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以色列急性麻痹病毒LN株全基因克隆与遗传进化分析
1
作者
陈路
李林熹
+3 位作者
梁爽
韩宇
李明
孙莉
《现代畜牧兽医》
2024年第5期19-22,共4页
研究旨在了解辽宁省以色列急性麻痹病毒(IAPV)的遗传进化特点。试验选取成年患病蜜蜂提取IAPV并进行PCR测序,选取China-BJ (GenBank登录号:KX421583.1)基因序列设计12对引物进行全基因克隆,将获得的基因序列与GenBank已公布的19株IAPV...
研究旨在了解辽宁省以色列急性麻痹病毒(IAPV)的遗传进化特点。试验选取成年患病蜜蜂提取IAPV并进行PCR测序,选取China-BJ (GenBank登录号:KX421583.1)基因序列设计12对引物进行全基因克隆,将获得的基因序列与GenBank已公布的19株IAPV序列进行遗传进化分析。结果显示:试验成功分离出IAPV,并将其命名为IAPV-LN株(GenBank登录号:MZ269472.1)。IAPV-LN株与China-BJ和China-BJ2 (GenBank登录号:MG599488.1)同属一个分支。研究表明,丹东市某蜂场患病蜜蜂中分离得到的IAPV-LN株与China-BJ2、China-BJ的亲缘关系最近,可能来自同一个原始毒株。
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关键词
以色列
急性
麻痹
病毒
全基因克隆
遗传进化分析
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职称材料
以色列急性麻痹病毒Taq Man荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用
被引量:
5
2
作者
张体银
黄嫦娇
+4 位作者
田国宁
侯义宏
王武军
张志灯
林素洁
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第12期1287-1292,共6页
为建立以色列急性麻痹病毒(IAPV)荧光定量RT-PCR检测方法,本研究根据GenBank中IAPV RNA依赖的RNA聚合酶(RdRp)基因保守区域序列设计了一对特异性引物和一条特异性探针,以体外转录制备的重组质粒标准品为模板,经过反应条件优化,建立了IAP...
为建立以色列急性麻痹病毒(IAPV)荧光定量RT-PCR检测方法,本研究根据GenBank中IAPV RNA依赖的RNA聚合酶(RdRp)基因保守区域序列设计了一对特异性引物和一条特异性探针,以体外转录制备的重组质粒标准品为模板,经过反应条件优化,建立了IAPV荧光定量RT-PCR检测方法,并对其进行了特异性、敏感性、重复性试验;利用所建立的方法对70份福建地区临床疑似IAPV感染的蜜蜂样品进行检测,并对阳性样品进行测序验证。结果显示,荧光定量RT-PCR方法的最佳引物和探针浓度分别为0.25μmol/L和0.20μmol/L,最佳退火温度为61℃。该方法仅对IAPV出现阳性扩增信号,对蜜蜂克什米尔病毒、蜜蜂慢性麻痹病毒、蜜蜂残翅病毒、蜜蜂急性麻痹病毒、蜜蜂黑蜂王台病毒、蜜蜂囊状幼虫病毒等6种病毒均未出现扩增,特异性较强;该方法对重组质粒标准品的最低检测限为9.7拷贝/μL,比普通RT-PCR敏感性高约100倍;该方法批内及批间变异系数均小于1.5%,重复性好。利用该方法和普通RT-PCR方法分别对70份临床样品进行检测,结果显示,两种方法的阳性检出率分别为31.4%(22/70)和27.1(19/70),二者的符合率为95.9%。本研究首次建立的IAPV Taq Man荧光定量RTPCR检测方法快速、敏感,检测结果准确可靠,为IAPV的流行病学调查及其分子生物学的快速检测奠定了基础。
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关键词
以色列
急性
麻痹
病毒
荧光定量RT-PCR
RNA依赖的RNA聚合酶
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职称材料
西方蜜蜂NPC2 基因的生物信息学分析及其在IAPV感染过程中的功能鉴定
3
作者
金红梅
袁春颖
+3 位作者
邹德馨
侯春生
马鸣潇
邓炎春
《环境昆虫学报》
北大核心
2025年第4期1238-1249,共12页
本研究旨在探究西方蜜蜂Apis mellifera细胞内胆固醇转运蛋白2(NPC intracellular cholesterol transporter 2,AmNPC2)的分子特性及其在以色列急性麻痹病毒(Israeli acute paralysis virus,IAPV)感染过程中的潜在调控作用。通过综合运...
