粉防己碱对人鼻咽癌细胞株CNE增殖抑制和凋亡作用的研究 被引量：17

1

作者 邓雨霞 孙新臣 《医学研究生学报》 CAS 2007年第4期360-365,共6页

目的:探讨粉防己碱(Tet)对人鼻咽癌细胞株CNE增殖抑制和凋亡的影响。方法:将人鼻咽癌细胞株CNE分为不同浓度Tet处理组,并设立对照组。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察Tet对人鼻咽癌细胞株CNE体外生长的抑制作用;采用透射电镜、琼脂糖凝... 目的:探讨粉防己碱(Tet)对人鼻咽癌细胞株CNE增殖抑制和凋亡的影响。方法:将人鼻咽癌细胞株CNE分为不同浓度Tet处理组,并设立对照组。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法观察Tet对人鼻咽癌细胞株CNE体外生长的抑制作用;采用透射电镜、琼脂糖凝胶电泳技术、流式细胞术Annenxin V/PI EGFP观察Tet对人鼻咽癌细胞株CNE凋亡的影响;采用逆转录-多聚酶链反应技术(RT-PCR)观察Tet对人鼻咽癌细胞株CNE凋亡相关基因mRNA表达的影响。结果:Tet呈浓度依赖性抑制癌细胞体外生长(P<0.05)。Tet处理细胞72 h后,电镜下可见细胞缩小,核裂解,凋亡小体形成;随着Tet浓度的提高,各Tet处理组DNA凝胶电泳梯形条带和细胞凋亡率渐趋明显。与对照组相比较,Bcl-2 mRNA的表达渐减弱,Bax基因mRNA表达渐增强(P<0.05)。结论:Tet可抑制癌细胞生长,促进癌细胞凋亡,其抗癌作用机制可能与下调Bcl-2基因表达和上调Bax基因表达有密切联系。 展开更多

关键词 粉防己碱 人鼻咽癌细胞株cne 细胞凋亡 基因调控

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生长抑素受体亚型在人鼻咽癌细胞株CNE_2中表达 被引量：3

2

作者 李勇 孙晓南 +1 位作者 姒健敏 张骏 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2006年第8期647-650,共4页

背景与目的:生长抑素受体(somatostatin receptor SSTR)在许多肿瘤组织均有表达,为生长抑素类似物如奥曲肽用于这些肿瘤的治疗提供了生物学基础,但对生长抑素受体在鼻咽癌中表达情况的研究甚少。本研究旨在了解生长抑素受体基因在鼻咽... 背景与目的:生长抑素受体(somatostatin receptor SSTR)在许多肿瘤组织均有表达,为生长抑素类似物如奥曲肽用于这些肿瘤的治疗提供了生物学基础,但对生长抑素受体在鼻咽癌中表达情况的研究甚少。本研究旨在了解生长抑素受体基因在鼻咽癌细胞中的表达情况,为生长抑素类似物用于鼻咽癌治疗的进一步研究提供试验基础。方法:采用RT-PCR法和SP免疫组化法联合检测体外培养的人鼻咽癌细胞株CNE2的SSTRs表达,并对PCR mRNA产物测序以鉴定结果。结果:RT-PCR提示人鼻咽癌细胞株CNE2分别表达生长抑素受体亚型SSTR1、SSTR2、SSTR4;免疫组化结果:人鼻咽癌细胞株CNE2表达SSTR1、SSTR2A为强阳性(>60%),表达SSTR4为弱阳性、SSTR2介于两者之间、SSTR3和SSTR5则无表达。结论:我们的研究证实人鼻咽癌细胞株CNE2有多种生长抑素受体亚型基因表达,且以表达SSTR1、SSTR2较多。 展开更多

关键词 人鼻咽癌细胞株cne2 生长抑素受体 培养的肿瘤细胞

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茶多酚对人鼻咽癌细胞株CNE_2细胞DNA损伤和细胞周期的影响 被引量：12

3

作者 谢冰芬 郝东磊 +3 位作者 刘宗潮 朱孝峰 冯公侃 潘启超 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第5期424-427,共4页

目的　观察茶多酚（ｔｅａ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ， ＴＰ） 对人鼻咽癌细胞株ＣＮＥ２ 细胞ＤＮＡ 的损伤作用和细胞周期的影响。方法　用琼脂糖凝胶电泳方法测定ＴＰ对细胞ＤＮＡ的断裂作用；用流式细胞术（ＦＣＭ） 观察ＴＰ对ＣＮ... 目的　观察茶多酚（ｔｅａ ｐｏｌｙｐｈｅｎｏｌｓ， ＴＰ） 对人鼻咽癌细胞株ＣＮＥ２ 细胞ＤＮＡ 的损伤作用和细胞周期的影响。方法　用琼脂糖凝胶电泳方法测定ＴＰ对细胞ＤＮＡ的断裂作用；用流式细胞术（ＦＣＭ） 观察ＴＰ对ＣＮＥ２ 细胞周期的变化及其诱导凋亡。结果　ＴＰ可引起ＣＮＥ２ 细胞ＤＮＡ 断裂、其断裂程度随剂量的增加和作用时间的延长而增强。ＴＰ不同浓度和不同作用时间可干扰ＣＮＥ２ 细胞在周期中的进程，使Ｇ１ 期细胞明显增多，Ｓ期细胞减少，细胞分裂增殖指数（ＰＩ）亦随之降低。同时，ＴＰ可诱导ＣＮＥ２ 细胞凋亡，其凋亡率随ＴＰ浓度的增加和作用时间的延长在逐渐增加。结论　ＴＰ１９９８１２０４ 收稿，１９９９０７３１ 修回＊ 国家自然科学基金资助课题，Ｎｏ ３９３７０８００作者简介：谢冰芬，女，副研究员，硕士生导师，研究方向为肿瘤药理可引起人鼻咽癌细胞株ＣＮＥ２ 细胞的ＤＮＡ 断裂，使细胞停滞于Ｇ１ 期，阻止Ｇ１ 期细胞进入Ｓ期；同时亦可诱导细胞凋亡。 展开更多

