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双阴性选择法纯化培养人骨髓多能成体祖细胞
被引量：
12
1
作者
慕宁
高毅
唐力军
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2005年第5期535-537,共3页
目的建立体外分选纯化及培养人骨髓来源多能成体祖细胞(MAPCs)的方法.方法取健康成人志愿者适量骨髓采用梯度密度离心法分离获取单个核细胞,贴壁培养后,将获取的骨髓贴壁细胞通过CD45、血糖蛋白A(GlyA)免疫微磁珠(miniMACS)负分选,流式...
目的建立体外分选纯化及培养人骨髓来源多能成体祖细胞(MAPCs)的方法.方法取健康成人志愿者适量骨髓采用梯度密度离心法分离获取单个核细胞,贴壁培养后,将获取的骨髓贴壁细胞通过CD45、血糖蛋白A(GlyA)免疫微磁珠(miniMACS)负分选,流式细胞术鉴定分选后细胞纯度;对传代到不同阶段的细胞进行CD45、GlyA流式细胞分析,初步了解MAPCs在培养、增殖过程中的免疫学稳定性.结果通过miniMACS分选,平均每1×106/ml骨髓贴壁细胞可分选出约(5～10)×104/ml的MAPCs,分选前后细胞活力分别为(96.7±1.7)%和(96.0±2.4)%,无明显差异;自制的培养基培养分选后的MAPCs生长良好,最长传代到第16代;流式细胞仪分析获取的CD45、G1yA-细胞纯度大于98%;流式细胞仪分析传代第4、8、12代MAPCs,CD45-、G1yA-细胞纯度大于98%.结论CD45、GlyA miniMACS负分选可从骨髓中分离高纯度的MAPCs;MAPCs在本室自制的人MAPCs培养基中体外有较强的增殖能力,且能保持较长时间的稳定状态.
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关键词
人骨髓来源多能成体祖细胞
免疫磁珠分离法
分离纯化
细胞
培养
流式
细胞
术
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职称材料
犬骨髓多能成体祖细胞的体外培养、鉴定及向平滑肌样细胞的诱导分化
被引量：
2
2
作者
温昱
李彬
+4 位作者
党瑞山
张传森
张喜
刘艳春
李瑞
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第6期593-597,共5页
目的:探讨犬骨髓多能成体祖细胞(MAPC)的体外培养条件、生物学特性及其向平滑肌样细胞分化的可能性。方法:观察体外培养犬骨髓多能成体祖细胞的形态、生长情况,检测其表面标志,利用流式细胞技术检测MAPC的生长周期及特异表面标志表达率...
目的:探讨犬骨髓多能成体祖细胞(MAPC)的体外培养条件、生物学特性及其向平滑肌样细胞分化的可能性。方法:观察体外培养犬骨髓多能成体祖细胞的形态、生长情况,检测其表面标志,利用流式细胞技术检测MAPC的生长周期及特异表面标志表达率;并以分化培养基诱导培养,采用RT-PCR方法检测骨髓多能成体祖细胞OCT-4及分化细胞SM-MHC (smooth muscle cells-myosin heavy chain)表达;检测分化细胞有无平滑肌细胞表面标志的表达。结果:光镜下观察犬骨髓多能成体祖细胞体积偏大,长多角型,数个细长伪足,细胞核大,胞质丰富,细胞增殖能力旺盛;表达表面标志CD13和SSEA-1.不表达CD44、CD45、CD133和MHCⅡ;RT-PCR结果显示表达OCT-4。诱导分化后,分化细胞表达平滑肌细胞表面标志——α^- SMA、calponin、SM-MHC;RT-PCR结果显示表达SM-MHC。结论:体外成功培养犬骨髓多能成体祖细胞,具有与文献报道类似的生物学特征;MAPC在一定诱导条件下具有向平滑肌样细胞分化的潜能。
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关键词
骨髓
多能
成体
祖细胞
细胞
培养
细胞
分化
平滑肌样
细胞
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职称材料
免疫磁珠法分选人骨髓多能成体祖细胞及初步鉴定
3
作者
慕宁
汪艳
+2 位作者
谢金敏
朱应乾
高毅
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第10期1048-1051,共4页
目的：应用免疫磁珠法分选人骨髓多能成体祖细胞,观察其分选效果,建立体外分选纯化及培养人骨髓来源多能成体祖细胞（hMAPCs）的方法.方法：取健康成人志愿者适量骨髓后采用梯度密度离心法分离获取单个核细胞,在自制培养基下贴壁培养后...
