顺铂通过激活p53信号通路抑制人食管癌细胞的生存 被引量：10

1

作者 古春萍 阙富昌 +2 位作者 李亦蕾 刘叔文 余乐 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第1期90-94,共5页

研究顺铂抑制人食管癌细胞生存的作用及其机制。细胞活力实验检测顺铂对食管癌亲代细胞EC109及耐药细胞EC109/CDDP的杀伤作用。Western blot检测顺铂处理后食管癌亲代细胞EC109及耐药细胞EC109/CDDP的p53和Phospho-p53(Ser15)的蛋白表... 研究顺铂抑制人食管癌细胞生存的作用及其机制。细胞活力实验检测顺铂对食管癌亲代细胞EC109及耐药细胞EC109/CDDP的杀伤作用。Western blot检测顺铂处理后食管癌亲代细胞EC109及耐药细胞EC109/CDDP的p53和Phospho-p53(Ser15)的蛋白表达。克隆存活实验检测顺铂单独及联合p53抑制剂Pifithrin-α对食管癌亲代细胞EC109及耐药细胞EC109/CDDP生存的影响。实验结果显示,与亲代细胞EC109比较,耐药细胞EC109/CDDP保持了对顺铂的耐药性,IC50分别是(20.4±4.4)μmol/L和(5.7±0.1)μmol/L。在亲代和耐药人食管癌细胞,顺铂不改变p53蛋白的表达,但增加了p53蛋白在Ser15位磷酸化水平。顺铂抑制了EC109及耐药细胞EC109/CDDP细胞的生存能力,而p53抑制剂Pifithrin-α在亲代细胞和耐药细胞不同程度的拮抗了顺铂的这一作用。顺铂通过激活p53信号通路,抑制了人食管癌细胞的生存。 展开更多

关键词 顺铂 P53 人食管癌细胞

在线阅读 下载PDF 职称材料

尼美舒利对人食管癌细胞Eca-109 COX-2表达及生长的抑制作用 被引量：5

2

作者 刘俊茹 齐凤英 +3 位作者 李丽 左连富 郭建文 刘江惠 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期1084-1088,共5页

目的研究环氧化酶-2(COX-2)选择性抑制剂尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞株COX-2表达和细胞增殖及凋亡的影响。方法MTT法测定尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞增殖的抑制率;RT-PCR法检测Eca-109细胞COX-2mRNA表达变化;流式细胞仪检测COX-2... 目的研究环氧化酶-2(COX-2)选择性抑制剂尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞株COX-2表达和细胞增殖及凋亡的影响。方法MTT法测定尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞增殖的抑制率;RT-PCR法检测Eca-109细胞COX-2mRNA表达变化;流式细胞仪检测COX-2蛋白表达、细胞周期时相分布及凋亡率的变化;光镜和琼脂糖电泳法进一步观察细胞凋亡。结果尼美舒利对人食管癌Eca-109细胞有较强的抑制作用,有明显的时间和浓度依赖性;呈浓度依赖性下调Eca-109细胞COX-2 mRNA及蛋白表达;可使Eca-109细胞G0/G1期比例增高,S期细胞减少,增殖指数降低,凋亡细胞增多。结论尼美舒利可能通过对COX-2表达的下调而诱导凋亡和细胞周期阻滞,从而抑制人食管癌Eca-109细胞生长。 展开更多

关键词 尼美舒利 环氧化酶-2 人食管癌Eca-109细胞株 凋亡

在线阅读 下载PDF 职称材料

戊地昔布对人食管癌细胞凋亡及COX-2表达的影响 被引量：2

3

作者 刘淑霞 张玉军 +2 位作者 齐凤英 左连富 郭建文 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2006年第4期213-217,共5页

目的:探讨戊地昔布对人食管癌Eca109细胞系凋亡及环氧化酶-2表达的影响。方法:采用MTT法检测戊地昔布对人食管癌Eca109细胞生长的作用,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布,电子显微镜进一步检测细胞凋亡,RT-PCR及流式细胞术检测COX-2... 目的:探讨戊地昔布对人食管癌Eca109细胞系凋亡及环氧化酶-2表达的影响。方法:采用MTT法检测戊地昔布对人食管癌Eca109细胞生长的作用,流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布,电子显微镜进一步检测细胞凋亡,RT-PCR及流式细胞术检测COX-2mRNA及蛋白的表达。结果:戊地昔布(25～400μmol/L)依时间和浓度依赖性抑制人食管癌Eca109细胞的生长,作用72h后,对细胞生长的抑制率可达85.95%,凋亡率由(2.38±0.42)%增加到(48.46±0.73)%;50～400μmol/L时增殖指数和S期的细胞比例则明显降低,G0/G1期的细胞比例增加;同时,低浓度的戊地昔布对COX-2mRNA及蛋白的表达均没有影响,随着浓度的增加明显抑制COX-2mRNA及蛋白的表达。结论:戊地昔布可诱导人食管癌Eca109细胞发生凋亡,其诱导凋亡的机制可能与抑制COX-2的表达有关。 展开更多

