吴茱萸碱部分通过人白介素1所介导的途径诱导人黑色素瘤A375-S2细胞死亡 被引量：18

1

作者 王澈 王敏伟 +2 位作者 田代真一 小野寺敏 池岛乔 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第12期1478-1481,共4页

目的研究吴茱萸碱(evodiamine)诱导人黑色素瘤A375S2细胞死亡的作用机制及其与细胞因子人白介素1(interleukin1,IL1)信号转导途径之间的关系。方法MTT检测法,DNA凝胶电泳法及Westernblot法。结果IL1受体拮抗因子(IL1receptorantagonist,... 目的研究吴茱萸碱(evodiamine)诱导人黑色素瘤A375S2细胞死亡的作用机制及其与细胞因子人白介素1(interleukin1,IL1)信号转导途径之间的关系。方法MTT检测法,DNA凝胶电泳法及Westernblot法。结果IL1受体拮抗因子(IL1receptorantagonist,IL1ra)在24h时能够部分抑制吴茱萸碱诱导的A375S2细胞死亡。吴茱萸碱在诱导A375S2细胞死亡的过程中,Fas配体(Fasligand,FasL)的蛋白表达量升高,激活其下游的caspase8和caspase3,进而引起DNA的损伤并激活p53蛋白,同时Bax/Bcl2的蛋白表达比例被上调。在经过IL1ra预处理后,这些变化均被部分的抑制或逆转。结论吴茱萸碱诱导A375S2细胞死亡的作用是部分通过IL1介导的信号转导途径而实现的。 展开更多

关键词 吴茱萸碱 人白介素1 a375-s2细胞 FAS CASPASE p53 BAX/BCL-2

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人白细胞介素1β通过caspase途径诱导人黑色素瘤A375-S2细胞凋亡 被引量：8

2

作者 王澈 王敏伟 +2 位作者 田代真一 小野寺敏 池岛乔 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期1138-1143,共6页

目的 :对interleukin - 1β(IL - 1β)诱导人黑色素瘤A375 -S2细胞凋亡的信号转导途径进行研究。 方法 :使用倒置显微镜观察细胞形态学变化。通过MTT法测定IL - 1β对A375 -S2细胞的抑制作用以及细胞内半胱氨酸蛋白酶 (caspases)与这种... 目的 :对interleukin - 1β(IL - 1β)诱导人黑色素瘤A375 -S2细胞凋亡的信号转导途径进行研究。 方法 :使用倒置显微镜观察细胞形态学变化。通过MTT法测定IL - 1β对A375 -S2细胞的抑制作用以及细胞内半胱氨酸蛋白酶 (caspases)与这种作用的关系。利用乳酸脱氢酶 (LDH)测定法对IL - 1β作用后细胞的损伤情况进行分析。琼脂糖凝胶电泳法检测IL - 1β对细胞DNA降解的影响。 结果 :IL - 1β对A375 -S2细胞的抑制作用呈剂量和时间依赖性 ,在 10 -9mol/L作用 72h时达到 90 %以上。caspase- 1、- 3、- 8、- 9和caspase - 10的抑制剂能够部分抑制IL -1β早期诱导的细胞凋亡。LDH活力测定显示 ,在IL - 1β诱导的细胞死亡过程中 ,凋亡占主导地位 ,并呈现剂量和时间依赖性。细胞经过 10 -11mol/LIL - 1β处理 72h后 ,出现凋亡典型的DNA梯状条带 ,与上述结果一致。 结论 :IL -1β能够诱导人黑色素瘤A375 -S2细胞凋亡 。 展开更多

关键词 白细胞介素1 黑色素瘤 a375-s2细胞 细胞凋亡 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶

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全反式维A酸、阿维A和他扎罗汀对人黑色素瘤细胞A375凋亡和Bax/Bcl-2蛋白表达的影响及意义 被引量：8

3

作者 冉立伟 谭升顺 +3 位作者 王万卷 邱实 雷小兵 曾惟惠 《第一军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期972-974,978,共4页