本研究旨在探究西方蜜蜂Apis mellifera细胞内胆固醇转运蛋白2(NPC intracellular cholesterol transporter 2,AmNPC2)的分子特性及其在以色列急性麻痹病毒(Israeli acute paralysis virus,IAPV)感染过程中的潜在调控作用。通过综合运用生物信息学分析、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和RNA干扰(RNAi)等技术手段,研究了AmNPC2的分子特征、组织表达谱及其对IAPV入侵的调控功能。结果表明,AmNPC2基因CDS区域长度为465 bp,对应开放阅读框(ORF)编码154个氨基酸。AmNPC2蛋白的相对分子量约为16.8 kDa,含14个磷酸化位点,具有跨膜结构域;含信号肽,剪切位点位于17~18号氨基酸之间,主要定位于细胞外;系统进化分析显示AmNPC2与东方蜜蜂Apis cerana的NPC2聚为一支;二级结构预测显示,AmNPC2包含83个无规则卷曲、26个α-螺旋、39条延伸链和6个β-转角。RT-qPCR结果显示,AmNPC2在自然感染IAPV的工蜂中的8个检测组织中均有表达,其中在蜜囊和气管中表达量最高,而在中肠中表达相对较低;值得注意的是,IAPV自然感染主要也发生在蜜囊和气管组织。通过实验感染模型分析发现,IAPV感染后,蜜蜂AmNPC2基因的转录水平显著上调。通过RNA干扰技术特异性敲降AmNPC2基因的表达后,定量分析表明IAPV病毒的复制效率出现了显著抑制,其病毒载量下降了6倍以上。本研究结果表明AmNPC2可能通过调控宿主脂质代谢参与IAPV的感染过程,该研究首次揭示了NPC2基因在蜜蜂病毒过程中的潜在作用,为深入理解蜜蜂-病毒互作机制提供了新的理论依据。
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关键词
西方蜜蜂
转运胆固醇蛋白
分子特性
表达特征
以色列
急性
麻痹
病毒
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职称材料
秋末蜜蜂病毒病混合感染诊断实例
4
作者
王海洲
郭兴启
+5 位作者
赵光栋
王丽君
候俊斌
郭得政
郭慧娟
单文璐
《中国蜂业》
2021年第1期24-25,共2页
山东莒县部分乡镇蜂群短期内死亡严重,通过对典型发病蜂场临床症状调查和实验室病毒检测,确诊发病蜂场病因主要为蜜蜂以色列急性麻痹病毒、克什米尔病毒、残翅病毒混合感染,究其原因为秋季治螨不彻底、蜂群饲喂不足、饲养管理不善所造成...
山东莒县部分乡镇蜂群短期内死亡严重,通过对典型发病蜂场临床症状调查和实验室病毒检测,确诊发病蜂场病因主要为蜜蜂以色列急性麻痹病毒、克什米尔病毒、残翅病毒混合感染,究其原因为秋季治螨不彻底、蜂群饲喂不足、饲养管理不善所造成,建议蜂农更新养殖理念,饲养强群,彻底治螨,搞好蜂场环境卫生,在蜜源匮乏季节要及时饲喂,避免盗蜂发生,从而提高蜂群的抗病能力。
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关键词
蜜蜂
以色列
急性
麻痹
病毒
克什米尔
病毒
残翅
病毒
诊断
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职称材料
蜂群崩溃失调病(CCD)研究进展
被引量:
9
5
作者
苏松坤
湛毅
+2 位作者
蔡芳
刘芳
陈盛禄
《中国蜂业》
2007年第11期5-7,共3页
2006年冬到2007年春,蜂群崩溃失调病(colony collapse disorder,简称CCD)在世界范围内流行,已造成巨大损失。CCD是指意蜂蜂群中大量的成年工蜂短时间内突然在巢外失踪,没有发现尸体,只剩下蜂王、卵、一些未成年的工蜂和大量蜜粉残留于...
