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沉默单核细胞趋化蛋白-1基因降低人食管癌EC109细胞的迁移及侵袭能力 被引量:2
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作者 张超贤 韩宇 +1 位作者 常廷民 李光艳 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期678-685,共8页
单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)是白色脂肪细胞分泌的炎症趋化刺激因子,属于趋化因子CC亚族,可促进肿瘤血管形成和细胞外基质降解,从而促进肿瘤细胞的浸润与转移。沉默MCP-1基因可显著抑制恶性肿瘤生长... 单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)是白色脂肪细胞分泌的炎症趋化刺激因子,属于趋化因子CC亚族,可促进肿瘤血管形成和细胞外基质降解,从而促进肿瘤细胞的浸润与转移。沉默MCP-1基因可显著抑制恶性肿瘤生长及转移,但其作用的分子机制尚不完全清楚。本研究应用小干扰RNA技术沉默人食管癌EC109细胞中MCP-1表达。细胞划痕试验显示,与对照组相比,沉默MCP-1基因可明显抑制食管癌EC109细胞迁移能力。Transwell侵袭实验显示,沉默MCP-1基因后,EC109细胞侵袭能力降低。Western印迹试验和RT-PCR试验揭示,沉默MCP-1基因后,细胞中MMP-7、MMP-9、TGF-β_1及VEGF表达水平显著下降。研究结果提示,沉默MCP-1基因可通过抑制MMP-7、MMP-9、TGF-β_1及VEGF表达,降低癌细胞迁移及侵袭能力。 展开更多
关键词 小干扰RNA 单核细胞趋化蛋白-1 人食管癌ec109细胞 迁移及侵袭
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三氧化二砷诱导人食管癌Ec109细胞凋亡伴随c-myc基因的降调节 被引量:26
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作者 邓友平 林晨 +3 位作者 张雪艳 陈德权 肖培根 吴旻 《中国医学科学院学报》 CSCD 北大核心 2000年第1期67-70,共4页
目的 探讨三氧化二砷 (As2 O3)对食管癌 Ec10 9细胞系的生物学效应及细胞和分子机制。方法 通过四氮唑 (MTT)还原法检测三氧化二砷 (As2 O3)对食管癌 Ec10 9细胞系存活率的影响 ,从形态观察、流式细胞仪分析、DNA凝胶电泳、细胞凋亡... 目的 探讨三氧化二砷 (As2 O3)对食管癌 Ec10 9细胞系的生物学效应及细胞和分子机制。方法 通过四氮唑 (MTT)还原法检测三氧化二砷 (As2 O3)对食管癌 Ec10 9细胞系存活率的影响 ,从形态观察、流式细胞仪分析、DNA凝胶电泳、细胞凋亡原位检测 (TU NEL)研究三氧化二砷诱导食管癌 Ec10 9细胞凋亡的情况 ,并以 Western blot检测基因表达。结果  Ec10 9细胞经 As2 O3处理后 ,存活率明显降低。光学显微镜下可见到明显的凋亡细胞 ,在细胞周期 G1期前有低于 2倍体的凋亡峰 ;DNA凝胶电泳显示出典型的凋亡特征 :DNA有规律断裂形成的梯状图谱 ,细胞凋亡原位检测发现 DNA断裂 ,Western blot检测表明 c- myc基因的表达下降。结论  As2 O3能诱导人食管癌Ec10 9细胞凋亡 ,并伴随 c- m yc基因的降调节。 展开更多
关键词 三氧化二砷 食管癌 ec109细胞 细胞凋亡
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腺苷诱导人食管癌EC109细胞凋亡及其内质网分子机制 被引量:3
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作者 韦碧柳 李国平 +4 位作者 蒲泽锦 黄官友 冯家琳 叶艳清 吴灵飞 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第6期532-537,共6页
目的探讨内质网应激途径在腺苷诱导食管癌EC109细胞凋亡中的作用。方法腺苷2 mmol.L-1作用于EC109细胞24~72 h或腺苷0.5~4 mmol.L-1作用于EC109细胞36 h,MTT法观察腺苷对EC109细胞存活率的时效和量效关系;免疫荧光法检测葡萄糖调节蛋... 目的探讨内质网应激途径在腺苷诱导食管癌EC109细胞凋亡中的作用。方法腺苷2 mmol.L-1作用于EC109细胞24~72 h或腺苷0.5~4 mmol.L-1作用于EC109细胞36 h,MTT法观察腺苷对EC109细胞存活率的时效和量效关系;免疫荧光法检测葡萄糖调节蛋白78(GRP78),胱天蛋白酶4,胱天蛋白酶3,转录因子CHOP和核因子κB(NF-κB)的表达及亚细胞定位;原位末端转移酶标记技术检测细胞凋亡;Western蛋白印迹法检测内质网应激相关蛋白表达。结果腺苷对EC109细胞生长具有明显的抑制作用。腺苷2 mmol.L-1与EC109细胞作用24,36,48和72 h,细胞存活率分别为(57.7±15.0)%,(56.5±11.1)%,(43.8±5.7)%和(28.8±4.1)%,呈时间依赖性下降(r=0.9192,P<0.01);腺苷0.5,1,2和4 mmol.L-1与EC109细胞作用36 h,随药物浓度增加,细胞存活率依次为(83.1±11.2)%,(67.9±6.7)%,(55.3±5.0)%和(45.4±5.4)%,呈浓度依赖性降低(r=0.8252,P<0.01)。腺苷0.5~4mmol.L-1与EC109细胞作用36 h,细胞凋亡率分别为(15.5±1.1)%,(28.2±0.8)%,(40.1±2.2)%和(50.6±1.3)%,与对照组(2.1±0.3)%相比均明显增加(P<0.05)。腺苷2 mmol.L-1与EC109细胞作用36 h,与正常对照组相比,GRP78、胱天蛋白酶4、胱天蛋白酶3和CHOP表达明显增强(P<0.05,P<0.01),胱天蛋白酶4,胱天蛋白酶3和CHOP发生核易位。GRP78、胱天蛋白酶4、胱天蛋白酶3、CHOP和NF-κB表达呈浓度依赖性增加(rGRP78=0.9471,r胱天蛋白酶4=0.8977,r胱天蛋白酶3=0.968,rCHOP=0.9762,rNF-κB=0.9471,P<0.05)。结论腺苷可诱导人食管癌EC109细胞凋亡,其分子机制可能与内质网应激凋亡途径的启动有关。 展开更多