目的探讨全反式维A酸(ATRA)、阿维A及他扎罗汀对人黑色素瘤细胞A375凋亡及Bax/Bcl-2蛋白表达的影响及其意义。方法采用体外培养和流式细胞仪检测细胞凋亡(AnnexinV-PI法),SABC免疫细胞化学方法检测细胞Bax/Bcl-2蛋白表达情况。结果浓度... 目的探讨全反式维A酸(ATRA)、阿维A及他扎罗汀对人黑色素瘤细胞A375凋亡及Bax/Bcl-2蛋白表达的影响及其意义。方法采用体外培养和流式细胞仪检测细胞凋亡(AnnexinV-PI法),SABC免疫细胞化学方法检测细胞Bax/Bcl-2蛋白表达情况。结果浓度均为10-5mol/L的ATRA、阿维A及他扎罗汀能不同程度地诱导了人黑色素瘤细胞A375凋亡,其中阿维A作用最为显著,凋亡率13.42%,明显高于对照组、ATRA及他扎罗汀组(均P<0.05);其次为ATRA(5.03%,明显高于对照组及他扎罗汀组,P<0.05)和他扎罗汀组(凋亡率2.88%)。3种维A酸亦使A375细胞Bax蛋白阳性表达增强而Bcl-2蛋白阳性表达减弱(P<0.05),其中阿维A作用最强,其次为ATRA和他扎罗汀。结论维A酸促进A375细胞凋亡可能部分通过以线粒体为核心的凋亡途径。阿维A可能是防治黑色素瘤的有效药物。 展开更多

关键词 维A酸 人黑色素瘤细胞 a375 凋亡 Bax/Bcl-2蛋白

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2-丁亚砜-1,4-萘醌诱导人恶性黑色素瘤A375细胞凋亡及其机制 被引量：2

4

作者 徐宛婷 李雨 +2 位作者 罗英花 刘畅 金成浩 《暨南大学学报（自然科学与医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期1-8,共8页

目的:探究2-丁亚砜-1,4-萘醌(BSNQ)对人恶性黑色素瘤A375细胞的诱导凋亡作用,阐明其诱导凋亡的机制.方法:MTT比色法检测BSNQ对人黑色素瘤A375细胞的杀伤作用.Annexin V-FITC/PI双染法与流式细胞术检测BSNQ对人黑色素瘤A375细胞的诱导凋... 目的:探究2-丁亚砜-1,4-萘醌(BSNQ)对人恶性黑色素瘤A375细胞的诱导凋亡作用,阐明其诱导凋亡的机制.方法:MTT比色法检测BSNQ对人黑色素瘤A375细胞的杀伤作用.Annexin V-FITC/PI双染法与流式细胞术检测BSNQ对人黑色素瘤A375细胞的诱导凋亡作用.Western blotting法检测Akt信号通路相关蛋白的表达情况.流式细胞术检测BSNQ对A375细胞内ROS的调控作用.结果:BSNQ处理A375细胞其存活率逐渐降低.BSNQ能够显著诱导A375细胞发生凋亡.抗凋亡蛋白p-Akt和Bcl-2表达量逐渐降低,pro-caspase-3表达量逐渐降低,促凋亡蛋白Bad和cleaved-caspase-3表达量逐渐升高(P<0.05).BSNQ能够显著增加细胞内ROS水平.同时,BSNQ与NAC共同处理后,能够显著降低BSNQ诱导的细胞凋亡程度.结论:BSNQ通过上调细胞内ROS水平,下调Akt信号通路的活性,诱导人黑色素瘤A375细胞凋亡. 展开更多

关键词 2-丁亚砜-1 4-萘醌 人黑色素瘤a375细胞 细胞凋亡 AKT信号通路 活性氧

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质子辐射对人恶性黑色素瘤A375细胞的DNA损伤影响研究 被引量：1

5

作者 王巧娟 隋丽 +4 位作者 刘建成 汪越 马立秋 朱润 郭刚 《原子能科学技术》 EI CAS CSCD 北大核心 2023年第12期2455-2466,共12页

