
3	传染性胰腺坏死病毒VP3基因的分段表达及其抗原表位区域分析	刘巍巍赵丽丽赵永欣王健楠李一经葛俊伟乔薪瑗刘敏	《淡水渔业》 CSCD 北大核心	2011	3	在线阅读下载PDF 职称材料
4	抗传染性胰腺坏死病毒VP3蛋白单克隆抗体的制备	刘立月刘巍巍赵丽丽葛俊伟唐立杰刘敏李一经	《淡水渔业》 CSCD 北大核心	2013	2	在线阅读下载PDF 职称材料
5	传染性胰腺坏死病毒VP2蛋白单克隆抗体的制备及应用	吴敏邵轶智卢彤岩赵景壮徐黎明	《大连海洋大学学报》	2025		在线阅读下载PDF 职称材料
6	疫苗及其在水生动物疾病预防中的应用(一)	王玉堂	《中国水产》	2018	4	在线阅读下载PDF 职称材料