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鸡传染性支气管炎病毒M41株全基因组序列测定及致病性分析
1
作者 赵靖玉 李丹 +4 位作者 张兵 张乾义 张锦华 宋亚芬 杨承槐 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第8期3967-3975,共9页
为系统评价传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)M41株传代过后是否生物特性会发生改变,我们将国家兽医微生物菌(毒)种保藏中心1979年从法国引进的IBV M41株(保藏编号CVCC AV1511,简写AV1511-1979)在SPF鸡上连续传代5次... 为系统评价传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)M41株传代过后是否生物特性会发生改变,我们将国家兽医微生物菌(毒)种保藏中心1979年从法国引进的IBV M41株(保藏编号CVCC AV1511,简写AV1511-1979)在SPF鸡上连续传代5次,评估其在基因组变异、排毒规律、组织嗜性等方面的差异。采用Illumina高通量测序方法测序传代前后基因组序列,并建立了IBV攻毒模型,使用RT-PCR、RT-qPCR、气管环纤毛摆动试验等方法从病毒含量、临床症状观察、组织嗜性等方面评价其传代前后差异情况。结果表明AV1511-1979株在SPF鸡上连续传代5代后全基因组未发生变异,但是与其他来源的Mass株在1a、5a、N蛋白区域差异较大;攻毒模型中试验鸡出现精神沉郁、张口呼吸和呼吸啰音等明显临床症状,剖检发现气管环纤毛摆动状况不佳或停止摆动;RT-qPCR结果显示病毒在感染鸡的气管、肺脏、肾脏、腺胃、十二指肠、盲肠扁桃体内均可复制,尤其在气管、肾脏、腺胃中病毒载量较高,传代前后的病毒载量在统计学上无显著差异。研究表明:IBV M41株AV1511-1979株在SPF鸡上传代5代内生物特性稳定,不发生改变,作为IBV灭活疫苗生产用种毒、IBV疫苗检验用标准强毒株,我们的工作为生产种毒代次控制、疫苗评价提供了参考。 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎病毒 M41株 SPF鸡 传代 生物特性
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传染性支气管炎病毒3b基因缺失嵌合活疫苗的安全性与免疫效力研究
2
作者 徐睿 李艳丽 +5 位作者 王倩倩 姜逸 马丽 温建新 李朝阳 周生 《中国家禽》 北大核心 2025年第9期58-65,共8页
为探讨以传染性支气管炎病毒(IBV)H120疫苗株基因组为骨架,辅助蛋白3b基因缺失后的重组嵌合病毒rH120-4/91S1和rH120-4/91S作为传染性支气管炎(IB)疫苗候选株的可行性,试验将嵌合病毒免疫雏鸡进行安全性评估,并通过攻毒保护试验进行有... 为探讨以传染性支气管炎病毒(IBV)H120疫苗株基因组为骨架,辅助蛋白3b基因缺失后的重组嵌合病毒rH120-4/91S1和rH120-4/91S作为传染性支气管炎(IB)疫苗候选株的可行性,试验将嵌合病毒免疫雏鸡进行安全性评估,并通过攻毒保护试验进行有效性评估,同时针对3b基因缺失区域建立能鉴别疫苗株与分离株的检测方法。结果显示:与4/91疫苗株相比,嵌合疫苗对气管纤毛的损伤程度显著降低,且主要经咽喉低水平排毒;所有免疫组对QX型强毒株J151和IBYZ的攻击均能提供有效保护,显著降低气管损伤及咽喉排毒(P≤0.01),但嵌合疫苗株在泄殖腔排毒控制上不及4/91疫苗株,后者在攻毒后3 d显著降低泄殖腔病毒载量,而嵌合疫苗效果不显著(P>0.05);采用针对3b基因缺失区域设计的特异性引物成功建立了区分疫苗株与分离株的RT-PCR检测方法,疫苗株扩增片段为325 bp,野毒株扩增片段约500 bp。研究表明,与4/91疫苗株相比,两株嵌合活疫苗具有更高的安全性及良好的免疫保护效果,并能通过RT-PCR方法将嵌合疫苗株与分离株进行快速区分,为研发安全有效的IB新型活疫苗提供了理论依据。 展开更多
关键词 传染性支气管炎病毒 H120疫苗株 4/91疫苗株 嵌合疫苗
