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传染性法氏囊病病毒变异E株对法氏囊上皮形态和机能的影响
1
作者 陈明勇 赵德明 +1 位作者 高齐瑜 乔健 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第5期471-474,共4页
运用传染性法氏囊病病毒变异E株通过泄殖腔人工感染SPF鸡胚和雏鸡 ,观察了法氏囊上皮细胞的形态学变化和机能变化。结果表明 ,病毒感染后 ,法氏囊上皮细胞微绒毛坏死、断裂、脱落 ,上皮细胞之间连接松散 ,表面上皮细胞坏死剥脱 ,形成火... 运用传染性法氏囊病病毒变异E株通过泄殖腔人工感染SPF鸡胚和雏鸡 ,观察了法氏囊上皮细胞的形态学变化和机能变化。结果表明 ,病毒感染后 ,法氏囊上皮细胞微绒毛坏死、断裂、脱落 ,上皮细胞之间连接松散 ,表面上皮细胞坏死剥脱 ,形成火山口样特征性变化 ; 展开更多
关键词 传染性法氏囊病病毒变异e株 鸡 免疫抑制
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传染性法氏囊病病毒变异E株感染鸡细胞凋亡的研究 被引量：5
2
作者 陈明勇 高齐瑜 +1 位作者 杨汉春 乔健 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第2期180-184,共5页
研究了传染性法氏囊病病毒（IBDV）变异E株人工感染28日龄SPF雏鸡后鸡法氏囊淋巴细胞的凋亡情况。电镜观察和DNA电泳分析结果表明,IBDV感染后12～48h,雏鸡法氏囊淋巴细胞出现典型细胞凋亡的形态学特征和生化特征;经流式细胞计检测和荧... 研究了传染性法氏囊病病毒（IBDV）变异E株人工感染28日龄SPF雏鸡后鸡法氏囊淋巴细胞的凋亡情况。电镜观察和DNA电泳分析结果表明,IBDV感染后12～48h,雏鸡法氏囊淋巴细胞出现典型细胞凋亡的形态学特征和生化特征;经流式细胞计检测和荧光染色观察,统计学分析表明,IBDV感染后24～48h,雏鸡法氏囊淋巴细胞凋亡数量显著增加（P<0.05或P<0.01）。试验结果揭示IBDV变异E株人工感染可以诱导雏鸡法氏囊淋巴细胞凋亡。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病病毒 变异e株 细胞凋亡 SPF鸡 免疫抑制
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传染性法氏囊病病毒变异E株对法氏囊生长发育的影响
3
作者 陈明勇 高齐瑜 王彩虹 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第6期440-442,共3页
本试验全面而系统地观察了传染性法氏囊病病毒变异E株 ,通过泄殖腔、鼻腔和尿囊腔接种雏鸡和鸡胚后不同时间法氏囊的组织形态学变化。结果表明 ,病毒感染后 12～ 48小时 ,雏鸡法氏囊粘膜上皮细胞肿胀、坏死脱落 ,淋巴滤泡髓质部及皮质... 本试验全面而系统地观察了传染性法氏囊病病毒变异E株 ,通过泄殖腔、鼻腔和尿囊腔接种雏鸡和鸡胚后不同时间法氏囊的组织形态学变化。结果表明 ,病毒感染后 12～ 48小时 ,雏鸡法氏囊粘膜上皮细胞肿胀、坏死脱落 ,淋巴滤泡髓质部及皮质部淋巴细胞不同程度变性、坏死、排空 ,形成腺管样结构或囊状空泡 ,接毒后 72～ 144小时 ,法氏囊淋巴滤泡淋巴细胞坏死排空 ,淋巴滤泡萎缩 ,网状结缔组织大量增生 ,而胚胎发育时期 ,法氏囊粘膜上皮肿胀变性 ,法氏囊淋巴滤泡形成延迟或不完整 ,淋巴滤泡内淋巴细胞缺乏或空虚。探讨了传染性法氏囊病病毒对胚胎发育时期和雏鸡发育时期法氏囊生长发育的影响。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病病毒 变异株 法氏囊 生长发育 鸡
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鸡传染性法氏囊病毒新型变异株传播性研究
4
作者 王萱 吴雨 +4 位作者 刘星 林丽苗 赵海参 麦凯杰 李群辉 《家禽科学》 2025年第5期42-47,I0014,I0015,共8页
