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鸡传染性支气管炎病毒M41株全基因组序列测定及致病性分析
1
作者 赵靖玉 李丹 +4 位作者 张兵 张乾义 张锦华 宋亚芬 杨承槐 《畜牧兽医学报》 北大核心 2025年第8期3967-3975,共9页
为系统评价传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)M41株传代过后是否生物特性会发生改变,我们将国家兽医微生物菌(毒)种保藏中心1979年从法国引进的IBV M41株(保藏编号CVCC AV1511,简写AV1511-1979)在SPF鸡上连续传代5次... 为系统评价传染性支气管炎病毒(infectious bronchitis virus,IBV)M41株传代过后是否生物特性会发生改变,我们将国家兽医微生物菌(毒)种保藏中心1979年从法国引进的IBV M41株(保藏编号CVCC AV1511,简写AV1511-1979)在SPF鸡上连续传代5次,评估其在基因组变异、排毒规律、组织嗜性等方面的差异。采用Illumina高通量测序方法测序传代前后基因组序列,并建立了IBV攻毒模型,使用RT-PCR、RT-qPCR、气管环纤毛摆动试验等方法从病毒含量、临床症状观察、组织嗜性等方面评价其传代前后差异情况。结果表明AV1511-1979株在SPF鸡上连续传代5代后全基因组未发生变异,但是与其他来源的Mass株在1a、5a、N蛋白区域差异较大;攻毒模型中试验鸡出现精神沉郁、张口呼吸和呼吸啰音等明显临床症状,剖检发现气管环纤毛摆动状况不佳或停止摆动;RT-qPCR结果显示病毒在感染鸡的气管、肺脏、肾脏、腺胃、十二指肠、盲肠扁桃体内均可复制,尤其在气管、肾脏、腺胃中病毒载量较高,传代前后的病毒载量在统计学上无显著差异。研究表明:IBV M41株AV1511-1979株在SPF鸡上传代5代内生物特性稳定,不发生改变,作为IBV灭活疫苗生产用种毒、IBV疫苗检验用标准强毒株,我们的工作为生产种毒代次控制、疫苗评价提供了参考。 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎病毒 m41株 SPF鸡 传代 生物特性
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表面展示鸡传染性支气管炎病毒M41株S1蛋白的重组假型杆状病毒的构建
2
作者 陈筱薇 樊惠英 +4 位作者 林文耀 程晓亮 叶昱 陈春丽 廖明 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第3期398-402,共5页
以鸡传染性支气管炎病毒M41毒株基因序列为模板,利用PCR方法扩增膜定位信号缺失的S1基因(dS1),将其亚克隆入杆状病毒表面展示质粒pBACsurf-1中,再次将S1及gp64的基因片段克隆到杆状病毒转移质粒pFastBacTMDual,得到重组质粒pFastBac-gp6... 以鸡传染性支气管炎病毒M41毒株基因序列为模板,利用PCR方法扩增膜定位信号缺失的S1基因(dS1),将其亚克隆入杆状病毒表面展示质粒pBACsurf-1中,再次将S1及gp64的基因片段克隆到杆状病毒转移质粒pFastBacTMDual,得到重组质粒pFastBac-gp64-dS1.将该重组质粒转化到DH10Bac感受态细胞中,获得重组穿梭载体Bacmid-gp64-dS1,提取重组Bacmid质粒,以PCR验证其正确性.将阳性重组Bacmid质粒利用脂质体转染Sf9昆虫细胞,获得重组杆状病毒BV-dS1.间接免疫荧光试验表明,该重组杆状病毒可以Sf9昆虫细胞膜表达鸡传染性支气管炎病毒S1蛋白. 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎病毒 m41 表面展示 S1蛋白 重组杆状病毒
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鸡传染性支气管炎病毒M41株鸡胚增殖工艺研究
3
作者 史爱华 赵蕾 +7 位作者 李林 张建伟 沈佳 习硕 姜北宇 彭湃 阮继湘 章振华 《中国家禽》 北大核心 2021年第8期106-110,共5页
