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右美托咪定通过激活Nrf2/HO-1通路减轻热应激诱导的人骨骼肌细胞胀亡
1
作者
刘洋
贾亿卿
+3 位作者
李程程
毛汉丁
刘树元
单毅
《南方医科大学学报》
北大核心
2025年第3期603-613,共11页
目的研究右美托咪定(DEX)对于热打击诱导人骨骼肌细胞(HSKMC)胀亡的保护作用及可能机制。方法体外培养HSKMC,热打击组(HS组)将细胞置于43℃的水浴锅中热打击4 h,构建细胞胀亡模型,设置对照组、HS组、30μmol/L DEX+HS组、ML385+30μmol/...
目的研究右美托咪定(DEX)对于热打击诱导人骨骼肌细胞(HSKMC)胀亡的保护作用及可能机制。方法体外培养HSKMC,热打击组(HS组)将细胞置于43℃的水浴锅中热打击4 h,构建细胞胀亡模型,设置对照组、HS组、30μmol/L DEX+HS组、ML385+30μmol/L DEX+HS组、si-Nrf2+HS组、si-Nrf2+30μmol/L DEX+HS组。通过CCK-8法检测细胞活力,透射电子显微镜观察细胞超微结构,Annexin V-FITC/PI免疫荧光流式细胞术检测细胞胀亡和细胞凋亡,使用谷胱甘肽(GSH)和GSH-px试剂盒检测细胞中GSH及GSH-px含量,TBA法检测丙二醛(MDA),比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)、超氧歧化酶(SOD)、三磷酸腺苷(ATP)表达水平,ELISA法检测肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-6、IL-1β水平,qRT-PCR及Western blotting法检测porimin、caspase-3、Nrf2、p-Nrf2、HO-1、NQO1等蛋白表达水平变化,荧光探针法检测细胞内活性氧(ROS),JC-1荧光染色法检测线粒体膜电位损伤。结果与对照组相比,HS组细胞和细胞器肿胀、胞质内空泡化明显,符合胀亡表现,细胞活力下降,细胞双阳性细胞率(Annexin-V+/PI+)、porimin蛋白表达量增加(P<0.05),caspase-3蛋白在各组间的差异无统计学意义(P>0.05),ROS、MDA、LDH、TNF-α、IL-6和IL-1β的含量增多(P<0.05),ATP、线粒体膜电位、GSH、GSH-px和SOD水平降低(P<0.05)。与HS组相比,30μmol/L DEX+HS组细胞损伤减轻,细胞活力升高,细胞双阳性细胞率下降(P<0.05),ROS、MDA、LDH、TNF-α、IL-6和IL-1β的含量下降(P<0.05),ATP、线粒体膜电位、GSH、GSH-px和SOD含量升高(P<0.05),Nrf2、p-Nrf2、HO-1和NQO1蛋白表达升高(P<0.05)。与30μmol/L DEX+HS组相比,经ML385或si-Nrf2干预后,DEX对HSKMC细胞的保护作用减弱(P<0.05)。结论热打击诱导人骨骼肌细胞发生胀亡,DEX抑制热打击诱导的胀亡,可能机制是激活Nrf2/HO-1信号通路减轻HSKMC的氧化损伤以及抑制炎症因子分泌。
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关键词
右美托咪定
横纹肌溶解症
胀亡
人骨骼肌细胞
Nrf2/HO-1通路
在线阅读
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职称材料
阳离子脂质体转染人类骨骼肌原代细胞的初步研究
被引量：
2
2
作者
李华玲
周晓霞
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2006年第6期8-10,共3页
探讨不同脂质体介导基因转染人类骨骼肌原代细胞的转染效率和基因的表达。将含有β-半乳糖苷酶LacZ结构基因的质粒,用三种不同的阳离子脂质体导入人类骨骼肌原代细胞中,通过X-Gal染色观察不同的转染效率。结果发现,Fugene 6转染效率最高...
