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传染性法氏囊病超强病毒株VP2基因原核表达及其免疫原性检测 被引量:3
1
作者 朱彩霞 朱瑞良 +3 位作者 刘冠华 翁立雪 马荣德 孙寅剑 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期154-156,共3页
为检测传染性法氏囊病超强毒株(vvIBDV)重组VP2蛋白的免疫原性,本研究利用RT-PCR方法扩增vvIBDV的结构蛋白VP2基因,并将其克隆到表达载体pGEX-4T-3中,构建重组表达质粒pGEX-VP2。将其转化受体菌E.coli BL21(DE3)plysS,经IPTG诱导后,SDS-... 为检测传染性法氏囊病超强毒株(vvIBDV)重组VP2蛋白的免疫原性,本研究利用RT-PCR方法扩增vvIBDV的结构蛋白VP2基因,并将其克隆到表达载体pGEX-4T-3中,构建重组表达质粒pGEX-VP2。将其转化受体菌E.coli BL21(DE3)plysS,经IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳和western blot分析表明,表达的重组蛋白约69 ku,并以包涵体形式存在。表达的重组蛋白经纯化后,免疫6周龄BALB/c小鼠制备免疫血清,ELISA分析表明制备的血清效价在1∶5 120以上,表明vvIBDV VP2具有良好的免疫原性,为建立vvIBDV的ELISA检测方法提供了试验依据。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病超强病毒株 VP2 E.coliBL21(DE3)plysS 表达
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鸡传染性法氏囊病毒新型变异株传播性研究
2
作者 王萱 吴雨 +4 位作者 刘星 林丽苗 赵海参 麦凯杰 李群辉 《家禽科学》 2025年第5期42-47,I0014,I0015,共8页
传染性法氏囊病毒(Infectiousbursaldiseasevirus,IBDV)是一种具有dsRNA基因组的高度传染性病毒,主要感染鸡,因死亡率高,造成重大经济损失。由于该毒株具有典型的免疫逃逸,毒株重组新型变体和高毒力毒株的出现导致发病率、死亡率加剧,... 传染性法氏囊病毒(Infectiousbursaldiseasevirus,IBDV)是一种具有dsRNA基因组的高度传染性病毒,主要感染鸡,因死亡率高,造成重大经济损失。由于该毒株具有典型的免疫逃逸,毒株重组新型变体和高毒力毒株的出现导致发病率、死亡率加剧,继发感染并降低疫苗接种的有效性。因此,需要对该毒株流行情况以及临床传播能力进行详细研究。本试验在前期分离的一株新型变异株GD2021-08的基础上,对其水平传播能力进行研究,为临床生产防控提供参考和指导。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病毒 新型变异 水平传播
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传染性法氏囊病病毒感染和复制的分子机制研究进展
3
作者 郑铁锁 李永红 +5 位作者 韩翡 李静 童菊芸 陈镇荣 杨傲冰 陈坚 《动物医学进展》 北大核心 2025年第1期102-108,共7页
传染性法氏囊病(IBD)是由传染性法氏囊病病毒(IBDV)引起的一种急性、高度传染性、免疫抑制的禽类疾病,给家禽养殖业造成巨大的经济损失,引起人们的广泛关注。目前许多科研工作者对IBDV进行了多方面的研究,发现IBDV感染和复制的分子机制... 传染性法氏囊病(IBD)是由传染性法氏囊病病毒(IBDV)引起的一种急性、高度传染性、免疫抑制的禽类疾病,给家禽养殖业造成巨大的经济损失,引起人们的广泛关注。目前许多科研工作者对IBDV进行了多方面的研究,发现IBDV感染和复制的分子机制很复杂。论文主要对IBDV蛋白和宿主蛋白及因子相互作用在感染和复制中的作用、IBDV感染宿主细胞受体结合位点、IBDV感染后调控宿主细胞因子和干扰素、细胞凋亡情况和影响病毒感染和复制的miRNAs、lncRNAs和circRNAs进行综述,为IBDV的进一步研究和IBD防控提供参考。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病毒 感染 复制 分子机制