为研究鸡传染性支气管炎病毒(IBV)M41标准毒株在鸡胚上的最佳生产工艺,试验用IBV M41株分别以不同剂量接种同一胚龄不同鸡胚、不同胚龄普通鸡胚,以及IBV M41株接种普通鸡胚后不同培养时间收获鸡胚尿囊液,比较不同培养条件下制备病毒液... 为研究鸡传染性支气管炎病毒(IBV)M41标准毒株在鸡胚上的最佳生产工艺,试验用IBV M41株分别以不同剂量接种同一胚龄不同鸡胚、不同胚龄普通鸡胚,以及IBV M41株接种普通鸡胚后不同培养时间收获鸡胚尿囊液,比较不同培养条件下制备病毒液的产量及病毒效价。结果显示:IBV M41株接种无传染性支气管炎病毒母源抗体的SPF鸡胚最佳病毒接种剂量为104.5EID50,接种含有IBV母源抗体的普通鸡胚最佳病毒接种剂量为105.1EID50,最佳接种胚龄为11日胚龄,最佳收毒时间为48 h。按照此工艺制备疫苗,免疫SPF鸡,IBV抗体效价均符合规程标准。研究结果为用鸡胚高效、大量生产IBV M41株病毒抗原进而生产合格的IB疫苗提供了数据支持。 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎病毒 m41株 鸡胚 增殖工艺 病毒效价
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鸡传染性支气管炎病毒M41株毒种保存期试验
4
作者 孙淼 李岭 +3 位作者 李启红 李慧姣 李俊平 杨承槐 《中国兽药杂志》 北大核心 2015年第8期7-9,共3页
对保存于中国兽医微生物菌种保藏管理中心的4个不同年代(1991年4月、1996年6月、2001年1月、2006年12月)冻干的鸡传染性支气管炎病毒(IBV)M41株毒种进行了对雏鸡的毒力和病毒含量测定试验,结果表明:4个不同保存年代的IBV M41株毒种均能... 对保存于中国兽医微生物菌种保藏管理中心的4个不同年代(1991年4月、1996年6月、2001年1月、2006年12月)冻干的鸡传染性支气管炎病毒(IBV)M41株毒种进行了对雏鸡的毒力和病毒含量测定试验,结果表明:4个不同保存年代的IBV M41株毒种均能使雏鸡100%出现鸡传染性支气管炎典型症状,病毒含量均≥10^(6.0)EID_(50)/0.1 mL。其中一支毒种在-70℃以下保存22年11个月,其毒力和病毒含量均符合《中华人民共和国兽用生物制品规程》(二○○○年版)规定,能够满足检验需求。本试验为探寻IBV M41株毒种更加合理的保存期提供了参考。 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎病毒 m41株 毒力 保存期
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鸡传染性支气管炎病毒M41株和Conn株的血清交叉血凝抑制试验 被引量：2
5
作者 蒋国胜 阮武营 +6 位作者 马魁芳 陈云杰 吴倩 徐凌松 许岩 左志军 崔保安 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2012年第2期209-211,共3页
本试验用系统血凝抑制(HI)交叉试验,对鸡传染性支气管炎病毒M41株和Conn株进行抗体区分。结果表明,M41株和Conn株标准抗原与M41阳性血清HI抗体效价在免疫后21d分别为8log2、5log2,相差3log2;免疫后28d分别为8log2、5log2,相差3log2;免疫... 本试验用系统血凝抑制(HI)交叉试验,对鸡传染性支气管炎病毒M41株和Conn株进行抗体区分。结果表明,M41株和Conn株标准抗原与M41阳性血清HI抗体效价在免疫后21d分别为8log2、5log2,相差3log2;免疫后28d分别为8log2、5log2,相差3log2;免疫后35d分别为8log2、5log2,相差3log2。M41株和Conn株标准抗原与Conn阳性血清HI抗体效价在免疫后21d分别为4log2、8log2,相差4;免疫后28d分别为4log2、8log2,相差4log2;免疫后35d分别为4log2、9log2,相差5log2。因此,用血清HI交叉试验能够将抗M41株和Conn株抗体区分开来。 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎病毒 m41株 Conn株 抗体区分