2006年冬到2007年春,蜂群崩溃失调病(colony collapse disorder,简称CCD)在世界范围内流行,已造成巨大损失。CCD是指意蜂蜂群中大量的成年工蜂短时间内突然在巢外失踪,没有发现尸体,只剩下蜂王、卵、一些未成年的工蜂和大量蜜粉残留于巢脾内的症状。到目前为止,经调查发现以色列急性麻痹病毒(Israeliacute paralysis virus,IAPV)是导致CCD的最大嫌疑,但CCD的确切致病机理尚未揭开。本文综述了CCD的主要症状、可能的致病原因等方面的研究进展,提出若干需要高度关注的问题,以及防范CCD的措施。
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关键词
蜜蜂
蜂群崩溃失调病(CCD)
以色列
急性
麻痹
病毒
(
iapv
)
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职称材料
题名
以色列急性麻痹病毒LN株全基因克隆与遗传进化分析
1
作者
陈路
李林熹
梁爽
韩宇
李明
孙莉
机构
锦州医科大学畜牧兽医学院
锦州市农业农村综合服务中心(锦州市植物保护中心)
出处
《现代畜牧兽医》
2024年第5期19-22,共4页
基金
辽宁省自然科学基金面上项目(2022-MS-385)
锦州医科大学横向课题项目(H2022043)
大学生创新训练项目(X202310160072、202210160007)。
文摘
研究旨在了解辽宁省以色列急性麻痹病毒(IAPV)的遗传进化特点。试验选取成年患病蜜蜂提取IAPV并进行PCR测序,选取China-BJ (GenBank登录号:KX421583.1)基因序列设计12对引物进行全基因克隆,将获得的基因序列与GenBank已公布的19株IAPV序列进行遗传进化分析。结果显示:试验成功分离出IAPV,并将其命名为IAPV-LN株(GenBank登录号:MZ269472.1)。IAPV-LN株与China-BJ和China-BJ2 (GenBank登录号:MG599488.1)同属一个分支。研究表明,丹东市某蜂场患病蜜蜂中分离得到的IAPV-LN株与China-BJ2、China-BJ的亲缘关系最近,可能来自同一个原始毒株。
关键词
以色列
急性
麻痹
病毒
全基因克隆
遗传进化分析
Keywords
Israeli acute paralysis virus
Entire gene cloning
Phylogenetic analysis
分类号
S895.2 [农业科学—特种经济动物饲养]
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职称材料
题名
以色列急性麻痹病毒Taq Man荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用
被引量:
5
2
作者
张体银
黄嫦娇
田国宁
侯义宏
王武军
张志灯
林素洁
机构
福州海关技术中心福建省检验检疫技术研究重点实验室
潍坊海关技术中心
长沙海关技术中心
出处
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021年第12期1287-1292,共6页
基金
福建省对外合作项目(2018I0022)
福州海关科研项目(FK2020-21)。
文摘
为建立以色列急性麻痹病毒(IAPV)荧光定量RT-PCR检测方法,本研究根据GenBank中IAPV RNA依赖的RNA聚合酶(RdRp)基因保守区域序列设计了一对特异性引物和一条特异性探针,以体外转录制备的重组质粒标准品为模板,经过反应条件优化,建立了IAPV荧光定量RT-PCR检测方法,并对其进行了特异性、敏感性、重复性试验;利用所建立的方法对70份福建地区临床疑似IAPV感染的蜜蜂样品进行检测,并对阳性样品进行测序验证。结果显示,荧光定量RT-PCR方法的最佳引物和探针浓度分别为0.25μmol/L和0.20μmol/L,最佳退火温度为61℃。