关键词 腺苷 细胞凋亡 内质网 应激 ec109细胞
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沉默ABCE1基因对人食管癌EC109细胞凋亡、增殖、侵袭及迁移的影响 被引量:2
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作者 李小瑞 岳军艳 +4 位作者 张清琴 崔艳慧 花勤亮 寇小格 李慧敏 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第5期569-574,共6页
目的:探讨电转法沉默ATP结合盒转运子E1(ATP-binding cassette protein E1,ABCE1)基因的表达对人食管癌EC109细胞凋亡、增殖、侵袭及迁移的影响。方法:合成靶向ABCE1的siRNA序列(ABCE1-siRNA)以及阴性对照序列(NCsiRNA),电转法转染至EC... 目的:探讨电转法沉默ATP结合盒转运子E1(ATP-binding cassette protein E1,ABCE1)基因的表达对人食管癌EC109细胞凋亡、增殖、侵袭及迁移的影响。方法:合成靶向ABCE1的siRNA序列(ABCE1-siRNA)以及阴性对照序列(NCsiRNA),电转法转染至EC109细胞,分别形成ABCE1-EC109、NC-siRNA-EC109细胞。RT-PCR、Western blotting检测转染后EC109细胞中ABCE1 mRNA与蛋白的表达情况,流式细胞术检测EC109细胞周期及凋亡,CCK-8法、划痕愈合实验、Transwell法分别检测EC109细胞的增殖、迁移以及侵袭的能力。结果:ABCE1-EC109细胞中ABCE1 mRNA和蛋白表达较NC-siRNAEC109细胞明显降低[(0.47±0.04)vs(0.67±0.05),(0.63±0.09)vs(0.86±0.11);均P<0.05]。与NC-siRNA-EC109细胞相比,ABCE1-EC109细胞的增殖速度明显减慢[(2.20±0.10)vs(2.91±0.13),P<0.05],细胞周期阻滞在G0/G1期细胞数目明显增多[(76.5±3.1)%vs(56.1±2.7)%,P<0.05)];细胞的凋亡率明显升高[(15.46±3.12)%vs(0.54±0.24)%,P<0.01],迁移、侵袭能力均显著下降[迁移:(8.12±0.23)vs(1.91±0.11)μm,P<0.05;侵袭:(42.56±4.68)vs(68.78±6.98)个,P<0.01]。结论:电转法沉默ABCE1基因的表达可促进食管癌EC109细胞的凋亡,抑制其体外增殖、侵袭及迁移。 展开更多
关键词 ATP 结合盒转运子E1 食管癌 电转法 ec109细胞 凋亡 增殖 侵袭 迁移
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环巴胺对人食管癌EC109细胞转移的影响及作用机制 被引量:2
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作者 左小平 秦治明 +2 位作者 王凯斌 郑相如 陈立前 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1828-1832,共5页
目的探讨环巴胺特异性阻断人食管癌EC109细胞Hedgehog(Hh)信号通路后对其转移能力的影响及其可能的机制。方法环巴胺处理EC109细胞48 h后,采用Transwell小室、血管生成实验观察细胞的迁移、侵袭及血管形成等转移能力,RT-PCR检测Gli-1mRN... 目的探讨环巴胺特异性阻断人食管癌EC109细胞Hedgehog(Hh)信号通路后对其转移能力的影响及其可能的机制。方法环巴胺处理EC109细胞48 h后,采用Transwell小室、血管生成实验观察细胞的迁移、侵袭及血管形成等转移能力,RT-PCR检测Gli-1mRNA的表达,Western blot检测Gli-1、MMP-9、VEGF蛋白的表达。结果环巴胺阻断Hh信号通路能显著减弱EC109细胞迁移、侵袭及血管形成能力(P<0.05);Gli-1mRNA表达量降低,Gli-1、MMP-9、VEGF蛋白的表达量均降低,差异有统计学意义(P均<0.05)。结论环巴胺能显著抑制EC109细胞的转移能力,其可能机制与抑制Gli-1进而使下游MMP-9、VEGF表达下调有关。 展开更多
关键词 HEDGEHOG通路 环巴胺 ec109细胞 转移
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靶向GRP78的miRNA表达载体对人食管癌EC109细胞增殖的抑制作用 被引量:5
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作者 李洪标 郭益添 +3 位作者 黄官友 冯家琳 蒲泽锦 吴灵飞 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第1期75-81,共7页