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不同来源鸡传染性支气管炎病毒M41株病毒特性的分析比较 被引量：2
6
作者 张喜美 梁贤 +4 位作者 刘晓倩 郑丛丛 于春梅 王飞 胡晓明 《家禽科学》 2021年第1期21-24,共4页
为了比较2株不同来源的鸡传染性支气管炎病毒(M41)毒株的生物学特性、免疫原性及S1基因同源性。将TONG-IBV和MOU-IBV分别接种10日龄SPF鸡胚,观察鸡胚病变特点、计算病毒含量(EID50)、制备灭活疫苗进行免疫抗体效价检测,进行S1基因测序... 为了比较2株不同来源的鸡传染性支气管炎病毒(M41)毒株的生物学特性、免疫原性及S1基因同源性。将TONG-IBV和MOU-IBV分别接种10日龄SPF鸡胚,观察鸡胚病变特点、计算病毒含量(EID50)、制备灭活疫苗进行免疫抗体效价检测,进行S1基因测序分析。试验结果表明:接种TONG-IBV株后鸡胚出血较严重,蜷缩程度较轻,接种MOU-IBV的鸡胚呈典型的蜷缩状;MOU-IBV组抗体效价高于TONG-IBV组抗体效价;同源性分析结果显示,MOU株S1与M41参考株S1(GenBank序列号MK937830.1)的同源性为99.7%,高于TONG株S1与M41参考株S1的同源性99.0%。以上结果显示,不同来源M41疫苗株的病毒特性出现了多样性变化。 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎病毒 m41疫苗株 病毒特性
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传染性支气管炎病毒3b基因缺失嵌合活疫苗的安全性与免疫效力研究
7
作者 徐睿 李艳丽 +5 位作者 王倩倩 姜逸 马丽 温建新 李朝阳 周生 《中国家禽》 北大核心 2025年第9期58-65,共8页
为探讨以传染性支气管炎病毒(IBV)H120疫苗株基因组为骨架,辅助蛋白3b基因缺失后的重组嵌合病毒rH120-4/91S1和rH120-4/91S作为传染性支气管炎(IB)疫苗候选株的可行性,试验将嵌合病毒免疫雏鸡进行安全性评估,并通过攻毒保护试验进行有... 为探讨以传染性支气管炎病毒(IBV)H120疫苗株基因组为骨架,辅助蛋白3b基因缺失后的重组嵌合病毒rH120-4/91S1和rH120-4/91S作为传染性支气管炎(IB)疫苗候选株的可行性,试验将嵌合病毒免疫雏鸡进行安全性评估,并通过攻毒保护试验进行有效性评估,同时针对3b基因缺失区域建立能鉴别疫苗株与分离株的检测方法。结果显示:与4/91疫苗株相比,嵌合疫苗对气管纤毛的损伤程度显著降低,且主要经咽喉低水平排毒;所有免疫组对QX型强毒株J151和IBYZ的攻击均能提供有效保护,显著降低气管损伤及咽喉排毒(P≤0.01),但嵌合疫苗株在泄殖腔排毒控制上不及4/91疫苗株,后者在攻毒后3 d显著降低泄殖腔病毒载量,而嵌合疫苗效果不显著(P>0.05);采用针对3b基因缺失区域设计的特异性引物成功建立了区分疫苗株与分离株的RT-PCR检测方法,疫苗株扩增片段为325 bp,野毒株扩增片段约500 bp。研究表明,与4/91疫苗株相比,两株嵌合活疫苗具有更高的安全性及良好的免疫保护效果,并能通过RT-PCR方法将嵌合疫苗株与分离株进行快速区分,为研发安全有效的IB新型活疫苗提供了理论依据。 展开更多
关键词 传染性支气管炎病毒 H120疫苗株 4/91疫苗株 嵌合疫苗
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传染性支气管炎病毒M_(41)株种子批的建立 被引量：2
8
作者 王新卫 贾文科 +1 位作者 王泽霖 孙好学 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2008年第9期3663-3664,3729,共3页