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鸡传染性法氏囊病病毒超强毒株VP2基因突变对细胞嗜性改变的研究 被引量:7
4
作者 高立 祁小乐 +5 位作者 高玉龙 高宏雷 秦立廷 邓小芸 李凯 王笑梅 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第10期747-751,共5页
为研究鸡传染性法氏囊病病毒超强毒株(vvIBDV)细胞嗜性改变的分子基础,本研究通过定点突变、重叠延伸PCR(SOE-PCR)等技术,以vvIBDV HLJ-0504株为骨架构建了两组感染性克隆,并借助已建立的反向遗传操作技术进行病毒拯救。IFA检测、电镜... 为研究鸡传染性法氏囊病病毒超强毒株(vvIBDV)细胞嗜性改变的分子基础,本研究通过定点突变、重叠延伸PCR(SOE-PCR)等技术,以vvIBDV HLJ-0504株为骨架构建了两组感染性克隆,并借助已建立的反向遗传操作技术进行病毒拯救。IFA检测、电镜观察及RT-PCR鉴定均显示:Q253H/A284T双点突变的pCAGGHLJ0504A889/980HRT和pCAGGHLJ0504BHRT共转染DF1细胞成功拯救出重组病毒(rHLJ0504HT),而未进行双点突变的pCAGGHLJ0504AHRT和pCAGGHLJ0504BHRT共转染组未获得重组病毒。上述结果表明,双点突变Q253H/A284T能使vvIBDV HLJ-0504适应非允许细胞CEF,但未进行Q253H/A284T双点突变的vvIBDV HLJ-0504不能感染非允许细胞CEF,因此,该研究表明VP2的Q253H/A284T两个氨基酸突变是vvIBDV细胞嗜性改变的分子基础。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病超强病毒株 病毒拯救 细胞嗜性
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我国部分地区A2dB1型传染性法氏囊病病毒新型变异株的鉴定及序列分析
5
作者 张文英 于航博 +15 位作者 姜楠 王国栋 牛鑫鑫 黄萌萌 张玉龙 韩金泽 许萌萌 刘长军 王素艳 李凯 高立 崔红玉 张艳萍 陈运通 高玉龙 祁小乐 《中国家禽》 北大核心 2024年第9期194-200,共7页
为持续了解传染性法氏囊病病毒新型变异株(Novel variant infectious bursal disease virus,nVarIBDV)在我国流行情况,研究收集2021—2022年6个主要养禽地区疑似传染性法氏囊病(Infectious bursal disease,IBD)鸡病料,采用RT-PCR进行检... 为持续了解传染性法氏囊病病毒新型变异株(Novel variant infectious bursal disease virus,nVarIBDV)在我国流行情况,研究收集2021—2022年6个主要养禽地区疑似传染性法氏囊病(Infectious bursal disease,IBD)鸡病料,采用RT-PCR进行检测,并对11株IBDV代表毒株的基因组双节段代表区段VP2-HVR和VP1-B-marker进行基因测序及序列分析。结果显示:所检测病料的IBDV阳性率为20.65%(19/92),其中11株IBDV代表毒株均为A2dB1型nVarIBDV。研究表明,nVarIBDV在我国主要养禽地区仍持续流行,而且出现了值得注意的新的突变位点,有必要进行持续的IBDV流行病学监测。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病毒 新型变异 A2dB1型 流行
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传染性法氏囊病病毒超强毒株HLJ-0504全基因组克隆及其新特征分析 被引量:11
6
作者 高立 祁小乐 +5 位作者 高玉龙 高宏雷 秦立廷 邓小芸 宇文延青 王笑梅 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期401-404,共4页