目的：应用免疫磁珠法分选人骨髓多能成体祖细胞,观察其分选效果,建立体外分选纯化及培养人骨髓来源多能成体祖细胞（hMAPCs）的方法.方法：取健康成人志愿者适量骨髓后采用梯度密度离心法分离获取单个核细胞,在自制培养基下贴壁培养后,将获取的骨髓贴壁细胞通过CD45、血糖蛋白A（GlyA）免疫微磁珠（miniMACS）负分选,锥虫蓝拒染实验计数MACS分选前后细胞活力.流式细胞仪鉴定分选后细胞纯度;流式细胞仪分析培养细胞CD29、CD44、CD34和HLA-DR表达情况.结果：通过MACS分选,平均每1×106/ml骨髓贴壁细胞可分选出约（5～10）×104/ml hMAPCs,分选后的hMAPCs细胞生长良好,最长传代到第20代.分选前后细胞活力分别为（96.7±1.7）%和（96.0±2.4）%,无明显差异;流式细胞仪分析获取的CD45-、GlyA-细胞纯度大于98%;流式细胞仪检测hMAPCs中CD29阳性表达细胞比率为99.2%,CD44阳性细胞比率为98.3%,CD34阳性细胞比率为1.2%,HLA-DR阳性细胞比率为5.3%.结论：CD45、GlyA免疫微磁珠负分选可从骨髓中分离高纯度的hMAPCs;分选后hMAPCs在自行研制的培养基中有较强的增殖能力.
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关键词
骨髓
祖代
细胞
多能
成体
祖细胞
免疫磁化分离
细胞
培养技术
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职称材料
题名
双阴性选择法纯化培养人骨髓多能成体祖细胞
被引量：
12
1
作者
慕宁
高毅
唐力军
机构
南方医科大学珠江医院普外科
出处
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2005年第5期535-537,共3页
基金
广东省"十五"重点科技攻关专项基金资助项目(2002A3020206)~~
文摘
目的建立体外分选纯化及培养人骨髓来源多能成体祖细胞(MAPCs)的方法.方法取健康成人志愿者适量骨髓采用梯度密度离心法分离获取单个核细胞,贴壁培养后,将获取的骨髓贴壁细胞通过CD45、血糖蛋白A(GlyA)免疫微磁珠(miniMACS)负分选,流式细胞术鉴定分选后细胞纯度;对传代到不同阶段的细胞进行CD45、GlyA流式细胞分析,初步了解MAPCs在培养、增殖过程中的免疫学稳定性.结果通过miniMACS分选,平均每1×106/ml骨髓贴壁细胞可分选出约(5～10)×104/ml的MAPCs,分选前后细胞活力分别为(96.7±1.7)%和(96.0±2.4)%,无明显差异;自制的培养基培养分选后的MAPCs生长良好,最长传代到第16代;流式细胞仪分析获取的CD45、G1yA-细胞纯度大于98%;流式细胞仪分析传代第4、8、12代MAPCs,CD45-、G1yA-细胞纯度大于98%.结论CD45、GlyA miniMACS负分选可从骨髓中分离高纯度的MAPCs;MAPCs在本室自制的人MAPCs培养基中体外有较强的增殖能力,且能保持较长时间的稳定状态.