传染性法氏囊病毒(Infectiousbursaldiseasevirus,IBDV)是一种具有dsRNA基因组的高度传染性病毒,主要感染鸡,因死亡率高,造成重大经济损失。由于该毒株具有典型的免疫逃逸,毒株重组新型变体和高毒力毒株的出现导致发病率、死亡率加剧,... 传染性法氏囊病毒(Infectiousbursaldiseasevirus,IBDV)是一种具有dsRNA基因组的高度传染性病毒,主要感染鸡,因死亡率高,造成重大经济损失。由于该毒株具有典型的免疫逃逸,毒株重组新型变体和高毒力毒株的出现导致发病率、死亡率加剧,继发感染并降低疫苗接种的有效性。因此,需要对该毒株流行情况以及临床传播能力进行详细研究。本试验在前期分离的一株新型变异株GD2021-08的基础上,对其水平传播能力进行研究,为临床生产防控提供参考和指导。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病病毒 新型变异株 水平传播
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我国部分地区A2dB1型传染性法氏囊病病毒新型变异株的鉴定及序列分析
5
作者 张文英 于航博 +15 位作者 姜楠 王国栋 牛鑫鑫 黄萌萌 张玉龙 韩金泽 许萌萌 刘长军 王素艳 李凯 高立 崔红玉 张艳萍 陈运通 高玉龙 祁小乐 《中国家禽》 北大核心 2024年第9期194-200,共7页
为持续了解传染性法氏囊病病毒新型变异株(Novel variant infectious bursal disease virus,nVarIBDV)在我国流行情况,研究收集2021—2022年6个主要养禽地区疑似传染性法氏囊病(Infectious bursal disease,IBD)鸡病料,采用RT-PCR进行检... 为持续了解传染性法氏囊病病毒新型变异株(Novel variant infectious bursal disease virus,nVarIBDV)在我国流行情况,研究收集2021—2022年6个主要养禽地区疑似传染性法氏囊病(Infectious bursal disease,IBD)鸡病料,采用RT-PCR进行检测,并对11株IBDV代表毒株的基因组双节段代表区段VP2-HVR和VP1-B-marker进行基因测序及序列分析。结果显示:所检测病料的IBDV阳性率为20.65%(19/92),其中11株IBDV代表毒株均为A2dB1型nVarIBDV。研究表明,nVarIBDV在我国主要养禽地区仍持续流行,而且出现了值得注意的新的突变位点,有必要进行持续的IBDV流行病学监测。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病病毒 新型变异株 A2dB1型 流行病学
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鸡传染性法氏囊病毒新型变异株致病性研究 被引量：1
6
作者 李群辉 吴雨 +4 位作者 刘星 林丽苗 尹丽娟 严专强 王连想 《家禽科学》 2024年第11期21-27,I0008,I0009,共9页
鸡传染性法氏囊病是一种由鸡传染性法氏囊病毒引起的急性、高传播性和致死率的烈性传染病,鸡感染该病毒后会引起法氏囊器官严重萎缩,导致机体产生免疫抑制。近年来IBDV新型变异株在我国开始流行,目前尚无商品化疫苗预防该病,未来可能成... 鸡传染性法氏囊病是一种由鸡传染性法氏囊病毒引起的急性、高传播性和致死率的烈性传染病,鸡感染该病毒后会引起法氏囊器官严重萎缩,导致机体产生免疫抑制。近年来IBDV新型变异株在我国开始流行,目前尚无商品化疫苗预防该病,未来可能成为养禽业健康发展的新威胁。因此,需要进一步研究其流行病学情况和在临床疾病可能发挥着潜在的作用。本研究针对新型变异株GD2021-08进行致病模型建立,为生产防控提供参考和指导。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病毒 新型变异株 致病模型
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传染性法氏囊病毒新型变异株荧光定量RT-PCR检测方法的建立 被引量：1