为了解传染性法氏囊病病毒(IBDV)HLJ-0504株的分子生物学特征,本研究利用融合PCR技术获得HLJ-0504株全基因组序列。核苷酸和推导氨基酸序列遗传演化分析发现,HLJ-0504A节段位于IBDV超强毒的分枝上,而B节段则介于超强毒株和减毒株之间,... 为了解传染性法氏囊病病毒(IBDV)HLJ-0504株的分子生物学特征,本研究利用融合PCR技术获得HLJ-0504株全基因组序列。核苷酸和推导氨基酸序列遗传演化分析发现,HLJ-0504A节段位于IBDV超强毒的分枝上,而B节段则介于超强毒株和减毒株之间,形成一个独立分枝,属于一株新的自然重组病毒。VP2抗原性预测分析表明,HLJ-0504株VP2第Ⅰ亲水区中的氨基酸发生突变(D212N),该突变可能导致了HLJ-0504株抗原性发生漂变。本实验结果为深入研究IBDV的分子特征奠定了基础。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病毒超强 HLJ-0504 全基因组 重组
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传染性法氏囊病超强毒Gx株VP5基因在病毒致弱过程中的变异研究 被引量:8
7
作者 张厚双 王笑梅 +3 位作者 高宏雷 付朝阳 曾祥伟 鞠玉琳 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期25-28,共4页
利用SPF鸡胚对鸡传染性法氏囊病超强毒 (vvIBDV)Gx株进行培育 ,通过鸡胚成纤维细胞对病毒进行传代致弱 ,对其非结构蛋白VP5基因核苷酸及推导的氨基酸序列进行分析 ,从而揭示vvIBDVGx从超强毒力向弱毒力转化过程中基因的序列变化规律。... 利用SPF鸡胚对鸡传染性法氏囊病超强毒 (vvIBDV)Gx株进行培育 ,通过鸡胚成纤维细胞对病毒进行传代致弱 ,对其非结构蛋白VP5基因核苷酸及推导的氨基酸序列进行分析 ,从而揭示vvIBDVGx从超强毒力向弱毒力转化过程中基因的序列变化规律。对不同代次细胞毒序列分析的结果表明 ,细胞毒在第 8代以前 ,VP5基因序列没有改变 ,与欧洲标准超强毒氨基酸同源性达 98%以上 ;细胞毒第 9代核苷酸和氨基酸序列发生了改变 ;10代毒VP5基因与欧洲标准弱毒Cu_1氨基酸序列同源性达 99% ;细胞适应毒传至 2 0代 ,其VP5基因序列不再改变。从而说明 。 展开更多
关键词 传染性法氏囊超强毒VP5基因 致弱 变异
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传染性法氏囊病毒新型变异株荧光定量RT-PCR检测方法的建立 被引量:1
8
作者 曹雪珍 周庆丰 +4 位作者 王连想 严专强 林丽苗 李薇 李群辉 《广东畜牧兽医科技》 2024年第3期54-59,82,共7页
传染性法氏囊病病毒新型变异株(Novel variant Infectious bursal disease virus,nVarIBDV)给我国养禽业防控法氏囊带来更大的挑战。目前缺乏快速、灵敏的针对nVarIBDV的检测方法。为解决这一问题,该试验根据已发表的nVarIBD的VP2基因序... 传染性法氏囊病病毒新型变异株(Novel variant Infectious bursal disease virus,nVarIBDV)给我国养禽业防控法氏囊带来更大的挑战。目前缺乏快速、灵敏的针对nVarIBDV的检测方法。为解决这一问题,该试验根据已发表的nVarIBD的VP2基因序列,设计了一对引物和一条特异性Taq Man探针,建立了一种nVarIBD的Taq Man荧光定量RT-PCR检测方法,该方法可通过特异性扩增nVarIBD VP2基因来确定样品是否为IBDV新型变异株。通过构建重组质粒pMD18-T-VP2对引物和探针进行灵敏性和重复性试验,以及特异性检测,最后使用该检测方法对临床样品进行验证。荧光定量RT-PCR结果显示灵敏性可达1.32×10^(1)copies/μL,高于常规RT-PCR的100倍。批内和批间重复试验变异系数(CV)均小于0.5%,结果表明该检测方法有良好的重复性与稳定性。该方法与常见禽病毒核酸无交叉反应,说明检测方法具有较好的特异性。综合本研究结果表明,该研究建立的nVarIBD荧光定量RT-PCR检测方法特异性强、灵敏性高、重复性好,可用于临床样品中IBDV新型变异株的监测。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病毒新型变异 荧光定量RT-PCR Taq Man探针