该方法仅对IAPV出现阳性扩增信号,对蜜蜂克什米尔病毒、蜜蜂慢性麻痹病毒、蜜蜂残翅病毒、蜜蜂急性麻痹病毒、蜜蜂黑蜂王台病毒、蜜蜂囊状幼虫病毒等6种病毒均未出现扩增,特异性较强;该方法对重组质粒标准品的最低检测限为9.7拷贝/μL,比普通RT-PCR敏感性高约100倍;该方法批内及批间变异系数均小于1.5%,重复性好。利用该方法和普通RT-PCR方法分别对70份临床样品进行检测,结果显示,两种方法的阳性检出率分别为31.4%(22/70)和27.1(19/70),二者的符合率为95.9%。本研究首次建立的IAPV Taq Man荧光定量RTPCR检测方法快速、敏感,检测结果准确可靠,为IAPV的流行病学调查及其分子生物学的快速检测奠定了基础。
关键词
以色列
急性
麻痹
病毒
荧光定量RT-PCR
RNA依赖的RNA聚合酶
Keywords
Israeli acute paralysis virus
real-time RT-PCR
RNA dependent RNA polymerase
分类号
S895.2 [农业科学—特种经济动物饲养]
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职称材料
题名
西方蜜蜂NPC2 基因的生物信息学分析及其在IAPV感染过程中的功能鉴定
3
作者
金红梅
袁春颖
邹德馨
侯春生
马鸣潇
邓炎春
机构
锦州医科大学畜牧兽医学院
辽宁省农业发展服务中心
中国农业科学院麻类研究所
出处
《环境昆虫学报》
北大核心
2025年第4期1238-1249,共12页
基金
国家自然科学基金青年基金项目(32300418)
湖南省科技领军人才项目(2024RC1069)。
文摘
本研究旨在探究西方蜜蜂Apis mellifera细胞内胆固醇转运蛋白2(NPC intracellular cholesterol transporter 2,AmNPC2)的分子特性及其在以色列急性麻痹病毒(Israeli acute paralysis virus,IAPV)感染过程中的潜在调控作用。通过综合运用生物信息学分析、实时荧光定量PCR(RT-qPCR)和RNA干扰(RNAi)等技术手段,研究了AmNPC2的分子特征、组织表达谱及其对IAPV入侵的调控功能。结果表明,AmNPC2基因CDS区域长度为465 bp,对应开放阅读框(ORF)编码154个氨基酸。AmNPC2蛋白的相对分子量约为16.8 kDa,含14个磷酸化位点,具有跨膜结构域;含信号肽,剪切位点位于17~18号氨基酸之间,主要定位于细胞外;系统进化分析显示AmNPC2与东方蜜蜂Apis cerana的NPC2聚为一支;二级结构预测显示,AmNPC2包含83个无规则卷曲、26个α-螺旋、39条延伸链和6个β-转角。RT-qPCR结果显示,AmNPC2在自然感染IAPV的工蜂中的8个检测组织中均有表达,其中在蜜囊和气管中表达量最高,而在中肠中表达相对较低;值得注意的是,IAPV自然感染主要也发生在蜜囊和气管组织。通过实验感染模型分析发现,IAPV感染后,蜜蜂AmNPC2基因的转录水平显著上调。通过RNA干扰技术特异性敲降AmNPC2基因的表达后,定量分析表明IAPV病毒的复制效率出现了显著抑制,其病毒载量下降了6倍以上。本研究结果表明AmNPC2可能通过调控宿主脂质代谢参与IAPV的感染过程,该研究首次揭示了NPC2基因在蜜蜂病毒过程中的潜在作用,为深入理解蜜蜂-病毒互作机制提供了新的理论依据。
关键词
西方蜜蜂
转运胆固醇蛋白
分子特性
表达特征
以色列
急性
麻痹
病毒
Keywords
Apis mellifera
NPC intracellular cholesterol transporter 2
Molecular characteristics
Expression profile
iapv
分类号
Q968.1 [生物学—昆虫学]
Q963 [生物学—昆虫学]
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职称材料
