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脂肪分化相关蛋白通过蛋白激酶C和酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1促进THP-1巨噬细胞蓄积脂质 被引量:5
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作者 袁中华 刘晓辉 +10 位作者 王中群 贾薇 Niu Xi-lin 黄谙非 刘录山 易光辉 王佐 任重 唐朝克 田国平 杨永宗 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第5期833-842,共10页
目的:探讨脂肪分化相关蛋白促进THP-1巨噬细胞蓄积脂质的机制。方法:使用高胆固醇饲料喂养新西兰兔12周,复制动脉粥样硬化动物模型。然后用Western blotting和免疫组织化学染色观察兔主动脉脂肪分化相关蛋白及蛋白激酶C的表达。THP-1巨... 目的:探讨脂肪分化相关蛋白促进THP-1巨噬细胞蓄积脂质的机制。方法:使用高胆固醇饲料喂养新西兰兔12周,复制动脉粥样硬化动物模型。然后用Western blotting和免疫组织化学染色观察兔主动脉脂肪分化相关蛋白及蛋白激酶C的表达。THP-1巨噬细胞与氧化低密度脂蛋白孵育不同的时间,使细胞负荷胆固醇酯后,用RT-PCR的方法观察脂肪分化相关蛋白及酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1的表达,用PepTag assay琼脂糖凝胶电泳及分光光度法观察蛋白激酶C的活性。在负荷胆固醇酯的THP-1巨噬细胞中分别加入蛋白激酶C的激动剂佛波酯和抑制剂钙磷酸结合蛋白,观察脂肪分化相关蛋白的表达,同时使用油红O染色和高效液相色谱法测定细胞内脂质的变化。瞬时转染pcDNA3.1-HA-adi表达载体到THP-1巨噬细胞,复制高表达脂肪分化相关蛋白的细胞模型。在负荷、不负荷胆固醇酯或ACAT抑制剂存在的状态下,观察酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1表达及细胞内胆固醇酯的改变。结果:与对照组相比,兔主动脉病变处脂肪分化相关蛋白及蛋白激酶C表达均显著增加。负荷胆固醇酯的THP-1巨噬细胞中脂肪分化相关蛋白及酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1表达上调,蛋白激酶C的活性升高。荷脂细胞与蛋白激酶C激动剂共孵育后,可以协同增强上调脂肪分化相关蛋白的效应,细胞内脂质增多;如果荷脂细胞同时与蛋白激酶C抑制剂共孵育,可以有效抑制荷脂所致的脂肪分化相关蛋白高表达,细胞内脂质减少。高表达脂肪分化相关蛋白的THP-1巨噬细胞能够使酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1表达增加,促进细胞内胆固醇酯蓄积。加入酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶抑制剂后,这些作用被减弱。结论:脂肪分化相关蛋白可能是通过蛋白激酶C活性的改变影响酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1的活性,从而影响细胞内脂质的蓄积。 展开更多
关键词 脂肪分化相关蛋白 蛋白激C 基辅酶a 胆固醇酰基转移 THP-1细胞 动脉硬化
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渥曼青霉素阻断罗格列酮对人巨噬细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1表达的影响 被引量:3
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作者 陈心 成蓓 +2 位作者 王洪星 何平 葛晶 《实用医学杂志》 CAS 2008年第7期1088-1090,共3页
目的:研究过氧化体增殖物激活型受体-γ(peroxisome proliferator activated receptors-γ,PPAR-γ)配体罗格列酮对巨噬细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1(Acyl-CoA:cholesterol acyltransferase-1,ACAT-1)表达的影响及可能机制。方法:... 目的:研究过氧化体增殖物激活型受体-γ(peroxisome proliferator activated receptors-γ,PPAR-γ)配体罗格列酮对巨噬细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1(Acyl-CoA:cholesterol acyltransferase-1,ACAT-1)表达的影响及可能机制。方法:在RPMI 1640培养基中培养人单核细胞株(THP-1),加入佛波酯培养48h,细胞贴壁呈巨噬细胞样分化。将细胞分为空白对照组、不同浓度罗格列酮组和罗格列酮+渥曼青霉素(wortmannin)组,运用实时定量PCR和Western blot,观察巨噬细胞ACAT-1 mRNA和蛋白表达水平的变化。结果:罗格列酮可明显抑制ACAT-1 mRNA和蛋白的表达,且呈浓度依赖性;加入磷酯酰肌醇三磷酸激酶(phosphate dylinositol 3-kinase,PI3K)信号途径抑制剂渥曼青霉素后ACAT-1表达较罗格列酮组高,较空白对照组低。结论:PPAR-γ配体罗格列酮通过PI3K途径抑制ACAT-1表达发挥其抗动脉粥样硬化的作用。 展开更多
