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传染性法氏囊病超强毒Gx株VP3基因在病毒致弱过程中的变异研究 被引量:1
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作者 张厚双 王笑梅 +4 位作者 高宏雷 付朝阳 包晓玮 彭志伟 鞠玉琳 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期128-132,共5页
利用SPF鸡胚对鸡传染性法氏囊病超强毒vvIBDVGx株进行培育,通过鸡胚成纤维细胞对病毒进行传代致弱,对其结构蛋白VP3基因核苷酸及推导的氨基酸序列进行分析,从而揭示vvIBDVGx从超强毒力向弱毒力转化过程中基因的序列变化规律。对不同代... 利用SPF鸡胚对鸡传染性法氏囊病超强毒vvIBDVGx株进行培育,通过鸡胚成纤维细胞对病毒进行传代致弱,对其结构蛋白VP3基因核苷酸及推导的氨基酸序列进行分析,从而揭示vvIBDVGx从超强毒力向弱毒力转化过程中基因的序列变化规律。对不同代次细胞毒序列分析的结果表明,细胞毒在第8代以前,VP3基因序列没有改变,与标准超强毒HK46株氨基酸同源性达99%以上;细胞毒第9代核苷酸和氨基酸序列发生了改变;10代毒VP3基因与标准弱毒P2株氨基酸序列同源性达100%;细胞适应毒传至20代,其VP3基因序列不再改变。从而说明,vvIBDVGx株在致弱过程中,VP3基因也随之改变。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病超强毒vp3基因 致弱 变异
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传染性法氏囊病病毒上海超强毒株VP2-4-3基因真核表达质粒的构建与表达 被引量:5
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作者 蒋静 孙建和 陆苹 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期179-182,共4页
应用Long and Accurate—PCR(LA-PCR)技术,扩增克隆了鸡传染性法氏囊病病毒上海超强毒(wIB-DV)的VP2—4—3基因。应用粘性末端连接策略,将VP2-4-3基因克隆人真核表达载体pALTER-MAX。经酶切鉴定,表明VP2-4-3基因为正向插入,位于CMV启动... 应用Long and Accurate—PCR(LA-PCR)技术,扩增克隆了鸡传染性法氏囊病病毒上海超强毒(wIB-DV)的VP2—4—3基因。应用粘性末端连接策略,将VP2-4-3基因克隆人真核表达载体pALTER-MAX。经酶切鉴定,表明VP2-4-3基因为正向插入,位于CMV启动子下游。该真核表达质粒在脂质体的介导下转染Vero细胞,经特异性抗IBDV抗体的免疫荧光检测,发现在细胞内有特异蛋白表达。 展开更多
关键词 传染性法氏囊 传染性法氏囊 上海超强 vp2-4-3基因 真核表达质粒 基因表达 免疫荧光检测
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传染性法氏囊病超强毒Gx株VP5基因在病毒致弱过程中的变异研究 被引量:8
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作者 张厚双 王笑梅 +3 位作者 高宏雷 付朝阳 曾祥伟 鞠玉琳 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期25-28,共4页
利用SPF鸡胚对鸡传染性法氏囊病超强毒 (vvIBDV)Gx株进行培育 ,通过鸡胚成纤维细胞对病毒进行传代致弱 ,对其非结构蛋白VP5基因核苷酸及推导的氨基酸序列进行分析 ,从而揭示vvIBDVGx从超强毒力向弱毒力转化过程中基因的序列变化规律。... 利用SPF鸡胚对鸡传染性法氏囊病超强毒 (vvIBDV)Gx株进行培育 ,通过鸡胚成纤维细胞对病毒进行传代致弱 ,对其非结构蛋白VP5基因核苷酸及推导的氨基酸序列进行分析 ,从而揭示vvIBDVGx从超强毒力向弱毒力转化过程中基因的序列变化规律。对不同代次细胞毒序列分析的结果表明 ,细胞毒在第 8代以前 ,VP5基因序列没有改变 ,与欧洲标准超强毒氨基酸同源性达 98%以上 ;细胞毒第 9代核苷酸和氨基酸序列发生了改变 ;10代毒VP5基因与欧洲标准弱毒Cu_1氨基酸序列同源性达 99% ;细胞适应毒传至 2 0代 ,其VP5基因序列不再改变。从而说明 。 展开更多
