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传代培养角膜细胞的染色体遗传变异率分析 被引量:2
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作者 马志敏 金月娥 +2 位作者 任志华 卢珞 陆振虞 《上海交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期76-77,共2页
目的 分析传代培养角膜细胞染色体数目的变异率。方法 选择人角膜上皮细胞(HCE)、牛角膜内皮细胞(BCE)和兔角膜上皮细胞(RCE)细胞,采用直接法制备传代细胞染色体标本,常规Giemsa染色,1000倍光学显微镜下计数分裂相染色体数目... 目的 分析传代培养角膜细胞染色体数目的变异率。方法 选择人角膜上皮细胞(HCE)、牛角膜内皮细胞(BCE)和兔角膜上皮细胞(RCE)细胞,采用直接法制备传代细胞染色体标本,常规Giemsa染色,1000倍光学显微镜下计数分裂相染色体数目,进行核型分析,统计染色体数目变异情况。结果 HCE染色体众数为56—65,为超二倍体;BCE染色体众数为27~34,为亚二倍体;RCE染色体众数为74~88,为超二倍体。与起源细胞相比,以上3种传代细胞染色体数目均发生了改变。结论 该项核型分析为HCE、BCE和RCE的功能研究提供了重要的参考信息。 展开更多
关键词 传代培养细胞 染色体变异 角膜细胞
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人牙周膜成纤维细胞的培养及牵张应变诱导凋亡研究 被引量:3
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作者 仲维广 邓芳成 +2 位作者 胥春 纪舒昱 张富强 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2012年第8期789-792,795,共5页
目的:探讨人牙周膜成纤维细胞的分离、培养及在牵张应变作用下发生早期凋亡的情况。方法:刮取健康人前磨牙牙周膜,进行牙周膜成纤维细胞的分离、培养及生长曲线描绘。经3~4代传代培养后,对细胞加载1%~20%的牵张应变,加载时间分别为30m... 目的:探讨人牙周膜成纤维细胞的分离、培养及在牵张应变作用下发生早期凋亡的情况。方法:刮取健康人前磨牙牙周膜,进行牙周膜成纤维细胞的分离、培养及生长曲线描绘。经3~4代传代培养后,对细胞加载1%~20%的牵张应变,加载时间分别为30min,1h、6h、12h然后通过流式细胞仪检测Annexin V-FITC(异硫氰酸荧光素)及激光扫描共聚焦显微镜进行细胞的早期凋亡鉴定。结果:人牙周膜成纤维细胞传代到12代以后,细胞逐渐呈衰老生状,胞体变大,细胞生长缓慢。人牙周膜成纤维细胞的凋亡率在30min组低于对照组,但两者间无统计学差异。在6h内,人牙周膜成纤维细胞的凋亡情况随加载时间和加载应力的增加而增加(P<0.05)。在12h时所有组的细胞凋亡均减少。结论:人牙周膜成纤维细胞的使用最好在12代以内,尤其是3~4代细胞的活力、增殖能力较好。牵张应变可以诱导细胞发生早期凋亡。 展开更多
关键词 人牙周膜成纤维细胞传代培养早期凋亡牵张应变
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猪流行性腹泻病毒GD-A株的分离鉴定及S基因序列分析 被引量:6
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作者 朱俊 高又文 +3 位作者 张杰 叶昱 廖明 樊惠英 《华南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期21-25,共5页
【目的】在广东省某疑似发生猪流行性腹泻的猪场中,采集病猪的粪便样品,经RT-PCR检测阳性的样品接种于Vero细胞,以分离猪流行性腹泻病毒.【方法】通过在细胞上的连续传代,直至能稳定增殖.并通过RT-PCR对细胞培养物进行特异性片段的检测... 【目的】在广东省某疑似发生猪流行性腹泻的猪场中,采集病猪的粪便样品,经RT-PCR检测阳性的样品接种于Vero细胞,以分离猪流行性腹泻病毒.【方法】通过在细胞上的连续传代,直至能稳定增殖.并通过RT-PCR对细胞培养物进行特异性片段的检测,观察细胞病变(CPE)的发生情况,以及间接免疫荧光(IFA)检测猪流行性腹泻病毒的M蛋白,对病毒进行分离与鉴定.【结果和结论】病毒在盲传5代时能观察到典型病变,传至20代时能在Vero细胞上增殖稳定.RT-PCR、CPE与IFA的结果证明,所分离到的病毒为PEDV,并命名为GD-A株. 展开更多
关键词 猪流行性腹泻病毒 分离 鉴定 M蛋白 S基因 间接免疫荧光 细胞传代培养
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