为研究质子辐射对人恶性黑色素瘤的杀伤效应,本研究利用北京HI-13串列加速器提供的15 MeV质子,以0、1、2、4、8 Gy剂量辐照A375细胞,以细胞克隆术和流式细胞术检测A375细胞的克隆形成率、周期阻滞及凋亡率,用免疫荧光法检测2 Gy辐照后... 为研究质子辐射对人恶性黑色素瘤的杀伤效应,本研究利用北京HI-13串列加速器提供的15 MeV质子,以0、1、2、4、8 Gy剂量辐照A375细胞,以细胞克隆术和流式细胞术检测A375细胞的克隆形成率、周期阻滞及凋亡率,用免疫荧光法检测2 Gy辐照后细胞的γH2AX焦点数,并与相同条件下的γ射线辐射对比。结果表明,在1~8 Gy剂量下,随着剂量的增加,A375细胞的存活率下降,在4~8 Gy剂量下,细胞的存活率明显低于γ射线。辐照后12 h,细胞G2/M期阻滞随剂量的增加而增加,质子辐射诱导的周期阻滞强于γ射线;辐照后48 h,γ射线诱导的细胞周期阻滞已基本解除,但质子诱导的细胞周期阻滞除1 Gy外,2~8 Gy均未完全解除。辐射诱导的细胞凋亡随照射剂量的增加而增加,随着时间的延长,凋亡比例有所增加,且质子诱导的细胞凋亡率高于γ射线。辐照2 Gy后,γ射线和质子诱导的γH2AX焦点峰值均在照后1 h出现,质子辐射诱导的γH2AX焦点数和大小均高于γ射线。以上结果表明,质子辐射可有效杀伤恶性黑色素瘤A375细胞,在黑色素瘤治疗中有潜在应用价值。 展开更多

关键词 人恶性黑色素瘤a375细胞 质子辐射 细胞周期 克隆形成率 细胞凋亡 γH2AX焦点

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紫草素诱导A375-S2细胞凋亡的分子机制研究 被引量：41

6

作者 吴振 吴立军 +2 位作者 田代真一 小野寺敏 池岛乔 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期202-205,共4页

目的　研究紫草素诱导人黑色素瘤A375 S2细胞凋亡的分子机制。方法　MTT法、Hoechst33258荧光染色、DNA片段化分析、Westernblot、流式细胞分析以及caspase活力分析等。结果　10μmol·L-1紫草素可明显地抑制A375 S2细胞的生长,其... 目的　研究紫草素诱导人黑色素瘤A375 S2细胞凋亡的分子机制。方法　MTT法、Hoechst33258荧光染色、DNA片段化分析、Westernblot、流式细胞分析以及caspase活力分析等。结果　10μmol·L-1紫草素可明显地抑制A375 S2细胞的生长,其半数有效抑制浓度IC50为 (10 9±1 8)μmol·L-1。10μmol·L-1紫草素可诱导A375 S2细胞凋亡,并经历了caspase 9和caspase 3的激活。紫草素促进p53蛋白的积聚,Bax蛋白表达的上调和Bcl xL蛋白表达的下调,进而导致细胞色素C的释放,致使细胞凋亡。紫草素可使细胞周期停止在G1 期。结论　紫草素可诱导A375 S2细胞周期停止在G1 期,其诱导细胞凋亡的途径经过p53介导的Bax和caspase 9的激活。 展开更多

关键词 紫草素 人黑色素瘤a375-s2细胞 凋亡 细胞周期 P53

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冬凌草甲素通过改变Bax/Bcl-xL表达激活caspase-3诱导A375-S2细胞凋亡 被引量：24

7

作者 张春玲 吴立军 +3 位作者 左海军 田代真一 小野寺敏 池岛乔 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期669-672,共4页

目的　研究冬凌草甲素诱导人黑色素瘤A375 S2细胞凋亡的作用原理。方法　形态学观察 ,DNA凝胶电泳法及WesternBlot法。结果　冬凌草甲素能明显诱导A375 S2细胞发生凋亡 ,其作用呈明显的量效关系和时间依赖性。形态学观察可见凋亡小体... 目的　研究冬凌草甲素诱导人黑色素瘤A375 S2细胞凋亡的作用原理。方法　形态学观察 ,DNA凝胶电泳法及WesternBlot法。结果　冬凌草甲素能明显诱导A375 S2细胞发生凋亡 ,其作用呈明显的量效关系和时间依赖性。形态学观察可见凋亡小体的形成 ,琼脂糖凝胶电泳可见凋亡典型的DNA梯带 ;caspase 3的抑制剂能阻止caspase 3的活力升高 ;免疫印迹结果显示冬凌草甲素作用A375 S2细胞 12h改变Bax与Bcl xL蛋白的表达 ;且发现caspase 3的底物PARP蛋白在 12h时被降解。结论　冬凌草甲素 (34 3μmol·L-1)诱导A375 S2细胞凋亡 ,这种作用是通过改变了Bax/Bcl xL的表达比率 ,激活caspase 3而实现的。 展开更多