关键词 传染性法氏囊超强vp5基因 致弱 变异
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传染性法氏囊病病毒结构蛋白VP3基因的克隆与原核表达 被引量:4
4
作者 彭志伟 王笑梅 +4 位作者 高宏雷 付朝阳 张厚双 包晓玮 冉多良 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期124-127,共4页
利用PCR技术扩增出IBDV的结构蛋白VP3基因,将其克隆到表达载体pPROEX-HTa中,获得重组质粒命名为VP3/PA,经PCR、酶切和序列分析鉴定表明,插入的位置、大小和读码框均正确。SDS-PAGE检测表明,经重组质粒VP3/PA转化、诱导的受体菌E.coliDH... 利用PCR技术扩增出IBDV的结构蛋白VP3基因,将其克隆到表达载体pPROEX-HTa中,获得重组质粒命名为VP3/PA,经PCR、酶切和序列分析鉴定表明,插入的位置、大小和读码框均正确。SDS-PAGE检测表明,经重组质粒VP3/PA转化、诱导的受体菌E.coliDH5α能表达结构蛋白VP3基因,约33Ku,表达量达到了菌体总蛋白的33.9%,经Westernblot等检测表明,诱导表达的抗原蛋白能与vvIBDV阳性血清发生特异性反应。这为IBDV血清学诊断方法的建立打下了基础。 展开更多
关键词 传染性法氏囊 结构蛋白vp3基因 克隆与原核表达
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传染性法氏囊病超强病毒株VP2基因原核表达及其免疫原性检测 被引量:3
5
作者 朱彩霞 朱瑞良 +3 位作者 刘冠华 翁立雪 马荣德 孙寅剑 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期154-156,共3页
为检测传染性法氏囊病超强毒株(vvIBDV)重组VP2蛋白的免疫原性,本研究利用RT-PCR方法扩增vvIBDV的结构蛋白VP2基因,并将其克隆到表达载体pGEX-4T-3中,构建重组表达质粒pGEX-VP2。将其转化受体菌E.coli BL21(DE3)plysS,经IPTG诱导后,SDS-... 为检测传染性法氏囊病超强毒株(vvIBDV)重组VP2蛋白的免疫原性,本研究利用RT-PCR方法扩增vvIBDV的结构蛋白VP2基因,并将其克隆到表达载体pGEX-4T-3中,构建重组表达质粒pGEX-VP2。将其转化受体菌E.coli BL21(DE3)plysS,经IPTG诱导后,SDS-PAGE电泳和western blot分析表明,表达的重组蛋白约69 ku,并以包涵体形式存在。表达的重组蛋白经纯化后,免疫6周龄BALB/c小鼠制备免疫血清,ELISA分析表明制备的血清效价在1∶5 120以上,表明vvIBDV VP2具有良好的免疫原性,为建立vvIBDV的ELISA检测方法提供了试验依据。 展开更多
关键词 传染性法氏囊超强 vp2 E.coliBL21(DE3)plysS 表达
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鸡传染性法氏囊病病毒VP3基因的克隆与原核表达 被引量:3
6
作者 宋铁彬 白江 +2 位作者 马博 王连江 陈福勇 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2007年第11期29-30,共2页
关键词 传染性法氏囊 vp3基因 克隆与原核表达 RNA IBDV A节段 基因 vp2
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传染性法氏囊病病毒VP2与C3d串联基因重组表达质粒的构建及其免疫功能研究 被引量:2
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作者 马金荣 欧阳伟 +6 位作者 王永山 吴晓悠 朱向东 张海彬 范红结 王忠灿 唐雨德 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期471-475,共5页