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鸡传染性法氏囊病毒新型变异株致病性研究 被引量:1
9
作者 李群辉 吴雨 +4 位作者 刘星 林丽苗 尹丽娟 严专强 王连想 《家禽科学》 2024年第11期21-27,I0008,I0009,共9页
鸡传染性法氏囊病是一种由鸡传染性法氏囊病毒引起的急性、高传播性和致死率的烈性传染病,鸡感染该病毒后会引起法氏囊器官严重萎缩,导致机体产生免疫抑制。近年来IBDV新型变异株在我国开始流行,目前尚无商品化疫苗预防该病,未来可能成... 鸡传染性法氏囊病是一种由鸡传染性法氏囊病毒引起的急性、高传播性和致死率的烈性传染病,鸡感染该病毒后会引起法氏囊器官严重萎缩,导致机体产生免疫抑制。近年来IBDV新型变异株在我国开始流行,目前尚无商品化疫苗预防该病,未来可能成为养禽业健康发展的新威胁。因此,需要进一步研究其流行病学情况和在临床疾病可能发挥着潜在的作用。本研究针对新型变异株GD2021-08进行致病模型建立,为生产防控提供参考和指导。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病毒 新型变异 模型
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传染性法氏囊病病毒上海超强毒株VP2-4-3基因真核表达质粒的构建与表达 被引量:5
10
作者 蒋静 孙建和 陆苹 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期179-182,共4页
应用Long and Accurate—PCR(LA-PCR)技术,扩增克隆了鸡传染性法氏囊病病毒上海超强毒(wIB-DV)的VP2—4—3基因。应用粘性末端连接策略,将VP2-4-3基因克隆人真核表达载体pALTER-MAX。经酶切鉴定,表明VP2-4-3基因为正向插入,位于CMV启动... 应用Long and Accurate—PCR(LA-PCR)技术,扩增克隆了鸡传染性法氏囊病病毒上海超强毒(wIB-DV)的VP2—4—3基因。应用粘性末端连接策略,将VP2-4-3基因克隆人真核表达载体pALTER-MAX。经酶切鉴定,表明VP2-4-3基因为正向插入,位于CMV启动子下游。该真核表达质粒在脂质体的介导下转染Vero细胞,经特异性抗IBDV抗体的免疫荧光检测,发现在细胞内有特异蛋白表达。 展开更多
关键词 传染性法氏囊 传染性法氏囊病毒 上海超强 VP2-4-3基因 真核表达质粒 基因表达 免疫荧光检测
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传染性法氏囊病病毒超强毒株致弱的分子生物学特征 被引量:9
11
作者 许信刚 王笑梅 +1 位作者 李健强 童光志 《西北农业学报》 CSCD 2000年第3期12-15,22,共5页
为了探索传染性法氏囊病病毒 ( IBDV)超强毒株致弱的分子特征变化 ,采用 RT-PCR技术 ,从超强毒 ( vv IBDV)及其不同代次细胞传代致弱毒中扩增到编码 VP2蛋白的 c DNA高变区基因 ,并对其序列测定。将 vv IBDV及其致弱毒株 VP2高变区的氨... 为了探索传染性法氏囊病病毒 ( IBDV)超强毒株致弱的分子特征变化 ,采用 RT-PCR技术 ,从超强毒 ( vv IBDV)及其不同代次细胞传代致弱毒中扩增到编码 VP2蛋白的 c DNA高变区基因 ,并对其序列测定。将 vv IBDV及其致弱毒株 VP2高变区的氨基酸与其它血清 I型毒株比较 ,发现 vv IBDV与其致弱毒株在VP2高变区的 2 2 2、2 4 2、2 53、2 56、2 71、2 79、2 84、2 94、2 99和 3 0 0位氨基酸发生了改变 ,而这些氨基酸的变化使亲水区和七肽区发生了改变 。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病毒 超强 致弱毒 序列分析
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鸡传染性法氏囊病病毒超强株VP2基因重组新城疫病毒胚胎免疫安全性及效力试验 被引量:6
12
作者 王琪 葛金英 +6 位作者 焦利红 曹有才 李晓艳 马良 马吉飞 王笑梅 步志高 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期695-698,共4页