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鸡新城疫La Sota株、鸡传染性支气管炎W_(93)株二联活疫苗研究 Ⅱ.接毒剂量选择试验
3
作者 苗玉和 卫广森 +3 位作者 王文成 康连伟 任秀颖 赵冰开 《中国兽药杂志》 2003年第9期21-23,共3页
　将鸡新城疫LaSota毒种和嗜肾型鸡传染性支气管炎W93毒种分别用生理盐水做适当稀释后,将两种病毒液等量混合,接种于同一SPF鸡胚尿囊腔内。结果表明,IBV、NDV在同一鸡胚内增殖时无互相干扰现象;收获的鸡胚液(LaSota+W93)中NDV、IBV的效... 　将鸡新城疫LaSota毒种和嗜肾型鸡传染性支气管炎W93毒种分别用生理盐水做适当稀释后,将两种病毒液等量混合,接种于同一SPF鸡胚尿囊腔内。结果表明,IBV、NDV在同一鸡胚内增殖时无互相干扰现象;收获的鸡胚液(LaSota+W93)中NDV、IBV的效价分别达到相应单苗水平。 展开更多
关键词 鸡 新城疫病毒LaSota株 传染性支气管炎病毒w93株 二联疫苗 活疫苗 接毒剂量 选择试验
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嗜肾型鸡传染性支气管炎病毒W93疫苗株S1基因的克隆与序列测定
4
作者 王文成 赵宝华 +3 位作者 尹广东 李尚波 卫广森 许崇波 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期357-360,共4页
根据国外已发表的鸡传染性支气管炎病毒 (IBV)S1基因序列 ,设计了两对引物并以RT_PCR特异性扩增出嗜肾型IBVW93疫苗株的S1基因 ,基因产物大小为 1.6 2kb ,与设计相符 ,对其进行序列测定后 ,与标准毒株H5 2、H12 0、M41、BEAU株的S1基因... 根据国外已发表的鸡传染性支气管炎病毒 (IBV)S1基因序列 ,设计了两对引物并以RT_PCR特异性扩增出嗜肾型IBVW93疫苗株的S1基因 ,基因产物大小为 1.6 2kb ,与设计相符 ,对其进行序列测定后 ,与标准毒株H5 2、H12 0、M41、BEAU株的S1基因进行同源性比较 ,结果表明 ,W93株与H5 2、H12 0、M41和BEAU株的核苷酸序列的同源性分别为 96 .8%、97.1%、96 .9%和 96 .8% 。 展开更多
关键词 嗜肾型 鸡 传染性 支气管炎 病毒 w93疫苗株 S1基因 克隆 序列测定
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鸡传染性支气管炎嗜肾性W93株活疫苗研究Ⅱ.NIBVW93株的培育 被引量：4
5
作者 王志伦 肖玉芳 《中国兽药杂志》 北大核心 2000年第2期1-2,共2页
将 NIBV X株病毒 ,在 SPF鸡胚中连续传至 80代 ,雏鸡发病率及死亡率均明显降低 ,传至 90代 ,对易感鸡接种后无不良反应 ,不影响增重 。
关键词 活疫苗 传染性支气管炎 嗜肾性 鸡 w93株培育
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我国鸡传染性支气管炎病毒地方分离株生物学特性的研究 被引量：28
6
作者 贺秀媛 刘胜旺 +3 位作者 王玮 刘丽玲 孔宪刚 王建华 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期349-353,共5页
从我国新疆维吾尔自治区某鸡场发病症状及病理变化疑似鸡传染性支气管炎的病鸡有出血点病变的腺胃组织中分离病毒 ,在 9～ 11日龄SPF鸡胚上连续传代 9次 ,通过病毒对鸡胚的致病作用、病毒在电镜下的形态观察、病毒在鸡胚中的增殖动态变... 从我国新疆维吾尔自治区某鸡场发病症状及病理变化疑似鸡传染性支气管炎的病鸡有出血点病变的腺胃组织中分离病毒 ,在 9～ 11日龄SPF鸡胚上连续传代 9次 ,通过病毒对鸡胚的致病作用、病毒在电镜下的形态观察、病毒在鸡胚中的增殖动态变化、病毒在CEF中的增殖特性、凝集鸡红细胞的特性以及动物回归试验等来研究我国鸡传染性支气管炎病毒地方流行株的生物学特性。结果表明 ,该毒株的第一代尿囊液对鸡胚无肉眼可见的致病作用 ,当继代到第 5代后 ,胚体严重病变 ;电镜观察该病毒为典型的冠状病毒 ;病毒在鸡胚中随着接种病毒时间的延长 ,其效价增高 ,96小时可达到 48小时的 1倍 ,该毒株可在CEF上生长 ,但不能形成明显的蚀斑 ;并且经 1%胰酶处理后可凝集鸡红细胞 ;鸡胚的第 4代尿囊液病毒回归动物体 ,可致鸡病变病死鸡肾脏病变尤为明显 ,呈典型的花斑肾 ,腺胃则未见肉眼可见的病变 ,接种鸡、同居鸡和对照鸡之间NDV疫苗免疫后其HI抗体水平无明显差异 ,但从发病症状来看 。 展开更多