目的:探讨靶向葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78)基因的miRNA真核表达质粒,对人食管癌EC109细胞增殖的影响。方法:设计合成4对针对GRP78的特异性miRNA干扰序列和1对阴性对照序列,定向克隆至pcDNATM6.2-GW/EmGFP-mi... 目的:探讨靶向葡萄糖调节蛋白78(glucose regulated protein 78,GRP78)基因的miRNA真核表达质粒,对人食管癌EC109细胞增殖的影响。方法:设计合成4对针对GRP78的特异性miRNA干扰序列和1对阴性对照序列,定向克隆至pcDNATM6.2-GW/EmGFP-miR真核表达载体上,构建靶向GRP78的miRNA重组质粒:pcDNATM6.2-miR78-1、pcDNATM6.2-miR78-2、pcDNATM6.2-miR78-3、pcDNATM6.2-miR78-4,并通过脂质体法转染至HEK293细胞;杀稻瘟菌素筛选2周形成稳定转染细胞系;荧光显微镜检测转染效率。将筛选出的最佳干扰质粒转染至EC109细胞,采用RT-PCR法检测GRP78 mRNA的表达,CCK8法检测其对EC109细胞增殖的影响。结果:测序结果表明成功构建4种靶向GRP78的miRNA重组质粒,经转染和筛选,所有转染后HEK293细胞均有GFP的表达;与未转染组及阴性对照组(pcDNATM6.2-Ctrl)相比,4种干扰质粒组HEK293细胞中GRP78 mRNA的表达均下降(P<0.05);干扰效率以转染pcDNATM6.2-miR78-1为最高。pcDNATM6.2-miR78-1转染EC109细胞,与未转染组、pcDNATM6.2-Ctrl组相比,EC109细胞中GRP78 mRNA的表达明显下降[(0.38±0.02)vs(1.03±0.04)、(1.00±0.03),均P<0.05]。CCK8法检测结果显示,转染pcDNATM6.2-miR78-1干扰质粒12、24、48、72 h后,EC109细胞的增殖被显著抑制[(0.028±0.001)vs(0.086±0.010),(0.035±0.003)vs(0.155±0.011),(0.112±0.009)vs(0.389±0.008)、(0.169±0.013)vs(0.433±0.009);均P<0.05]。结论:4对靶向GRP78的miRNA表达载体构建成功,其中pcDNATM6.2-miR78-1干扰质粒沉默效果最佳,能有效抑制EC109细胞的增殖。 展开更多
关键词 食管癌 ec109细胞 葡萄糖调节蛋白78(GRP78) miRNA RNA干扰 HEK293细胞
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戊地昔布诱导人食管癌Eca109细胞凋亡的机制研究 被引量:9
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作者 张玉军 刘淑霞 +2 位作者 齐凤英 左连富 郭建文 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期629-633,共5页
目的探讨特异选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂戊地昔布诱导人食管癌Eca109细胞凋亡及其作用机制。方法流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布;电子显微镜进一步检测细胞凋亡;采用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒测定Eca109细胞的LDH含量;... 目的探讨特异选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂戊地昔布诱导人食管癌Eca109细胞凋亡及其作用机制。方法流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布;电子显微镜进一步检测细胞凋亡;采用乳酸脱氢酶(LDH)试剂盒测定Eca109细胞的LDH含量;流式细胞术检测p-p38MAPK及凋亡基因Fas和FasL蛋白的表达。结果戊地昔布(25—400μmol·L^-1)可诱导人食管癌Eca109细胞发生凋亡,凋亡率由(2.95±0.83)%增力口到(48.46±0.73)%;50—400μmol·L^-1时增殖指数和S期的细胞比例则明显降低,G0/G1期的细胞比例增加;同时,流式细胞术显示,25μmol·L^-1戊地昔布即可上调人食管癌Eca109细胞p-p38MAPK蛋白的表达,并随剂量的增加而增强;50—400μmol·L^-1的戊地昔布可上调Eca109细胞Fas及FasL的表达。结论戊地昔布可诱导人Eca109细胞凋亡,其诱导凋亡的机制可能部分是通过激活p-p38MAPK/Fas、FasL途径实现的。 展开更多
关键词 戊地昔布 人食管癌eca109细胞 凋亡 P-P38MAPK FAS FASL
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CHFR基因CpG岛甲基化对食管癌Eca109细胞增殖和凋亡的影响 被引量:6
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作者 朱应超 田辉 +3 位作者 岳韦名 高存 亓磊 司立博 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第2期139-143,共5页
