利用DNA重组技术在柞蚕蛹中表达重组人促红细胞生成素(Recombinant human erythropoietin,rhEPO),经过亲和层析纯化后,用SDS-PAGE分离纯化各组分,并通过电喷雾电离串联质谱技术(ESI-MS/MS)检测其糖基化修饰.结果显示,在柞蚕蛹中表达的rh...利用DNA重组技术在柞蚕蛹中表达重组人促红细胞生成素(Recombinant human erythropoietin,rhEPO),经过亲和层析纯化后,用SDS-PAGE分离纯化各组分,并通过电喷雾电离串联质谱技术(ESI-MS/MS)检测其糖基化修饰.结果显示,在柞蚕蛹中表达的rhEPO比活性约为1190 U/μg,其糖基化修饰位点与人体表达的EPO一致,有3个N-糖基化位点和1个O-糖基化位点.凝集素杂交实验结合质谱结果表明,柞蚕蛹表达的rhEPO的糖链中缺乏唾液酸修饰,而缺少唾液酸修饰的EPO通过鼻腔给药后在多种神经系统疾病的治疗中发挥着重要的作用.所得结果为进一步研究外源蛋白在柞蚕蛹-柞蚕核型多角体病毒(Anthraea pernyi nucleopolyhedrorirus,ApNPV)宿主载体表达系统表达后的糖基化与生物活性提供了依据.展开更多
目的在32例年龄在60岁以上的慢性病贫血（anemia of chronic disease,AcD）患者中，应用重组人促红细胞生成素（recombinant human erythropoietin,rhEPO）治疗8周后测观察贫血改善情况，并筛选出具有较高临床意义的预测参数。方法32名...目的在32例年龄在60岁以上的慢性病贫血（anemia of chronic disease,AcD）患者中，应用重组人促红细胞生成素（recombinant human erythropoietin,rhEPO）治疗8周后测观察贫血改善情况，并筛选出具有较高临床意义的预测参数。方法32名AcD老年患者应用rhEPO治疗8周，8周内血红蛋白（hemoglobin，Hb）上升20g／L设为治疗有效。选用血清EPO水平、Hb、网状红细胞计数（reticulocyte count, Ret）、总铁结合力（total iron binding capacity,TIBC） 、血清铁（serum iron，SI）、血清铁蛋白（serum ferritin serum，SF）、可溶性转铁蛋白受体（serum transferrin receptor, sTfR）作为观测指标，观察患者8周时血红球蛋白的改变并进一步统计分析其与各观测指标变化之间的关系。结果32例老年AcD患者应用rhEPO治疗8周后Hb升高，SI、LgSF下降，sTfR升高（P〈0．05）。20例患者8周时获得预期疗效，多元回归分析提示rhEPO治疗8周后Hb改变与LgEPO及基线sTfR水平呈负相关（P〈0．05）。根据设定的评价方法将32例患者分为rhEPO治疗有效组及治疗无效组，绘制sTfR及LgEPO的受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve, ROC曲线）并计算曲线下面积（area under the curve,AUC），后者具有统计学意义并且AUC更大（AUC为0．81，P〈0．05，95％CI：0．627～0．993），并通过最大Youden指数寻找到最佳诊断点为EPO≤58mIU／mL。如患者EPO≤58mIU／mL，可预测其能获得较好的治疗效果。结论rhEPO在老年慢性病贫血中可取得较好的治疗效果，患者的EPO水平是具有较高临床意义的预测参数。展开更多