关键词 鸡 传染性 支气管炎 病毒 地方分离株 生物学特性
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鸡传染性支气管炎病毒H120疫苗株全长cDNA感染性克隆的构建 被引量：12
7
作者 周生 戴亚斌 +3 位作者 唐梦君 刘梅 程旭 吕晓娟 《中国家禽》 北大核心 2010年第23期22-26,共5页
根据鸡传染性支气管炎病毒(IBV)H120疫苗株的全基因组序列设计引物,采用RT-PCR方法对其基因组分10个片段进行扩增,并克隆至pMD19-T载体中进行测序。经BsaⅠ限制性内切酶酶切后,采用优化的连接策略将各DNA片段进行连接,获取H120株的基因... 根据鸡传染性支气管炎病毒(IBV)H120疫苗株的全基因组序列设计引物,采用RT-PCR方法对其基因组分10个片段进行扩增,并克隆至pMD19-T载体中进行测序。经BsaⅠ限制性内切酶酶切后,采用优化的连接策略将各DNA片段进行连接,获取H120株的基因组全长cDNA,其5′端具有完整的T7RNA聚合酶启动子的核心序列,3′端具有polyA尾巴结构。通过T7RNA聚合酶体外转录系统合成病毒基因组RNA,转染BHK-21细胞并进行病毒拯救。采用RT-PCR、测序及鸡胚传代对拯救出的病毒株进行鉴定。结果表明成功地从H120株的基因组全长cDNA拯救出病毒H120-R株,为进一步开展该病毒的分子致病机理研究、新型疫苗的研制等奠定了基础。 展开更多
关键词 传染性支气管炎病毒 H120疫苗株 感染性克隆 病毒拯救
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鸡传染性支气管炎病毒变异株的分离及分子特征研究 被引量：7
8
作者 边葶苈 朱林文思 +4 位作者 雷静 任景乐 李烨 周继勇 廖敏 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期960-963,共4页
为了解近年来鸡传染性支气管炎病毒（IBv）分子生物学特征及其变异情况，本研究以最近从山东潍坊某鸡场产蛋鸡卵巢中分离的一株IBV WF2011为研究对象，进行基因2～基因6的基因组测序及分析。结果表明分离株3’端基因组具有典型的IBV基... 为了解近年来鸡传染性支气管炎病毒（IBv）分子生物学特征及其变异情况，本研究以最近从山东潍坊某鸡场产蛋鸡卵巢中分离的一株IBV WF2011为研究对象，进行基因2～基因6的基因组测序及分析。结果表明分离株3’端基因组具有典型的IBV基因编码特征5’．S．3a．3b．E．M．5a．5b．N．3’，S蛋白裂解位点为ⅫRRSRR，，与美国株Gray、Holte、JMK、Conn46和韩国株SNU8067的s蛋白裂解位点相同。同源性比较和系统进化分析显示，WF2011分离株与常见的参考病毒株的同源性普遍较低，s1基因的同源性在49．7％～86．0％之间，并且与LX4、SAlBK和Mass类型的病毒株存在较大的遗传距离。WF2011是一株变异程度比较大的IBV变异株。 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎病毒 变异株 遗传进化分析
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鸡肾型传染性支气管炎病毒陕西地方株的分离与鉴定 被引量：5
9
作者 倪斌 张彦明 +4 位作者 王晶钰 张永国 苏正元 魏中锋 孙裴 《中国动物检疫》 CAS 北大核心 2005年第6期27-28,共2页