目的:研究CHFR基因启动子甲基化状态与食管癌Eca109细胞增殖和凋亡的关系。方法:分别用不同浓度(2、5、10μmol/L)5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-CdR)处理Eca109细胞,未经药物处理的细胞为对照组。甲基化特... 目的:研究CHFR基因启动子甲基化状态与食管癌Eca109细胞增殖和凋亡的关系。方法:分别用不同浓度(2、5、10μmol/L)5-氮杂-2'-脱氧胞苷(5-Aza-2'-deoxycytidine,5-Aza-CdR)处理Eca109细胞,未经药物处理的细胞为对照组。甲基化特异性PCR(methylation-specific PCR,MSP)检测CHRF基因CpG岛的甲基化状态,RT-PCR检测CHFR mRNA的表达情况,MTT法及流式细胞术检测不同浓度5-Aza-CdR处理对Eca109细胞增殖及凋亡的影响。结果:对照组Eca109细胞CHFR CpG岛处于高甲基化状态,5-Aza-CdR处理后CHFR CpG岛可发生不同程度的剂量依赖性的去甲基化。对照组Eca109细胞无CHFR mRNA表达,5-Aza-CdR处理组(2、5、10μmol/L)CHFR mRNA相对表达量显著增加(0.174±0.010、0.221±0.013、0.356±0.014)。不同浓度5-Aza-CdR处理后,Eca109细胞增殖受到抑制[作用72 h时的抑制率分别为(30.87±0.74)%、(44.60±0.79)%、(56.67±0.35)%],细胞凋亡显著增加[(7.46±1.46)%、(16.27±1.61)%、(25.29±2.25)%vs(1.83±0.41)%,P<0.01]。结论:食管癌Eca109细胞经5-Aza-CdR处理后,CHFR基因CpG岛发生部分去甲基化,出现CHFRmRNA表达,并抑制Eca109细胞增殖和促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 CHFR基因 甲基化 食管癌 ecA109细胞 增殖 凋亡
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肿瘤转移抑制基因-1在食管鳞癌组织及食管癌EC109细胞中的表达及意义 被引量:6
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作者 刘博 吕洋 +3 位作者 林媛媛 刘军超 李秀娟 乔海霞 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期536-539,548,共5页
目的探讨肿瘤转移抑制基因-1(TMSG-1)在食管鳞癌(ESCC)组织及食管癌EC109细胞中的表达及意义。方法采用SP免疫组织化学染色法检测136例ESCC及37例正常食管黏膜组织中TMSG-1蛋白的表达情况,分析TMSG-1与ESCC患者临床病理指标的关系;培养... 目的探讨肿瘤转移抑制基因-1(TMSG-1)在食管鳞癌(ESCC)组织及食管癌EC109细胞中的表达及意义。方法采用SP免疫组织化学染色法检测136例ESCC及37例正常食管黏膜组织中TMSG-1蛋白的表达情况,分析TMSG-1与ESCC患者临床病理指标的关系;培养人食管癌EC109细胞并用常用化疗药物顺铂(CDDP)干预,同时设对照组,采用MTT法检测细胞增殖抑制率,半定量RT-PCR法检测细胞TMSG-1的表达情况。结果 TMSG-1在ESCC和正常食管黏膜的阳性率分别为52.2%(71/136)、94.6%(35/37),差异具有统计学意义(P<0.05)。TMSG-1的异常表达与ESCC组织学分级、患者的TNM分期、淋巴结转移情况相关。顺铂干预组EC109细胞的增殖抑制率较对照组显著增高,差异具有统计学意义(P<0.01)。RT-PCR结果显示,干预组EC109细胞TMSG-1的mRNA表达明显高于对照组(P<0.01)。结论 TMSG-1的异常表达与ESCC的发展及转移相关,可作为较为理想的肿瘤标志物辅助诊断并指导临床治疗。 展开更多
关键词 食管鳞状细胞 肿瘤转移抑制基因-1(TMSG-1) ec109细胞 免疫组织化学 RT-PCR 细胞增殖 顺铂(CDDP)
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苦参碱通过抑制PI3K/Akt/mTOR信号通路诱导食管癌Ec109细胞自噬 被引量:12
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作者 刘丰熙 李刚 +3 位作者 李秀娟 吕洋 张子瑛 牛金兰 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2020年第3期468-472,共5页
目的探究苦参碱对食管癌Ec109细胞的自噬作用及其机制。方法体外培养食管癌Ec109细胞,分别经不同浓度苦参碱处理后,倒置相差显微镜下观察细胞形态学变化;四甲基偶氮唑蓝法检测细胞增殖抑制率;Western blotting检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ及P... 目的探究苦参碱对食管癌Ec109细胞的自噬作用及其机制。方法体外培养食管癌Ec109细胞,分别经不同浓度苦参碱处理后,倒置相差显微镜下观察细胞形态学变化;四甲基偶氮唑蓝法检测细胞增殖抑制率;Western blotting检测自噬相关蛋白LC3-Ⅱ及PI3K/Akt/mTOR信号通路相关蛋白p-mTOR、p-Akt和p-p70S6K的表达;实时荧光定量PCR检测自噬相关基因Beclin1 mRNA的表达。结果倒置显微镜下可见,食管癌Ec109细胞经苦参碱处理后胞体缩小,胞内可发现不均一的细颗粒状物质。不同浓度的苦参碱处理48 h,细胞增殖抑制率随着苦参碱浓度的增加逐渐升高(P<0.05)。Western blotting检测结果显示,LC3-Ⅱ的表达随苦参碱浓度的升高而增高,但p-mTOR、p-Akt和p-p70S6K的表达均随苦参碱浓度的增高而降低;实时荧光定量PCR结果显示,苦参碱处理使自噬基因Beclin1 mRNA的表达上调。结论苦参碱诱导食管癌细胞自噬可能是通过PI3K/Akt/mTOR信号通路介导的。 展开更多