为提高传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因核酸疫苗的免疫效力,本研究根据已发表的鸡源补体C3d序列,设计并合成在5'端添加编码连接肽(Gly4Ser)2序列的C3d基因。用同尾酶BglⅡ和BamHⅠ构建含有3拷贝C3d与VP2基因融合的重组表达质粒pcDN... 为提高传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因核酸疫苗的免疫效力,本研究根据已发表的鸡源补体C3d序列,设计并合成在5'端添加编码连接肽(Gly4Ser)2序列的C3d基因。用同尾酶BglⅡ和BamHⅠ构建含有3拷贝C3d与VP2基因融合的重组表达质粒pcDNA-VP2-3C3d。用脂质体法转染BHK21细胞,48 h后,westernblot分析表明,表达的重组蛋白为162 ku;间接免疫荧光试验检测转染细胞中具有特异性荧光。用pcDNA-VP2-3C3d与前期构建的pcDNA-VP2分别免疫2周龄SPF鸡,二免14 d后,间接ELISA法检测IBDV抗体效价,pcDNA-VP2-3C3d组抗体水平显著高于pcDNA-VP2组;MTT法检测鸡脾淋巴细胞增殖活性,pcDNA-VP2-3C3d组免疫诱导的特异性淋巴细胞增殖活性显著高于pcDNA-VP2组(p<0.05)。本研究表明C3d可以增强VP2基因免疫诱导的IBDV特异性体液和细胞免疫应答。 展开更多
关键词 传染性法氏囊 vp2基因 鸡补体C3d 分子免疫佐剂 基因免疫
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鸡传染性法氏囊病毒3个毒株VP2高变区的基因扩增与序列分析 被引量:1
8
作者 张艳英 孙继国 +2 位作者 郑世学 孙玉杰 张曼夫 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第z1期240-242,共3页
以用疫苗株V -hb和V1免疫后又发病的病鸡法氏囊分离毒株HeB -bdI的基因组RNA为模板 ,利用RT -PCR/Nested -PCR扩增出了cDNA产物。并对其VP2高变区基因序列测定 ,同时测定了V -hb和V1的基因序列。序列分析表明 :HeB -bdI毒株与UK661同源... 以用疫苗株V -hb和V1免疫后又发病的病鸡法氏囊分离毒株HeB -bdI的基因组RNA为模板 ,利用RT -PCR/Nested -PCR扩增出了cDNA产物。并对其VP2高变区基因序列测定 ,同时测定了V -hb和V1的基因序列。序列分析表明 :HeB -bdI毒株与UK661同源性较高为 98.4% ,而与弱毒株Cu -1、非致病性株PBG98和变异株相差较大 ;而疫苗株V -hb和V1疫苗株与HeB -bdI毒株的同源性较低仅为 93 .1%。 展开更多
关键词 传染性法氏囊 超强 vp2 基因克隆 序列分析
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幼鸡传染性法氏囊病病毒超强毒株VP2基因的克隆和分析 被引量:2
9
作者 赵渝 陆苹 孙建和 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 2002年第4期387-391,共5页
利用反转录 聚合酶链反应(RT PCR),扩增并克隆传染性法氏囊病病毒超强毒株(vvIBDV)SH9901VP2基因,并对其进行全序列测定 结果表明,克隆到的VP2基因序列长1 3kb;强毒株SH9901VP2片段与超强毒株OKMY高度相似;核苷酸与氨基酸同源性分别为99... 利用反转录 聚合酶链反应(RT PCR),扩增并克隆传染性法氏囊病病毒超强毒株(vvIBDV)SH9901VP2基因,并对其进行全序列测定 结果表明,克隆到的VP2基因序列长1 3kb;强毒株SH9901VP2片段与超强毒株OKMY高度相似;核苷酸与氨基酸同源性分别为99 26%,99 8%. 展开更多
关键词 幼鸡 传染性法氏囊 超强 vp2基因 序列分析 基因克隆
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利用SUMO表达系统高效可溶性表达鸡传染性法氏囊病病毒VP3基因 被引量:5