7
作者 曹雪珍 周庆丰 +4 位作者 王连想 严专强 林丽苗 李薇 李群辉 《广东畜牧兽医科技》 2024年第3期54-59,82,共7页
传染性法氏囊病病毒新型变异株(Novel variant Infectious bursal disease virus,nVarIBDV)给我国养禽业防控法氏囊带来更大的挑战。目前缺乏快速、灵敏的针对nVarIBDV的检测方法。为解决这一问题,该试验根据已发表的nVarIBD的VP2基因序... 传染性法氏囊病病毒新型变异株(Novel variant Infectious bursal disease virus,nVarIBDV)给我国养禽业防控法氏囊带来更大的挑战。目前缺乏快速、灵敏的针对nVarIBDV的检测方法。为解决这一问题,该试验根据已发表的nVarIBD的VP2基因序列,设计了一对引物和一条特异性Taq Man探针,建立了一种nVarIBD的Taq Man荧光定量RT-PCR检测方法,该方法可通过特异性扩增nVarIBD VP2基因来确定样品是否为IBDV新型变异株。通过构建重组质粒pMD18-T-VP2对引物和探针进行灵敏性和重复性试验,以及特异性检测,最后使用该检测方法对临床样品进行验证。荧光定量RT-PCR结果显示灵敏性可达1.32×10^(1)copies/μL,高于常规RT-PCR的100倍。批内和批间重复试验变异系数(CV)均小于0.5%,结果表明该检测方法有良好的重复性与稳定性。该方法与常见禽病毒核酸无交叉反应,说明检测方法具有较好的特异性。综合本研究结果表明,该研究建立的nVarIBD荧光定量RT-PCR检测方法特异性强、灵敏性高、重复性好,可用于临床样品中IBDV新型变异株的监测。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病病毒新型变异株 荧光定量RT-PCR Taq Man探针
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一株麻鸡传染性法氏囊病毒新型变异株的分离鉴定
8
作者 王艳 孙文渊 +2 位作者 朱维 王峰升 孟德坤 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2024年第2期83-88,共6页
近几年,鸡传染性法氏囊病毒新型变异株在我国广泛流行,主要发生于肉鸡,其致病力弱、隐蔽性强但能造成法氏囊严重萎缩。本研究从山东济宁地区临床出现法氏囊萎缩的发病麻鸡中采集法氏囊病料,接种SPF鸡胚进行病毒分离,通过RT-PCR方法进行... 近几年,鸡传染性法氏囊病毒新型变异株在我国广泛流行,主要发生于肉鸡,其致病力弱、隐蔽性强但能造成法氏囊严重萎缩。本研究从山东济宁地区临床出现法氏囊萎缩的发病麻鸡中采集法氏囊病料,接种SPF鸡胚进行病毒分离,通过RT-PCR方法进行病毒鉴定,将分离毒株回归SPF鸡进行致病性试验,同时对其主要抗原基因VP2进行进化分析。结果发现,该毒株能致死鸡胚;对其VP2基因进行测序比对和进化树分析发现,其与近几年的新型变异株基因序列的进化关系较近,同源性为96.1%~99.2%;人工感染SPF鸡第7 d法氏囊即出现较为明显的萎缩,第14 d萎缩更为明显,囊体比显著小于对照组(P<0.01)。本研究分离到的麻鸡源传染性法氏囊病毒JN22株属于新型变异株,能导致SPF鸡法氏囊显著萎缩。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病毒 新型变异株 麻鸡 法氏囊萎缩
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传染性法氏囊病病毒变异株弱毒的培育 被引量：3
9
作者 李建荣 周继勇 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第4期255-258,共4页