关键词 冬凌草甲素 a375-s2细胞 凋亡 Bax/Bcl—xL CASPASE-3

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薯蓣苷元诱导人黑素瘤细胞A375-S2凋亡依赖半胱天冬酶和MAPK途径 被引量：6

8

作者 霍锐 周秋丽 +4 位作者 王本祥 王敏伟 田代真一 小野寺敏 池岛乔 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期270-275,共6页

目的　研究薯蓣苷元诱导人黑素瘤细胞A375 S2凋亡的机制。方法　MTT法测定细胞生长抑制率及半胱天冬酶和有丝分裂原活化的蛋白激酶(MAPK)抑制剂对薯蓣苷元诱导细胞凋亡的影响。电镜观察细胞形态变化。流式细胞仪检测细胞凋亡及周期分... 目的　研究薯蓣苷元诱导人黑素瘤细胞A375 S2凋亡的机制。方法　MTT法测定细胞生长抑制率及半胱天冬酶和有丝分裂原活化的蛋白激酶(MAPK)抑制剂对薯蓣苷元诱导细胞凋亡的影响。电镜观察细胞形态变化。流式细胞仪检测细胞凋亡及周期分布。用半胱天冬酶活力检测试剂盒测定半胱天冬酶活力。结果　薯蓣苷元抑制A375 S2细胞的生长呈时间 剂量依赖性。经薯蓣苷元处理后的A375 S2细胞表现出典型的凋亡特征 :细胞表面微绒毛消失、胞质空泡化、染色质浓集、边聚。流式细胞仪检测表明薯蓣苷元导致DNA片段化和细胞周期阻滞在G0 /G1期。半胱天冬酶家族抑制剂 (z VAD fmk )和p38MAPK抑制剂 (SB2 0 35 80 )可部分抑制薯蓣苷元诱导的A375 S2细胞凋亡。结论薯蓣苷元可诱导A375 S2细胞凋亡。其诱导凋亡作用与半胱天冬酶及MAPK的活化相关。 展开更多

关键词 薯蓣苷元 细胞 a375-s2 凋亡 半胱氨酸蛋白酶类 蛋白激酶类

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水飞蓟素和Fas激动性抗体CH11共同作用诱导A375-S2细胞凋亡 被引量：4

9

作者 杨小珂 李林昊 +4 位作者 周蓓 吴立军 田代真一 小野寺敏 池岛乔 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1242-1245,共4页

目的水飞蓟素和CH11共同作用诱导人黑色素瘤细胞A375-S2凋亡的分子机制。方法结晶紫法测定细胞生长抑制率;细胞凋亡的形态学观察,LDH法测定凋亡与坏死的比率;用免疫印迹法检测凋亡抑制性的去乙酰化酶SIRT1、Bc l-2家族成员(抗凋亡蛋白Bc... 目的水飞蓟素和CH11共同作用诱导人黑色素瘤细胞A375-S2凋亡的分子机制。方法结晶紫法测定细胞生长抑制率;细胞凋亡的形态学观察,LDH法测定凋亡与坏死的比率;用免疫印迹法检测凋亡抑制性的去乙酰化酶SIRT1、Bc l-2家族成员(抗凋亡蛋白Bc l-2,Bc l-xL和促凋亡蛋白Bax)、细胞色素C和Caspase-3的表达。结果水飞蓟素和CH11共同作用能诱导A375-S2细胞发生凋亡;形态学观察可见凋亡小体的形成;免疫印迹法检测发现水飞蓟素和CH11共同作用的A375-S2细胞中Bax蛋白的表达增加,Bc l-2蛋白和Bc l-xL蛋白的表达降低,细胞色素C释放增加,pro-caspase-3表达量明显降低。结论水飞蓟素协同CH11能明显促进A375-S2细胞的凋亡。 展开更多

