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乳酸锌对猪空肠上皮细胞IPEC-J2增殖及相关调控基因mRNA表达的影响 被引量:10
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作者 韩国全 余冰 +6 位作者 陈代文 相振田 亓宏伟 陈洪 毛倩 毛湘冰 黄志清 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期740-747,共8页
旨在探讨乳酸锌对猪空肠上皮细胞增殖及相关调控基因ZnT2、DMT1、IREG-1、MT1和ZIP4mRNA表达的影响。用乳酸锌的锌浓度分别为50、100、150、200mg.L-1的培养基培养IPEC-J2细胞,采用比色法测定分析细胞增殖变化;用实时荧光定量RT-PCR方... 旨在探讨乳酸锌对猪空肠上皮细胞增殖及相关调控基因ZnT2、DMT1、IREG-1、MT1和ZIP4mRNA表达的影响。用乳酸锌的锌浓度分别为50、100、150、200mg.L-1的培养基培养IPEC-J2细胞,采用比色法测定分析细胞增殖变化;用实时荧光定量RT-PCR方法检测ZnT2、DMT1、IREG-1、MT1及ZIP4mRNA表达,以TBPmRNA的表达水平作为内参对照。在细胞培养前36h,乳酸锌对IPEC-J2细胞基本没有影响,随锌浓度递增细胞增殖幅度升高;乳酸锌处理IPEC-J2细胞后,ZnT2、DMT1、IREG-1及MT1mRNA表达随锌浓度增高而升高,ZIP4mRNA表达则随锌浓度增高而降低。添加乳酸锌可以促进IPEC-J2细胞增殖,上调ZnT2、DMT1、IREG-1、MT1mRNA表达,下调ZIP4mRNA表达。 展开更多
关键词 乳酸锌 空肠上细胞ipec-j2 MRNA表达 相关调控基因
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仔猪感染PCV2后空肠黏膜免疫系统中相关免疫细胞变化 被引量:5
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作者 邹战明 乔金增 +3 位作者 杨宁 朱琳琳 武子函 李焕荣 《北京农学院学报》 2016年第1期50-54,共5页
【目的】分析PCV2感染后对仔猪空肠免疫功能的影响。【方法】将6头断奶仔猪随机分为PCV2感染组和空白组,通过流式细胞术分析仔猪空肠中诱导部位和效应部位相关免疫细胞变化。【结果】结果显示,与空白组相比,PCV2感染组诱导部位PP结中总... 【目的】分析PCV2感染后对仔猪空肠免疫功能的影响。【方法】将6头断奶仔猪随机分为PCV2感染组和空白组,通过流式细胞术分析仔猪空肠中诱导部位和效应部位相关免疫细胞变化。【结果】结果显示,与空白组相比,PCV2感染组诱导部位PP结中总T淋巴细胞、活化/记忆T细胞和细胞毒性T细胞百分率极显著增高(P<0.01),B细胞百分率显著增加(P<0.05);效应部位固有层中树突状细胞(DCs)、B细胞、活化/记忆T细胞和细胞毒性T细胞百分率极显著增高(P<0.01),DCs表面抗原递呈相关分子CD80/86与MHCⅡ表达量、总T淋巴细胞、NK细胞百分率显著上调(P<0.05),而黏膜层中总T淋巴细胞、活化/记忆T细胞和细胞毒性T细胞、NK细胞百分率极显著增高(P<0.01)。【结论】结果表明PCV2感染导致空肠黏膜免疫系统中树突状细胞及各类淋巴细胞数量的增加,可能影响了空肠黏膜的免疫功能,提示其与PCV2临床感染引起肠炎的发生存在一定相关性。 展开更多
关键词 PCV2 仔猪 空肠 免疫细胞
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胰高血糖素样肽-2对脂多糖应激的IPEC-J2细胞形态和紧密连接相关基因表达的影响 被引量:9
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作者 余长松 贾刚 +4 位作者 邓秋红 陈小玲 赵华 刘光芒 王康宁 《畜牧兽医学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第4期592-599,共8页
本研究旨在考察胰高血糖素样肽-2(Glucagons-like peptide-2,GLP-2)和脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)对仔猪空肠上皮细胞及其紧密连接(Tight Junctions,TJ)相关蛋白基因表达的影响,并探讨GLP-2调控仔猪肠道TJ蛋白基因表达可能的作用机... 本研究旨在考察胰高血糖素样肽-2(Glucagons-like peptide-2,GLP-2)和脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS)对仔猪空肠上皮细胞及其紧密连接(Tight Junctions,TJ)相关蛋白基因表达的影响,并探讨GLP-2调控仔猪肠道TJ蛋白基因表达可能的作用机理。试验一设对照、GLP-2、LPS、LPS+GLP-2共4个组,考查各处理对IPEC-J2细胞形态和紧密连接关键蛋白Occludin、Claudin-1和ZO-1基因表达的影响。结果:添加100nmol·L-1 GLP-2能显著改善IPEC-J2细胞形态,显著提高Occludin、Claudin-1和ZO-1mRNA表达(P<0.01);100μg·mL-1 LPS处理能显著破坏细胞形态、降低IPEC-J2细胞紧密连接蛋白mRNA的表达(P<0.01);在添加LPS基础上添加100nmol·L-1 GLP-2能有效维护细胞形态,显著增加IPEC-J2细胞TJ相关蛋白Occludin、Claudin-1和ZO-1mRNA的表达(P<0.01),增加量分别为46.3%、65.1%和30.3%。