[目的]为生产鸡传染性支气管炎疫苗奠定基础。[方法]在研究制备鸡传染性支气管炎疫苗所用毒种的毒力、免疫原性、保存期等的基础上,测定4种来源的传染性支气管炎病毒M41株的50%鸡胚感染量(EID50),选取滴度较高病毒作为毒种,建立传染性... [目的]为生产鸡传染性支气管炎疫苗奠定基础。[方法]在研究制备鸡传染性支气管炎疫苗所用毒种的毒力、免疫原性、保存期等的基础上,测定4种来源的传染性支气管炎病毒M41株的50%鸡胚感染量(EID50),选取滴度较高病毒作为毒种,建立传染性支气管炎病毒M41株种子批,并测定其毒力。[结果]含毒尿囊液在冻干前后对鸡胚的毒力不变。毒力试验结果表明该毒的毒力中等,可为雏鸡提供保护。M41株种毒的EID50和免疫原性在7代内无变化。湿毒在-15℃保存半年以内,其毒价基本不变。种子批建立后未受到细菌及其他微生物的污染。[结论]该种子批可以用于生产鸡传染性支气管炎疫苗。 展开更多
关键词 传染性支气管炎病毒m41株 种子批 建立
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鸡传染性支气管炎病毒中国地方分离株M基因的分子特征 被引量：19
9
作者 刘胜旺 贺秀瑗 +2 位作者 孔宪刚 王玮 童光志 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第6期404-407,共4页
本实验根据已经发表的鸡传染性支气管炎病毒 (IBV)M蛋白基因序列设计并合成一对引物 ,利用RT_PCR扩增得到了IBV新疆分离株LX4株 (HA价为 2 7)M基因 678bp的片段 ,将该片段克隆到PUC18载体上 ,通过对所得到的重组质粒进行酶切分析、PCR鉴... 本实验根据已经发表的鸡传染性支气管炎病毒 (IBV)M蛋白基因序列设计并合成一对引物 ,利用RT_PCR扩增得到了IBV新疆分离株LX4株 (HA价为 2 7)M基因 678bp的片段 ,将该片段克隆到PUC18载体上 ,通过对所得到的重组质粒进行酶切分析、PCR鉴定 ,证明得到了含有目的基因片段的阳性重组质粒。采用Sanger’s双脱氧末端终止法对插入片段进行核苷酸序列测定 ,获得了IBV_LX4株M基因的核苷酸序列 ,利用DNASIS分析软件 ,将它与GENBANK中发表的 15株国外参考毒株相比较 ,发现核苷酸的同源性 (除D14 66和DE0 72外 )为 85 % ～92 % ,氨基酸的同源性为 83 % ～92 % ,与国内参考株 (H5 2_GD)相比分别为 90 %和 92 % ,确证我们得到的克隆片段为IBV -LX4株的M基因。且含有两个糖基化位点 ,9个高度保守的半胱氨酸 ,三个跨膜区域 。 展开更多
关键词 传染性支气管炎病毒 m基因 分子特征 鸡病毒
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鸡传染性支气管炎M_(41)株、T株及四川肾型SAIB_3株病理学比较研究 被引量：2
10
作者 钟妮娜 王红宁 +2 位作者 张化贤 崔恒敏 汪开毓 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 1996年第5期11-13,共3页
鸡传染性支气炎(Infectious Bronchitis,IB)是由传染性支气管炎病毒(IBV)引起的一种急性高度接触传染病,主要侵害鸡的呼吸系统、泌尿系统和生殖系统。60年代以前,人们认为本病主要损害幼鸡的呼吸器官和产蛋母鸡的生殖器官,但是,1962年Wi... 鸡传染性支气炎(Infectious Bronchitis,IB)是由传染性支气管炎病毒(IBV)引起的一种急性高度接触传染病,主要侵害鸡的呼吸系统、泌尿系统和生殖系统。60年代以前,人们认为本病主要损害幼鸡的呼吸器官和产蛋母鸡的生殖器官,但是,1962年Winter-field和Hitcher在美国首次分离出两株能引起鸡肾脏病变的传染性支气管炎病毒(IBV),随后,Cumncing(1963)在澳大利亚也分离到1株肾病型IBV,并命名为澳大利亚T株。此后很多国家均有此病报道。 展开更多
关键词 鸡病 传染性支气管炎 肾型 m41 T SAIB3 病理学
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鸡传染性支气管炎病毒广西株N、M基因的克隆与序列分析 被引量：1
11