为研制能够同时预防传染性法氏囊病(IBD)和新城疫(ND)的疫苗,本研究选用表达IBD病毒(IBDV)超强毒株(vvIBDV)VP2基因的重组ND病毒(NDV)LaSota疫苗株(rL-VP2),测定其半数鸡胚感染量、平均鸡胚致死时间、脑内接种指数和静脉内致病指数等指... 为研制能够同时预防传染性法氏囊病(IBD)和新城疫(ND)的疫苗,本研究选用表达IBD病毒(IBDV)超强毒株(vvIBDV)VP2基因的重组ND病毒(NDV)LaSota疫苗株(rL-VP2),测定其半数鸡胚感染量、平均鸡胚致死时间、脑内接种指数和静脉内致病指数等指标,按不同剂量接种18胚龄SPF鸡胚,分别于出雏后第9d、第14d和第21d采血,用微量凝集法和ELISA方法测定血清中抗NDV抗体和抗IBDV抗体水平,并于出雏后28d用NDV强毒(F48E9株)和vvIBDVGx株攻毒,评估重组疫苗的胚胎免疫效果。结果显示:按104EID50/枚剂量进行免疫不会影响SPF鸡胚出雏率和出雏后21d存活率,并且该免疫组雏鸡能够对NDV强毒和vvIBDV攻毒提供安全的免疫保护。 展开更多
关键词 胚胎免疫 重组新城疫病毒 传染性法氏囊病毒超强 VP2基因
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传染性法氏囊病病毒超强毒地方株HN01的分离鉴定及分子系统进化分析 被引量:2
13
作者 贾赟 张素芳 +4 位作者 周斌 王旭东 王川庆 赵玉军 陈溥言 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2005年第2期32-38,共7页
 用分离的疑为鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)超强毒(vvIBDV)地方分离株HN01,经处理后接种SPF鸡,36h后接种鸡开始发病,发病率为100%,死亡率为70%以上。剖检可见与野外病例相同的病理变化,如肌肉、腺胃、心脏出血,法氏囊水肿且多呈"...  用分离的疑为鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)超强毒(vvIBDV)地方分离株HN01,经处理后接种SPF鸡,36h后接种鸡开始发病,发病率为100%,死亡率为70%以上。剖检可见与野外病例相同的病理变化,如肌肉、腺胃、心脏出血,法氏囊水肿且多呈"紫葡萄"样外观。经血清学试验、毒力试验、鸡胚接种试验、分子生物学和电镜形态学观察均证明该分离物为超强毒株,从而证明河南省鸡群中存在不同于IBDV一般强毒株、经典株和变异株的超强毒株。通过对IBDV不同毒株VP2基因高变区氨基酸序列的聚类分析发现,HN01与华南超强毒株G9201、欧洲超强毒株UK661关系最接近,而与HK46,OKYM,D6948,UPM92-04和KS等毒株关系依次渐远。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病毒 超强 分离鉴定 VP2 序列分析 系统进化树
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鸡传染性法氏囊病毒超强毒株的分离及生物学特性鉴定 被引量:5
14
作者 邱冬 贾华强 +1 位作者 邢丽娟 崔尚金 《中国动物检疫》 CAS 2003年第2期23-24,共2页
用SPF鸡及鸡胚 ,从吉林某鸡场病死鸡的法氏囊组织中分离到一株超强毒株 (J20株 )。此病毒不能凝集鸡的红细胞 ,可以被IBDV标准阳性血清检出IBDV抗原。通过对J2001分离毒株进行回归实验 ,测定病毒效价EID50 达106/0.2ml,发病率为100 % ,... 用SPF鸡及鸡胚 ,从吉林某鸡场病死鸡的法氏囊组织中分离到一株超强毒株 (J20株 )。此病毒不能凝集鸡的红细胞 ,可以被IBDV标准阳性血清检出IBDV抗原。通过对J2001分离毒株进行回归实验 ,测定病毒效价EID50 达106/0.2ml,发病率为100 % ,死亡率达70% ;病毒理化特性试验 ,电镜观察等证实J20株为鸡传染性法氏囊病超强毒株。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病毒 超强 生物学特性 分离鉴定