传染性法氏囊病病毒 3个变异野毒株 (JD1、JD2 、NB)和 2个经典血清型Ⅰ毒株 (HZ1、SC)直接在鸡胚成纤维细胞上传代 ,均能不同程度地产生细胞病变效应 (CPE)。将 5个毒株 2 1代细胞毒连续回归鸡体 5代 ,除JD1外 ,其余毒株均能不同程度... 传染性法氏囊病病毒 3个变异野毒株 (JD1、JD2 、NB)和 2个经典血清型Ⅰ毒株 (HZ1、SC)直接在鸡胚成纤维细胞上传代 ,均能不同程度地产生细胞病变效应 (CPE)。将 5个毒株 2 1代细胞毒连续回归鸡体 5代 ,除JD1外 ,其余毒株均能不同程度导致法氏囊病变。HZ14 1、JD135、SC38、JD2 37、NB38代细胞毒在鸡体内回归 5代 ,均未见法氏囊的眼观病变和组织学变化 ,囊指数保持稳定 ,说明HZ1、SC、JD1、JD2 、NB 5个毒株分别经CEF传 41、38、2 1～ 35、37、38代 。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病病毒 变异毒株 弱毒株
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传染性法氏囊病病毒变异株弱毒的免疫原性研究 被引量：2
10
作者 李建荣 周继勇 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 2000年第5期347-351,共5页
传染性法氏囊病病毒 (IBDV)JD1、JD2 、NB变异株和HZ1、SC经典株弱毒分别以 30 0 0TCID50 、5 0 0 0TCID50 、10 0 0 0TCID50 、5 0 0 0TCID50 剂量免疫SPF鸡后的攻毒试验结果表明 :IBDV_NB、JD1、HZ1弱毒株可诱导SPF鸡产生很高的血清... 传染性法氏囊病病毒 (IBDV)JD1、JD2 、NB变异株和HZ1、SC经典株弱毒分别以 30 0 0TCID50 、5 0 0 0TCID50 、10 0 0 0TCID50 、5 0 0 0TCID50 剂量免疫SPF鸡后的攻毒试验结果表明 :IBDV_NB、JD1、HZ1弱毒株可诱导SPF鸡产生很高的血清中和抗体 ,具有优良的免疫原性 ,强毒攻击保护率均达 10 0 %。IBDV_NB毒株的最佳免疫剂量为 30 0 0TCID50 ,IBDV_JD1和HZ1毒株的最佳免疫剂量为 5 0 0 0TCID50 。抗体消长规律表明NB毒株一次免疫的有效保护期可达 2 74天 ,JD1和HZ1毒株为 2 展开更多
关键词 传染性法氏囊病病毒 变异株 弱毒疫苗 免疫原性
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传染性法氏囊病病毒变异株二价弱毒疫苗的研究 被引量：1
11
作者 周继勇 李建荣 《浙江大学学报（农业与生命科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期233-236,共4页
选用传染性法氏囊病病毒变异株 JD1、NB、HZ1弱毒株配制成 JN(JD1+NB毒株组成 )和 JH(JD1+HZ1毒株组成 )两种二价弱毒疫苗 .分别在 14日龄首免和 2 8日龄二免 SPF鸡 ,并于一免后 14d、2 1d,二免后 12 d分别用强毒株传染性法氏囊病病毒 (... 选用传染性法氏囊病病毒变异株 JD1、NB、HZ1弱毒株配制成 JN(JD1+NB毒株组成 )和 JH(JD1+HZ1毒株组成 )两种二价弱毒疫苗 .分别在 14日龄首免和 2 8日龄二免 SPF鸡 ,并于一免后 14d、2 1d,二免后 12 d分别用强毒株传染性法氏囊病病毒 (IBDV) BC6 / 85株攻击 ;同时观察疫苗的安全性 .结果表明 JN和 JH疫苗均能诱导 SPF免疫鸡产生优良的免疫应答反应 ,并能使免疫鸡对 IBDV-BC6 / 85株的攻击产生 10 0 %的保护 . JN和 JH疫苗的最佳免疫剂量分别为 6 0 0 0 TCID50 和 10 0 0 展开更多
关键词 鸡 传染性法氏囊病病毒 变异株 二价弱毒疫苗
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我国传染性法氏囊病病毒新型变异株分析研究 被引量：29
12