关键词 戊地昔布 人食管癌Eca109细胞 细胞凋亡COX-2

在线阅读 下载PDF 职称材料

SMC4在人食管癌组织中的表达及对食管癌细胞增殖、侵袭和转移的作用机制研究 被引量：5

4

作者 张冉 石长林 +1 位作者 苟小军 何鸿晏 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2021年第11期1339-1345,共7页

目的:探讨SMC4在人食管癌(EC)组织中的表达及其对EC细胞增殖、侵袭和转移的作用机制。方法:收集2018年5月至2019年4月我院手术切除的EC组织标本及其癌旁正常组织标本各114例,免疫组化法检测人EC组织和正常食管组织中SMC4表达,并分析其... 目的:探讨SMC4在人食管癌(EC)组织中的表达及其对EC细胞增殖、侵袭和转移的作用机制。方法:收集2018年5月至2019年4月我院手术切除的EC组织标本及其癌旁正常组织标本各114例,免疫组化法检测人EC组织和正常食管组织中SMC4表达,并分析其与食管癌临床病理学参数的关系,采用细胞转染技术构建稳定下调SMC4的KYSE170和Eca-109细胞(KYSE170-siSMC4组/Eca-109-siSMC4组),以未经处理的KYSE170和Eca-109细胞(Control组)转染siNC的KYSE170/Eca-109细胞(KYSE170-siNC组/Eca-109-siNC组)作为对照,MTT法检测KYSE170和Eca-109细胞增殖;Transwell小室法检测转染后KYSE170和Eca-109细胞侵袭;划痕实验检测转染后KYSE170和Eca-109细胞迁移;IFA检测SMC4对上皮间质转化(EMT)相关分子N-cadherin表达的影响,Western blot检测细胞中PI3K、p-PI3K、Akt、p-Akt蛋白表达。结果:SMC4在食管癌组织中的阳性表达率高于正常食管黏膜组织(P<0.001);SMC4与肿瘤直径、TNM临床分期、浸润程度、淋巴结转移及组织分化程度密切相关(P<0.05);与Control组和KYSE170-siNC组相比,KYSE170-siSMC4组细胞在第4、5和6天增殖能力明显下降(P<0.05),Eca-109-siSMC4组4 d、5 d和6 d增殖能力明显低于Control组和Eca-109-siNC组(P<0.05);KYSE170-siSMC4组穿膜细胞数显著少于Control组和KYSE170-siNC组(P<0.05),Eca-109-siSMC4组穿膜细胞数明显少于Control组和Eca-109-siNC组(P<0.05);KYSE170-siSMC4组细胞迁移率明显低于Control组和KYSE170-siNC组(P<0.05),Eca-109-siSMC4组细胞迁移率明显低于Control组和Eca-109-siNC组(P<0.05);共聚焦显微镜观察发现,下调SMC4后,与Control组和KYSE170-siNC相比,KYSE170-siSMC4细胞N-cadherin表达明显下降(P<0.05);KYSE170-siSMC4组p-PI3K和p-Akt表达明显低于Control组和KYSE170-siNC组(P<0.05)。结论:下调SMC4表达可抑制人EC细胞增殖、侵袭和转移,并通过降低EMT相关分子N-cadherin表达抑制EMT,其作用机制可能与PI3K/AKT信号通路有关。 展开更多

关键词 染色体结构维持蛋白4 人食管癌细胞 增殖 侵袭 转移

在线阅读 下载PDF 职称材料

转染IL-27基因的食管癌细胞在裸鼠体内的抗肿瘤作用 被引量：2

5

作者 刘丽华 单保恩 +2 位作者 邵丽丽 艾军 王士杰 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期119-122,共4页

目的:将小鼠IL-27基因转染人食管癌细胞株,研究其在裸鼠体内的抗肿瘤活性。方法:以逆转录病毒为载体,将IL-27基因转染人食管癌细胞株Eca109,获得表达IL-27的阳性细胞克隆(Eca109/IL-27),用ELISA法检测细胞IL-27的分泌。将Eca109/IL-27... 目的:将小鼠IL-27基因转染人食管癌细胞株,研究其在裸鼠体内的抗肿瘤活性。方法:以逆转录病毒为载体,将IL-27基因转染人食管癌细胞株Eca109,获得表达IL-27的阳性细胞克隆(Eca109/IL-27),用ELISA法检测细胞IL-27的分泌。将Eca109/IL-27移植裸鼠腹腔,观察瘤细胞的成瘤性和裸鼠的生存期。用RT-PCR检测IL-27基因在裸鼠体内瘤组织中的表达,用流式细胞仪检测CD204表达、细胞周期和细胞凋亡变化。结果:成功建立了表达IL-27基因的人食管癌细胞株Eca109/IL-27,该细胞培养上清中IL-27含量为(137.73±7.00)pg/ml,而Eca109/LXSN和Eca109细胞培养上清中未检出IL-27(P<0.01),但Eca109/IL-27与Eca109/LXSN和Eca109细胞周期和细胞凋亡率无明显差异(P>0.05)。将Eca109/IL-27、Eca109/LXSN和Eca109细胞分别接种裸鼠腹腔15天后,各组裸鼠均于腹腔形成多数瘤结节,Eca109/IL-27组明显少于Eca109/LXSN和Eca109细胞组(P<0.05);Eca109/IL-27组裸鼠的生存期(35天时均无死亡)明显长于Eca109/LXSN和Eca109细胞组[分别为(23.33±1.52)、(24.00±1.37)天](P<0.01);Eca109/IL-27组肿瘤组织中有p28和EBI3亚基基因表达,而Eca109/LXSN和Eca109细胞组瘤组织中未见表达(P<0.01);其CD204表达水平、细胞凋亡率也明显高于接种Eca109/LXSN与Eca109细胞组(P<0.05);G0/G1和G2/M期细胞增多,S期细胞明显减少,与接种Eca109/LXSN和Eca109细胞组比较均有显著差异(P<0.05)。结论:IL-27可于体内促进肿瘤细胞凋亡,阻滞细胞周期发展,提高CD204的表达,延长生存期,发挥抗肿瘤免疫活性。 展开更多