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鸡传染性法氏囊病病毒超强毒株HLJ-0504 VP5基因缺失株感染性克隆的构建及鉴定 被引量:4
15
作者 高立 祁小乐 +5 位作者 秦立廷 高宏雷 高玉龙 李凯 王永强 王笑梅 《中国动物传染病学报》 CAS 2010年第2期1-7,共7页
利用体外定点突变技术,缺失vvIBDV HLJ-0504株VP5基因,通过多重PCR在基因组两端分别引入锤头状核酶序列(HamRz)和丁肝病毒核酶序列(HdvRz)。将带有核酶序列的IBDV基因组插入载体pCAGGs的β肌动蛋白启动子下游,构建了IBDV感染性克隆pCAGG... 利用体外定点突变技术,缺失vvIBDV HLJ-0504株VP5基因,通过多重PCR在基因组两端分别引入锤头状核酶序列(HamRz)和丁肝病毒核酶序列(HdvRz)。将带有核酶序列的IBDV基因组插入载体pCAGGs的β肌动蛋白启动子下游,构建了IBDV感染性克隆pCAGGHLJ0504A△ VP5HRT,将该感染性克隆与pCAGGHLJ0504BHRT共转染DF-I细胞。IFA,RT-PCR,电镜观察均显示获得重组病毒,将其命名为rHLJ0504HT△VP5。vvIBDV VP5基因缺失感染性克隆的成功构建为我们利用反向遗传操作技术快速致弱vvIBDV,构建IBD的候选疫苗株奠定了基础。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病毒超强 VP5 感染性克隆 重组病毒
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传染性法氏囊病病毒超强毒株高免卵黄抗体的研制及应用 被引量:2
16
作者 陆冰洋 刘华栋 +4 位作者 王彩先 唐娟 詹海杰 李婷婷 詹丽娥 《中国家禽》 北大核心 2014年第1期22-25,共4页
本研究从山西某养殖场分离到一株传染性法氏囊病病毒,经序列比对,发现其与国外经典超强毒株的同源性高达99.6%,除222位点,其他位点均具备超强毒株的序列特征,结合临床发病特征,确定为超强毒株。用此超强毒株研制成传染性法氏囊病灭活疫... 本研究从山西某养殖场分离到一株传染性法氏囊病病毒,经序列比对,发现其与国外经典超强毒株的同源性高达99.6%,除222位点,其他位点均具备超强毒株的序列特征,结合临床发病特征,确定为超强毒株。用此超强毒株研制成传染性法氏囊病灭活疫苗,对健康鸡群三免,当卵黄抗体滴度达到27时,收集鸡蛋,制备高免卵黄抗体,用此高免卵黄抗体治疗IBDV感染鸡群,有效率达100%。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病毒 超强 VP2 卵黄抗体
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4种中等毒力活疫苗对鸡传染性法氏囊病病毒超强毒株感染的免疫保护作用观察 被引量:2
17
作者 侯宏艳 赵瑞宏 +3 位作者 张丹俊 朱会 胡晓苗 朱传民 《动物医学进展》 CSCD 北大核心 2013年第12期218-221,共4页
针对安徽省传染性法氏囊病病毒(IBDV)超强毒株AH01的流行,用4种临床上常用的国内外中等毒力活疫苗分组免疫13日龄的麻黄鸡,于免疫接种后10d用AH01株攻毒,观察各组的临床症状和病理变化,测定法氏囊指数,同时用ELISA检测免疫鸡血清中抗体... 针对安徽省传染性法氏囊病病毒(IBDV)超强毒株AH01的流行,用4种临床上常用的国内外中等毒力活疫苗分组免疫13日龄的麻黄鸡,于免疫接种后10d用AH01株攻毒,观察各组的临床症状和病理变化,测定法氏囊指数,同时用ELISA检测免疫鸡血清中抗体水平。结果表明,这4种疫苗对超强毒株AH01均有免疫保护效果,但北京的疫苗A的免疫保护效果最好,其次是以色列的疫苗C,南京的疫苗B和马来西亚的疫苗D的免疫保护作用较差。 展开更多
关键词 传染性法氏囊 中等毒力活疫苗 超强 免疫保护
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传染性法氏囊病病毒超强毒株衣壳蛋白的可溶性表达、纯化与活性分析 被引量:3
18
作者 高祥 李辉 +8 位作者 张礼洲 卢珍 王永强 高立 吴甜甜 高玉龙 刘长军 王笑梅 祁小乐 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2017年第7期2096-2102,共7页