关键词 茶多酚 鼻咽癌 细胞株 cne2 细胞 DNA损伤

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土贝母皂苷诱导人鼻咽癌细胞株CNE-2Z细胞凋亡的研究 被引量：13

4

作者 翁昔阳 于立坚 马润娣 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期181-181,共1页

目的　研究土贝母皂苷 (下称皂苷 )对人鼻咽癌细胞株CNE 2Z细胞凋亡的影响。方法　MTT法检测皂苷对CNE 2Z细胞生长的影响 ;形态学方法 (荧光显微镜和透射电镜 )、流式细胞仪和DNA琼脂糖凝胶电泳观察和分析在皂苷作用下CNE 2Z细胞形态、... 目的　研究土贝母皂苷 (下称皂苷 )对人鼻咽癌细胞株CNE 2Z细胞凋亡的影响。方法　MTT法检测皂苷对CNE 2Z细胞生长的影响 ;形态学方法 (荧光显微镜和透射电镜 )、流式细胞仪和DNA琼脂糖凝胶电泳观察和分析在皂苷作用下CNE 2Z细胞形态、DNA含量的变化和DNA断裂的情况 ;蛋白免疫印迹法检测凋亡相关基因bcl 2、bax和cas pase 3表达的变化。 结果　皂苷抑制CNE 2Z细胞的生长 ,其效果与皂苷的浓度和作用时间相关 ;诱导CNE 2Z细胞发生典型程序性死亡 ;凋亡抑制基因bcl 2表达逐渐减少 ;而凋亡诱导基因bax和caspase 3在 1、3、5h表达增高。 结论　诱导细胞凋亡是皂苷发挥抗瘤效果的一种重要机制 ;皂苷诱导的CNE 2Z细胞凋亡与bcl 2、bax和caspase 展开更多

关键词 土贝母皂苷 细胞凋亡 凋亡相关基因 鼻咽癌细胞株 cne-2Z

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CNE1、CNE2鼻咽癌细胞株中ATM/PI3K区基因突变的检测 被引量：4

5

作者 王宏梅 伍新尧 +2 位作者 夏云飞 黄艳梅 刘秀芳 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2003年第3期276-278,共3页

为了探讨具有不同放射敏感性的CNE1、CNE2鼻咽癌细胞株中ATM/PI3K区基因突变的情况,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术和PCR产物直接测序方法(荧光标记的ddNTPs循环测序),对CNE1、CNE2中ATM的PI3K关键区域进行突变检测。结果表明,所... 为了探讨具有不同放射敏感性的CNE1、CNE2鼻咽癌细胞株中ATM/PI3K区基因突变的情况,采用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术和PCR产物直接测序方法(荧光标记的ddNTPs循环测序),对CNE1、CNE2中ATM的PI3K关键区域进行突变检测。结果表明,所测CNE1、CNE2中的ATM/PI3K区序列中没有发生突变,认为鼻咽癌细胞株CNE1、CNE2间内在的放射敏感性的差异可能与ATM/PI3K区基因突变不相关。 展开更多

关键词 cne1 cne2 鼻咽癌 细胞株 ATM/P13K区 基因突变 RT-PCR 放射敏感性

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紫杉醇对低分化鼻咽癌细胞株CNE-2生长凋亡的影响及Survivin mRNA的表达变化 被引量：3

6

作者 张帅 肖健云 +3 位作者 赵素萍 田勇泉 邱元正 王承龙 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2007年第6期590-594,共5页

目的：探讨紫杉醇对低分化的鼻咽癌细胞株CNE-2生长抑制率、凋亡的影响以及凋亡抑制基因Surovivin的变化。方法1通过MTT法计算紫杉醇作用CNE-2细胞后的生长抑制率，通过流式细胞仪检测紫杉醇对CNE-2细胞凋亡及细胞周期的影响并应用One S... 目的：探讨紫杉醇对低分化的鼻咽癌细胞株CNE-2生长抑制率、凋亡的影响以及凋亡抑制基因Surovivin的变化。方法1通过MTT法计算紫杉醇作用CNE-2细胞后的生长抑制率，通过流式细胞仪检测紫杉醇对CNE-2细胞凋亡及细胞周期的影响并应用One Step RT-PCR法检测Survivin mRNA表达的变化。结果：观察到CNE-2细胞对紫杉醇具有时间和剂量的依赖性。10^-9～10^-7mol·L^-1的紫杉醇作用后，随着时间的增加，细胞的凋亡率也明显增加。低浓度的紫杉醇（10^-9～10^-8mol·L^-1）作用细胞后，并没有出现G2／M期的累积。而当浓度达到10^-7mol·L^-1作用24h后便出现明显的G2／M期阻滞，但48h后这种阻滞又出现下降。CNE-2细胞被高浓度的紫杉醇（10^-7～10^-6mol·L^-1）作用24h后，Survivin mRNA的表达反而显著增加（P〈0．05），低浓度紫杉醇则对Survivinm RNA的表达无影响。10^-7mol·L^1紫杉醇作用CNE-2细胞后，Survivin mRNA表达明显增加并持续到48h，72h后则又降至对照组水平。结论：紫杉醇作用CNE-2细胞后可以出现早期明显的G2／M期累积，这种现象可能与Survivin基因表达上调有一定关系。 展开更多