关键词 IL-27 人食管癌细胞 裸鼠 抗肿瘤活性

在线阅读 下载PDF 职称材料

纳米载体介导的hTERT反义核酸对食管癌细胞生物活性的影响 被引量：1

6

作者 王白燕 张振中 +2 位作者 周天洋 张岚 李惠翔 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2008年第23期1353-1358,共6页

目的:研究聚氰基丙烯酸丁酯纳米粒(polybutylcyanoacrylate nanoparticles,PBCA-NPs,NPs)介导的端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transeriptase,hTERT)基因反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)对食管癌细胞EC9... 目的:研究聚氰基丙烯酸丁酯纳米粒(polybutylcyanoacrylate nanoparticles,PBCA-NPs,NPs)介导的端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transeriptase,hTERT)基因反义寡核苷酸(antisense oligodeoxynucleotide,ASODN)对食管癌细胞EC9706生物活性的影响。方法:采用乳化聚合法制备聚氰基丙烯酸丁酯纳米粒作为转染寡核苷酸(SODN)的载体,利用激光粒度分析仪和原子力显微镜测定制备NPs的粒径及zeta电位;以NPs介导8条不同hTERTASODN(NPs-ASODNⅠ、NPs-ASODNⅡ、NPs-ASODNⅢ、NPs-ASODNⅣ、NPs-ASODNⅤ、NPs-ASODNⅥ、NPs-ASODNⅦ和NPs-ASODNⅧ)转染食管癌细胞EC9706,采用MTT法检测转染后对EC9706细胞增殖的影响;采用RT-PCR检测hTERTmRNA表达情况;流式细胞术检测细胞凋亡率。结果:所制NPs粒径均匀、zeta电位较高,较为理想;以NPs介导hTERTASODN转染24h时,EC9706细胞增殖被明显抑制,该抑制作用随转染时间的延长和浓度的增高依次增强,与细胞对照组相比有显著差异(P<0.05);且不同ASODN转染后对EC9706细胞抑制率不同。单纯NPs组、正义寡核苷酸NPs-SODN组和单纯ASODN组转染后对EC9706细胞增殖无明显抑制作用(P>0.05)。NPs-ASODN转染EC9706细胞72h时,hTERTmRNA表达水平明显降低,与细胞对照组相比有显著差异(P<0.05)。NPs-ASODN转染72h时,NPs-ASODNⅠ、Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ转染组EC9706细胞出现明显凋亡现象(P<0.05),而NPs-ASODNⅡ、Ⅲ、Ⅳ转染组EC9706细胞未发生明显的凋亡现象(P>0.05)。结论:聚氰基丙烯酸丁酯纳米粒可以作为一种良好的基因载体,在其介导下hTERTASODN能有效抑制食管癌细胞EC9706的增殖和hTERTmRNA的表达,并能诱导细胞凋亡。提示该纳米粒作为一种新型纳米载体为食管癌的基因治疗提供了一条新的途径。这种抑制作用具有时间和浓度依赖性,并具有序列特异性,表明hTERT基因不同位点在端粒酶活性中所起的作用可能不同。 展开更多

关键词 纳米载体 HTERT 反义寡核苷酸 人食管癌细胞系EC9706

在线阅读 下载PDF 职称材料

大豆异黄酮在缺氧条件下诱导食管癌细胞凋亡及对HIF-1α表达的影响 被引量：1

7

作者 段红 张俊文 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2005年第19期1946-1949,共4页