关键词 噻唑烷二酮类 青霉素类 PPARΓ 1-磷脂肌醇3- 人酰基辅酶a:胆固醇酰基转移-1
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Ghrelin对THP-1细胞泡沫化过程中酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1表达的影响 被引量:3
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作者 王彦富 成蓓 +4 位作者 万晶晶 梅春丽 刘玮 柯丽 何平 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第9期1700-1703,共4页
目的:研究单核/巨噬细胞分化成为泡沫细胞过程中ghrelin对人酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(ACAT-1)表达以及细胞内胆固醇酯的影响。方法:体外培养人源单核细胞系(THP-1),由佛波酯(PMA)作用使其分化为巨噬细胞,后者可在氧化低密度脂蛋白(o... 目的:研究单核/巨噬细胞分化成为泡沫细胞过程中ghrelin对人酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(ACAT-1)表达以及细胞内胆固醇酯的影响。方法:体外培养人源单核细胞系(THP-1),由佛波酯(PMA)作用使其分化为巨噬细胞,后者可在氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)存在条件下进一步转变为泡沫细胞。巨噬细胞加入不同浓度的ghrelin预孵2 h后再加入ox-LDL,油红O染色法观察细胞内脂滴含量,运用RT-PCR法检测ACAT-1 mRNA水平,Western blotting法检测ACAT-1蛋白表达,采用酶法,通过荧光分光光度计检测细胞内胆固醇酯含量。结果:Ghrelin可明显减少THP-1源性泡沫细胞内脂滴的形成,显著降低细胞内胆固醇酯含量,并能显著降低单核/巨噬细胞泡沫化过程中ACAT-1 mRNA水平和蛋白表达,且此干预作用呈浓度依赖性。结论:Ghrelin可能通过ACAT-1转录翻译水平的下调延缓动脉粥样硬化的发生。 展开更多
关键词 GHRELIN 基辅酶a 胆固醇酰基转移1 泡沫细胞 动脉硬化
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糖基化终产物对THP-1巨噬细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1表达的影响 被引量:1
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作者 杨启红 徐强 +1 位作者 张红 司良毅 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第17期1630-1633,共4页
目的观察糖基化终产物(advanced glycosylation end-products,AGEs)对THP-1巨噬细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1(acyl coenzyme A:cholesterol acyltransferase-1,ACAT-1)表达的影响。方法将糖基化-牛血清白蛋白(AGE-modified bovine ... 目的观察糖基化终产物(advanced glycosylation end-products,AGEs)对THP-1巨噬细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1(acyl coenzyme A:cholesterol acyltransferase-1,ACAT-1)表达的影响。方法将糖基化-牛血清白蛋白(AGE-modified bovine serum albumin,AGE-BSA)与佛波酯(PMA)诱导分化72h的THP-1巨噬细胞共同孵育,运用RT-PCR和Western blot分别检测巨噬细胞ACAT-1 mRNA和蛋白的表达水平。结果PMA诱导72h后,THP-1细胞停止增殖,由单核细胞分化成为巨噬细胞。用50、100、200和400mg/L AGE-BSA处理巨噬细胞后,细胞ACAT-1 mRNA相对表达量逐渐增加;ACAT-1蛋白表达的平均积分光密度值也逐渐增加,二者较对照牛血清白蛋白组明显增加(P<0.05)。用200mg/LAGE-BSA作用巨噬细胞0、12、24、36h和48h后,细胞ACAT-1 mRNA相对表达量逐渐升高;ACAT-1蛋白表达的平均积分光密度值也逐渐升高,较0h明显增加(P<0.05)。结论AGEs可上调THP-1巨噬细胞ACAT-1 mRNA和蛋白的表达,呈浓度和时间依赖性,这可能与糖尿病动脉粥样硬化有关。 展开更多