探讨不同脂质体介导基因转染人类骨骼肌原代细胞的转染效率和基因的表达。将含有β-半乳糖苷酶LacZ结构基因的质粒,用三种不同的阳离子脂质体导入人类骨骼肌原代细胞中,通过X-Gal染色观察不同的转染效率。结果发现,Fugene 6转染效率最高,蓝染细胞达10%,其脂质体与DNA的最佳比例为3∶2。Fugene 6可有效地将外源基因导入骨骼肌原代细胞,而且外源基因可以长效高效地表达,有望用来作为基因治疗的载体。
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关键词
脂质体
转染
人骨骼肌
原代
细胞
LACZ基因
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职称材料
题名
右美托咪定通过激活Nrf2/HO-1通路减轻热应激诱导的人骨骼肌细胞胀亡
1
作者
刘洋
贾亿卿
李程程
毛汉丁
刘树元
单毅
机构
华南理工大学医学院
解放军总医院第六医学中心急诊医学科
出处
《南方医科大学学报》
北大核心
2025年第3期603-613,共11页
基金
166工程项目(231-CXCY-N101-07-07-01)。
文摘
目的研究右美托咪定(DEX)对于热打击诱导人骨骼肌细胞(HSKMC)胀亡的保护作用及可能机制。方法体外培养HSKMC,热打击组(HS组)将细胞置于43℃的水浴锅中热打击4 h,构建细胞胀亡模型,设置对照组、HS组、30μmol/L DEX+HS组、ML385+30μmol/L DEX+HS组、si-Nrf2+HS组、si-Nrf2+30μmol/L DEX+HS组。通过CCK-8法检测细胞活力,透射电子显微镜观察细胞超微结构,Annexin V-FITC/PI免疫荧光流式细胞术检测细胞胀亡和细胞凋亡,使用谷胱甘肽(GSH)和GSH-px试剂盒检测细胞中GSH及GSH-px含量,TBA法检测丙二醛(MDA),比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)、超氧歧化酶(SOD)、三磷酸腺苷(ATP)表达水平,ELISA法检测肿瘤坏死因子(TNF)-α、白介素(IL)-6、IL-1β水平,qRT-PCR及Western blotting法检测porimin、caspase-3、Nrf2、p-Nrf2、HO-1、NQO1等蛋白表达水平变化,荧光探针法检测细胞内活性氧(ROS),JC-1荧光染色法检测线粒体膜电位损伤。结果与对照组相比,HS组细胞和细胞器肿胀、胞质内空泡化明显,符合胀亡表现,细胞活力下降,细胞双阳性细胞率(Annexin-V+/PI+)、porimin蛋白表达量增加(P<0.05),caspase-3蛋白在各组间的差异无统计学意义(P>0.05),ROS、MDA、LDH、TNF-α、IL-6和IL-1β的含量增多(P<0.05),ATP、线粒体膜电位、GSH、GSH-px和SOD水平降低(P<0.05)。与HS组相比,30μmol/L DEX+HS组细胞损伤减轻,细胞活力升高,细胞双阳性细胞率下降(P<0.05),ROS、MDA、LDH、TNF-α、IL-6和IL-1β的含量下降(P<0.05),ATP、线粒体膜电位、GSH、GSH-px和SOD含量升高(P<0.05),Nrf2、p-Nrf2、HO-1和NQO1蛋白表达升高(P<0.05)。与30μmol/L DEX+HS组相比,经ML385或si-Nrf2干预后,DEX对HSKMC细胞的保护作用减弱(P<0.05)。结论热打击诱导人骨骼肌细胞发生胀亡,DEX抑制热打击诱导的胀亡,可能机制是激活Nrf2/HO-1信号通路减轻HSKMC的氧化损伤以及抑制炎症因子分泌。
关键词
右美托咪定
横纹肌溶解症
胀亡
人骨骼肌细胞
Nrf2/HO-1通路
Keywords
dexmedetomidine
rhabdomyolysis
oncosis
human skeletal muscle cells
Nrf2/HO-1 pathway
分类号
R594.12 [医药卫生—内科学]
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职称材料
题名
阳离子脂质体转染人类骨骼肌原代细胞的初步研究
被引量：
2
2
作者
李华玲
周晓霞
机构
扬州大学医学院生化教研室
出处
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2006年第6期8-10,共3页
基金
国家留学基金委(CSC)资助项目
扬州大学科研资助项目(2005-52)
文摘
探讨不同脂质体介导基因转染人类骨骼肌原代细胞的转染效率和基因的表达。将含有β-半乳糖苷酶LacZ结构基因的质粒,用三种不同的阳离子脂质体导入人类骨骼肌原代细胞中,通过X-Gal染色观察不同的转染效率。结果发现,Fugene 6转染效率最高,蓝染细胞达10%,其脂质体与DNA的最佳比例为3∶2。Fugene 6可有效地将外源基因导入骨骼肌原代细胞,而且外源基因可以长效高效地表达,有望用来作为基因治疗的载体。
关键词
脂质体
转染
人骨骼肌
原代
细胞
LACZ基因
Keywords
cationic liposome
transfection
primary human skeletal muscle cells
LacZ gene
分类号
Q786 [生物学—分子生物学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
右美托咪定通过激活Nrf2/HO-1通路减轻热应激诱导的人骨骼肌细胞胀亡
刘洋
贾亿卿
李程程
毛汉丁
刘树元
单毅
《南方医科大学学报》
北大核心
2025
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
阳离子脂质体转染人类骨骼肌原代细胞的初步研究
李华玲
周晓霞
《生物学杂志》
CAS
CSCD
2006
2
在线阅读
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职称材料
已选择
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