作者 范林进 王雨龙 +13 位作者 吴甜甜 李凯 姜楠 高玉龙 高立 刘长军 崔红玉 潘青 张艳萍 刘玉凤 孙先本 刘俊启 王笑梅 祁小乐 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第11期1164-1169,共6页
近期非典型传染性法氏囊病(IBD)给养禽业带来了新的威胁,本研究团队率先鉴定发现其病原为IBDV新型变异株。为了解该IBDV新型变异株流行规律和致病特点,本研究对2018年9月~2019年6月分离自黑龙江、辽宁、河北、山东、江苏、浙江、云南7... 近期非典型传染性法氏囊病(IBD)给养禽业带来了新的威胁,本研究团队率先鉴定发现其病原为IBDV新型变异株。为了解该IBDV新型变异株流行规律和致病特点,本研究对2018年9月~2019年6月分离自黑龙江、辽宁、河北、山东、江苏、浙江、云南7个省的32个IBDV代表株的VP2基因高变区进行了遗传演化分析,结果显示,IBDV新型变异株虽然属于变异株分支,但却不同于美国早期变异株,其形成了一个独立的亚群。动物回归试验结果显示,IBDV新型变异株不致死鸡,但造成其中枢免疫器官法氏囊严重萎缩,B淋巴细胞崩解坏死,复制出了非典型IBD的症状。本研究测定了IBDV新型变异株的最低致病剂量,并依据病毒自身特殊性状,首次提出用法氏囊半数萎缩量(BAD50)作为IBDV新型变异株的病毒效价单位。本研究为IBDV新型变异株的流行规律监测和综合防控提供了数据支撑。 展开更多
关键词 非典型传染性法氏囊病 传染性法氏囊病病毒 新型变异株 法氏囊半数萎缩量
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蛋鸡感染传染性法氏囊病病毒新型变异株的鉴定 被引量：13
13
作者 王雨龙 范林进 +9 位作者 姜楠 高玉龙 李凯 高立 刘长军 崔红玉 潘青 张艳萍 王笑梅 祁小乐 《中国家禽》 北大核心 2020年第5期36-40,共5页
传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)新型变异株正在成为养禽业健康发展新的重要威胁。目前报道的IBDV新型变异株均来自肉鸡群的感染。为了解IBDV新型变异株感染蛋鸡的情况,通过对黑龙江省一个疑似非典型IBD发病... 传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)新型变异株正在成为养禽业健康发展新的重要威胁。目前报道的IBDV新型变异株均来自肉鸡群的感染。为了解IBDV新型变异株感染蛋鸡的情况,通过对黑龙江省一个疑似非典型IBD发病蛋鸡群样品进行RT-PCR检测及相关分析,结果显示,引起该鸡群非典型IBD的病原是IBDV新型变异株。这是蛋鸡感染IBDV新型变异株的首次报道,对于更全面了解IBDV新型变异株的流行态势具有重要意义。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病病毒 新型变异株 蛋鸡
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鸡传染性法氏囊病病毒新型变异株衣壳蛋白重组真核表达质粒的免疫原性分析 被引量：2
14
作者 张文英 姜楠 +17 位作者 王雨龙 马广斌 牛鑫鑫 黄萌萌 王国栋 宋桂才 李凯琳 刘爱晶 王素艳 高立 崔红玉 刘长军 李凯 潘青 张艳萍 王笑梅 高玉龙 祁小乐 《中国家禽》 北大核心 2022年第6期31-35,共5页
为了研究针对传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)新型变异株的特异性防控技术,试验通过RT-PCR方法扩增IBDV新型变异株代表毒株SHG19的衣壳蛋白VP2基因,将其克隆至真核表达载体pCAGGS上,获得重组质粒pCA-SHG19 V... 为了研究针对传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)新型变异株的特异性防控技术,试验通过RT-PCR方法扩增IBDV新型变异株代表毒株SHG19的衣壳蛋白VP2基因,将其克隆至真核表达载体pCAGGS上,获得重组质粒pCA-SHG19 VP2,将重组质粒以100μg/只的剂量在聚乙烯亚胺(PEI)的作用下免疫4周龄BALB/c小鼠,用间接免疫荧光(IFA)和ELISA对血清抗体进行检测。结果表明:免疫鼠血清可特异性识别IBDV,ELISA抗体效价高达1∶16000以上,重组真核表达质粒pCA-SHG19 VP2的基因免疫在BALB/c小鼠模型上产生了良好的特异免疫应答。研究结果对IBD的综合防控研究具有参考意义。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病病毒 新型变异株 衣壳蛋白 基因免疫