关键词 紫杉醇 低分化 鼻咽癌细胞株 凋亡 Survivin

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塞来昔布对鼻咽癌细胞株CNE-2Z作用的研究 被引量：7

7

作者 向银洲 魏莲枝 李洁 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 2007年第11期1154-1157,1161,共5页

目的:探讨塞来昔布对鼻咽癌细胞株CNE-2Z的生长抑制作用及可能机制。方法:以人鼻咽癌细胞株CNE-2Z为研究对象,体外药物敏感试验(MTT)观察不同浓度和作用时间的塞来昔布对细胞的生长抑制作用;免疫细胞化学染色检测细胞增殖核抗原(PCNA)... 目的:探讨塞来昔布对鼻咽癌细胞株CNE-2Z的生长抑制作用及可能机制。方法:以人鼻咽癌细胞株CNE-2Z为研究对象,体外药物敏感试验(MTT)观察不同浓度和作用时间的塞来昔布对细胞的生长抑制作用;免疫细胞化学染色检测细胞增殖核抗原(PCNA)和环氧化酶-2(COX-2)的表达;流式细胞术(FCM)检测药物作用后细胞周期分布。结果:MTT试验显示塞来昔布对人鼻咽癌细胞株CNE-2Z增殖有抑制作用,其抑制效应具有时间及浓度依赖的特点;流式细胞术表明塞来昔布可引起CNE-2Z细胞G0/G1期阻滞;免疫组织化学检测显示塞来昔布下调PCNA、COX-2蛋白表达。结论:CNE-2Z细胞中存在COX-2表达,塞来昔布可抑制鼻咽癌CNE-2Z细胞增殖,可能成为鼻咽癌化疗的有效药物。 展开更多

关键词 塞来昔布 鼻咽癌细胞株cne-2Z 生长抑制

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EGCG通过上调MnSOD表达诱导鼻咽癌细胞株CNE-2凋亡

8

作者 刘强和 黄鑫 +2 位作者 向秋 伍靖武 雷迅 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2010年第11期605-607,共3页

目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯((-)-epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对鼻咽癌细胞株CNE-2的凋亡诱导作用、以及这个过程中MnSOD的表达变化特点。方法:应用噻唑蓝(MTT)法计算不同浓度EGCG作用于CNE-2鼻咽癌细胞后不同时间点的生... 目的:探讨表没食子儿茶素没食子酸酯((-)-epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对鼻咽癌细胞株CNE-2的凋亡诱导作用、以及这个过程中MnSOD的表达变化特点。方法:应用噻唑蓝(MTT)法计算不同浓度EGCG作用于CNE-2鼻咽癌细胞后不同时间点的生长抑制率,并通过细胞荧光显微镜观察其凋亡情况,同时应用RT-PCR法检测这个过程中MnSOD mRNA的表达变化。结果:EGCG可以诱导CNE-2细胞凋亡、抑制其生长,而且存在时间和剂量依赖关系,同时伴有MnSOD mRNA的表达上调。结论:EGCG能通过上调MnSOD mRNA表达诱导鼻咽癌细胞株CNE-2凋亡。 展开更多

关键词 表没食子儿茶素没食子酸酯 鼻咽癌细胞株 凋亡 锰超氧化物歧化酶

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二烯丙基二硫诱导人鼻咽癌CNE2细胞凋亡及其可能的分子机制 被引量：6

9

作者 唐海林 宋颖 +3 位作者 唐荣军 周秀田 曾希 苏琦 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2007年第8期598-602,共5页