关键词 糖尿病 糖基化终产物 基辅酶a:胆固醇酰基转移-1 基因表达
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牛磺酸抑制THP-1细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1表达 被引量:1
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作者 柯丽 成蓓 +2 位作者 余其振 何平 白智峰 《实用医学杂志》 CAS 2005年第10期1012-1014,共3页
目的:观察牛磺酸对人单核细胞系THP-1细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1(ACAT-1)表达的影响。方法:在有或无干扰素-γ(INF-γ)的条件下,用不同浓度的牛磺酸与THP-1持续孵育不同的时间,RT-PCR检测ACAT-1mRNA水平,WesternBlot检测其蛋白... 目的:观察牛磺酸对人单核细胞系THP-1细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1(ACAT-1)表达的影响。方法:在有或无干扰素-γ(INF-γ)的条件下,用不同浓度的牛磺酸与THP-1持续孵育不同的时间,RT-PCR检测ACAT-1mRNA水平,WesternBlot检测其蛋白表达。结果:牛磺酸显著下调THP-1的ACAT-1mRNA和蛋白表达水平(P<0.05~0.01,n=3),并呈时间和剂量依赖性效应。INF-γ促进ACAT-1mRNA和蛋白表达(P<0.05),该作用被牛磺酸部分抑制(P<0.01)。结论:牛磺酸抑制ACAT-1的基础表达和由INF-γ诱导的表达,这可能是其抗动脉粥样硬化的机制之一。 展开更多
关键词 牛磺酸 THP-1细胞基辅酶a 胆固醇酰基转移-1 表达 动脉硬化
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不对称二甲基精氨酸上调THP-1来源的巨噬细胞和泡沫细胞内胆固醇酰基转移酶-1的表达(英文) 被引量:2
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作者 朱振东 贾俊琴 +2 位作者 张旋 王庸晋 王殿华 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第12期2613-2618,共6页
目的观察不对称二甲基精氨酸(ADMA)对单核细胞THP-1来源的巨噬细胞和泡沫细胞中胆固醇酰基转移酶-1(ACAT-1)的表达及胆固醇含量的影响。方法分别采用RT-PCR和Western blot技术检测ACAT-1mRNA和蛋白表达水平。采用酶偶联比色法检测细胞... 目的观察不对称二甲基精氨酸(ADMA)对单核细胞THP-1来源的巨噬细胞和泡沫细胞中胆固醇酰基转移酶-1(ACAT-1)的表达及胆固醇含量的影响。方法分别采用RT-PCR和Western blot技术检测ACAT-1mRNA和蛋白表达水平。采用酶偶联比色法检测细胞内胆固醇含量。结果不同浓度的ADMA(0,3.75,7.5,15,or30μmol/L)对THP-1来源的巨噬细胞和泡沫细胞作用不同时间(6、12、24h)后,巨噬细胞和泡沫细胞内ACAT-1mRNA和蛋白的表达明显上调,细胞内总胆固醇的含量明显升高。结论 ADMA在巨噬细胞形成泡沫细胞过程中可能发挥了重要作用。抑制巨噬细胞和泡沫细胞内ACAT-1可能成为治疗动脉粥样硬化的潜在靶点。 展开更多
关键词 不对称二甲基精氨酸 单核细胞THP-1 巨噬细胞 泡沫细胞 基辅酶a 胆固醇酰基转移-1
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酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1反义寡核苷酸对泡沫细胞形成的影响 被引量:3
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作者 何平 成蓓 戚本玲 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第8期1616-1619,共4页