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传染性法氏囊病毒变异毒株疫苗研究进展
15
作者 李建荣 《预防兽医学进展》 2000年第1期7-10,共4页
关键词 法氏囊病 病毒 变异毒株 疫苗 进展 传染性 鸡
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雪山草鸡感染传染性法氏囊病病毒新型变异株的鉴定 被引量：2
16
作者 姜楠 王雨龙 +11 位作者 张文英 牛鑫鑫 刘长军 高玉龙 高立 崔红玉 李凯 潘青 张艳萍 刘爱晶 王笑梅 祁小乐 《中国动物检疫》 CAS 2021年第5期119-125,共7页
传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)新型变异株正在我国广泛蔓延,给商品肉鸡群和蛋鸡群带来了新的威胁。本研究对一个疑似发生非典型传染性法氏囊病的地方品种雪山草鸡群进行了RT-PCR检测,并对分离的3株毒株进... 传染性法氏囊病病毒(infectious bursal disease virus,IBDV)新型变异株正在我国广泛蔓延,给商品肉鸡群和蛋鸡群带来了新的威胁。本研究对一个疑似发生非典型传染性法氏囊病的地方品种雪山草鸡群进行了RT-PCR检测,并对分离的3株毒株进行了基因测序及序列分析。结果显示,引起该鸡群发病的病原是IBDV新型变异株,属于A2dB1基因型;这3个毒株的VP2高变区编码蛋白上含有IBDV变异株的特征性氨基酸,也具有IBDV新型变异株的独特氨基酸。结果提示,我国地方品种鸡群中也有IBDV新型变异株的流行,现有的部分商品化IBDV疫苗已不能有效预防IBDV新型变异株的流行。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病病毒 新型变异株 A2dB1基因型 雪山草鸡
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传染性法氏囊病病毒疫苗株B87在DF-1细胞和Vero细胞感染性研究 被引量：2
17
作者 潘鹏宇 韩金泽 +7 位作者 殷建豪 谢艾伶 吴凤明 刘鼎阔 孙英峰 尤春雪 于晓雪 李留安 《动物医学进展》 北大核心 2023年第2期41-45,共5页
为比较传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)疫苗株B87对DF-1细胞和Vero细胞易感性,对比了IBDV B87株感染两种细胞后的致细胞病变效应(cytopathic effect,CPE)、病毒基因组dsRNA、半数组织感染量(median tissue cu... 为比较传染性法氏囊病病毒(Infectious bursal disease virus,IBDV)疫苗株B87对DF-1细胞和Vero细胞易感性,对比了IBDV B87株感染两种细胞后的致细胞病变效应(cytopathic effect,CPE)、病毒基因组dsRNA、半数组织感染量(median tissue culture infective dose,TCID 50)水平、病毒载量及VP2基因表达水平。结果显示,IBDV B87株感染后,DF-1细胞CPE程度高于Vero细胞;DF-1细胞病毒基因dsRNA荧光密度高于Vero细胞;DF-1细胞病毒载量荧光密度高于Vero细胞,且DF-1细胞中病毒滴度(105.423±0.03296 TCID 50/0.1 mL)极显著高于Vero细胞中病毒滴度(102.592±0.03428 TCID 50/0.1 mL,P<0.01),VP2基因表达量显著高于Vero细胞(P<0.05)。说明IBDV B87株对DF-1细胞的感染性高于Vero细胞。 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病病毒B87株 DF-1细胞 VeRO细胞 感染性 细胞嗜性