背景与目的:二烯丙基二硫(DADS)是大蒜中的一种脂溶性单体化合物,对多种肿瘤细胞有促凋亡作用。本实验旨在探讨DADS抑制人鼻咽癌CNE2细胞增殖与诱导凋亡的生物学效应及可能的分子机制。方法:分别采用MTT、光学显微镜、流式细胞仪、DNA... 背景与目的:二烯丙基二硫(DADS)是大蒜中的一种脂溶性单体化合物,对多种肿瘤细胞有促凋亡作用。本实验旨在探讨DADS抑制人鼻咽癌CNE2细胞增殖与诱导凋亡的生物学效应及可能的分子机制。方法:分别采用MTT、光学显微镜、流式细胞仪、DNA琼脂糖凝胶电泳与Western blot检测DADS抑制CNE2细胞增殖与诱导凋亡作用及Bcl-2、Bax和半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶(Caspase3)蛋白的表达。结果:MTT结果显示,50、100、200及400μmol/LDADS作用CNE2细胞48h,抑制率分别为3.66%、14.25%、29.66%及61.28%,呈浓度依赖性(P<0.05)。形态学观察发现,DADS处理24h后,部分CNE2细胞变圆,体积明显缩小,胞质强嗜酸性,核固缩、深染,核染色质积聚至核膜周边,呈现凋亡细胞形态学改变。流式细胞术分析显示,50、100、200和400μmol/LDADS作用24h,凋亡率分别为(10.8±1.3)%、(14.8±1.1)%、(21.7±2.0)%及(29.8±2.6)%,呈浓度依赖性诱导CNE2细胞凋亡(n=3,P<0.05)。200及400μmol/LDADS分别作用CNE2细胞24h后,DNA凝胶电泳出现典型梯形条带。Western blot检测显示,50、100、200和400μmol/LDADS处理CNE2细胞24h后,Bcl-2蛋白与β-Actin的灰度值比分别是1.92±0.21、1.21±0.18、0.89±0.14及0.41±0.09,与对照组(2.24±0.26)比较,差异有显著性(P<0.05);Bax蛋白与β-Actin的灰度值比分别是0.78±0.14、1.12±0.19、1.54±0.22及2.08±0.27,与对照组(0.33±0.08)比较,差异有显著性(P<0.05);随浓度的增加,Bcl-2蛋白下调,Bax蛋白表达上调。200、400μmol/LDADS处理CNE2细胞24h后,与对照组相比,Caspase3酶原蛋白条带变细并且可见到蛋白裂解产物,表明DADS可以促进Caspase3的活化。结论:DADS具有抑制人鼻咽癌CNE2细胞增殖和诱导凋亡的作用,其机制可能与Bcl-2蛋白下调,Bax蛋白表达上调导致Bcl-2/Bax比值下降,促进Caspase3的活化有关。 展开更多

关键词 二烯丙基二硫 鼻咽癌 cne2细胞 凋亡

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肝素增强佛波酯对人鼻咽癌CNE2细胞的作用 :上调c-jun ,p53 ,p21的表达(英文) 被引量：7

10

作者 李红良 陈丹丹 +5 位作者 张海伟 钟玲 李小红 罗英儒 任先达 司徒锐 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期250-255,共6页

目的 :观察肝素联合佛波酯对人鼻咽癌细胞的增殖与凋亡的影响及其可能的分子机制。方法 :用细胞记数法、流式细胞术观察肝素联合佛波酯对人鼻咽癌细胞的增殖及细胞周期的影响 ;而用TUNEL、琼脂糖凝胶电泳、Westernblot等方法观察肝素与... 目的 :观察肝素联合佛波酯对人鼻咽癌细胞的增殖与凋亡的影响及其可能的分子机制。方法 :用细胞记数法、流式细胞术观察肝素联合佛波酯对人鼻咽癌细胞的增殖及细胞周期的影响 ;而用TUNEL、琼脂糖凝胶电泳、Westernblot等方法观察肝素与佛波酯联合应用对人鼻咽癌细胞凋亡的作用。结果 :肝素与佛波酯联合应用后对鼻咽癌细胞的生长抑制及其凋亡具有显著增强的作用 ,同佛波酯单独应用于诱导细胞凋亡相比 ,低剂量的肝素与佛波酯联合应用后发现 :TUNEL阳性细胞明显增多 ;G1 期细胞阻止 ,S期细胞明显减少 ,凋亡率增加 ;DNA“梯形”变化更加明显 ;c-jun ,p53 ,p2 1基因表达明显升高 ,而c-fos在整个用药过程中没有改变。结论 :肝素增强佛波酯对人鼻咽癌细胞的抗增殖及促凋亡 ,这可能与c-jun ,p53 ,p2 展开更多

关键词 肝素 细胞周期 细胞凋亡 佛波醇酯类 cne2细胞 鼻咽癌 c-jumn P53 P21

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5-氨基乙酰丙酸光动力杀伤人鼻咽癌耐药/非耐药细胞株的实验研究 被引量：3

11

作者 杨小民 罗荣城 +4 位作者 马红京 李黎波 丁雪梅 严晓 吕成伟 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1046-1049,共4页

目的观察5-氨基乙酰丙酸(5-aminolevulinic acid,5-ALA)光动力学效应对体外培养人鼻咽癌细胞株CNE2及其顺铂耐药株CNE2/DDP的生物作用,探讨光动力治疗多药耐药鼻咽癌的可行性。方法对CNE2与CNE2/DDP分别加入不同浓度的5-ALA(0.01、0.05... 目的观察5-氨基乙酰丙酸(5-aminolevulinic acid,5-ALA)光动力学效应对体外培养人鼻咽癌细胞株CNE2及其顺铂耐药株CNE2/DDP的生物作用,探讨光动力治疗多药耐药鼻咽癌的可行性。方法对CNE2与CNE2/DDP分别加入不同浓度的5-ALA(0.01、0.05、0.10、0.25、0.5、1.0、2.0、4.0mmol/L)孵育4h,予波长为630nm的半导体激光进行照射,能量密度分别为2、5、10、20J/cm2,继续孵育24h,用四唑盐比色法测定细胞存活率;两株细胞与2.0mmol/L浓度的5-ALA溶液共孵育4h后,用流式细胞仪检测细胞内生性光敏剂原卟啉Ⅸ的荧光强度。结果5-ALA光动力对体外培养的CNE2和CNE2/DDP细胞均有杀伤作用,表现为对5-ALA浓度、激光剂量的量-效依赖关系。激光能量为20J/cm2时,5-ALA对CNE2和CNE2/DDP细胞的半数杀伤浓度分别为0.07mmol/L与0.375mmol/L,二者比较差异显著(P<0.01);不同5-ALA浓度、不同激光剂量条件下CNE2细胞存活率显著低于CNE2/DDP(P<0.05);CNE2和CNE2/DDP的细胞内荧光强度分别为(197.33±1.45)、(106.36±2.31),相差非常显著(P<0.01)。结论5-ALA-PDT对CNE2和CNE2/DDP均有杀伤作用,但CNE2/DDP对其敏感性低于CNE2,表明CNE2/DDP对5-ALA-PDT存在一定程度的交叉抗性,增加5-ALA浓度和/或增大激光剂量可以在一定程度上克服这种抵抗。 展开更多