关键词 苦参碱 食管癌ec109细胞 细胞自噬 PI3K/Akt/mTOR信号通路
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杨梅素通过抑制能量代谢促进5-氟尿嘧啶对人食管癌细胞EC109的抗肿瘤作用 被引量:5
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作者 苏楠 范霞霞 +2 位作者 谢娇娇 李亚飞 马永成 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS 北大核心 2022年第6期451-458,共8页
目的研究杨梅素(MYR)对5-氟尿嘧啶(5-FU)抗肿瘤作用的促进效应,并探讨其潜在机制。方法①人食管癌细胞EC109分别设立细胞对照组、MYR 4.68~300.00μmol·L^(-1)组、5-FU 0.8~48.0μmol·L^(-1)组和5-FU 0.8~48.0μmol·L^(-... 目的研究杨梅素(MYR)对5-氟尿嘧啶(5-FU)抗肿瘤作用的促进效应,并探讨其潜在机制。方法①人食管癌细胞EC109分别设立细胞对照组、MYR 4.68~300.00μmol·L^(-1)组、5-FU 0.8~48.0μmol·L^(-1)组和5-FU 0.8~48.0μmol·L^(-1)+MYR 75μmol·L^(-1)组,分别孵育24,48和72 h,采用MTT法检测细胞存活抑制率。②EC109细胞分为细胞对照、MYR 75μmol·L^(-1)、5-FU 12μmol·L^(-1)和MYR+5-FU组,孵育48 h,荧光显微镜观察线粒体膜电位(MMP);流式细胞术检测细胞凋亡率、MMP和葡萄糖摄取。③细胞分组为细胞对照组、MYR 75,100和200μmol·L^(-1)组、5-FU 12μmol·L^(-1)组及MYR 75μmol·L^(-1)+5-FU 12μmol·L^(-1)组。细胞能量代谢分析仪每隔5 min实时检测细胞氧消耗速率(OCR)和胞外酸化率(ECAR),检测150 min。结果①MYR 75~300μmol·L^(-1)浓度范围内作用48和72 h,均可显著抑制EC109细胞存活(P<0.01);5-FU 3~48μmol·L^(-1)浓度范围内作用48和72 h,均能抑制食管癌细胞EC109存活(P<0.01);5-FU 0.8~48.0μmol·L^(-1)+MYR 75μmol·L^(-1)组作用48和72 h时,MYR 75μmol·L^(-1)表现出对5-FU的增敏作用,当作用24 h时,MYR则对5-FU表现出拮抗作用。②与细胞对照组相比,MYR 75μmol·L^(-1),5-FU 12μmol·L^(-1)和MYR+5-FU作用EC109细胞48 h,细胞凋亡率均显著升高(P<0.01);与单用组相比,联用组细胞凋亡率显著升高(P<0.01)。MYR 75μmol·L^(-1)组和5-FU 12μmol·L^(-1)组MMP显著下降(P<0.05);与单用药组相比,联用组MMP显著下降(P<0.01);葡萄糖摄取结果显示,与细胞对照组相比,MYR 75μmol·L^(-1)组细胞葡萄糖摄取显著下降(P<0.01),而5-FU 12μmol·L^(-1)组无明显变化;与单用药组相比,联用组可显著抑制葡萄糖摄取(P<0.01)。③能量分析结果显示,MYR 75,100和200μmol·L^(-1)组OCR和ECAR显著降低(P<0.05);5-FU 12μmol·L^(-1)组细胞OCR显著降低(P<0.05),而ECAR有所升高(P<0.05);与单用药组相比,联用组OCR进一步下降(P<0.05),ECAR无明显变化。结论MYR可促进5-FU对EC109的杀伤作用,其机制可能与MYR抑制细胞酵解和线粒体呼吸水平、抑制肿瘤细胞能量代谢有关。 展开更多
关键词 杨梅素 5-氟尿嘧啶 线粒体 能量代谢 ec109 人食管癌
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尼美舒利对人食管癌细胞Eca-109 COX-2表达及生长的抑制作用 被引量:5
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作者 刘俊茹 齐凤英 +3 位作者 李丽 左连富 郭建文 刘江惠 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期1084-1088,共5页
目的研究环氧化酶-2(COX-2)选择性抑制剂尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞株COX-2表达和细胞增殖及凋亡的影响。方法MTT法测定尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞增殖的抑制率;RT-PCR法检测Eca-109细胞COX-2mRNA表达变化;流式细胞仪检测COX-2... 目的研究环氧化酶-2(COX-2)选择性抑制剂尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞株COX-2表达和细胞增殖及凋亡的影响。方法MTT法测定尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞增殖的抑制率;RT-PCR法检测Eca-109细胞COX-2mRNA表达变化;流式细胞仪检测COX-2蛋白表达、细胞周期时相分布及凋亡率的变化;光镜和琼脂糖电泳法进一步观察细胞凋亡。结果尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞有较强的抑制作用,有明显的时间和浓度依赖性;呈浓度依赖性下调Eca-109细胞COX-2 mRNA及蛋白表达;可使Eca-109细胞G0/G1期比例增高,S期细胞减少,增殖指数降低,凋亡细胞增多。结论尼美舒利可能通过对COX-2表达的下调而诱导凋亡和细胞周期阻滞,从而抑制人食管癌Eca-109细胞生长。 展开更多