作者 屈素洁 施开创 +5 位作者 粟艳琼 胡杰 莫胜兰 张步娴 李军 邹联斌 《中国畜牧兽医》 CAS 北大核心 2015年第12期3119-3125,共7页
为研究鸡传染性支气管炎病毒（IBV）广西流行株的遗传变异情况,本研究从广西发病鸡中分离鉴定了1株IBV。参照GenBank中IBV的核苷酸序列设计2对引物,利用RT-PCR技术对分离毒株的N、M基因进行了克隆、序列测定,并与GenBank中发表的国内外... 为研究鸡传染性支气管炎病毒（IBV）广西流行株的遗传变异情况,本研究从广西发病鸡中分离鉴定了1株IBV。参照GenBank中IBV的核苷酸序列设计2对引物,利用RT-PCR技术对分离毒株的N、M基因进行了克隆、序列测定,并与GenBank中发表的国内外参考毒株进行比对分析。结果显示,N基因序列全长为1 230bp,编码409个氨基酸,M基因序列全长为678bp,编码225个氨基酸。与参考毒株相比,分离株的N基因核苷酸序列同源性为87.2%~93.3%,推导的氨基酸序列同源性为90.0%~94.4%;M基因的核苷酸序列同源性为83.6%~91.0%,推导的氨基酸序列同源性为82.7%~92.9%。在遗传进化树中,本试验分离株Guangxi156株与BJ株和LX4株两个参考株位于同一个分支上,亲缘关系较近,而与其他参考株属于不同的分支,亲缘关系较远。结果表明,本试验分离株是一株新的IBV变异株。 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎病毒 N基因 m基因 基因克隆 序列分析
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5株鸡传染性支气管炎病毒M基因克隆及序列分析
12
作者 施少华 陈珍 +3 位作者 邴国霞 刘祥 刘金华 黄瑜 《福建农业学报》 CAS 2008年第4期342-345,共4页
利用RT-PCR技术成功扩增出5株鸡传染性支气管炎病毒(IBV)分离株M基因全长cDNA,并将其克隆到pGEM-T Easy载体上,获得M基因的重组质粒。序列分析表明,5株IBV分离株间的M基因核苷酸同源性为89.0%～100.0%,与参考毒株核苷酸同源性为85.7%～9... 利用RT-PCR技术成功扩增出5株鸡传染性支气管炎病毒(IBV)分离株M基因全长cDNA,并将其克隆到pGEM-T Easy载体上,获得M基因的重组质粒。序列分析表明,5株IBV分离株间的M基因核苷酸同源性为89.0%～100.0%,与参考毒株核苷酸同源性为85.7%～99.3%;在M蛋白遗传进化树中,5株IBV分离株分居3个群;分离毒株M蛋白的α-螺旋结构主要分布在N端前100个氨基酸残基的肽段区,其他的部分主要是β-折叠和无规则卷曲结构,表明IBV分离株M蛋白在基因序列和二级结构上相对保守。 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎病毒 m基因 序列分析
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鸡传染性支气管炎病毒SC株mRNA5及mRNA6 cDNA分子特征
13
作者 马德星 刘胜旺 李广兴 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2007年第8期6-7,共2页
关键词 鸡传染性支气管炎病毒 分子特征 CDNA SC株 virus 冠状病毒属 冠状病毒科 代表种
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禽传染性支气管炎病毒四川分离株M基因的克隆及真核表达载体构建
14
作者 杨帆 王红宁 +2 位作者 李春 吴琦 周生 《四川畜牧兽医》 2003年第B09期19-19,共1页