关键词 鼻咽癌 5-氨基乙酰丙酸 光动力学疗法 cne2 cne2/DDP 多药耐药

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肝素对叉孢素介导的人鼻咽癌CNE2细胞的增殖与凋亡的影响(英文) 被引量：4

12

作者 李红良 陈丹丹 +4 位作者 罗英儒 张海伟 任先达 刘建军 司徒锐 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期343-343,共1页

目的 :观察肝素对叉孢素介导的人鼻咽癌细胞的增殖与凋亡的影响 ,以及探讨其可能的分子机制。方法 :应用了MTT法、荧光染色、TUNEL、流式细胞术、琼脂糖凝胶电泳、RT -PCR及Westernblot等方法。结果 :肝素与叉孢素联合应用后对鼻咽癌细... 目的 :观察肝素对叉孢素介导的人鼻咽癌细胞的增殖与凋亡的影响 ,以及探讨其可能的分子机制。方法 :应用了MTT法、荧光染色、TUNEL、流式细胞术、琼脂糖凝胶电泳、RT -PCR及Westernblot等方法。结果 :肝素与叉孢素联合应用后对鼻咽癌细胞的增殖及凋亡具有显著的影响。低剂量的肝素与叉孢素联合应用 :细胞生长抑制率显著高于叉孢素单独应用 ;细胞核浓缩 ,核碎裂等形态学变化更加明显 ;TUNEL阳性细胞明显增多 ;凋亡率增加 ;DNA“梯形”变化也清晰可见 ;c-myc ,bax基因的表达明显高于叉孢素单独应用 ,而bcl- 2在整个用药过程中没有改变。结论 :肝素与叉孢素对人鼻咽癌细胞在抗增殖及促凋亡方面有协同作用 ,这可能与c -myc ,bax的表达上调有关 . 展开更多

关键词 肝素 细胞凋亡 叉孢素 蛋白激酶C 鼻咽癌 cne2细胞 细胞增殖

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抑瘤基因NGX6对鼻咽癌细胞株HNE1细胞生长的影响(英文) 被引量：6

13

作者 李江 黄宇琛 +5 位作者 李伟芳 谭琛 张秋红 彭聪 李小玲 李桂源 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期398-403,共6页

鼻咽癌是我国南方多发恶性肿瘤 ,它的发生发展与遗传因素密切相关 .采用定位候选克隆策略在 9p上克隆出一个候选抑瘤基因 ,命名为NGX6 .为了进一步研究它的功能 ,将NGX6基因的全长cDNA片段亚克隆至pcDNA3.1(+ )的表达载体中 ,通过脂质... 鼻咽癌是我国南方多发恶性肿瘤 ,它的发生发展与遗传因素密切相关 .采用定位候选克隆策略在 9p上克隆出一个候选抑瘤基因 ,命名为NGX6 .为了进一步研究它的功能 ,将NGX6基因的全长cDNA片段亚克隆至pcDNA3.1(+ )的表达载体中 ,通过脂质体转染入鼻咽癌细胞系HNE1中 ,Northern杂交方法筛选高效表达NGX6的细胞株 ,并借助细胞生长曲线、软琼脂糖集落形成实验、裸鼠体内接种实验和流式细胞仪对转染细胞的生物学行为进行了检测 .结果显示 ,转染了NGX6基因的HNE1细胞的生长速度明显减慢 ,在软琼脂中集落形成率较对照组显著下降 (P〈0 0 5 ) ,裸鼠体内成瘤的时间较对照组明显延长 ,瘤体的大小和重量较对照组明显减少 ,流式细胞仪检测发现细胞的凋亡率无明显变化 .为了明确NGX6蛋白在细胞中发挥作用的部位 ,进一步将NGX6的开放阅读框架完整正确地克隆到pEGFPC1的荧光载体中 ,转染到COS7细胞中 ,用荧光显微镜观察细胞中荧光的分布 ,发现荧光主要分布在细胞浆中 ,说明NGX6蛋白可能是一种胞浆蛋白 .该研究表明 ,NGX6在NPC的发生发展中起重要作用 ,为全面阐述NGX6的功能提供重要的信息 。 展开更多

关键词 抑瘤基因NGX6 鼻咽癌细胞株 HNE1细胞生长

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表皮生长因子受体调控的人鼻咽癌细胞系CNE2分泌蛋白质的筛选 被引量：5