关键词 尼美舒利 环氧化酶-2 人食管癌eca-109细胞 凋亡
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涤痰化瘀汤对人食管癌Eca-109细胞ra sp21 p53基因表达影响的研究 被引量:7
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作者 王明艳 许冬青 +5 位作者 刘华东 赵凤鸣 江励华 梁枫 张民庆 蔡宝昌 《中华中医药学刊》 CAS 2009年第3期530-531,共2页
目的:观察涤痰化瘀汤含药血清对人食管癌Eca-109细胞生长的抑制作用及对ras p21、突变型p53基因表达的影响。方法:以人食管癌Eca-109细胞为材料,采用MTT法,观察涤痰化瘀汤含药血清对细胞生长的抑制率;应用流式细胞仪检测涤痰化瘀汤对人... 目的:观察涤痰化瘀汤含药血清对人食管癌Eca-109细胞生长的抑制作用及对ras p21、突变型p53基因表达的影响。方法:以人食管癌Eca-109细胞为材料,采用MTT法,观察涤痰化瘀汤含药血清对细胞生长的抑制率;应用流式细胞仪检测涤痰化瘀汤对人食管癌Eca-109细胞ras p21、突变型p53基因表达的影响。此外以ICR纯种小鼠的骨髓细胞为材料,以微核为指标,观察涤痰化瘀汤的致变作用,以进行药物安全性评估。结果:涤痰化瘀汤含药血清对人食管癌Eca-109细胞有抑制作用;含药血清组与对照血清组比ras p21、突变型p53基因表达均降低;涤痰化瘀汤药物组的微核率与正常对照组比无显著差别。结论:涤痰化瘀汤含药血清对人食管癌Eca-109细胞生长有明显的抑制作用且对ras p21、突变型p53基因表达有影响。涤痰化瘀汤无致变作用。 展开更多
关键词 涤痰化瘀汤 人食管癌ecA-109细胞 抑制作用 rasp21基因 P53基因
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顺铂联合COX-2选择性抑制剂NS-398对食管癌Eca-109细胞增殖和凋亡的影响 被引量:2
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作者 王琳冬 郭颖 +4 位作者 郝秀轻 罗强 孙黎 朱登祥 张林西 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第21期2303-2306,共4页
目的体外观察顺铂(diamminedichloroplatinum,DDP)以及DDP联合环氧合酶-2(cyclooxygenase,COX-2)选择性抑制剂NS-398对人食管癌Eca-109细胞增殖和凋亡的影响,比较单独应用DDP与DDP联合NS-398应用于食管癌Eca-109细胞的抗肿瘤效应。方法 ... 目的体外观察顺铂(diamminedichloroplatinum,DDP)以及DDP联合环氧合酶-2(cyclooxygenase,COX-2)选择性抑制剂NS-398对人食管癌Eca-109细胞增殖和凋亡的影响,比较单独应用DDP与DDP联合NS-398应用于食管癌Eca-109细胞的抗肿瘤效应。方法 CCK-8法检测不同浓度的DDP(1.25、2.50、5.00、10.00、20.00mg/L)单独作用及DDP联合NS-398(1.00、10.00μmol/L)作用Eca-109细胞24h的细胞增殖抑制率。琼脂糖凝胶电泳技术检测DDP(1.25、2.50、5.00mg/L)单用及联合NS-398(1.00、10.00、80.00μmol/L)作用Eca-109细胞24h和48h的DNA Ladder出现情况。透射电镜观察DDP单用以及联合NS-398作用于Eca-109细胞24h超微结构的变化。药物未处理组作为对照组。结果细胞增殖抑制实验表明顺铂、NS-398对Ec-109细胞有剂量依赖性抑制增殖作用(P<0.05)。顺铂联合NS-398用药组细胞增殖抑制率明显高于同浓度顺铂单用组,且随添加的NS-398的剂量的增加而增加,DDP联合NS-398用药组对Ec-109细胞的增殖抑制效应和诱导凋亡效应明显高于DDP单药组,二者具有协同效应。结论与DDP单用相比,添加低剂量NS-398能够增强DDP对Eca-109细胞的增殖抑制效应和诱导凋亡效应。 展开更多
关键词 食管癌 ecA-109细胞 NS-398 顺铂 细胞凋亡
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奈达铂与顺铂联合应用对人食管癌Eca-109细胞增殖与凋亡的影响 被引量:2
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作者 苏翔宇 李苏宜 +2 位作者 刘琳 封革 凌扬 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期91-96,共6页