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作者 曲栗 尹杰超 +7 位作者 李宁 刘生伟 傅俊华 姚文兵 谷学佳 郝建权 任桂萍 李德山 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期199-202,共4页
为评价SUMO原核表达系统(pHisSUMO Express)对病毒基因的可溶性表达,本研究从人工接种发病的鸡传染性法氏囊病(IBD)的病料组织样品中提取总RNA,通过RT-PCR扩增IBD病毒(IBDV)VP3基因,并将其克隆于pHisSUMO中构建了重组表达质粒pHisSUMO-V... 为评价SUMO原核表达系统(pHisSUMO Express)对病毒基因的可溶性表达,本研究从人工接种发病的鸡传染性法氏囊病(IBD)的病料组织样品中提取总RNA,通过RT-PCR扩增IBD病毒(IBDV)VP3基因,并将其克隆于pHisSUMO中构建了重组表达质粒pHisSUMO-VP3,转化大肠杆菌Rosetta(DE3)PlysS,经IPTG诱导,得到可溶性表达的融合蛋白SUMO-VP3。结果表明,该融合蛋白表达量占细菌总蛋白35%,经HisTrapTMFF crude column层析柱纯化后的SUMO-VP3蛋白可被SUMO蛋白酶Ⅰ有效切割,获得无标签的VP3蛋白,经western blot鉴定表明该VP3蛋白具有良好的抗原性。本研究表明pHisSUMO Express表达系统是高效可溶表达外源蛋白的有效工具,所表达的病毒蛋白具有良好的抗原性,为病原诊断抗原的研究和制备提供有效表达系统。 展开更多
关键词 SUMO 高效可溶表达 传染性法氏囊 vp3基因
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鸡传染性法氏囊病病毒超强毒洛阳分离株VPP2基因的原核表达及鉴定 被引量:2
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作者 杨阳 刘莎莎 +4 位作者 贾艳艳 胡茂志 李银聚 王伟杰 张震 《中国家禽》 北大核心 2016年第17期17-20,共4页
根据GenBank公布的鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因序列,设计合成1对特异性引物,应用RT-PCR技术扩增鸡传染性法氏囊病病毒超强毒(vv IBDV)洛阳分离株LY1的VP2基因并进行克隆,构建重组质粒p MD18-T-VP2,然后连接至原核表达载体p ET32a... 根据GenBank公布的鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)VP2基因序列,设计合成1对特异性引物,应用RT-PCR技术扩增鸡传染性法氏囊病病毒超强毒(vv IBDV)洛阳分离株LY1的VP2基因并进行克隆,构建重组质粒p MD18-T-VP2,然后连接至原核表达载体p ET32a,将阳性质粒转化至感受态细胞Rosetta中进行诱导表达。SDS-PAGE结果显示VP2基因在大肠杆菌Rosetta细胞中实现融合表达,蛋白大小约66 ku,且主要存在于细胞上清中,Western blot试验证实表达的VP2蛋白具有较好的反应原性。研究结果可为IBDV的诊断抗原及基因工程疫苗研究奠定基础。 展开更多
关键词 传染性法氏囊超强 vp2基因 原核表达
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鸡传染性法氏囊病超强毒VP1基因的原核表达及兔抗血清的制备 被引量:1
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作者 康忠惠 王永强 +8 位作者 王琦 李久宽 秦立廷 高玉龙 高宏雷 祁小乐 林欢 王笑梅 许修宏 《中国家禽》 北大核心 2011年第2期11-14,共4页