目的研究在缺氧条件下大豆异黄酮(soybeanisoflavone)对人食管癌细胞株ECa109生长抑制作用及可能机制。方法运用产气袋法(GasPaK)制造缺氧条件,实验分为对照组、大豆异黄酮组、缺氧对照组、缺氧大豆异黄酮组,用MTT法检测常氧和缺氧条件... 目的研究在缺氧条件下大豆异黄酮(soybeanisoflavone)对人食管癌细胞株ECa109生长抑制作用及可能机制。方法运用产气袋法(GasPaK)制造缺氧条件,实验分为对照组、大豆异黄酮组、缺氧对照组、缺氧大豆异黄酮组,用MTT法检测常氧和缺氧条件下药物效应。流式细胞仪分析各组细胞周期分布,透射电镜观察细胞超微形态的改变,S-P免疫组化法检测各组细胞HIF-1α和Fas的表达。结果不同浓度大豆异黄酮不同氧条件下对人食管癌细胞株ECa109生长均有抑制作用,并呈剂量-效应关系。缺氧条件下大豆异黄酮对人食管癌细胞株ECa109生长抑制作用增加。常氧和缺氧条件下大豆异黄酮处理后细胞均滞留于G2/M期,缺氧大豆异黄酮组凋亡率增加。透射电镜观察常氧下及缺氧条件下大豆异黄酮处理后细胞出现凋亡和坏死细胞的形态学改变。大豆异黄酮不同氧条件下均上调Fas表达,并能下调因缺氧表达增加的缺氧诱导因子-1α(hypoxia-induciblefactor-1α,HIF-1α)的表达。结论大豆异黄酮对人食管癌细胞生长有抑制作用,其抑制作用可能通过阻抑细胞周期进程,上调Fas蛋白表达,从而诱导食管癌细胞凋亡而实现的。缺氧条件下大豆异黄酮抑制作用增强,抑制HIF-1α的表达可能是其重要机制。 展开更多

关键词 缺氧 大豆异黄酮 人食管癌细胞株ECa109 缺氧诱导因子-1Α

在线阅读 下载PDF 职称材料

戊地昔布诱导人食管癌Eca109细胞凋亡的机制研究 被引量：9

8

作者 张玉军 刘淑霞 +2 位作者 齐凤英 左连富 郭建文 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第5期629-633,共5页

目的探讨特异选择性环氧化酶-2（COX-2）抑制剂戊地昔布诱导人食管癌Eca109细胞凋亡及其作用机制。方法流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布；电子显微镜进一步检测细胞凋亡；采用乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒测定Eca109细胞的LDH含量；... 目的探讨特异选择性环氧化酶-2（COX-2）抑制剂戊地昔布诱导人食管癌Eca109细胞凋亡及其作用机制。方法流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布；电子显微镜进一步检测细胞凋亡；采用乳酸脱氢酶（LDH）试剂盒测定Eca109细胞的LDH含量；流式细胞术检测p-p38MAPK及凋亡基因Fas和FasL蛋白的表达。结果戊地昔布（25—400μmol·L^-1）可诱导人食管癌Eca109细胞发生凋亡，凋亡率由（2．95±0．83）％增力口到（48．46±0．73）％；50—400μmol·L^-1时增殖指数和S期的细胞比例则明显降低，G0／G1期的细胞比例增加；同时，流式细胞术显示，25μmol·L^-1戊地昔布即可上调人食管癌Eca109细胞p-p38MAPK蛋白的表达，并随剂量的增加而增强；50—400μmol·L^-1的戊地昔布可上调Eca109细胞Fas及FasL的表达。结论戊地昔布可诱导人Eca109细胞凋亡，其诱导凋亡的机制可能部分是通过激活p-p38MAPK／Fas、FasL途径实现的。 展开更多

关键词 戊地昔布 人食管癌Eca109细胞 凋亡 P-P38MAPK FAS FASL

在线阅读 下载PDF 职称材料

涤痰化瘀汤对人食管癌Eca-109细胞ra sp21 p53基因表达影响的研究 被引量：7

9

作者 王明艳 许冬青 +5 位作者 刘华东 赵凤鸣 江励华 梁枫 张民庆 蔡宝昌 《中华中医药学刊》 CAS 2009年第3期530-531,共2页

目的:观察涤痰化瘀汤含药血清对人食管癌Eca-109细胞生长的抑制作用及对ras p21、突变型p53基因表达的影响。方法:以人食管癌Eca-109细胞为材料,采用MTT法,观察涤痰化瘀汤含药血清对细胞生长的抑制率;应用流式细胞仪检测涤痰化瘀汤对人... 目的:观察涤痰化瘀汤含药血清对人食管癌Eca-109细胞生长的抑制作用及对ras p21、突变型p53基因表达的影响。方法:以人食管癌Eca-109细胞为材料,采用MTT法,观察涤痰化瘀汤含药血清对细胞生长的抑制率;应用流式细胞仪检测涤痰化瘀汤对人食管癌Eca-109细胞ras p21、突变型p53基因表达的影响。此外以ICR纯种小鼠的骨髓细胞为材料,以微核为指标,观察涤痰化瘀汤的致变作用,以进行药物安全性评估。结果:涤痰化瘀汤含药血清对人食管癌Eca-109细胞有抑制作用;含药血清组与对照血清组比ras p21、突变型p53基因表达均降低;涤痰化瘀汤药物组的微核率与正常对照组比无显著差别。结论:涤痰化瘀汤含药血清对人食管癌Eca-109细胞生长有明显的抑制作用且对ras p21、突变型p53基因表达有影响。涤痰化瘀汤无致变作用。 展开更多

关键词 涤痰化瘀汤 人食管癌ECA-109细胞 抑制作用 rasp21基因 P53基因

在线阅读 下载PDF 职称材料

沉默单核细胞趋化蛋白-1基因降低人食管癌EC109细胞的迁移及侵袭能力 被引量：2

10

作者 张超贤 韩宇 +1 位作者 常廷民 李光艳 《中国生物化学与分子生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第6期678-685,共8页