膜蛋白是禽传染性支气管炎病毒的主要结构蛋白,可能存在着具有重要免疫作用的抗原决定簇,能诱导细胞介导的免疫反应,但其免疫生物学功能尚不清楚。本研究选择禽传染性支气管炎病毒中国分离株SAIBWJ,通过RT-PCR扩增获得其膜蛋白基因M基... 膜蛋白是禽传染性支气管炎病毒的主要结构蛋白,可能存在着具有重要免疫作用的抗原决定簇,能诱导细胞介导的免疫反应,但其免疫生物学功能尚不清楚。本研究选择禽传染性支气管炎病毒中国分离株SAIBWJ,通过RT-PCR扩增获得其膜蛋白基因M基因并插入到PGEM-T载体中,获得重组质粒PGEM-M,将重组质粒中的克隆片段进行序列测定及分析。对PGEM-M进行双酶切获得M基因片段,克隆到真核表达载体pcDNA3.1+中,通过菌落PCR、双酶切证明获得了M基因的真核表达质粒。利用DNAstar软件将IBVSAIBwj株的膜蛋白基因的核苷酸序列与GenBank中的国内外参考毒株进行比较,其核苷酸序列的同源率为91.6%～98.8%,氨基酸序列的同源率为91.6%～99.6%。糖基化位点的增加和减少对M蛋白的抗原性产生很大的影响。在M蛋白近N端含有两个糖基化位点,第一个跨膜疏水区距离亲水区大约20个氨基酸。SAIBwjM基因核苷酸、氨基酸进化关系可以看出,SAIBwjM与国内外参考株的同源性均较高,因此可能具有交叉保护性抗原,可望用于制备诊断试剂及制备基因工程疫苗。由于IBV变异较大,常规疫苗不能产生完全保护力。在IBV的免疫保护机制中,细胞免疫起着关键的作用,近年来一些研究者已经进行了IBVDNA疫苗的研究,并取得了一定的进展。IBV的S1基因真核表达质粒可同时诱? 展开更多
关键词 禽类 传染性支气管炎病毒 四川分离株 m基因 基因克隆
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喘咳停抗鸡传染性支气管炎病毒H_(52)株和M_(41)株感染的疗效试验 被引量：1
15
作者 薛树山 张喜臣 +2 位作者 刘欣 崔玉君 祝智国 《辽宁畜牧兽医》 2002年第4期1-2,共2页
本研究主要通过喘咳停抗传染性支气管炎病毒H52株（IBVH52）鸡胚感染抑制试验和传染性支气管炎病毒M41株（IBVM41）雏鸡感染治疗试验来了解其对病毒引起的鸡呼吸道感染的疗效。试验I分为A1（IBVH52）、A2（IBVH52+中药煎剂）、A3（中药... 本研究主要通过喘咳停抗传染性支气管炎病毒H52株（IBVH52）鸡胚感染抑制试验和传染性支气管炎病毒M41株（IBVM41）雏鸡感染治疗试验来了解其对病毒引起的鸡呼吸道感染的疗效。试验I分为A1（IBVH52）、A2（IBVH52+中药煎剂）、A3（中药煎剂）和A4（空白）4组,鸡胚接种后120小时,A2组（30％）鸡胚死亡率比A1组（80％）低50％,A3组、A4组全部存活;活胚平均重A2组（6克）明显大于A1组（3.3克）,与A3组（7.9克）和A4组（7.8克）接近。试验Ⅱ分B1（喘咳停）、B2（对照药）和B3（空白）3组,IBVM41株感染鸡治疗3天后,B1组鸡只痊愈,10天后剖检病变不明显;B2组鸡只呼吸道症状减轻,但个别鸡只有继发感染,剖检见呼吸道内有少量粘液,肺脏纹理清晰;B3组鸡死亡3只,呼吸道症状明显,剖检见呼吸道内有大量粘液,肺脏纹理极为明显。以上试验结果表明,喘咳停具有明显的抗呼吸道病毒IBVH52株和M41株感染的作用。 展开更多
关键词 喘咳停 鸡 传染性支气管炎病毒 H52株 m41株 疗效试验 胚重 死亡率
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2株鸡传染性支气管炎病毒的分离鉴定与S1、M和N基因序列分析 被引量：4
16
作者 何家辉 封柯宇 +3 位作者 李鸿鑫 宋才良 张钰坤 谢青梅 《中国兽医杂志》 CAS 北大核心 2021年第1期10-14,共5页
为跟踪了解广东地区鸡传染性支气管炎病流行情况,2019年从广东省清远、惠州两地疑似鸡传染性支气管炎发病鸡群中采集分离到2株传染性支气管炎病毒,并对其进行了鉴定和分析。结果显示,在鸡胚上盲传3代后均出现鸡胚的典型病变,死亡鸡胚全... 为跟踪了解广东地区鸡传染性支气管炎病流行情况,2019年从广东省清远、惠州两地疑似鸡传染性支气管炎发病鸡群中采集分离到2株传染性支气管炎病毒,并对其进行了鉴定和分析。结果显示,在鸡胚上盲传3代后均出现鸡胚的典型病变,死亡鸡胚全身出血明显,未死亡鸡胚发育受阻,呈明显的侏儒胚、蜷缩。将2个分离株分别命名为CK/CH/GD/QY1119和CK/CH/GD/HZ1225,分别测定其半数感染量(EID 50),扩增其S 1、M和N基因核苷酸序列,获得相应的推导氨基酸序列并对其分析。