14

作者 梁可 陈主初 +7 位作者 易红 李建玲 张鹏飞 李茂玉 李萃 冯雪萍 彭芳 肖志强 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第1期100-106,共7页

为筛选表皮生长因子受体(epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)调控的鼻咽癌(nasopharyngealcarcinoma,NPC)细胞的分泌蛋白质,揭示EGFR在NPC发病中的作用机制,采用无血清培养法培养NPC细胞系CNE2,并用转化生长因子(transforminggrowthfa... 为筛选表皮生长因子受体(epidermalgrowthfactorreceptor,EGFR)调控的鼻咽癌(nasopharyngealcarcinoma,NPC)细胞的分泌蛋白质,揭示EGFR在NPC发病中的作用机制,采用无血清培养法培养NPC细胞系CNE2,并用转化生长因子(transforminggrowthfactor-α,TGF-α)刺激CNE2细胞24h作为实验组,对照组CNE2细胞不用TGF-α刺激.超滤法脱盐并浓缩两组细胞的培养上清制备分泌蛋白,采用双向凝胶电泳技术(two-dimensionalelectrophoresis,2-DE)分离两组细胞的分泌蛋白,PDquest图像分析软件识别差异表达的蛋白质点,基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(matrix-assistedlaserdesorption/ionizationtimeofflightmassspectrometry,MALDI-TOF-MS)鉴定差异表达蛋白.建立了实验组和对照组CNE2细胞分泌蛋白的2-DE图谱,图像分析识别了22个差异蛋白质点,质谱鉴定了8个非冗余蛋白质,其功能涉及肿瘤细胞侵袭转移、细胞凋亡和增殖,为进一步揭示EGFR在NPC发病中的作用及其机制奠定了基础. 展开更多

关键词 鼻咽癌 cne2细胞 表皮生长因子受体(EGFR) 分泌蛋白质组 二维凝胶电泳 质谱

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二烯丙基二硫下调cyclin D1和CDK4的表达诱导人鼻咽癌CNE2细胞G_1期阻滞 被引量：3

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作者 胡波 邱青朝 +2 位作者 贺修培 赵其辉 贺修胜 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1203-1207,共5页

目的研究二烯丙基二硫(DADS)对人鼻咽癌CNE2细胞的影响及其分子机制。方法采用MTT法检测DADS对CNE2细胞增殖抑制作用;流式细胞术分析DADS对CNE2细胞周期分布的影响;运用RT-PCR和Western blot方法分析DADS作用CNE2细胞后,cyclin D1和CDK... 目的研究二烯丙基二硫(DADS)对人鼻咽癌CNE2细胞的影响及其分子机制。方法采用MTT法检测DADS对CNE2细胞增殖抑制作用;流式细胞术分析DADS对CNE2细胞周期分布的影响;运用RT-PCR和Western blot方法分析DADS作用CNE2细胞后,cyclin D1和CDK4的表达变化。结果 MTT结果显示,不同浓度DADS(90、140、240、400μmol·L-1)处理CNE2细胞48h后,生长抑制率分别为4.0%、13.8%、25.8%、51.2%;流式细胞术分析显示,DADS阻滞CNE2细胞于G1期,并呈浓度依赖性;RT-PCR和Western blot结果表明,细胞周期调控基因cyclinD1、CDK4表达下调。结论 DADS对CNE2细胞的增殖抑制作用与其阻滞细胞G1期有关,并且可能是通过抑制cyclin D1、CDK4的表达使CNE2细胞阻滞于G1期。 展开更多

关键词 二烯丙基二硫 鼻咽癌 cne2细胞 细胞周期 CYCLIN D1 CDK4

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低表达MICA/MICB导致NK细胞对人鼻咽癌多药耐药细胞(CNE2/DDP)杀伤活性下降 被引量：8

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作者 梅家转 周健 +1 位作者 郭坤元 魏红梅 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 2006年第5期349-352,共4页

目的探讨HLAⅠ类分子及MHCⅠ类链相关分子(MICA/MICB)在人鼻咽癌细胞株CNE2及多药耐药细胞株CNE2/DDP的表达及其对NK细胞杀伤活性的影响。方法流式细胞仪检测CNE2和CNE2/DDP细胞表面HLAⅠ类分子和MICA/MICB的表达情况;LDH释放法测定3例... 目的探讨HLAⅠ类分子及MHCⅠ类链相关分子(MICA/MICB)在人鼻咽癌细胞株CNE2及多药耐药细胞株CNE2/DDP的表达及其对NK细胞杀伤活性的影响。方法流式细胞仪检测CNE2和CNE2/DDP细胞表面HLAⅠ类分子和MICA/MICB的表达情况;LDH释放法测定3例健康者的NK细胞在不同效靶比时对CNE2、CNE2/DDP细胞的杀伤活性;效靶比10∶1时,用抗HLAⅠ类分子单抗(W6/32)和抗MICA/MICB单抗(BAMO-1)分别封闭HLAⅠ类分子和MICA/MICB,观察NK细胞杀伤CNE2、CNE2/DDP细胞活性的变化。结果CNE2/DDP细胞表面HLAⅠ类分子和MICA/MICB的表达均较CNE2细胞明显减少(P<0.01)。NK细胞对CNE2、CNE2/DDP细胞的杀伤活性在效靶比5∶1时分别是(9.37±2.14)%、(4.37±0·63)%;效靶比10∶1时分别是(27.14±1.82)%、(15.79±2.87)%;效靶比20∶1时分别是(36.40±4.28)%、(26.20±4·18)%;效靶比301时分别是(54.67±2.80)%、(40.29±2.73)%。各效靶比时NK细胞对CNE2、CNE2/DDP细胞的杀伤活性与HLAⅠ类分子和MICA/MICB相关,NK细胞对CNE2/DDP细胞的杀伤活性明显低于CNE2细胞(P<0.01)。效靶比10∶1时,W6/32明显增强NK细胞对CNE2、CNE2/DDP细胞的杀伤活性(P<0.01),BAMO-1明显抑制NK细胞对CNE2、CNE2/DDP细胞的杀伤活性(P<0.01)。结论HLAⅠ类分子和MICA/MICB在CNE2、CNE2/DDP的表达差异影响着NK细胞的杀伤活性,MICA/MICB在多药耐药肿瘤细胞的低表达导致耐药肿瘤细胞对NK细胞杀伤敏感性下降。 展开更多