单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)是白色脂肪细胞分泌的炎症趋化刺激因子,属于趋化因子CC亚族,可促进肿瘤血管形成和细胞外基质降解,从而促进肿瘤细胞的浸润与转移。沉默MCP-1基因可显著抑制恶性肿瘤生长... 单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemoattractant protein-1,MCP-1)是白色脂肪细胞分泌的炎症趋化刺激因子,属于趋化因子CC亚族,可促进肿瘤血管形成和细胞外基质降解,从而促进肿瘤细胞的浸润与转移。沉默MCP-1基因可显著抑制恶性肿瘤生长及转移,但其作用的分子机制尚不完全清楚。本研究应用小干扰RNA技术沉默人食管癌EC109细胞中MCP-1表达。细胞划痕试验显示,与对照组相比,沉默MCP-1基因可明显抑制食管癌EC109细胞迁移能力。Transwell侵袭实验显示,沉默MCP-1基因后,EC109细胞侵袭能力降低。Western印迹试验和RT-PCR试验揭示,沉默MCP-1基因后,细胞中MMP-7、MMP-9、TGF-β_1及VEGF表达水平显著下降。研究结果提示,沉默MCP-1基因可通过抑制MMP-7、MMP-9、TGF-β_1及VEGF表达,降低癌细胞迁移及侵袭能力。 展开更多

关键词 小干扰RNA 单核细胞趋化蛋白-1 人食管癌EC109细胞 迁移及侵袭

在线阅读 下载PDF 职称材料

星半通膈散诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡及其机制研究 被引量：1

11

作者 刘华东 王明艳 +2 位作者 张民庆 黄仕文 梁枫 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 2008年第5期332-334,366,共4页

目的研究星半通膈散药液诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡及其作用机制。方法采用MTT法测定细胞生长抑制率,通过流式细胞仪观察凋亡细胞及检测p53、bcl-2基因表达。结果星半通膈散不同剂量药液均可抑制人食管癌Eca-109细胞生长,诱导细胞凋亡... 目的研究星半通膈散药液诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡及其作用机制。方法采用MTT法测定细胞生长抑制率,通过流式细胞仪观察凋亡细胞及检测p53、bcl-2基因表达。结果星半通膈散不同剂量药液均可抑制人食管癌Eca-109细胞生长,诱导细胞凋亡,降低p53(突变型)、bcl-2蛋白表达率。结论星半通膈散能诱导人食管癌Eca-109细胞凋亡,而抑制p53基因突变、下调bcl-2基因表达可能是其重要机制。 展开更多

关键词 星半通膈散 人食管癌Eea-109细胞 凋亡 P53 BEL-2 实验研究

在线阅读 下载PDF 职称材料

戊地昔布对人食管癌Eca109细胞系的抑制作用及其调控 被引量：1

12

作者 张玉军 齐凤英 +3 位作者 刘淑霞 左连富 郭建文 刘江惠 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2005年第9期508-512,共5页

目的:探讨特异选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂戊地昔布对人食管癌Eca109细胞的抑制作用及其调控机制。方法:采用MTT法检测戊地昔布对人食管癌Eca109细胞生长的作用;流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布;采用流式细胞术和免疫组织化学... 目的:探讨特异选择性环氧化酶-2(COX-2)抑制剂戊地昔布对人食管癌Eca109细胞的抑制作用及其调控机制。方法:采用MTT法检测戊地昔布对人食管癌Eca109细胞生长的作用;流式细胞术检测细胞凋亡和细胞周期分布;采用流式细胞术和免疫组织化学检测人食管癌Eca109细胞中p-p38MAPK、c-jun和c-fos的表达。结果:戊地昔布(25～400μmol/L)可按时间和浓度依赖性抑制人食管癌Eca109细胞的生长,作用72小时后,对细胞生长的抑制率可达85.95%,凋亡率由(2.38±0.42)%增加到(48.46±0.73)%;50～400μmol/L时增殖指数和S期的细胞比例则明显降低,G0/G1期的细胞比例增加。戊地昔布在给药72小时后,食管癌Eca109细胞中p-p38MAPK、c-fos、c-jun蛋白表达均增强,并且随浓度的增加而增强。结论:戊地昔布可通过诱导细胞凋亡和细胞周期停滞而抑制人Eca109细胞生长,其诱导凋亡的机制可能部分是通过激活p-p38MAPK、c-jun、c-fos途径实现的。 展开更多