对陕北(榆林)、关中(宝鸡市、扶风县)、陕南(洋县)等地鸡场疑似肾型传染性支气管炎病鸡,进行了病毒分离和鉴定。结果分离到4株IBV(定名为YL-04、BJ-04、FF-04、YX-04),并对分离病毒进行了血凝性、血凝抑制性、致病性、鸡胚矮小化等生物... 对陕北(榆林)、关中(宝鸡市、扶风县)、陕南(洋县)等地鸡场疑似肾型传染性支气管炎病鸡,进行了病毒分离和鉴定。结果分离到4株IBV(定名为YL-04、BJ-04、FF-04、YX-04),并对分离病毒进行了血凝性、血凝抑制性、致病性、鸡胚矮小化等生物学特性鉴定。结果发现,分离的4株病毒经1%胰酶处理后的各代病毒尿囊收集液均可凝集鸡红细胞;IBV标准阳性血清可特异性的抑制其凝集性;回归试验可复制出与自然发病相同的病例;病毒传代物有明显的致鸡胚矮小化作用。以上研究结果表明,我们分离到的是鸡传染性支气管炎病毒,临床表现为致肾脏病变的组织嗜性,证明以上地区鸡群发病与肾型传染性支气管炎病毒感染有关。 展开更多
关键词 鸡 肾型传染性支气管炎病毒 陕西地方株 分离 鉴定 传染性支气管炎
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鸡传染性支气管炎病毒肾型毒株血凝特性的研究 被引量：15
10
作者 刘兴友 甘孟侯 杨汉春 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1995年第9期6-9,共4页
本文对鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）澳大利亚Ｔ株和分离的四株肾型毒株（ＢＪ＿（９３０１）、ＢＪ＿（９３０２）、ＴＪ＿（９３０１）、ＨＮ＿（９３０１）株）的血凝特性进行了系统研究。结果表明ＩＢＶ供试毒株经１～２％胰蛋白... 本文对鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）澳大利亚Ｔ株和分离的四株肾型毒株（ＢＪ＿（９３０１）、ＢＪ＿（９３０２）、ＴＪ＿（９３０１）、ＨＮ＿（９３０１）株）的血凝特性进行了系统研究。结果表明ＩＢＶ供试毒株经１～２％胰蛋白酶处理后，能凝集鸡和小鼠红细胞，同一毒株对两种红细胞的凝集价相近，且均能被ＩＢＶ澳大利亚Ｔ株血清所抑制。处理后的ＩＢＶ对鸡红细胞的血凝以缓冲液浓度０．０１～０．０５ＭｐＨ６．０～８．４为宜，对反应温度及稀释液种类无严格要求。ＩＢＶ的血凝活性能耐受３７℃２３天、５６℃１２小时、８０℃１．５小时，但在－３０℃、４℃和室温下保存２个月后，绝大部分丧失血凝活性。ＩＢＶ经０．２％甲醛、０．２％脱氧胆酸钠、２％硼氢化钠、０．０１Ｍ高碘酸钠３７℃灭活２４小时，仍能保持其血凝活性。从ＩＢＶ的血凝活性可被过量胰蛋白酶破坏和氯仿灭活，推断该血凝素可能是由脂质和蛋白质组成。 展开更多
关键词 传染性 支气管炎 病毒 肾型毒株 血凝特性 鸡病
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鸡传染性支气管炎病毒中国地方流行株的分离与鉴定 被引量：12
11
作者 任涛 廖明 +2 位作者 罗开健 曹伟胜 辛朝安 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期362-365,共4页
对海南省和广西省的几个发生呼吸罗音、鸡群全群发病、死亡率不高的疑是鸡传染性支气管炎病 (IB)的鸡群 ,进行了病毒分离和鉴定。结果分离到了 4株IBV分离株 (HaN 1/95、HaN 2 /95、GX 1/98、GX 2 /98) ,并对分离病毒进行了病毒的致病... 对海南省和广西省的几个发生呼吸罗音、鸡群全群发病、死亡率不高的疑是鸡传染性支气管炎病 (IB)的鸡群 ,进行了病毒分离和鉴定。结果分离到了 4株IBV分离株 (HaN 1/95、HaN 2 /95、GX 1/98、GX 2 /98) ,并对分离病毒进行了病毒的致病性、病理组织切片、鸡胚矮小化、对NDV的干扰、电镜特征等生物特性鉴定及IBV基因组特异性 3’末端非编码区的一段保守序列的RT PCR和巢氏PCR鉴定。结果表明 4株IBV分离株 ,均能产生呼吸困难、罗音等临床症状 ;病理组织切片 ,气管、肾脏等组织表现为上皮细胞受损、固有层充血、出血和淋巴细胞的浸润及组织坏死 ;对NDV B1株有明显的干扰作用 ;其各自的传代物都有明显的致鸡胚矮小化作用 ;在透射电镜下观察到典型的冠状病毒粒子 ,多数近似为圆形 ,直径 75～ 2 0 0nm ,有囊膜 ,表面有一圈杆状纤突排列成花冠状 ,符合IBV的典型特征 ;基因组 3’末端UTR的RT PCR和巢氏PCR鉴定 ,4个分离株分别都扩增到 2 93bp和 172bp的特异目的片段 ,通过测序比较毒株间的核苷酸序列同源性在 99%以上 ,与GeneBank中IBVH5 2等标准株的 3’末端UTR的核苷酸序列高度同源。以上结果表明 4株分离病毒都是IBV ,为下一步的IBV分子流行病学的研究打下了基础。 展开更多