试验二考察了添加PI3K特异性抑制剂Wortmannin(Wort)和LY294002(LY)阻断PI3K-Akt-mTOR信号转导途径后Occludin、Claudin-1和ZO-1mRNA表达量的变化,试验共设对照、GLP-2、GLP-2+Wort、GLP-2+LY等4个组。结果:添加抑制剂Wort后可显著降低IPEC-J2细胞Akt、mTOR、Occludin、Claudin-1和ZO-1mRNA的表达(P<0.01),降低量分别为46.9%、50.5%,38.1%、49.6%和18.9%;添加LY后上述mRNA的表达量分别显著降低了67.2%、70.8%,49.6%、60.9%和25.8%(P<0.01)。以上结果表明:添加GLP-2能够有效抑制LPS应激对IPEC-J2细胞形态和TJ相关基因表达的损伤,PI3K-Akt-mTOR信号转导途径可能是GLP-2调控肠道紧密连接蛋白基因表达的重要信号通路之一。 展开更多
关键词 胰高血糖素样肽-2 脂多糖 仔猪空肠上细胞ipec-j2 紧密连接 PI3K-Akt-mTOR
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脂多糖诱导仔猪小肠上皮细胞炎性损伤模型的建立
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作者 赵磊 刘云卓 +3 位作者 王毅 孙会 张爱忠 李沐阳 《黑龙江八一农垦大学学报》 2024年第3期50-57,共8页
LPS诱导IPEC-J2细胞炎性损伤模拟仔猪体内早期断奶应激,构建IPEC-J2细胞炎性损伤模型。首先采用0、0.1、1、10、100μg·mL^(-1)LPS处理IPEC-J2细胞,MTS法检测LPS处理IPEC-J2细胞0、4、8、12、16、24 h后的增殖率,初步确定炎性损伤... LPS诱导IPEC-J2细胞炎性损伤模拟仔猪体内早期断奶应激,构建IPEC-J2细胞炎性损伤模型。首先采用0、0.1、1、10、100μg·mL^(-1)LPS处理IPEC-J2细胞,MTS法检测LPS处理IPEC-J2细胞0、4、8、12、16、24 h后的增殖率,初步确定炎性损伤模型构建的适宜浓度为10μg·mL^(-1),适宜时间为16 h。为了进一步确定LPS的最佳浓度,采用0~100μg·mL^(-1)LPS处理IPEC-J2细胞16 h,探究不同浓度LPS对IPEC-J2细胞的影响。结果表明:0.1~100μg·mL^(-1)LPS均可以不同程度的提高IPECJ2细胞IL^(-1)β、IL-6、IL-8和TNF-α含量及基因表达量,下调ZO-1、Occludin、Claudin-1基因表达量,降低IL-10、IgM、IgA和IgG含量,其中10μg·mL^(-1)的作用效果最佳;0.1~100μg·mL^(-1)LPS均可以不同程度的提高IPEC-J2细胞中ROS含量和细胞凋亡率,其中10μg·mL^(-1)的作用效果最佳。由此可见,LPS诱导细胞构建炎性损伤模型的适宜条件为10μg·mL^(-1)和16 h。 展开更多
关键词 仔猪 ipec-j2细胞 脂多糖 炎性损伤模型
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饲粮添加异亮氨酸对轮状病毒攻毒断奶仔猪回肠屏障功能的影响 被引量:5
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作者 毛湘冰 古长松 +6 位作者 陈代文 余冰 何军 郑萍 虞洁 罗钧秋 罗玉衡 《动物营养学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期5493-5499,共7页
本研究旨在探讨饲粮添加异亮氨酸是否可以缓解轮状病毒(RV)感染对断奶仔猪回肠屏障功能的影响。在细胞试验中,用8 mmol/L的L-异亮氨酸处理IPEC-J2细胞24 h;在动物饲养试验中,选取28头健康的21日龄断奶的"杜×长×大"... 本研究旨在探讨饲粮添加异亮氨酸是否可以缓解轮状病毒(RV)感染对断奶仔猪回肠屏障功能的影响。在细胞试验中,用8 mmol/L的L-异亮氨酸处理IPEC-J2细胞24 h;在动物饲养试验中,选取28头健康的21日龄断奶的"杜×长×大"仔猪,采用2×2双因子设计,即饲粮处理(添加1%L-异亮氨酸饲粮或添加0.68%L-丙氨酸饲粮)和RV攻毒(灌服RV或无菌培养液),RV攻毒于试验第15天早上进行。试验期为18 d。结果表明,L-异亮氨酸处理提高了IPEC-J2细胞中黏液蛋白2(mucin 2)、闭锁小带蛋白-1(ZO-1)和闭合蛋白(occludin)的mRNA相对表达量(P<0.05);RV攻毒提高了断奶仔猪平均腹泻指数和血清二胺氧化酶活性(P<0.05),提高了回肠黏膜中RV的非结构蛋白4阳性率,降低了断奶仔猪回肠黏膜中mucin 2、ZO-1和occludin mRNA相对表达量(P<0.05);而饲粮添加异亮氨酸缓解了RV攻毒对断奶仔猪平均腹泻指数、血清二胺氧化酶活性和回肠黏膜mucin 2、ZO-1和occludin mRNA相对表达量的影响(P<0.05),降低了回肠黏膜中RV的非结构蛋白4阳性率。综上所述,在断奶仔猪的饲粮中补充1%异亮氨酸可以预防RV诱导发生的腹泻,而这一作用与其可改善回肠屏障功能有关。 展开更多
关键词 异亮氨酸 ipec-j2细胞 断奶仔猪 轮状病毒 回肠屏障功能
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