题名
秋末蜜蜂病毒病混合感染诊断实例
4
作者
王海洲
郭兴启
赵光栋
王丽君
候俊斌
郭得政
郭慧娟
单文璐
机构
山东日照市畜牧兽医管理服务中心
山东农业大学
出处
《中国蜂业》
2021年第1期24-25,共2页
基金
山东省蜂产业技术体系专项(SDAIT-24-08)。
文摘
山东莒县部分乡镇蜂群短期内死亡严重,通过对典型发病蜂场临床症状调查和实验室病毒检测,确诊发病蜂场病因主要为蜜蜂以色列急性麻痹病毒、克什米尔病毒、残翅病毒混合感染,究其原因为秋季治螨不彻底、蜂群饲喂不足、饲养管理不善所造成,建议蜂农更新养殖理念,饲养强群,彻底治螨,搞好蜂场环境卫生,在蜜源匮乏季节要及时饲喂,避免盗蜂发生,从而提高蜂群的抗病能力。
关键词
蜜蜂
以色列
急性
麻痹
病毒
克什米尔
病毒
残翅
病毒
诊断
分类号
S895 [农业科学—特种经济动物饲养]
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职称材料
题名
蜂群崩溃失调病(CCD)研究进展
被引量:
9
5
作者
苏松坤
湛毅
蔡芳
刘芳
陈盛禄
机构
浙江大学动物科学学院
出处
《中国蜂业》
2007年第11期5-7,共3页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.30571409)
文摘
2006年冬到2007年春,蜂群崩溃失调病(colony collapse disorder,简称CCD)在世界范围内流行,已造成巨大损失。CCD是指意蜂蜂群中大量的成年工蜂短时间内突然在巢外失踪,没有发现尸体,只剩下蜂王、卵、一些未成年的工蜂和大量蜜粉残留于巢脾内的症状。到目前为止,经调查发现以色列急性麻痹病毒(Israeliacute paralysis virus,IAPV)是导致CCD的最大嫌疑,但CCD的确切致病机理尚未揭开。本文综述了CCD的主要症状、可能的致病原因等方面的研究进展,提出若干需要高度关注的问题,以及防范CCD的措施。
关键词
蜜蜂
蜂群崩溃失调病(CCD)
以色列
急性
麻痹
病毒
(
iapv
)
Keywords
Honeybee, Colony Collapse Disorder (CCD).Israeli Acute Paralvsis Virus (
iapv
)
分类号
S895 [农业科学—特种经济动物饲养]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
以色列急性麻痹病毒LN株全基因克隆与遗传进化分析
陈路
李林熹
梁爽
韩宇
李明
孙莉
《现代畜牧兽医》
2024
0
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职称材料
2
以色列急性麻痹病毒Taq Man荧光定量RT-PCR检测方法的建立及初步应用
张体银
黄嫦娇
田国宁
侯义宏
王武军
张志灯
林素洁
《中国预防兽医学报》
CAS
CSCD
北大核心
2021
5
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职称材料
3
西方蜜蜂NPC2 基因的生物信息学分析及其在IAPV感染过程中的功能鉴定
金红梅
袁春颖
邹德馨
侯春生
马鸣潇
邓炎春
《环境昆虫学报》
北大核心
2025
0
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职称材料
4
秋末蜜蜂病毒病混合感染诊断实例
王海洲
郭兴启
赵光栋
王丽君
候俊斌
郭得政
郭慧娟
单文璐
《中国蜂业》
2021
0
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职称材料
5
蜂群崩溃失调病(CCD)研究进展
苏松坤
湛毅
蔡芳
刘芳
陈盛禄
《中国蜂业》
2007
9
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