以鸡传染性法氏囊病超强毒Gx株基因组RNA为模板,通过RT-PCR扩增VP1基因,经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切处理后与经相同酶切处理的pET-30a原核表达载体连接,将酶切、PCR及测序鉴定正确的阳性重组子转化BL21(DE3)感受态细胞,融合蛋白His-VP1经IPT... 以鸡传染性法氏囊病超强毒Gx株基因组RNA为模板,通过RT-PCR扩增VP1基因,经EcoRⅠ和XhoⅠ双酶切处理后与经相同酶切处理的pET-30a原核表达载体连接,将酶切、PCR及测序鉴定正确的阳性重组子转化BL21(DE3)感受态细胞,融合蛋白His-VP1经IPTG诱导表达后主要以包涵体形式存在。Western blot检测到约97ku的目的蛋白能够与特异性的VP1单克隆抗体反应。将纯化的目的蛋白免疫新西兰白兔后获得了抗VP1蛋白的血清。该血清能够与重组杆状病毒rBacGxVP1感染的sf9细胞发生特异性反应,而且其ELISA抗体效价达到1∶25600。鸡传染性法氏囊病超强毒VP1基因的表达与兔抗血清的制备为病毒的检测及VP1功能的研究提供了有效工具。 展开更多
关键词 传染性法氏囊超强 vp1 原核表达 兔抗vp1血清
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广西地区传染性囊病病毒超强毒株的分离鉴定及其VP2基因高变区的序列分析 被引量:8
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作者 何秀苗 官丁明 +3 位作者 韦平 禤金彩 屈祖平 秦爱建 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2009年第9期7-9,共3页
研究通过鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)接种、琼脂扩散试验、致细胞病变和RT-PCR等方法,成功从广西疑似病鸡的腔上囊组织中获得了8个传染性囊病病毒(IBDV)毒株,分离株可致攻毒鸡发病率100%,死亡率60%~90%;分子特征上,8个分离株VP2... 研究通过鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)接种、琼脂扩散试验、致细胞病变和RT-PCR等方法,成功从广西疑似病鸡的腔上囊组织中获得了8个传染性囊病病毒(IBDV)毒株,分离株可致攻毒鸡发病率100%,死亡率60%~90%;分子特征上,8个分离株VP2高变区在酶切位点和特征性氨基酸上均属于vvIBDV的特征。同源性分析表明,8个分离株之间在核苷酸和氨基酸上的同源性分别为96.8%~99.1%和95.9%~99.3%,与其他参考vvIBDV毒株的同源性分别为94%~97.7%和92.5%~97.3%,而与常用疫苗株Bursine-2、B87(in),变异株GLS,经典强毒株的同源性仅有90%左右。遗传进化树上,8个分离株与国内外参考vvIBDV同处于一个大分支,与疫苗株和经典强毒株的距离较远,8个分离株与中国内地毒株SD1/97的亲缘关系最近。研究表明,广西仍然存在vvIBDV的流行。 展开更多
关键词 传染性 超强 RT—PCR vp2基因高变区
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传染性法氏囊病病毒中国超强毒株Harbin-1基因组A节段全长cDNA的连接 被引量:1
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作者 黄广明 姜丽琼 +1 位作者 孙安赛 袁克湖 《动物医学进展》 CSCD 2002年第3期51-52,共2页
本研究利用单酶切位点 Sal消化传染性法氏囊病病毒中国超强毒株 Harbin-1基因组 A节段的上段和下段克隆 p GEM-T-P1 2和p GEM-T-P3 4,经过去磷酸化以后 ,再用连接酶将上下段连接起来。酶切和测序鉴定结果表明 ,我们得到了全长的 IBDV基... 本研究利用单酶切位点 Sal消化传染性法氏囊病病毒中国超强毒株 Harbin-1基因组 A节段的上段和下段克隆 p GEM-T-P1 2和p GEM-T-P3 4,经过去磷酸化以后 ,再用连接酶将上下段连接起来。酶切和测序鉴定结果表明 ,我们得到了全长的 IBDV基因组 A节段编码区c DNA克隆。本研究结果为以后的工作奠定了基础。 展开更多
关键词 传染性法氏囊 中国超强 Harbin-1基因 A节段 全长CDNA 连接
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鸡传染性法氏囊病病毒分离鉴定及其VP2基因高变区序列分析 被引量:3