关键词 鸡 传染性支气管炎病毒 分离 鉴定 中国地方流行株
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鸡传染性支气管炎病毒DB株核蛋白基因的克隆及在杆状病毒系统中的表达 被引量：3
12
作者 高磊 王玮 +3 位作者 刘胜旺 谷守林 孔宪刚 蔡红 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期168-171,共4页
利用PT_PCR方法扩增鸡传染性支气管炎病毒 (IBV)DB株的核蛋白基因 ,并对其序列进行了测定 ,DB株IBV的核蛋白基因长度为 12 30bp ,编码蛋白由 4 0 9个氨基酸残基组成。与已发表的参考毒株进行核苷酸同源性比较 ,发现DB株与澳大利亚群毒... 利用PT_PCR方法扩增鸡传染性支气管炎病毒 (IBV)DB株的核蛋白基因 ,并对其序列进行了测定 ,DB株IBV的核蛋白基因长度为 12 30bp ,编码蛋白由 4 0 9个氨基酸残基组成。与已发表的参考毒株进行核苷酸同源性比较 ,发现DB株与澳大利亚群毒株的亲缘关系最为密切。同时构建了杆状病毒重组转移载体pBlue_DB_N ,将其与线性化的杆状病毒DNA共转染Sf9昆虫细胞 ,经过 3轮蚀斑纯化和聚合酶链式反应 (PCR)鉴定 ,获得重组杆状病毒rBac_DB_N。SDS_PAGE分析和Westernblot检测的结果表明DB株IBV核蛋白基因在重组杆状病毒感染的Sf9昆虫细胞内获得表达 ,融合蛋白最大表达量占细胞蛋白总量的19 .4 展开更多
关键词 传染性支气管炎 核蛋白 重组杆状病毒 病毒DB株 基因克隆 鸡
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传染性支气管炎病毒地方分离毒株S1基因的RT-PCR方法研究 被引量：3
13
作者 陈德胜 潘杰彦 +3 位作者 贾立群 戴亚斌 蔡宝祥 陈溥言 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2000年第3期85-88,共4页
以传染性支气管炎病毒 (IBV)标准毒株M41为材料 ,根据Genbank公开序列自行合成一对特异引物 ,用于扩增IBV的完整S1基因。建立了针对IBV基因组RNA特点的RT PCR方法。对反应体系中的重要反应物Mg2 +、dNTP和引物浓度进行优化 ,确定其浓度... 以传染性支气管炎病毒 (IBV)标准毒株M41为材料 ,根据Genbank公开序列自行合成一对特异引物 ,用于扩增IBV的完整S1基因。建立了针对IBV基因组RNA特点的RT PCR方法。对反应体系中的重要反应物Mg2 +、dNTP和引物浓度进行优化 ,确定其浓度值分别为 1 5mmol/L ,2 0 0 μmol/L和 40 μmol/L。使用此反应体系对国内IBV地方分离毒株JS/95 / 0 3 ,SD/ 97/ 0 1等 10多个毒株的S1基因进行扩增 ,均扩增出预期 1 7kb的完整S1基因 。 展开更多
关键词 传染性支气管炎病毒 地方分离株 S1基因 鸡
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腺胃病变型鸡传染性支气管炎病毒(IBV-D971株)致弱的研究 被引量：3
14
作者 荣骏弓 谷守林 +3 位作者 胡守萍 王成梅 付德霞 曲亚美 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期466-469,共4页
将IBV_D971株病毒在SPF鸡胚上连续传至 12 0代 ,培育出了一株毒力明显减弱 ,并且具有良好免疫原性的腺胃病变型鸡传染性支气管炎病毒弱毒株 (IBV_D971株 )。IBV_D971F10 5代毒力明显下降 ,以 10 9.2 5EID50 接种 1日龄SPF鸡 5 / 5无不... 将IBV_D971株病毒在SPF鸡胚上连续传至 12 0代 ,培育出了一株毒力明显减弱 ,并且具有良好免疫原性的腺胃病变型鸡传染性支气管炎病毒弱毒株 (IBV_D971株 )。IBV_D971F10 5代毒力明显下降 ,以 10 9.2 5EID50 接种 1日龄SPF鸡 5 / 5无不良反应。IBV_D971F10 5代毒连续通过 1日龄SPF鸡体 5代 ,未见毒力返强。以 10 3EID50 免疫 1日龄SPF鸡 ,攻毒后 5 / 5保护 ,对照 5 / 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎病毒 腺胃病变型 弱毒株 致弱