关键词 鼻咽癌细胞 多药耐药细胞株 自然杀伤细胞 MHC Ⅰ类链相关分子A/B HLA Ⅰ类分子

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运用蛋白质组学技术研究EB病毒诱导鼻咽癌细胞CNE2表达变化的蛋白质 被引量：4

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作者 江培洲 甘明 +4 位作者 黄华 沈新明 应万涛 钱小红 姚开泰 《中山大学学报（医学科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期29-33,共5页

【目的】寻找并鉴定CNE2细胞在EB病毒感染后表达发生变化的功能蛋白质,为阐明该病毒诱导鼻咽上皮细胞发生生物学变化的作用机制提供线索。【方法】分别从EB病毒感染后的CNE2细胞和未经感染的CNE2细胞中抽提总蛋白质,通过双向电泳分离。... 【目的】寻找并鉴定CNE2细胞在EB病毒感染后表达发生变化的功能蛋白质,为阐明该病毒诱导鼻咽上皮细胞发生生物学变化的作用机制提供线索。【方法】分别从EB病毒感染后的CNE2细胞和未经感染的CNE2细胞中抽提总蛋白质,通过双向电泳分离。运用软件比较分析上述两组的蛋白质表达图谱,寻找表达有差异的蛋白质点。从凝胶上切下差异蛋白质点,通过基质辅助激光解吸/离子化飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定。【结果】图像分析显示,EB病毒感染后的CNE2细胞和未经感染的CNE2细胞之间存在一些明显差异的蛋白质点。通过MALDI-TOF-MS成功地鉴定了其中4个蛋白质点,EB病毒感染CNE2细胞后蛋白质GRP78和硫氧还蛋白过氧化物酶1表达上调,蛋白质肌动蛋白胞浆组分2和蛋白酶体ι链表达下调。【结论】EB病毒感染鼻咽上皮细胞后引起生物学变化的分子机制可能包括:①诱导细胞大量合成蛋白质以促进增生,同时上调蛋白质GRP78的表达而抗凋亡;②提高细胞内氧化状态而诱导蛋白质硫氧还蛋白过氧化物酶1的表达,并可能通过该蛋白质调控NF-κB和AP-1来影响细胞生长。 展开更多

关键词 表达 EB病毒感染 cne2细胞 蛋白质组学技术 鼻咽癌细胞 鼻咽上皮细胞 诱导 MALDI-TOF-MS 硫氧还蛋白 基质辅助激光解吸

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鼻咽癌上皮细胞株HNE1差异表达基因的分离与鉴定 被引量：2

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作者 张必成 周洁 +7 位作者 朱诗国 龚佳蕾 聂新民 吕红斌 何显锋 李小玲 胡赓熙 李桂源 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2003年第6期743-750,共8页

为了分离鼻咽癌差异表达基因 ,应用抑制性扣除杂交技术 ,在正向抑制性扣除杂交中 ,以鼻咽癌上皮细胞株HNE1cDNA作为检测子 ,以人胚鼻咽上皮细胞cDNA作为驱赶子 ;在反向抑制性扣除杂交中 ,以人胚鼻咽上皮细胞cDNA作为检测子 ,以鼻咽癌上... 为了分离鼻咽癌差异表达基因 ,应用抑制性扣除杂交技术 ,在正向抑制性扣除杂交中 ,以鼻咽癌上皮细胞株HNE1cDNA作为检测子 ,以人胚鼻咽上皮细胞cDNA作为驱赶子 ;在反向抑制性扣除杂交中 ,以人胚鼻咽上皮细胞cDNA作为检测子 ,以鼻咽癌上皮细胞株HNE1cDNA作为驱赶子 ,分别通过抑制性扣除杂交 ,构建了鼻咽癌上皮细胞株HNE1表达下调和表达上调的两个扣除cDNA文库 .从鼻咽癌相关的扣除cDNA文库中随机挑取 1 2 0 0个克隆 ,采用菌落PCR扩增其插入cDNA片段 ,自动点膜制备成cDNA微阵列膜 ,分别用鼻咽癌上皮细胞株HNE1、人胚鼻咽上皮mRNA经逆转录标记cDNA探针 ,分别与cDNA微阵列膜杂交 ,通过杂交信号的自动扫描分析 ,对杂交信号存在 5倍差异的克隆进行测序 ,获得了 1 0个鼻咽癌差异表达基因的cDNA片段 ,其中 3个为新基因序列 ,其GenBank登录号为 :AF5 1 0 1 88、AF5 1 0 1 89和AF5 1 0 1 90 ,7个代表已知基因序列 .采用RT PCR证实S1 0 0A8,CK1 9和RBP1基因在人胚鼻咽上皮中高表达而在鼻咽癌细胞株HNE1中低表达 . 展开更多

