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多交叉置换扩增结合纳米生物传感器检测伊氏李斯特菌的方法建立
1
作者
李慧
王毅
+1 位作者
王艳
叶长芸
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第7期605-612,共8页
目的应用多交叉置换扩增技术结合纳米生物传感器(multiple cross displacement amplification coupled with gold nanoparticle-based lateral flow biosensor,MCDA-LFB)建立一种快速、特异和灵敏的伊氏李斯特菌(Listeria ivanovii,L.iv...
目的应用多交叉置换扩增技术结合纳米生物传感器(multiple cross displacement amplification coupled with gold nanoparticle-based lateral flow biosensor,MCDA-LFB)建立一种快速、特异和灵敏的伊氏李斯特菌(Listeria ivanovii,L.ivanovii)检测方法,并对该方法进行评价。方法以L.ivanovii种特异性基因smcl为靶标设计引物,对引物进行最佳反应温度、灵敏度和特异性测试,并用模拟样本和实际样本进行评估。结果L.ivanovii-MCDA-LFB的最佳反应温度为64℃。在L.ivanovii和non-L.ivanovii菌种鉴定中,该方法特异性为100%。此外,L.ivanovii-MCDA-LFB在纯培养物和模拟污染粪便样本的灵敏度分别为10 fg/反应和6.8×10^(2) CFU/g。在195份野鼠粪便样本增菌培养物检测中,L.ivanovii-MCDA-LFB检测结果和传统培养法(ISO 11290-1)结果相同,且只需二次增菌液水煮模板即可检出。结论L.ivanovii-MCDA-LFB方法作为一种快速、灵敏和特异的诊断方法可应用于食品、医疗和科研领域。
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关键词
伊氏李斯特菌
多交叉置换扩增
纳米生物传感器
smcl基因
最低检测限
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职称材料
奶牛粪便分离的伊氏李斯特菌伊氏亚种基因组序列测定及其分子特征分析
被引量：
1
2
作者
蒋华英
甘霖
+8 位作者
毛盼
宋泽萱
纪顺师
王怡倩
王艳
徐保红
高伟利
陈峥宏
叶长芸
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第8期624-630,共7页
目的了解某奶牛场奶牛粪便中李斯特菌的携带情况及其分离株的遗传特征。方法用ISO 11290方法分离196份奶牛粪便样本中的李斯特菌,对分离的伊氏李斯特菌进行全基因测序,用MEGA6.0构建系统发育树,网站在线比对分析伊氏李斯特菌株的毒力基...
目的了解某奶牛场奶牛粪便中李斯特菌的携带情况及其分离株的遗传特征。方法用ISO 11290方法分离196份奶牛粪便样本中的李斯特菌,对分离的伊氏李斯特菌进行全基因测序,用MEGA6.0构建系统发育树,网站在线比对分析伊氏李斯特菌株的毒力基因、耐药基因及前噬菌体等。结果196份奶牛场养殖的奶牛粪便样本中有9份样本为李斯特菌阳性,其中3株为伊氏李斯特菌伊氏亚种,6株为英诺克李斯特菌,分离率分别为1.53%和3.06%。3株伊氏李斯特菌伊氏亚种分离株具有包括LIPI-1和LIPI-2在内的绝大部分致病性李斯特菌毒力相关基因,携带一个不完整的前噬菌体及22个耐药相关基因。结论养殖场奶牛粪便中携带伊氏李斯特菌伊氏亚种。对伊氏李斯特菌伊氏亚种分离株的全基因组、毒力基因、耐药基因、前噬菌体基因等遗传特征分析,为进一步分析其致病性提供了参考。
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关键词
伊氏李斯特菌
伊氏
亚种
毒力基因
耐药基因
前噬
菌
体基因
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职称材料
题名
多交叉置换扩增结合纳米生物传感器检测伊氏李斯特菌的方法建立
1
作者
李慧
王毅
王艳
叶长芸
机构
山西医科大学汾阳学院病原生物学与检验教研室
首都儿科研究所实验中心
中国疾病预防控制中心传染病预防控制所
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024年第7期605-612,共8页
基金