目的:研究奈达铂(NDP)联合顺铂(DDP)对人食管癌细胞株Eca-109的增殖及凋亡的影响,并探讨其机制。方法:采用MTT法对Eca-109细胞的增殖抑制率进行检测,中效原理法对联合用药的相互作用进行分析判断;采用流式细胞术分析早期凋亡细胞比例;采... 目的:研究奈达铂(NDP)联合顺铂(DDP)对人食管癌细胞株Eca-109的增殖及凋亡的影响,并探讨其机制。方法:采用MTT法对Eca-109细胞的增殖抑制率进行检测,中效原理法对联合用药的相互作用进行分析判断;采用流式细胞术分析早期凋亡细胞比例;采用RT-PCR和免疫细胞化学分析Ki-67及Bax、Bcl-2表达的变化。结果:NDP、DDP均明显抑制Eca-109细胞的生长,且呈剂量依赖性;两者联合使用时,低浓度时呈拮抗效应,高浓度时呈协同效应;IC50浓度的NDP、DDP和1/2IC50(NDP)+1/2IC50(DDP)对Eca-109细胞的抑制率分别为(41.85±4.1)%,(47.38±2.9)%和(52.45±0.9)%;流式细胞术结果表明正常对照组、NDP组、DDP组、联合用药组细胞早期凋亡率依次增加,单独用药组与联合用药组相比有差异;与单独用药组比较,联合用药组Ki-67、Bcl-2表达率显著降低,而Bax表达显著增高。结论:与两药高浓度单独应用相比,低浓度NDP和DDP联合应用对Eca-109细胞增殖的抑制作用和诱导凋亡能力均有明显增强。 展开更多
关键词 奈达铂 顺铂 食管癌 中效原理 ecA-109细胞
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苦参素对食管癌Eca-109细胞BIP和CHOP mRNA表达的影响 被引量:11
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作者 曹珊 周慧茹 朱艳琴 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2014年第1期1-4,共4页
目的:探讨苦参素对食管癌Eca-109细胞内质网应激相关基因免疫球蛋白重链结合蛋白(BIP)和C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)表达的影响。方法:体外培养食管癌Eca-109细胞,分为空白对照组、5-氟尿嘧啶组(2 g/L)和不同剂... 目的:探讨苦参素对食管癌Eca-109细胞内质网应激相关基因免疫球蛋白重链结合蛋白(BIP)和C/EBP环磷酸腺苷反应元件结合转录因子同源蛋白(CHOP)表达的影响。方法:体外培养食管癌Eca-109细胞,分为空白对照组、5-氟尿嘧啶组(2 g/L)和不同剂量的苦参素组(2.0、1.0、0.5 g/L)。采用MTT法检测细胞增殖能力,Annexin V-PI法检测细胞凋亡率,实时荧光定量PCR法检测BIP和CHOP mRNA的相对表达量。结果:各组Eca-109细胞吸光度值、凋亡率、BIP和CHOP mRNA相对表达量比较,差异均有统计学意义(F=3.883、476.221、129.331、14.139,P均<0.05)。与空白对照组相比,苦参素组和5-氟尿嘧啶组Eca-109细胞吸光度值降低,凋亡率升高,BIP mRNA相对表达量降低,CHOP mRNA相对表达量升高(P均<0.05)。结论:苦参素可抑制Eca-109细胞增殖,促进其凋亡,BIP基因可能是其作用靶点之一,凋亡过程由CHOP介导。 展开更多
关键词 苦参素 食管癌 ecA-109细胞 内质网应激 免疫球蛋白重链结合蛋白 C EBP环磷酸腺苷反应元件 结合转录因子同源蛋白
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冬凌草活性成分KY3对食管癌EC109细胞增殖的抑制作用 被引量:1
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作者 方莉 王赛琪 +4 位作者 陈雪梅 薛博涵 王冠涛 李玉萍 刘宏民 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2017年第1期1-4,共4页
目的:探讨冬凌草活性成分KY3对食管癌细胞EC109增殖的抑制作用及其机制。方法:MTT法测定0、10、20、30、40、60、80、100μmol/L KY3对EC109细胞增殖的影响;流式细胞术检测0、10、20、30μmol/L KY3对EC109细胞凋亡和细胞周期分布的影响... 目的:探讨冬凌草活性成分KY3对食管癌细胞EC109增殖的抑制作用及其机制。方法:MTT法测定0、10、20、30、40、60、80、100μmol/L KY3对EC109细胞增殖的影响;流式细胞术检测0、10、20、30μmol/L KY3对EC109细胞凋亡和细胞周期分布的影响,免疫荧光法观察KY3对EC109细胞中微管结构的影响,Hoechst 33258染色观察KY3作用后EC109细胞核的形态。结果:KY3能够抑制EC109细胞的体外增殖;KY3处理后EC109细胞周期阻滞在G2/M期并发生凋亡(P<0.05);KY3作用于EC109细胞后,微管遭到破坏,随着KY3剂量的增加,α-微管蛋白逐渐发生降解并出现细胞核固缩、浓染等典型的凋亡形态。结论:冬凌草活性成分KY3在体外对EC109细胞具有增殖抑制作用,其机制可能与破坏细胞微管结构、G2/M期细胞周期阻滞及诱导细胞凋亡有关。 展开更多
关键词 ec109细胞 凋亡 周期阻滞 KY3
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TRAF4沉默对食管癌细胞Eca-109增殖、凋亡及细胞周期的影响 被引量:2
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作者 蒋鸣 翟祥军 +1 位作者 徐池 周国仁 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期389-393,401,共6页