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鸡传染性支气管炎病毒HN_(99)株血清学和免疫学特性的研究 被引量：4
15
作者 高文明 崔保安 +2 位作者 李新生 魏战勇 徐端红 《中国畜牧兽医》 CAS 2007年第9期81-83,共3页
在鸡胚肾细胞上对HN99株病毒进行了克隆纯化,经检测无外源病原污染。应用血清交叉中和试验确定了IBVHN99株的血清型,并用免疫保护试验进行了验证,结果证明HN99株与T株属同一血清型,与TJ、SD、湖北等地方分离株有一定的相关性。不同免疫... 在鸡胚肾细胞上对HN99株病毒进行了克隆纯化,经检测无外源病原污染。应用血清交叉中和试验确定了IBVHN99株的血清型,并用免疫保护试验进行了验证,结果证明HN99株与T株属同一血清型,与TJ、SD、湖北等地方分离株有一定的相关性。不同免疫剂量的效力试验结果表明用0.2 ml剂量的HN99灭活苗接种试验鸡,能够对HN99攻毒提供100%的保护,证明HN99株具有良好的免疫原性。 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎病毒 HN99株 血清型 免疫原性
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鸡传染性支气管炎病毒上海地方分离株的RT-PCR快速检测 被引量：4
16
作者 孙涛 王欣 陆苹 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第4期368-371,共4页
根据已报道的鸡传染性支气管炎病毒 (IBV)基因序列设计了 1对可用于扩增不同病毒株N基因片段的引物 ,得到了预期的 438bp长的产物 ,并将此RT PCR方法与鸡胚盲传法结合用于分离、检测IBV。分离病毒的扩增条带经纯化和回收以后 ,克隆到pMD... 根据已报道的鸡传染性支气管炎病毒 (IBV)基因序列设计了 1对可用于扩增不同病毒株N基因片段的引物 ,得到了预期的 438bp长的产物 ,并将此RT PCR方法与鸡胚盲传法结合用于分离、检测IBV。分离病毒的扩增条带经纯化和回收以后 ,克隆到pMD18 T质粒载体中。在对插入片段进行序列测定后 ,我们将测序结果与已发表的IBVN基因序列进行了比较 ,证实具有极高的同源性 ,表明分离的是IBV。据此建立起一种更加快速、有效的分离、鉴定IBV的方法。 展开更多
关键词 IBV N基因 RT-PCR 序列测定 分离株 分子生物学技术 鸡 传染性支气管炎病毒
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鸡传染性支气管炎病毒HN99株S1基因的克隆与序列测定 被引量：4
17
作者 陈红英 崔保安 +2 位作者 曹素芳 牛春玲 范成英 《动物医学进展》 CSCD 2004年第6期72-74,共3页
根据基因库中收录的鸡传染性支气管炎病毒 (IBV)S1基因的序列 ,设计了一对引物并采用RT -PCR扩增了鸡传染性支气管炎病毒HN99株的S1基因 ,扩增产物进行了克隆、测序 ,获得了IBVHN99株S1基因片段 ,其大小为1 739bp(含前导序列 ) ,其核苷... 根据基因库中收录的鸡传染性支气管炎病毒 (IBV)S1基因的序列 ,设计了一对引物并采用RT -PCR扩增了鸡传染性支气管炎病毒HN99株的S1基因 ,扩增产物进行了克隆、测序 ,获得了IBVHN99株S1基因片段 ,其大小为1 739bp(含前导序列 ) ,其核苷酸序列与H1 2 0、H52、M41、Gray、Holte的S1基因核苷酸序列同源性较低 ,分别为 79.1 %,79.2 %,77.3%,77.8%,79 .4%,有大量的点突变并伴有基因插入和缺失 ;IBVHN99株的S1基因推导的氨基酸与H1 2 0、H52、M41、Gray、Holte株氨基酸的同源性分别为80 .1 %,79.9%,79.5%,78.5%,78.5%,经S1基因系统进化分析 ,提示IBVHN99株与其它各毒株的亲缘关系较远 。 展开更多