国家重大传染病防治科技重大专项(No.2013ZX10004-101)
传染病预防控制国家重点实验室(No.2015SKLID507)
中国疾病预防控制中心传染病预防控制所(No.2016ZZKTB09)联合资助。
文摘
目的应用多交叉置换扩增技术结合纳米生物传感器(multiple cross displacement amplification coupled with gold nanoparticle-based lateral flow biosensor,MCDA-LFB)建立一种快速、特异和灵敏的伊氏李斯特菌(Listeria ivanovii,L.ivanovii)检测方法,并对该方法进行评价。方法以L.ivanovii种特异性基因smcl为靶标设计引物,对引物进行最佳反应温度、灵敏度和特异性测试,并用模拟样本和实际样本进行评估。结果L.ivanovii-MCDA-LFB的最佳反应温度为64℃。在L.ivanovii和non-L.ivanovii菌种鉴定中,该方法特异性为100%。此外,L.ivanovii-MCDA-LFB在纯培养物和模拟污染粪便样本的灵敏度分别为10 fg/反应和6.8×10^(2) CFU/g。在195份野鼠粪便样本增菌培养物检测中,L.ivanovii-MCDA-LFB检测结果和传统培养法(ISO 11290-1)结果相同,且只需二次增菌液水煮模板即可检出。结论L.ivanovii-MCDA-LFB方法作为一种快速、灵敏和特异的诊断方法可应用于食品、医疗和科研领域。
关键词
伊氏李斯特菌
多交叉置换扩增
纳米生物传感器
smcl基因
最低检测限
Keywords
Listeria ivanovii
multiple cross displace-ment amplification
lateral flow biosensor
smcl gene
limit of detection
分类号
R378.99 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
奶牛粪便分离的伊氏李斯特菌伊氏亚种基因组序列测定及其分子特征分析
被引量：
1
2
作者
蒋华英
甘霖
毛盼
宋泽萱
纪顺师
王怡倩
王艳
徐保红
高伟利
陈峥宏
叶长芸
机构
贵州医科大学基础医学院微生物教研室
传染病预防控制国家重点实验室
石家庄市疾病预防控制中心
出处
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020年第8期624-630,共7页
基金
传染病预防控制国家重点实验室项目(No.2015SKLID507)
中国疾病预防控制中心传染病预防控制所自主课题(No.2016ZZKTB09)联合资助。
文摘
目的了解某奶牛场奶牛粪便中李斯特菌的携带情况及其分离株的遗传特征。方法用ISO 11290方法分离196份奶牛粪便样本中的李斯特菌,对分离的伊氏李斯特菌进行全基因测序,用MEGA6.0构建系统发育树,网站在线比对分析伊氏李斯特菌株的毒力基因、耐药基因及前噬菌体等。结果196份奶牛场养殖的奶牛粪便样本中有9份样本为李斯特菌阳性,其中3株为伊氏李斯特菌伊氏亚种,6株为英诺克李斯特菌,分离率分别为1.53%和3.06%。3株伊氏李斯特菌伊氏亚种分离株具有包括LIPI-1和LIPI-2在内的绝大部分致病性李斯特菌毒力相关基因,携带一个不完整的前噬菌体及22个耐药相关基因。结论养殖场奶牛粪便中携带伊氏李斯特菌伊氏亚种。对伊氏李斯特菌伊氏亚种分离株的全基因组、毒力基因、耐药基因、前噬菌体基因等遗传特征分析,为进一步分析其致病性提供了参考。
关键词
伊氏李斯特菌
伊氏
亚种
毒力基因
耐药基因
前噬
菌
体基因
Keywords
Listeria ivanovii subsp.ivanovii
virulence gene
drug resistance gene
prophage gene
分类号
R378.99+4 [医药卫生—病原生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
多交叉置换扩增结合纳米生物传感器检测伊氏李斯特菌的方法建立
李慧
王毅
王艳
叶长芸
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2024
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
奶牛粪便分离的伊氏李斯特菌伊氏亚种基因组序列测定及其分子特征分析
蒋华英
甘霖
毛盼
宋泽萱
纪顺师
王怡倩
王艳
徐保红
高伟利
陈峥宏
叶长芸
《中国人兽共患病学报》
CAS
CSCD
北大核心
2020
1
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