分离株CK/CH/GD/QY1119和CK/CH/GD/HZ1225的EID 50分别为10-7.5/0.1 mL和10-6.75/0.1 mL,2个分离株S 1基因与Mass型等疫苗株同源性为76.2%~82.1%,同源性均较低。与H120疫苗株相比,2个分离株的S 1、M和N基因存在若干氨基酸的差异,2个分离株S 1基因均存在氨基酸的插入,分离株CK/CH/GD/QY1119的M基因存在氨基酸的缺失,分离株CK/CH/GD/HZ1225的M基因存在氨基酸的插入。进化树分析显示,2个分离株分别属于LDT3型分支和QX型分支,均在S 1、M和N基因进化树上的分属上存在差异。结果表明本次分离得到的2个分离株的S 1、M和N基因均存在不同程度变异,在临床防控中应引起重视。本试验为鸡传染性支气管炎的有效防控提供了参考依据。 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎病毒 LDT3型 QX型 S 1基因 m基因 N基因 序列分析
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我国鸡传染性支气管炎病毒地方分离株生物学特性的研究 被引量：28
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作者 贺秀媛 刘胜旺 +3 位作者 王玮 刘丽玲 孔宪刚 王建华 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期349-353,共5页
从我国新疆维吾尔自治区某鸡场发病症状及病理变化疑似鸡传染性支气管炎的病鸡有出血点病变的腺胃组织中分离病毒 ,在 9～ 11日龄SPF鸡胚上连续传代 9次 ,通过病毒对鸡胚的致病作用、病毒在电镜下的形态观察、病毒在鸡胚中的增殖动态变... 从我国新疆维吾尔自治区某鸡场发病症状及病理变化疑似鸡传染性支气管炎的病鸡有出血点病变的腺胃组织中分离病毒 ,在 9～ 11日龄SPF鸡胚上连续传代 9次 ,通过病毒对鸡胚的致病作用、病毒在电镜下的形态观察、病毒在鸡胚中的增殖动态变化、病毒在CEF中的增殖特性、凝集鸡红细胞的特性以及动物回归试验等来研究我国鸡传染性支气管炎病毒地方流行株的生物学特性。结果表明 ,该毒株的第一代尿囊液对鸡胚无肉眼可见的致病作用 ,当继代到第 5代后 ,胚体严重病变 ;电镜观察该病毒为典型的冠状病毒 ;病毒在鸡胚中随着接种病毒时间的延长 ,其效价增高 ,96小时可达到 48小时的 1倍 ,该毒株可在CEF上生长 ,但不能形成明显的蚀斑 ;并且经 1%胰酶处理后可凝集鸡红细胞 ;鸡胚的第 4代尿囊液病毒回归动物体 ,可致鸡病变病死鸡肾脏病变尤为明显 ,呈典型的花斑肾 ,腺胃则未见肉眼可见的病变 ,接种鸡、同居鸡和对照鸡之间NDV疫苗免疫后其HI抗体水平无明显差异 ,但从发病症状来看 。 展开更多
关键词 鸡 传染性 支气管炎 病毒 地方分离株 生物学特性
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鸡传染性支气管炎病毒广西流行株3种主要结构蛋白基因的遗传变异分析 被引量：11
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作者 磨美兰 李孟 +6 位作者 韦平 范文胜 黄柏成 郎亚辉 陈秋英 侯金莲 韦天超 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1138-1146,共9页
为了解鸡传染性支气管炎病毒(IBV)广西流行株的遗传变异情况,应用RT-PCR方法对2004-2007年的7株广西IBV分离株的纤突蛋白S1基因、核(N)蛋白和膜(M)蛋白基因进行扩增、克隆、测序和同源性比较及系统进化分析。结果显示广西IBV分离株S1基... 为了解鸡传染性支气管炎病毒(IBV)广西流行株的遗传变异情况,应用RT-PCR方法对2004-2007年的7株广西IBV分离株的纤突蛋白S1基因、核(N)蛋白和膜(M)蛋白基因进行扩增、克隆、测序和同源性比较及系统进化分析。