目的探讨重组人促红细胞生成素(recombinat human erythropoietin,rhEPO)对大鼠视神经(optic nerve,ON)不完全损伤后视网膜神经元凋亡的抑制作用和对视功能修复的影响。方法雄性Long Evans大鼠随机分为实验组和对照组,每组25只。制作ON...目的探讨重组人促红细胞生成素(recombinat human erythropoietin,rhEPO)对大鼠视神经(optic nerve,ON)不完全损伤后视网膜神经元凋亡的抑制作用和对视功能修复的影响。方法雄性Long Evans大鼠随机分为实验组和对照组,每组25只。制作ON不完全损伤模型。实验组和对照组按ON夹伤后不同时间分为伤后1d、3d、5d、7d、14d5个时间点。实验组伤后即时、3d、5d、7d,按5000U·kg-1体重腹腔内注射rhEPO;对照组注射等量生理盐水。伤后1d、3d、5d、7d、14d取材。取材前行闪光视觉诱发电位检测。应用TUNEL法检测视网膜神经元的凋亡。结果伤后7d、14d对照组视网膜凋亡细胞密集分布于视网膜节细胞层及内、外核层。实验组7d、14d视网膜凋亡细胞明显减少,视网膜节细胞层的凋亡细胞与对照组相比有非常显著差异(P<0.01)。2组闪光视觉诱发电位潜伏期各时间点组间比较无显著性差异(P>0.05)。伤后1d、3d、5d、7d实验组P1-N2波振幅和对照组相比无显著性差异(P>0.05);伤后14d时有显著差异(P<0.05)。结论rhEPO对ON不完全损伤后视网膜神经元的凋亡具有抑制作用,可以促进视功能的恢复。展开更多
文摘目的在32例年龄在60岁以上的慢性病贫血（anemia of chronic disease,AcD）患者中，应用重组人促红细胞生成素（recombinant human erythropoietin,rhEPO）治疗8周后测观察贫血改善情况，并筛选出具有较高临床意义的预测参数。方法32名AcD老年患者应用rhEPO治疗8周，8周内血红蛋白（hemoglobin，Hb）上升20g／L设为治疗有效。选用血清EPO水平、Hb、网状红细胞计数（reticulocyte count, Ret）、总铁结合力（total iron binding capacity,TIBC） 、血清铁（serum iron，SI）、血清铁蛋白（serum ferritin serum，SF）、可溶性转铁蛋白受体（serum transferrin receptor, sTfR）作为观测指标，观察患者8周时血红球蛋白的改变并进一步统计分析其与各观测指标变化之间的关系。结果32例老年AcD患者应用rhEPO治疗8周后Hb升高，SI、LgSF下降，sTfR升高（P〈0．05）。20例患者8周时获得预期疗效，多元回归分析提示rhEPO治疗8周后Hb改变与LgEPO及基线sTfR水平呈负相关（P〈0．05）。根据设定的评价方法将32例患者分为rhEPO治疗有效组及治疗无效组，绘制sTfR及LgEPO的受试者工作特征曲线（receiver operating characteristic curve, ROC曲线）并计算曲线下面积（area under the curve,AUC），后者具有统计学意义并且AUC更大（AUC为0．81，P〈0．05，95％CI：0．627～0．993），并通过最大Youden指数寻找到最佳诊断点为EPO≤58mIU／mL。如患者EPO≤58mIU／mL，可预测其能获得较好的治疗效果。结论rhEPO在老年慢性病贫血中可取得较好的治疗效果，患者的EPO水平是具有较高临床意义的预测参数。
文摘目的探讨重组人促红细胞生成素(recombinat human erythropoietin,rhEPO)对大鼠视神经(optic nerve,ON)不完全损伤后视网膜神经元凋亡的抑制作用和对视功能修复的影响。方法雄性Long Evans大鼠随机分为实验组和对照组,每组25只。制作ON不完全损伤模型。实验组和对照组按ON夹伤后不同时间分为伤后1d、3d、5d、7d、14d5个时间点。实验组伤后即时、3d、5d、7d,按5000U·kg-1体重腹腔内注射rhEPO;对照组注射等量生理盐水。伤后1d、3d、5d、7d、14d取材。取材前行闪光视觉诱发电位检测。应用TUNEL法检测视网膜神经元的凋亡。结果伤后7d、14d对照组视网膜凋亡细胞密集分布于视网膜节细胞层及内、外核层。实验组7d、14d视网膜凋亡细胞明显减少,视网膜节细胞层的凋亡细胞与对照组相比有非常显著差异(P<0.01)。2组闪光视觉诱发电位潜伏期各时间点组间比较无显著性差异(P>0.05)。伤后1d、3d、5d、7d实验组P1-N2波振幅和对照组相比无显著性差异(P>0.05);伤后14d时有显著差异(P<0.05)。结论rhEPO对ON不完全损伤后视网膜神经元的凋亡具有抑制作用,可以促进视功能的恢复。