关键词 鼻咽癌细胞株HNEl 抑制性扣除杂交 CDNA微阵列 差异表达基因

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分子靶向药物诱导耐药鼻咽癌CNE2/DDP细胞NKG2DLs的表达 被引量：3

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作者 黄宇贤 王杨 +5 位作者 李玉华 宋朝阳 陈锦章 贺艳杰 周雪云 郭坤元 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期250-255,共6页

目的:探讨不同分子靶向药物对高表达与低表达ATP结合转运蛋白G超家族成员2(ATP-binding cassette super-family Gmember 2,ABCG2)的人耐药鼻咽癌CNE2/DDP细胞(分别简写为ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP)表面NKG2D配体(natural kil... 目的:探讨不同分子靶向药物对高表达与低表达ATP结合转运蛋白G超家族成员2(ATP-binding cassette super-family Gmember 2,ABCG2)的人耐药鼻咽癌CNE2/DDP细胞(分别简写为ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP)表面NKG2D配体(natural killer group 2 member Dligands,NKG2DLs)表达的诱导作用及其对NK细胞杀伤敏感性的影响。方法:免疫磁珠法分选ABCG2highCNE2/DDP、ABCG2lowCNE2/DDP细胞及NK细胞。流式细胞术检测分选细胞的纯度和不同分子靶向药物(硼替佐米、索拉非尼、舒尼替尼)处理前后ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP细胞NKG2DLs的表达率。LDH释放法检测不同药物处理前后ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP细胞对NK细胞杀伤的敏感性。结果:ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP细胞表面ABCG2的表达率分别为(91.40±2.32)%和(1.70±0.24)%。分选后NK细胞中CD3-CD16+CD56+细胞的比例达90%以上。药物处理前,ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP细胞MICA、MICB、ULBP1、ULBP2和ULBP3呈弱表达;经不同分子靶向药物处理后,5种NKG2DLs的表达率均明显上升(P<0.01),以舒尼替尼处理后NKG2DLs的表达率升高最明显。随着NKG2DLs表达的上调,ABCG2highCNE2/DDP和ABCG2lowCNE2/DDP细胞对NK细胞杀伤的敏感性也随之升高。结论:不同分子靶向药物可诱导耐药鼻咽癌CNE2/DDP细胞NKG2DLs的表达,以舒尼替尼的诱导作用最强,且肿瘤细胞NKG2DLs的表达与其对NK细胞杀伤敏感性之间存在线性关系。 展开更多

关键词 分子靶向药物 三磷酸腺苷(ATP)结合转运蛋白G超家族成员2(ABCG2) 鼻咽癌细胞株 NKG2D配体 自然杀伤细胞

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ARA55过表达激活内源性线粒体凋亡通路诱导CNE2鼻咽癌细胞凋亡 被引量：1

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作者 崔兆磊 辛小琴 陈燕 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第20期2487-2491,共5页

目的:研究外源性ARA55表达上调对人CNE2鼻咽癌细胞生物学特性的影响,初步探讨相关作用机制。方法:实验设过表达组、空载体组及空白对照组。采用ZLip2000将前期构建的pCMV-ARA55-EGFP重组及空白载体分别转染至人CNE2细胞系,经荧光显微镜... 目的:研究外源性ARA55表达上调对人CNE2鼻咽癌细胞生物学特性的影响,初步探讨相关作用机制。方法:实验设过表达组、空载体组及空白对照组。采用ZLip2000将前期构建的pCMV-ARA55-EGFP重组及空白载体分别转染至人CNE2细胞系,经荧光显微镜及Western blot进一步观察和鉴定过表达组中ARA55-EGFP融合蛋白的表达;通过设置细胞增殖、侵袭迁移及凋亡等系列实验,探讨ARA55在鼻咽癌中发挥的生物学功能;Western blot检测线粒体凋亡途径中系列蛋白的表达变化。结果:转染重组过表达质粒的CNE2细胞系中可检测到ARA55-EGFP融合蛋白的表达;体外细胞功能实验结果显示,ARA55蛋白过表达后,CNE2细胞的增殖受到抑制,体外迁移和侵袭的细胞数显著减少(P<0.05)。同时,凋亡相关实验结果显示,ARA55过表达组的细胞凋亡率(早期+中晚期)较空载体组显著升高(P<0.05);Western blot进一步证实ARA55过表达组中Bcl-2蛋白的表达下调,细胞色素C(Cytochrome C)表达明显增加,下游Caspase-9和Caspase-3的剪接体表达增加。结论:过表达外源性ARA55可诱导内源性线粒体凋亡通路的激活,从而抑制CNE2鼻咽癌细胞增殖,诱导凋亡。 展开更多

关键词 ARA55 鼻咽癌 cne2细胞 凋亡 机制

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