关键词 戊地昔布 环氧化酶-2人食管癌Eca109细胞 凋亡p-p38MAPK

在线阅读 下载PDF 职称材料

eIF4E反义寡核苷酸对人食管癌EC9706细胞中eIF4EHPA表达的影响 被引量：1

13

作者 陈奎生 楚丽 +3 位作者 赵志华 李晟磊 高冬玲 张云汉 《中国肿瘤临床》 CAS CSCD 北大核心 2009年第14期830-834,共5页

目的:探讨真核起始因子4E(eIF4E)反义寡核苷酸对人食管癌EC9706细胞中eIF4E及肝素酶(HPA)蛋白、mRNA表达的影响,并观察其对EC9706细胞侵袭力的抑制效果。方法:针对eIF4E mRNA翻译起始区设计经硫代磷酸化修饰的反义寡核苷酸(ASODNS),经... 目的:探讨真核起始因子4E(eIF4E)反义寡核苷酸对人食管癌EC9706细胞中eIF4E及肝素酶(HPA)蛋白、mRNA表达的影响,并观察其对EC9706细胞侵袭力的抑制效果。方法:针对eIF4E mRNA翻译起始区设计经硫代磷酸化修饰的反义寡核苷酸(ASODNS),经脂质体转染食管癌EC9706细胞,采用原位杂交、Western Blot和Boy-den chamber侵袭实验等方法检测抑制前后EC9706细胞中eIF4E及HPA表达情况及细胞侵袭力改变。结果:eIF4EASODNS转染食管癌EC9706细胞24、48、72h后,elF4E及HPA的mRNA与蛋白表达量均较对照组有所降低(P<0.05),且均以转染72h的抑制效应最为明显,在每个时间段内随剂量增加eIF4E ASODNS抑制效应明显增强(P<0.05);eIF4E ASODNS对HPA蛋白、mRNA表达的抑制效应和对eIF4E蛋白、mRNA表达的抑制效应,呈正相关关系(蛋白r=10.02,mRNA r=10.17,P均<0.01);eIF4E ASODNS体外转染食管癌EC9706细胞后,其穿越Matrigel的细胞数明显少于细胞对照组、空白对照组和无关对照组(P均<0.05)。结论:eIF4E ASODNS可抑制食管癌EC9706细胞中eIF4E、HPA蛋白及mRNA表达,且可抑制食管癌EC9706细胞的浸润转移。该研究结果为临床治疗食管癌等恶性肿瘤浸润转移奠定一定的理论基础。 展开更多

关键词 真核细胞起始因子4E 反义寡核苷酸 人食管癌EC9706细胞株 肝素酶 转染

在线阅读 下载PDF 职称材料

吉西他滨对人食管癌Eca-109细胞的增殖、细胞周期、细胞凋亡及STAT3蛋白的影响 被引量：1

14

作者 吕红博 曾凡业 +2 位作者 王洪江 孙伟 阿迪力.萨来 《中国医学前沿杂志（电子版）》 2016年第12期149-152,共4页

目的探讨吉西他滨对人食管癌Eca-109细胞的增殖、细胞周期、细胞凋亡及STAT3蛋白表达的影响。方法 MTT法测定吉西他滨对人食管癌Eca-109细胞的增殖抑制作用,PI单染流式细胞术检测人食管癌Eca-109细胞周期,Annexin V-FITC/PI双染流式细... 目的探讨吉西他滨对人食管癌Eca-109细胞的增殖、细胞周期、细胞凋亡及STAT3蛋白表达的影响。方法 MTT法测定吉西他滨对人食管癌Eca-109细胞的增殖抑制作用,PI单染流式细胞术检测人食管癌Eca-109细胞周期,Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测人食管癌Eca-109细胞的凋亡情况,蛋白质印迹法检测STAT3蛋白的表达情况。结果不同浓度吉西他滨对人食管癌Eca-109细胞的抑制率均明显高于正常对照组(P<0.05),且随着药物浓度的增加,抑制率越高;吉西他滨0.20 mg/L组、0.40 mg/L组及0.80 mg/L组G0/G1期人食管癌Eca-109细胞百分数逐渐下降(P<0.05),G2/M期细胞百分数无变化(P>0.05),而S期细胞百分数逐渐增加(P<0.05)。吉西他滨0.20 mg/L组、0.40 mg/L组、0.80 mg/L组细胞凋亡率均明显高于正常对照组(P<0.05),且上述三组的STAT3蛋白表达均低于正常对照组(P<0.05),呈剂量依赖性。结论吉西他滨对人食管癌Eca-109细胞具有增殖抑制作用,阻滞细胞于S期,明显促进细胞凋亡,下调STAT3蛋白的表达。 展开更多

关键词 吉西他滨 人食管癌ECA-109细胞 增殖 细胞周期 凋亡 STAT3蛋白

在线阅读 下载PDF 职称材料

真核起始因子4E反义寡核苷酸对人食管癌EC-1细胞中真核起始因子4E表达的影响

15

作者 陈奎生 王志永 +3 位作者 周强 柴雅玫 高冬玲 张红 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2009年第5期935-937,959,共4页

目的:探讨真核起始因子4E(eIF4E)反义寡核酸(ASODN)对人食管癌EC-1细胞中eIF4E表达的影响。方法:将针对eIF4E不同基因位点的2条反义寡核苷酸(ASODN1、2)和1条无义寡核苷酸(N-ODN)转染EC-1细胞(设5、10、15μmol/L3个转染浓度),分别培养2... 目的:探讨真核起始因子4E(eIF4E)反义寡核酸(ASODN)对人食管癌EC-1细胞中eIF4E表达的影响。方法:将针对eIF4E不同基因位点的2条反义寡核苷酸(ASODN1、2)和1条无义寡核苷酸(N-ODN)转染EC-1细胞(设5、10、15μmol/L3个转染浓度),分别培养24、48、72h,并设空脂质体转染作为空白对照,采用免疫细胞化学和原位杂交方法检测转染后细胞中eIF4E蛋白和mRNA表达的变化。结果:ASODN1、2转染EC-1细胞培养24、48、72h后,各组中eIF4E蛋白和mRNA的表达均降低,2者分别与空白对照组相比,差异均有统计学意义(P<0.05);ASODN1、2组每个时间段内随浓度增加ASODN抑制效应增强,差异具有统计学意义(F=9.423、10.284、10.496、7.621、8.420和9.089,P<0.05),组间相同时间点、相同浓度的抑制效应比较差异无统计学意义(P>0.05);NODN组和空白对照组对eIF4E的表达均无抑制效应。结论:特异性的ASODN能有效抑制人食管癌EC-1细胞中eIF4E的表达。 展开更多