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作者 侯宏艳 潘孝成 +4 位作者 赵瑞宏 张丹俊 戴银 胡晓苗 朱传民 《国外畜牧学(猪与禽)》 2012年第5期63-66,共4页
利用SPF鸡胚培养法,自安徽两个不同鸡场分离到2株传染性法氏囊病病毒(IBDV),分别命名为AH01和AH02。为了解其致病特性,进行了鸡胚半数致死量(ELD50)测定、动物回归实验、VP2基因片段的扩增与分析。结果显示,AH01和AH02第一代尿囊膜悬液... 利用SPF鸡胚培养法,自安徽两个不同鸡场分离到2株传染性法氏囊病病毒(IBDV),分别命名为AH01和AH02。为了解其致病特性,进行了鸡胚半数致死量(ELD50)测定、动物回归实验、VP2基因片段的扩增与分析。结果显示,AH01和AH02第一代尿囊膜悬液病毒的ELD50值分别为104.7/0.2 mL和105.3/0.2mL,人工感染致死率分别为60%和73.3%;两分离株间的核苷酸同源性为97.8%,与国内外参考超强毒株的核苷酸同源性为96.0%~97.2%和96.7%~98.6%,提示其VP2高变区序列符合IBDV超强毒株特征。 展开更多
关键词 传染性法氏囊 超强 分离鉴定 vp2基因高变区
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传染性法氏囊病超强毒Gx株的致弱研究 被引量:12
16
作者 曾祥伟 王笑梅 +2 位作者 高宏雷 付朝阳 魏萍 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期140-144,共5页
本研究成功将鸡传染性法氏囊病超强毒vvIBDVGx株通过SPF鸡胚的快速培育及鸡胚成纤维细胞传代致弱 ,揭示了vvIBDV从超强毒力向弱毒力转化过程中 ,其主要结构蛋白VP2基因核苷酸及推导的氨基酸序列的变化规律。对不同代次细胞毒进行了序列... 本研究成功将鸡传染性法氏囊病超强毒vvIBDVGx株通过SPF鸡胚的快速培育及鸡胚成纤维细胞传代致弱 ,揭示了vvIBDV从超强毒力向弱毒力转化过程中 ,其主要结构蛋白VP2基因核苷酸及推导的氨基酸序列的变化规律。对不同代次细胞毒进行了序列分析 ,发现细胞毒在第 7代以前 ,VP2基因序列没有改变 ,与欧洲标准超强毒氨基酸同源性达 10 0 % ;细胞毒第 8代 ,有个别核苷酸发生了改变 ,但没有影响氨基酸序列 ;细胞毒第 9代是变化复杂的过渡代 ;10代毒VP2基因与欧洲标准弱毒Cu_1氨基酸序列同源性达 97% ;以后的细胞适应毒至 2 0代 ,其VP2基因序列不再改变。致病性实验表明原代毒对 4周龄SPF鸡致死率为 6 4 % ,细胞毒第 5代的致死率为 6 0 % ,而 2 0代毒对鸡无致病性 ,在鸡体内连续传代 展开更多
关键词 传染性法氏囊超强 传代致弱 vp2 基因 VVIBDV Gx株
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鸡传染性法氏囊病病毒VP2蛋白研究进展 被引量:19
17
作者 祁小乐 王笑梅 +1 位作者 高玉龙 高宏雷 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期656-660,共5页
鸡传染性法氏囊病(Infectious bursal disease,IBD)是由鸡传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)引起的一种急性、高度接触性传染病,主要危害3~6周龄的雏鸡。该病于1957年首次发现于美国Gumboro地区。50年... 鸡传染性法氏囊病(Infectious bursal disease,IBD)是由鸡传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)引起的一种急性、高度接触性传染病,主要危害3~6周龄的雏鸡。该病于1957年首次发现于美国Gumboro地区。50年来,IBD一直威胁着养禽业的发展。免疫抑制、抗原变异,特别是超强毒株(vvIBDV)的出现,使得该病的防控形势更加严峻。国际兽疫局(OIE)已将IBD列为“影响社会经济的重要疾病”。 展开更多
关键词 传染性法氏囊 vp2蛋白 接触性传染 VIRUS 国际兽疫局 免疫抑制 抗原变异 超强
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传染性法氏囊病病毒超强毒地方株HN01的分离鉴定及分子系统进化分析 被引量:2