关键词 鸡 传染性支气管炎病毒 HN99株 S1基因 基因克隆 序列测定
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鸡传染性支气管炎病毒合肥分离株S1基因序列及致病性分析 被引量：2
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作者 胡晓苗 盛豪 +5 位作者 郑忠毅 卞希一 张丹俊 周继勇 廖敏 潘孝成 《中国动物传染病学报》 CAS 北大核心 2021年第6期22-27,共6页
从安徽合肥一养殖户送检的临床样品中分离到一株鸡传染性支气管炎病毒,命名为HF200702。分离株在鸡胚盲传3代过程中可引起典型的侏儒胚现象;基于分离株S1基因序列对毒株进行分型结果显示,分离株属于目前流行的QX型,与H120、M41、4/91、Q... 从安徽合肥一养殖户送检的临床样品中分离到一株鸡传染性支气管炎病毒,命名为HF200702。分离株在鸡胚盲传3代过程中可引起典型的侏儒胚现象;基于分离株S1基因序列对毒株进行分型结果显示,分离株属于目前流行的QX型,与H120、M41、4/91、QX等疫苗株的同源性分别为76.1%、75.6%、78.3%、95.0%;用分离株第10代鸡胚尿囊液感染1日龄SPF雏鸡,对雏鸡的致死率为41.6%,感染鸡出现精神沉郁、张口呼吸、气管啰音等临床症状以及气管纤毛摆动停滞、肾脏肿大、尿酸盐沉积等病理变化。感染鸡从感染后第2 d开始持续向外界排毒直至感染后28 d。该研究数据表明,从安徽合肥某养鸡场疑似发生传染性支气管炎的鸡群中分离到QX型的IBV,该毒株对雏鸡有较强的致病作用,研究结果为了解该地区IBV的流行情况提供了参考数据。 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎病毒 合肥分离株 S1基因序列分析 致病性
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鸡传染性支气管炎病毒沈阳分离株组织嗜性的研究 被引量：3
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作者 沈国顺 刘丽霞 +2 位作者 孙家猛 刘春季 程刚 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2002年第7期17-18,共2页
关键词 鸡 传染性支气管炎病毒 沈阳分离株 组织嗜性
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传染性支气管炎病毒M_(41)株种子批的建立 被引量：2
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作者 王新卫 贾文科 +1 位作者 王泽霖 孙好学 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第9期3663-3664,3729,共3页
[目的]为生产鸡传染性支气管炎疫苗奠定基础。[方法]在研究制备鸡传染性支气管炎疫苗所用毒种的毒力、免疫原性、保存期等的基础上,测定4种来源的传染性支气管炎病毒M41株的50%鸡胚感染量(EID50),选取滴度较高病毒作为毒种,建立传染性... [目的]为生产鸡传染性支气管炎疫苗奠定基础。[方法]在研究制备鸡传染性支气管炎疫苗所用毒种的毒力、免疫原性、保存期等的基础上,测定4种来源的传染性支气管炎病毒M41株的50%鸡胚感染量(EID50),选取滴度较高病毒作为毒种,建立传染性支气管炎病毒M41株种子批,并测定其毒力。[结果]含毒尿囊液在冻干前后对鸡胚的毒力不变。毒力试验结果表明该毒的毒力中等,可为雏鸡提供保护。M41株种毒的EID50和免疫原性在7代内无变化。湿毒在-15℃保存半年以内,其毒价基本不变。种子批建立后未受到细菌及其他微生物的污染。[结论]该种子批可以用于生产鸡传染性支气管炎疫苗。 展开更多
关键词 传染性支气管炎病毒M41株 种子批 建立
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