为获得高质量的病毒衣壳蛋白VP2,本研究克隆了传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)超强毒株Gx的VP2基因,并亚克隆至载体pCold-Ⅰ,进而获得重组原核表达质粒pCold-Ⅰ-GxVP2,在Transetta(DE3)工程菌中优化条件进行I... 为获得高质量的病毒衣壳蛋白VP2,本研究克隆了传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)超强毒株Gx的VP2基因,并亚克隆至载体pCold-Ⅰ,进而获得重组原核表达质粒pCold-Ⅰ-GxVP2,在Transetta(DE3)工程菌中优化条件进行IBDV衣壳蛋白VP2的可溶性表达,运用Ni-NTA亲和层析和凝胶过滤两种技术串联的方法进行蛋白纯化,运用单克隆抗体介导的Western blotting技术鉴定纯化蛋白的特异性,免疫SPF鸡鉴定纯化蛋白的免疫活性。结果显示,在冷休克条件下,IBDV衣壳蛋白VP2在Transetta(DE3)工程菌中实现了可溶性表达;通过纯化获得了高纯度的VP2,浓度为542μg/mL;该蛋白不仅能与VP2单克隆抗体特异性反应,还能刺激鸡产生特异性免疫应答,具有良好的免疫活性。本研究在IPTG为1mmol/L,15℃、120r/min,诱导时间为24h的条件下,实现了有免疫活性的IBDV衣壳蛋白VP2的可溶性表达和纯化。高纯度、可溶、具有功能活性的衣壳蛋白的制备,为深入开展IBDV致病机制研究奠定了基础。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病毒 衣壳蛋白 可溶性表达 纯化
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幼鸡传染性法氏囊病病毒超强毒株VP2基因的克隆和分析 被引量:2
19
作者 赵渝 陆苹 孙建和 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 2002年第4期387-391,共5页
利用反转录 聚合酶链反应(RT PCR),扩增并克隆传染性法氏囊病病毒超强毒株(vvIBDV)SH9901VP2基因,并对其进行全序列测定 结果表明,克隆到的VP2基因序列长1 3kb;强毒株SH9901VP2片段与超强毒株OKMY高度相似;核苷酸与氨基酸同源性分别为99... 利用反转录 聚合酶链反应(RT PCR),扩增并克隆传染性法氏囊病病毒超强毒株(vvIBDV)SH9901VP2基因,并对其进行全序列测定 结果表明,克隆到的VP2基因序列长1 3kb;强毒株SH9901VP2片段与超强毒株OKMY高度相似;核苷酸与氨基酸同源性分别为99 26%,99 8%. 展开更多
关键词 幼鸡 传染性法氏囊 病毒超强 VP2基因 序列分析 基因克隆
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传染性法氏囊病病毒超强毒HZ株和XN株VP2基因的克隆和序列比较 被引量:3
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作者 许信刚 李健强 +4 位作者 王笑梅 童光志 梁荣 张耀相 邢福珊 《动物医学进展》 CSCD 2000年第1期39-42,共4页
根据已发表的 5 2 / 70株 IBDV基因组序列 ,设计并合成了一对特异扩增IBDV VP2基因的引物。以陕西地区分离的IBDV野毒 XN株、HZ株为材料 ,以其基因组为模板利用 RT- PCR技术扩增出了 1 .5kb 的 c DNA 产物 ,将 VP2基因克隆于PUC1 1 9质... 根据已发表的 5 2 / 70株 IBDV基因组序列 ,设计并合成了一对特异扩增IBDV VP2基因的引物。以陕西地区分离的IBDV野毒 XN株、HZ株为材料 ,以其基因组为模板利用 RT- PCR技术扩增出了 1 .5kb 的 c DNA 产物 ,将 VP2基因克隆于PUC1 1 9质粒上 ,得到重组 PUC1 1 9质粒。并对 VP2基因全序列测定、分析和聚类表明 ,XN株和 HZ株与欧洲超强毒株非常相似 ,而与经典强毒株、弱毒株和变异株相差较大。 展开更多
关键词 传染性法氏囊 序列分析 病毒 基因克隆 VVIBDV
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