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作者 贾赟 张素芳 +4 位作者 周斌 王旭东 王川庆 赵玉军 陈溥言 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2005年第2期32-38,共7页
 用分离的疑为鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)超强毒(vvIBDV)地方分离株HN01,经处理后接种SPF鸡,36h后接种鸡开始发病,发病率为100%,死亡率为70%以上。剖检可见与野外病例相同的病理变化,如肌肉、腺胃、心脏出血,法氏囊水肿且多呈"...  用分离的疑为鸡传染性法氏囊病病毒(IBDV)超强毒(vvIBDV)地方分离株HN01,经处理后接种SPF鸡,36h后接种鸡开始发病,发病率为100%,死亡率为70%以上。剖检可见与野外病例相同的病理变化,如肌肉、腺胃、心脏出血,法氏囊水肿且多呈"紫葡萄"样外观。经血清学试验、毒力试验、鸡胚接种试验、分子生物学和电镜形态学观察均证明该分离物为超强毒株,从而证明河南省鸡群中存在不同于IBDV一般强毒株、经典株和变异株的超强毒株。通过对IBDV不同毒株VP2基因高变区氨基酸序列的聚类分析发现,HN01与华南超强毒株G9201、欧洲超强毒株UK661关系最接近,而与HK46,OKYM,D6948,UPM92-04和KS等毒株关系依次渐远。 展开更多
关键词 传染性法氏囊 超强 分离鉴定 vp2 序列分析 系统进化树
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传染性法氏囊病病毒超强毒株高免卵黄抗体的研制及应用 被引量:2
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作者 陆冰洋 刘华栋 +4 位作者 王彩先 唐娟 詹海杰 李婷婷 詹丽娥 《中国家禽》 北大核心 2014年第1期22-25,共4页
本研究从山西某养殖场分离到一株传染性法氏囊病病毒,经序列比对,发现其与国外经典超强毒株的同源性高达99.6%,除222位点,其他位点均具备超强毒株的序列特征,结合临床发病特征,确定为超强毒株。用此超强毒株研制成传染性法氏囊病灭活疫... 本研究从山西某养殖场分离到一株传染性法氏囊病病毒,经序列比对,发现其与国外经典超强毒株的同源性高达99.6%,除222位点,其他位点均具备超强毒株的序列特征,结合临床发病特征,确定为超强毒株。用此超强毒株研制成传染性法氏囊病灭活疫苗,对健康鸡群三免,当卵黄抗体滴度达到27时,收集鸡蛋,制备高免卵黄抗体,用此高免卵黄抗体治疗IBDV感染鸡群,有效率达100%。 展开更多
关键词 传染性法氏囊 超强 vp2 卵黄抗体
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火鸡传染性法氏囊病病毒YL株VP2基因的克隆和序列比较 被引量:1
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作者 李佩伦 甘甲忠 +4 位作者 陈清 卢景 冯超 黄宇 黎军 《上海畜牧兽医通讯》 2005年第1期24-25,27,共3页
参考GenBank发表的传染性法氏囊病毒 (IBDV)基因组序列 ,设计并合成了一对特异扩增IBDVVP2基因的引物。以广西玉林发病火鸡群分离的IBDV野毒YL株为材料 ,以其基因组为模板利用RT -PCR技术扩增出了 1.5kb的cDNA产物 ,将VP2基因克隆于PUC... 参考GenBank发表的传染性法氏囊病毒 (IBDV)基因组序列 ,设计并合成了一对特异扩增IBDVVP2基因的引物。以广西玉林发病火鸡群分离的IBDV野毒YL株为材料 ,以其基因组为模板利用RT -PCR技术扩增出了 1.5kb的cDNA产物 ,将VP2基因克隆于PUC119质粒上 ,得到重组PUC119质粒。对VP2基因全序列测定、分析和聚类表明 ,YL株与欧洲超强毒株非常相似 ,而与经典强毒株、弱毒株和变异株相差较大。 展开更多
关键词 vp2基因 IBDV 火鸡 传染性法氏囊 传染性法氏囊 超强 鸡群 扩增 克隆 质粒
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