关键词 真核起始因子4E 反义寡核苷酸 人食管癌EC-1细胞 转染

在线阅读 下载PDF 职称材料

利用拉曼光谱研究^(60)Co γ射线对EC9706细胞的辐射损伤 被引量：3

16

作者 齐健 郭郑元 +2 位作者 张广水 吴电勇 唐伟跃 《光谱学与光谱分析》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2009年第7期1896-1900,共5页

将EC9706细胞经不同剂量60Co γ射线辐照后继续培养24 h。利用激光拉曼光谱分析EC9706细胞内部蛋白质、核酸、脂类等生物大分子的构象和含量变化。分析结果发现,各剂量组拉曼谱的峰强和频移与空白对照组之间存在较大的差异,主要表现是... 将EC9706细胞经不同剂量60Co γ射线辐照后继续培养24 h。利用激光拉曼光谱分析EC9706细胞内部蛋白质、核酸、脂类等生物大分子的构象和含量变化。分析结果发现,各剂量组拉曼谱的峰强和频移与空白对照组之间存在较大的差异,主要表现是蛋白质酰胺Ⅲ带1 244 cm-1谱带在中等剂量组(4、5Gy)β折叠结构向无规卷曲转化;色氨酸残基的吲哚环振动谱带1 341 cm-1在各剂量组中出现不同程度的红移;782cm-1谱带在大剂量组(7、8Gy)红移2~3 cm-1,说明大剂量γ射线辐照导致DNA中的磷酸二酯(O—P—O)基团的非氢键化程度增强。脂类的CH2和CH3弯曲振动谱带1 446 cm-1在2、4Gy组蓝移4 cm-1,其他剂量组频移不大,这与60Co γ射线对EC9706细胞的生物膜造成一定损伤有关。拉曼特征峰在不同剂量组中的变化,为进一步研究60Coγ射线辐照损伤EC9706细胞的最佳剂量提供了一定实验依据。 展开更多

关键词 60Co Γ射线 人食管癌细胞 拉曼光谱 剂量

在线阅读 下载PDF 职称材料

EC9706细胞经不同剂量^(137)Csγ射线照射后拉曼光谱的研究

17

作者 刘保良 李云涛 +2 位作者 陈长青 张建民 唐伟跃 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期83-85,共3页

本文研究了EC9706细胞经不同剂量137Csγ射线辐照、继续培养24h后的拉曼光谱,结果表明:(1)蛋白质酰胺Ⅲ带1240cm-1谱带在各剂量组出现不同程度蓝移,表明改变了β回折构象;色氨酸残基的吲哚环振动谱带550、762cm-1谱带在各剂量组中出现... 本文研究了EC9706细胞经不同剂量137Csγ射线辐照、继续培养24h后的拉曼光谱,结果表明:(1)蛋白质酰胺Ⅲ带1240cm-1谱带在各剂量组出现不同程度蓝移,表明改变了β回折构象;色氨酸残基的吲哚环振动谱带550、762cm-1谱带在各剂量组中出现较明显的频移,说明其内部构象的改变;空白对照组EC9706细胞中酪氨酸是"埋藏式"的,而在4、5、6Gy组却变成了"暴露式"的。(2)核酸中磷酸骨架基团的785、1096cm-1在射线剂量组出现了明显频移和散射强度变化,这可能与137Csγ射线对EC9706细胞DNA损伤,导致其增殖机制变化有关。(3)脂类中的CH2、CH3弯曲振动谱带1448cm-1仅在4、6Gy组出现频移,其它剂量组基本上没有改变。 展开更多

关键词 137Csγ射线 剂量 人食管癌细胞 拉曼光谱

在线阅读 下载PDF 职称材料

p38MAPK在戊地昔布诱导Eca109细胞凋亡中的调控作用 被引量：6

18

作者 张玉军 郝军 +4 位作者 刘淑霞 左连富 刘俊茹 吴海江 郭建文 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期497-501,共5页