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传染性法氏囊病病毒新型变异株VP2蛋白原核表达及免疫效果评价 被引量：4
18
作者 马景霞 王常伟 +4 位作者 吴洪才 何吉鑫 牛晓赛 段志强 朱杰 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第6期1876-1883,共8页
【目的】构建传染性法氏囊病病毒新型变异株(vaIBDV)VP2蛋白原核表达质粒,并明确VP2蛋白的免疫原性,为vaIBDV亚单位疫苗的开发提供技术支持。【方法】从IBDV新型变异株(BZ)中扩增VP2基因片段,亚克隆至pET-28a(+)载体上构建重组原核表达... 【目的】构建传染性法氏囊病病毒新型变异株(vaIBDV)VP2蛋白原核表达质粒,并明确VP2蛋白的免疫原性,为vaIBDV亚单位疫苗的开发提供技术支持。【方法】从IBDV新型变异株(BZ)中扩增VP2基因片段,亚克隆至pET-28a(+)载体上构建重组原核表达质粒,并转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态细胞,以IPTG诱导表达后通过SDS-PAGE和Western blotting进行鉴定,并以vaIBDV阳性血清进行琼扩效价测定;经Ni-NTA亲和层析纯化及适当浓缩后,制备乳化疫苗并免疫21日龄SPF鸡,通过安全性检验、抗体效价测定及攻毒保护评价进一步验证融合蛋白VP2的免疫原性。【结果】在25℃下以IPTG进行诱导表达,获得的融合蛋白VP2主要呈可溶性表达,大小约40 kD,且表达上清液中的融合蛋白VP2能与vaIBDV阳性血清发生特异性反应,其琼扩效价可达1∶32;经Ni-NTA亲和层析纯化及适当浓缩后,融合蛋白VP2的琼扩效价高达1∶256。以融合蛋白VP2为抗原制备的亚单位疫苗稳定性好,安全性高,无免疫引起的不良反应,剖检也未发现接种部位有明显损伤、局部炎症或疫苗吸收不良等现象。免疫21 d后鸡血清琼扩效价平均值达1∶76.8,而血清抗体效价均在1∶20000以上,表明以融合蛋白VP2制备的疫苗可刺激机体产生强烈的体液免疫反应,抗体阳性率达100%;使用IBDV BZ株攻毒后7 d剖检观察鸡法氏囊病变情况,结果显示免疫组鸡只均未发病,其法氏囊也无明显萎缩现象,即免疫保护率达100%。【结论】通过原核表达系统能成功实现vaIBDV VP2蛋白的可溶性表达,且获得的融合蛋白VP2免疫原性良好,能对vaIBDV提供100%的免疫保护效果,为开发vaIBDV亚单位疫苗提供了技术支持。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病病毒(IBDV) 新型变异株 VP2蛋白 亚单位疫苗 免疫效果
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一株鸡传染性法氏囊病毒变异株的鉴定与致病性 被引量：1
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作者 李娜 陈淑莲 +2 位作者 罗忠宝 黄宝钦 吴异健 《福建农林大学学报（自然科学版）》 CSCD 北大核心 2023年第2期222-231,共10页