目的探讨小干扰RNA(siRNA)靶向沉默肿瘤坏死因子受体相关因子4(TRAF4)基因表达对人食管癌细胞恶性行为的影响。方法选取对数生长期Eca-109细胞并行脂质体法高效转染2条靶向沉默TRAF4的siRNA(siTRAF4-1、siTRAF4-2),采用实时定量PC... 目的探讨小干扰RNA(siRNA)靶向沉默肿瘤坏死因子受体相关因子4(TRAF4)基因表达对人食管癌细胞恶性行为的影响。方法选取对数生长期Eca-109细胞并行脂质体法高效转染2条靶向沉默TRAF4的siRNA(siTRAF4-1、siTRAF4-2),采用实时定量PCR检测转染后的TRAF4 mRNA水平以筛选沉默效果较好的siRNA为沉默组,同时设阴性对照组(转染阴性siRNA序列)和空白对照组。采用噻唑蓝(MTT)法检测转染24、48、72、96h的吸光度值以计算各组增殖抑制率,AnnexinⅤ-FITC/PI双染、Caspase-3FITC单染或PI单染流式细胞术检测转染后的凋亡率、Caspase-3活化率和细胞周期分布情况。结果靶向沉默TRAF4 24-96h内,转染siTRAF4-1、siTRAF4-2的Eca-109细胞中TRAF4mRNA水平均低于未转染或转染对照siRNA的细胞,且转染siTRAF4-1、siTRAF4-2后的沉默率均高于转染对照siRNA的细胞(均P〈0.05);后续试验选取沉默率较高的siTRAF4-1进行研究。与空白对照组和阴性对照组相比,沉默组的增殖抑制率、凋亡率及Caspase-3活化率均升高,差异有统计学意义(均P〈0.05);沉默组转染96h的G0/G1期细胞比例高于空白对照组和阴性对照组,而S、G2/M期细胞比例低于其余两组,以上差异均有统计学意义(均P〈0.05);空白对照组和阴性对照组以上指标的差异均无统计学意义(均P〉0.05)。结论通过siRNA靶向沉默TRAF4基因表达的效果较好,可抑制细胞增殖并诱导凋亡、Caspase-3活化和细胞周期G0/G1期阻滞,为食管癌靶向治疗提供了方法学基础。 展开更多
关键词 小干扰RNA 肿瘤坏死因子受体相关因子4 食管癌细胞eca-109 增殖 凋亡
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新疆家蚕抗菌肽与化疗药物联用对食管癌Eca109细胞增殖和凋亡的影响 被引量:3
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作者 夏丽洁 张富春 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第4期402-407,共6页
目的:研究新疆家蚕抗菌肽(cecropin-XJ,CE-XJ)与4种化疗药物联用对人食管癌Eca109细胞增殖及凋亡的影响。方法:MTT法检测CE-XJ联合不同浓度的多柔比星(doxorubicin,ADM)、卡铂(carboplatin,CBP)、顺铂(cisplatin,DDP)和环磷... 目的:研究新疆家蚕抗菌肽(cecropin-XJ,CE-XJ)与4种化疗药物联用对人食管癌Eca109细胞增殖及凋亡的影响。方法:MTT法检测CE-XJ联合不同浓度的多柔比星(doxorubicin,ADM)、卡铂(carboplatin,CBP)、顺铂(cisplatin,DDP)和环磷酰胺(cyclophosphamide,CTX)对人食管癌Eca109细胞增殖的影响,流式细胞术分析CE-XJ与ADM、CBP、DDP、CTX联用对Eca109细胞凋亡、活性氧及线粒体膜电位的影响。结果:单独使用CE-XJ(1~50μmol/L)可依剂量依赖方式显著抑制Eca109细胞的增殖(P〈0.05或P〈0.01)。CE-XJ分别与ADM、DDP、CTX联合用药,与单独用药相比,Eca109细胞的增殖抑制明显加强、细胞凋亡率显著增加(均P〈0.05或P〈0.01),细胞内活性氧水平显著增加(P〈0.05),而线粒体膜电位显著降低(均P〈0.05)。但CE-XJ与CBP联用时出现拮抗现象,与单独用药相比,细胞增殖抑制变化不大,细胞凋亡率反而降低。结论:CE-XJ与化疗药物ADM、DDP和CTX联用对人食管癌Eca109细胞的增殖抑制和凋亡诱导有明显促进作用,其机制可能与细胞内活性氧和线粒体膜电位变化有关。但CE-XJ与CBP联用则起拮抗作用,其机制有待进一步探讨。 展开更多
关键词 新疆家蚕抗菌肽 食管癌 ecA109细胞 多柔比星 卡铂 顺铂 环磷酰胺 增殖 凋亡
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星半通膈散诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡及其机制研究 被引量:1
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作者 刘华东 王明艳 +2 位作者 张民庆 黄仕文 梁枫 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 2008年第5期332-334,366,共4页
目的研究星半通膈散药液诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡及其作用机制。方法采用MTT法测定细胞生长抑制率,通过流式细胞仪观察凋亡细胞及检测p53、bcl-2基因表达。结果星半通膈散不同剂量药液均可抑制人食管癌Eca-109细胞生长,诱导细胞凋亡... 目的研究星半通膈散药液诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡及其作用机制。方法采用MTT法测定细胞生长抑制率,通过流式细胞仪观察凋亡细胞及检测p53、bcl-2基因表达。结果星半通膈散不同剂量药液均可抑制人食管癌Eca-109细胞生长,诱导细胞凋亡,降低p53(突变型)、bcl-2蛋白表达率。结论星半通膈散能诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡,而抑制p53基因突变、下调bcl-2基因表达可能是其重要机制。 展开更多
关键词 星半通膈散 人食管癌Eea-109细胞 凋亡 P53 BEL-2 实验研究
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