目的探讨p38MAPK信号转导途径在戊地昔布诱导食管癌Eca109细胞凋亡中的调控作用。方法将正常培养的人食管癌Eca109细胞随机分为正常对照组、戊地昔布组和戊地昔布+SB203580组;采用流式细胞术和DNA Ladder检测凋亡情况;RT-PCR检测p38mRN... 目的探讨p38MAPK信号转导途径在戊地昔布诱导食管癌Eca109细胞凋亡中的调控作用。方法将正常培养的人食管癌Eca109细胞随机分为正常对照组、戊地昔布组和戊地昔布+SB203580组;采用流式细胞术和DNA Ladder检测凋亡情况;RT-PCR检测p38mRNA的表达变化;流式细胞术和免疫细胞化学检测p38蛋白的表达变化。结果①戊地昔布能够诱导Eca109细胞发生凋亡,并呈剂量依赖性,而SB203580能够部分降低戊地昔布诱导的Eca109细胞的凋亡率;②戊地昔布能够上调Eca109细胞中p38mRNA和蛋白的表达,而戊地昔布+SB203580组p38mRNA和蛋白的表达下降;③p38蛋白表达与凋亡率呈正相关。结论戊地昔布能够通过部分激活p38MAPK信号途径诱导Eca109细胞发生凋亡。 展开更多

关键词 人食管癌Eca109细胞 戊地昔布 凋亡 P38MAPK SB203580

在线阅读 下载PDF 职称材料

D-氨基葡萄糖衍生物对Eca-109细胞内活性氧、线粒体膜电位的影响 被引量：2

19

作者 杨国栋 吴静 +3 位作者 强占荣 周永宁 王爱勤 薛群基 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2007年第5期544-547,共4页

目的:探讨2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖(2-[(3-carboxy-1-oxoprogy1)amino]-2-deoxy-D-Glucose,COPADG)诱导Eca-109细胞凋亡的机制。方法:不同浓度COPADG作用于人食管癌Eca-109细胞24h,检测Eca-109细胞的抑制率、凋亡率、细... 目的:探讨2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖(2-[(3-carboxy-1-oxoprogy1)amino]-2-deoxy-D-Glucose,COPADG)诱导Eca-109细胞凋亡的机制。方法:不同浓度COPADG作用于人食管癌Eca-109细胞24h,检测Eca-109细胞的抑制率、凋亡率、细胞内活性氧(ROS)、线粒体跨膜电位。结果:Eca-109细胞凋亡率与COPADG浓度呈正相关(rs=1.0,P<0.01);Eca-109细胞线粒体膜电位水平与Eca-109细胞凋亡率相关(rs=1.0,P<0.01);ROS水平与Eca-109细胞凋亡率呈正相关(rs=1.0,P<0.01);ROS水平与Eca-109细胞线粒体膜电位水平呈负相关(rs=1.0,P<0.01)。结论:COPADG可促进Eca-109细胞凋亡,提高Eca-109细胞内ROS水平,并降低线粒体膜电位水平。实验结果提示COPADG提高ROS水平,降低Eca-109细胞线粒体膜电位水平,启动细胞凋亡通路,促使Eca-109细胞凋亡,并且线粒体膜电位的下降是通过提高ROS实现的。 展开更多

关键词 2-(3-羧基-1-丙酰氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖 人食管癌ECA-109细胞 凋亡 活性氧 细胞线粒体跨膜电位

在线阅读 下载PDF 职称材料

环境因素对人类疾病调控作用机制研究

20

作者 谢明仁 卢建珍 +3 位作者 王贤贤 谢刘阳 YU Xin 俞发荣 《生态科学》 CSCD 2020年第6期175-180,共6页

为了探索环境因素对人类疾病调控作用机制,研究植物提取物二十碳烯酸对人食管癌细胞(EC56细胞)PI3K-Akt信号通路调控基因表达水平的影响,分别给予EC56细胞0.2,0.8,1.6 mg·L-1二十碳烯酸和5-FU培养48 h。用流式细胞仪检测EC56细胞... 为了探索环境因素对人类疾病调控作用机制,研究植物提取物二十碳烯酸对人食管癌细胞(EC56细胞)PI3K-Akt信号通路调控基因表达水平的影响,分别给予EC56细胞0.2,0.8,1.6 mg·L-1二十碳烯酸和5-FU培养48 h。用流式细胞仪检测EC56细胞凋亡率;用酶联免疫吸附法(ELISA法)检测EC56细胞中脑源性神经营养因子(BDNF)、酪氨酸激酶受体B(TrkB)、粘着斑激酶(FAK)、蛋白激酶(Akt)表达水平。结果发现,给予EC56细胞二十碳烯酸和5-FU培养48 h,细胞凋亡率为15.46%,21.52%,23.13%和18.34,与对照组比较,细胞凋亡率有显著性差异(P<0.01);BDNF、TrkB水平比对照组分别降低了22.76%,43.90%,56.91%,40.65%和22.59%,43.49%,67.76%,49.28%(P<0.01);FAK和Akt水平比对照组分别降低了14.34%,36.49%,50.7%,49.7%和15.11%,24.99%,32.71%,20.84%。结果提示,植物提取物二十碳烯酸对EC56细胞增殖具有明显的抑制作用,其作用机制与PI3K-Akt信号转道通路中调控基因TrkB、BDNF、FAK和Akt表达水平下调和抑制EC56细胞分裂周期有关。实验结果为充分利用自然环境资源,协调生态环境平衡,提高人类身心健康研究提供了参考依据。 展开更多

关键词 二十碳烯酸 人食管癌细胞 细胞分裂周期 凋亡 PI3K-AKT信号通路

在线阅读 下载PDF 职称材料