近日,在福建省南平市某鸡场发现一株新的鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)流行株,并将其命名为IBDV-FJ02.为了明晰IBDV-FJ02株遗传变异情况和临床致病特征,进行了A节段基因组序列和特征性氨基酸位点的分析、基于A节段和B节段的新型基因型分类... 近日,在福建省南平市某鸡场发现一株新的鸡传染性法氏囊病毒(IBDV)流行株,并将其命名为IBDV-FJ02.为了明晰IBDV-FJ02株遗传变异情况和临床致病特征,进行了A节段基因组序列和特征性氨基酸位点的分析、基于A节段和B节段的新型基因型分类以及对无特定病原体(SPF)鸡致病性的研究,旨在为鸡传染性法氏囊病的防治提供依据.结果显示:IBDV-FJ02株A节段核苷酸序列与早期变异株E的同源性最高,达95.6%,与中国变异株SHG558在同一分支上;IBDV-FJ02株VP2-4-3蛋白氨基酸序列第222位氨基酸为T,第249位为K,第318位为D,参考变异株中仅GLS、E与其一致,位点N^(213)、T^(222)、K^(249)、 D^(318)、E^(323)均符合变异株的特征.根据新型基因型分类方案,显示IBDV-FJ02株属于A2dB1基因型,即IBDV新型变异株类群.致病性测定结果显示:IBDV-FJ02株感染3周龄SPF鸡并不会导致感染鸡只死亡,在感染后21 d内,主要引起鸡只法氏囊的严重萎缩和脾脏的轻微肿大.上述结果表明,IBDV-FJ02株是一种IBDV新型变异株,具有明显的IBDV变异株致病特点. 展开更多
关键词 鸡传染性法氏囊病病毒 序列比对 新型基因型分类 致病性 新型变异株
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肉鸡源传染性法氏囊病新型重排毒株的分离鉴定及遗传进化分析 被引量：2
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作者 左文博 蒲德粉 +3 位作者 王威威 王林果 韦平 何秀苗 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2024年第4期890-896,共7页
[目的]明确云南某肉鸡场疑似传染性法氏囊病病毒(IBDV)感染病例的病原类型及分子特征,以了解IBDV新型重排毒株在肉鸡中的流行情况、分子进化趋势,为制定有效的传染性法氏囊病(IBD)防控和疫苗选用策略提供参考依据。[方法]对疑似IBDV感... [目的]明确云南某肉鸡场疑似传染性法氏囊病病毒(IBDV)感染病例的病原类型及分子特征,以了解IBDV新型重排毒株在肉鸡中的流行情况、分子进化趋势,为制定有效的传染性法氏囊病(IBD)防控和疫苗选用策略提供参考依据。[方法]对疑似IBDV感染的病鸡法氏囊进行研磨处理后,采用巢式RT-PCR进行检测,后将IBDV阳性的法氏囊组织悬液接种于9日龄SPF鸡胚并进行病毒分离,对病毒的vVP2和VP1-b基因扩增并进行遗传变异分析。[结果]成功分离出一株新型IBDV重排毒株(命名为YN-YX221110),接种9日龄SPF鸡胚后,胚体整体呈现弥漫性出血,头、颈以及背部皮肤有出血点。基于vVP2基因序列,分离株YN-YX221110与新型变异株(nvIBDV)参考株的核苷酸相似性最高,为93.2%~97.9%,分离株YN-YX221110的vVP2基因222A特征性氨基酸位点与UK661、HK46等超强毒株(vvIBDV)参考株相同,249K、256V、279N、284A、294L、299S等位点与新型变异株(nvIBDV)参考株中的SHG19相同;在基于vVP2基因的遗传进化树中,分离株YN-YX221110与GX-QZ191002、SHG19等nvIBDV参考株聚为一支,属于A2d分支。基于VP1-b基因序列,分离株YN-YX221110与参考株中的经典毒株(cIBDV)类似株核苷酸相似性最高,为97.8%~98.4%,分离株YN-YX221110的vVP2基因特征性氨基酸位点240D、242D、287T、390L和393E与致弱毒株(attIBDV)参考株中的B87、Gt相同;在基于VP1-b基因序列的系统发育进化树中,分离株YN-YX221110与参考株Gt、B87和CEF94等cIBDV类似株中的attIBDV聚为一支,属于B1a分支。分离株YN-YX221110基因型为A2dB1a。[结论]成功分离得到肉鸡源IBDV分离株YN-YX221110,其A片段来源于nvIBDV,B片段来源于cIBDV类似株中的attIBDV,为新型IBDV重排毒株。 展开更多
关键词 传染性法氏囊病病毒(IBDV) 新型变异株 分离鉴定 基因重排 分子遗传进化
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