结果显示广西IBV分离株S1基因存在广泛的基因点突变,部分毒株出现基因插入和缺失,分离株之间氨基酸同源性为74.2%～98.7%;N基因无插入和缺失,但存在基因点突变,分离株之间氨基酸同源性为91.7%～99.3%;M基因存在点突变和插入现象,分离株之间氨基酸同源性为90.7%～98.2%。以疫苗株H120为参照,广西IBV分离株的S1、N和M基因都出现了变异,其中S1基因变异程度最大。7株广西IBV在S1、N和M基因氨基酸序列系统进化树中分别集中在2、3和3个基因群中,其中4株的S1、N和M基因分型结果不一致。结果表明广西IBV分离株的S1、N和M基因已发生变异,广西IBV存在广泛的基因突变、缺失或插入现象。研究的结果提示流行株的遗传变异可能是目前影响疫苗免疫效果的主要原因。 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎病毒 S1基因 N基因 m基因 系统进化分析 变异
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鸡传染性支气管炎病毒H120疫苗株全长cDNA感染性克隆的构建 被引量：12
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作者 周生 戴亚斌 +3 位作者 唐梦君 刘梅 程旭 吕晓娟 《中国家禽》 北大核心 2010年第23期22-26,共5页
根据鸡传染性支气管炎病毒(IBV)H120疫苗株的全基因组序列设计引物,采用RT-PCR方法对其基因组分10个片段进行扩增,并克隆至pMD19-T载体中进行测序。经BsaⅠ限制性内切酶酶切后,采用优化的连接策略将各DNA片段进行连接,获取H120株的基因... 根据鸡传染性支气管炎病毒(IBV)H120疫苗株的全基因组序列设计引物,采用RT-PCR方法对其基因组分10个片段进行扩增,并克隆至pMD19-T载体中进行测序。经BsaⅠ限制性内切酶酶切后,采用优化的连接策略将各DNA片段进行连接,获取H120株的基因组全长cDNA,其5′端具有完整的T7RNA聚合酶启动子的核心序列,3′端具有polyA尾巴结构。通过T7RNA聚合酶体外转录系统合成病毒基因组RNA,转染BHK-21细胞并进行病毒拯救。采用RT-PCR、测序及鸡胚传代对拯救出的病毒株进行鉴定。结果表明成功地从H120株的基因组全长cDNA拯救出病毒H120-R株,为进一步开展该病毒的分子致病机理研究、新型疫苗的研制等奠定了基础。 展开更多
关键词 传染性支气管炎病毒 H120疫苗株 感染性克隆 病毒拯救
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鸡传染性支气管炎病毒变异株的分离及分子特征研究 被引量：7
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作者 边葶苈 朱林文思 +4 位作者 雷静 任景乐 李烨 周继勇 廖敏 《中国预防兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第12期960-963,共4页
为了解近年来鸡传染性支气管炎病毒（IBv）分子生物学特征及其变异情况，本研究以最近从山东潍坊某鸡场产蛋鸡卵巢中分离的一株IBV WF2011为研究对象，进行基因2～基因6的基因组测序及分析。结果表明分离株3’端基因组具有典型的IBV基... 为了解近年来鸡传染性支气管炎病毒（IBv）分子生物学特征及其变异情况，本研究以最近从山东潍坊某鸡场产蛋鸡卵巢中分离的一株IBV WF2011为研究对象，进行基因2～基因6的基因组测序及分析。结果表明分离株3’端基因组具有典型的IBV基因编码特征5’．S．3a．3b．E．M．5a．5b．N．3’，S蛋白裂解位点为ⅫRRSRR，，与美国株Gray、Holte、JMK、Conn46和韩国株SNU8067的s蛋白裂解位点相同。同源性比较和系统进化分析显示，WF2011分离株与常见的参考病毒株的同源性普遍较低，s1基因的同源性在49．7％～86．0％之间，并且与LX4、SAlBK和Mass类型的病毒株存在较大的遗传距离。WF2011是一株变异程度比较大的IBV变异株。 展开更多
关键词 鸡传染性支气管炎病毒 变异株 遗传进化分析
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