关键词 水飞蓟素 CH11 协同作用 a375-s2细胞 凋亡

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水飞蓟素在紫外线照射诱导A375-S2细胞凋亡中发挥抑制作用 被引量：6

10

作者 李林昊 吴立军 +3 位作者 田代真一 小野寺敏 内海文彰 池岛乔 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第10期1873-1878,共6页

目的:从天然药物中筛选出抑制紫外线照射诱导人黑色素瘤细胞A375-S2凋亡的有效单体。方 法:MTT法测定细胞生长抑制率;形态学观察,DNA凝胶电泳及LDH法;用半胱天冬酶活力检测试剂盒测定半胱天 冬酶活力;用免疫印记法检测Bcl-2家族成员(Bcl... 目的:从天然药物中筛选出抑制紫外线照射诱导人黑色素瘤细胞A375-S2凋亡的有效单体。方 法:MTT法测定细胞生长抑制率;形态学观察,DNA凝胶电泳及LDH法;用半胱天冬酶活力检测试剂盒测定半胱天 冬酶活力;用免疫印记法检测Bcl-2家族成员(Bcl-2,Bcl-xL和Bax)的表达。结果:紫外线照射(2．4 J／cm2,5 min)能显著诱导A375-S2细胞发生凋亡,其作用呈明显时间依赖性。形态学观察可见凋亡小体的形成,琼脂糖凝 胶电泳可见凋亡典型的DNA梯带;水飞蓟素具有抑制紫外线照射(2．4 J／cm2,5 min)诱导A375-S2细胞凋亡的作 用,水飞蓟素作用于紫外线照射(2．4 J／cm2,5 min)的A375-S2细胞,培养12 h,使紫外线照射诱导的半胱天冬酶 -9、半胱天冬酶-3的活力降低;免疫印记法检测发现水飞蓟素作用的A375-S2细胞(紫外线照射)中Bcl-2蛋 白和Bcl-xL蛋白的表达增加。结论:水飞蓟素明显抑制紫外线照射诱导的A375-S2细胞的凋亡,其抑制凋亡作 用与半胱天冬酶途径和线粒体途径相关。 展开更多

关键词 紫外线 a375-s2细胞 水飞蓟素 细胞凋亡 半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶

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吴茱萸碱诱导A375-S2细胞死亡过程中对ERK激酶的调控 被引量：3

11

作者 张莹 张起辉 +3 位作者 吴立军 田代真一 小野寺敏 池岛乔 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2004年第12期2175-2179,共5页

目的对比吴茱萸碱与化疗药物对A375-S2细胞的细胞毒活性,并且研究PKC及ERK激酶在吴茱萸碱诱导A375-S2细胞死亡中的作用。方法MTT法,Western印迹法。结果虽吴茱萸碱对A375-S2细胞毒作用比化疗药物放线菌素D、顺铂和5-氟尿嘧啶弱,但对药... 目的对比吴茱萸碱与化疗药物对A375-S2细胞的细胞毒活性,并且研究PKC及ERK激酶在吴茱萸碱诱导A375-S2细胞死亡中的作用。方法MTT法,Western印迹法。结果虽吴茱萸碱对A375-S2细胞毒作用比化疗药物放线菌素D、顺铂和5-氟尿嘧啶弱,但对药物撤除后细胞继续增殖能力的影响远胜于3种化疗药物。低浓度(10μg/L)佛波酯(PMA)引起的PKC的激活可部分抑制吴茱萸碱引起的细胞死亡,PKC及ERK抑制剂可逆转这种作用,而且吴茱萸碱减少了ERK蛋白表达,并降低了ERK的磷酸化水平。结论吴茱萸碱对A375-S2细胞的细胞毒作用即使在药物撤除后仍对细胞继续增殖能力产生抑制作用。吴茱萸碱可通过减少ERK及磷酸化ERK的蛋白表达而阻断ERK激酶对细胞的保护作用。 展开更多

关键词 吴茱萸碱 黑色素瘤 a375-s2细胞 有丝分裂素激活蛋白激酶类

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