关键词
人骨髓来源多能成体祖细胞
免疫磁珠分离法
分离纯化
细胞
培养
流式
细胞
术
Keywords
multipotent adult progenitor cells
magnetic-activated cell sorting
flow cytometry
cell culture
cell purification
分类号
R329.2 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
犬骨髓多能成体祖细胞的体外培养、鉴定及向平滑肌样细胞的诱导分化
被引量：
2
2
作者
温昱
李彬
党瑞山
张传森
张喜
刘艳春
李瑞
机构
第二军医大学基础部人体解剖学教研室
第二军医大学长征医院骨科
第二军医大学基础部人体解剖学教研室生物医学工程研究所
出处
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007年第6期593-597,共5页
基金
国家自然科学基金(30672045).~~
文摘
目的:探讨犬骨髓多能成体祖细胞(MAPC)的体外培养条件、生物学特性及其向平滑肌样细胞分化的可能性。方法:观察体外培养犬骨髓多能成体祖细胞的形态、生长情况,检测其表面标志,利用流式细胞技术检测MAPC的生长周期及特异表面标志表达率;并以分化培养基诱导培养,采用RT-PCR方法检测骨髓多能成体祖细胞OCT-4及分化细胞SM-MHC (smooth muscle cells-myosin heavy chain)表达;检测分化细胞有无平滑肌细胞表面标志的表达。结果:光镜下观察犬骨髓多能成体祖细胞体积偏大,长多角型,数个细长伪足,细胞核大,胞质丰富,细胞增殖能力旺盛;表达表面标志CD13和SSEA-1.不表达CD44、CD45、CD133和MHCⅡ;RT-PCR结果显示表达OCT-4。诱导分化后,分化细胞表达平滑肌细胞表面标志——α^- SMA、calponin、SM-MHC;RT-PCR结果显示表达SM-MHC。结论:体外成功培养犬骨髓多能成体祖细胞,具有与文献报道类似的生物学特征;MAPC在一定诱导条件下具有向平滑肌样细胞分化的潜能。
关键词
骨髓
多能
成体
祖细胞
细胞
培养
细胞
分化
平滑肌样
细胞
Keywords
bone marrow
muhipotent adult progenitor eells
cell eultural
cell differentiation
smooth muscle-like cells
分类号
R329.2 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
免疫磁珠法分选人骨髓多能成体祖细胞及初步鉴定
3
作者
慕宁
汪艳
谢金敏
朱应乾
高毅
机构
第二军医大学长征医院器官移植研究所
南方医科大学珠江医院普通外科
出处
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006年第10期1048-1051,共4页
基金
广东省"十五"重点科技攻关专项基金(2002A3020206).~~
文摘
目的：应用免疫磁珠法分选人骨髓多能成体祖细胞,观察其分选效果,建立体外分选纯化及培养人骨髓来源多能成体祖细胞（hMAPCs）的方法.方法：取健康成人志愿者适量骨髓后采用梯度密度离心法分离获取单个核细胞,在自制培养基下贴壁培养后,将获取的骨髓贴壁细胞通过CD45、血糖蛋白A（GlyA）免疫微磁珠（miniMACS）负分选,锥虫蓝拒染实验计数MACS分选前后细胞活力.流式细胞仪鉴定分选后细胞纯度;流式细胞仪分析培养细胞CD29、CD44、CD34和HLA-DR表达情况.结果：通过MACS分选,平均每1×106/ml骨髓贴壁细胞可分选出约（5～10）×104/ml hMAPCs,分选后的hMAPCs细胞生长良好,最长传代到第20代.分选前后细胞活力分别为（96.7±1.7）%和（96.0±2.4）%,无明显差异;流式细胞仪分析获取的CD45-、GlyA-细胞纯度大于98%;流式细胞仪检测hMAPCs中CD29阳性表达细胞比率为99.2%,CD44阳性细胞比率为98.3%,CD34阳性细胞比率为1.2%,HLA-DR阳性细胞比率为5.3%.结论：CD45、GlyA免疫微磁珠负分选可从骨髓中分离高纯度的hMAPCs;分选后hMAPCs在自行研制的培养基中有较强的增殖能力.
关键词
骨髓
祖代
细胞
多能
成体
祖细胞
免疫磁化分离
细胞
培养技术
Keywords
myeloid progenitor cells
multipotent adult progenitor cells
immunomagnetic seperation
cell culture technique
分类号
R318.12 [医药卫生—生物医学工程]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
双阴性选择法纯化培养人骨髓多能成体祖细胞
慕宁
高毅
唐力军
《第一军医大学学报》
CSCD
北大核心
2005
12
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职称材料
2
犬骨髓多能成体祖细胞的体外培养、鉴定及向平滑肌样细胞的诱导分化
温昱
李彬
党瑞山
张传森
张喜
刘艳春
李瑞
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2007
2
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职称材料
3
免疫磁珠法分选人骨髓多能成体祖细胞及初步鉴定
慕宁
汪艳
谢金敏
朱应乾
高毅
《第二军医大学学报》
CAS
CSCD
北大核心
2006
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