目的:观察酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)反义寡核苷酸对泡沫细胞(FC)形成的影响。方法:体外培养人THP-1单核细胞系,由佛波酯(PMA)作用使其分化为巨噬细胞;并建立过表达ACAT1基因的THP-1单核细胞系。在脂质体的介导下将针对ACAT1... 目的:观察酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)反义寡核苷酸对泡沫细胞(FC)形成的影响。方法:体外培养人THP-1单核细胞系,由佛波酯(PMA)作用使其分化为巨噬细胞;并建立过表达ACAT1基因的THP-1单核细胞系。在脂质体的介导下将针对ACAT1基因序列的反义和错义寡核苷酸分别作用于上述细胞6h后加入Ac-LDL进行脂质负荷,以Western blotting法检测ACAT1蛋白表达,放射性同位素标记底物法检测ACAT酶活性的变化,油红O染色法观察泡沫细胞的形成情况。结果:ACAT1反义寡核苷酸可明显抑制巨噬细胞和过表达ACAT1基因的THP-1单核细胞内的ACAT酶活性,而且可明显抑制Ac-LDL负荷后泡沫细胞的形成;错义寡核苷酸则无此作用。结论:ACAT1反义寡核苷酸可抑制ACAT的生物学活性及泡沫细胞的形成。 展开更多
关键词 基辅酶a 胆固醇酰基转移 泡沫细胞 寡核苷酸类 反义
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TNF-α,ox-LDL对人单核细胞株U937胆固醇酰基转移酶1表达的影响
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作者 成蓓 王毅 +3 位作者 何平 吴剑萍 狄鸣 王洪星 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期423-425,428,共4页
目的 观察肿瘤坏死因子 α (TNF α)和氧化型低密度脂蛋白 (ox LDL)对人单核细胞U937酰基辅酶A :胆固醇酰基转移酶 1(ACAT1)mRNA表达和蛋白质翻译的影响。方法 U937细胞培养到足够数量后 ,细胞计数传代分组 :①对照组 :加等量的培养... 目的 观察肿瘤坏死因子 α (TNF α)和氧化型低密度脂蛋白 (ox LDL)对人单核细胞U937酰基辅酶A :胆固醇酰基转移酶 1(ACAT1)mRNA表达和蛋白质翻译的影响。方法 U937细胞培养到足够数量后 ,细胞计数传代分组 :①对照组 :加等量的培养基 ;②TNF α组 :加入TNF α ,使其终浓度为 10ng/ml;③ox LDL组 :加入ox LDL ,终浓度为 10 0 μg/ml。应用RT PCR检测ACAT1mRNA表达 ,蛋白定量应用免疫印迹法。 结果 与对照组相比 ,TNF α组ACAT1mRNA表达显著增加 (0 5 73± 0 0 32vs0 990± 0 0 2 2 ,P <0 0 1) ,而ox LDL组ACAT1mRNA表达水平 (0 5 5 4± 0 0 2 6 )无显著变化。 3组之间ACAT1酶蛋白含量差异无显著性意义。结论 TNF α能促进A CAT1mRNA表达 ,但未见TNF α和ox 展开更多
关键词 TNF-Α OX-LDL 单核细胞株 U937胆固醇 酰基转移1 基因表达 肿瘤坏死因子-Α TNF-Α
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粉防已碱对高脂饮食兔主动脉壁血管细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶表达的影响
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作者 王毅 孙宝贵 +1 位作者 温沁竹 汪芳 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期547-549,F004,共4页
目的:探讨中药粉防已碱对高脂饮食兔主动脉壁血管细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶(ACAT)表达的影响。方法:将18只雄性日本大耳白兔随机分为正常对照组(普通饲料,C组)、高脂模型组(高脂饲料,CH组)和粉防已碱组(高脂饲料+Tet,Tet组)。喂... 目的:探讨中药粉防已碱对高脂饮食兔主动脉壁血管细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶(ACAT)表达的影响。方法:将18只雄性日本大耳白兔随机分为正常对照组(普通饲料,C组)、高脂模型组(高脂饲料,CH组)和粉防已碱组(高脂饲料+Tet,Tet组)。喂养12周后处死动物,从主动脉根部连续切片,常规HE染色,计算机图像扫描,分析主动脉内膜和管壁厚皮;血管壁脂质苏丹Ⅳ染色;Westemblot方法测定主动脉壁血管细胞酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶表达。结果:CH组粥样斑块面积,内膜和血管壁厚度显著高于Tet组(P<0.01),而C和Tet组之间差异无显著性;ACAT蛋白含量各组差异无显著性(P>0.05)。结论:Tet具有抑制血管壁脂质沉积的作用,但不影响ACAT酶蛋白的表达。 展开更多
关键词 粉防已碱 基辅酶a 胆固醇酰基转移 动脉粥样硬化
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游泳训练对载脂蛋白E基因敲除小鼠过氧化物酶体增殖物激活受体-γ及脂代谢酶肉碱棕榈酰转移酶-1、中链酰基辅酶A脱氢酶的影响 被引量:2
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作者 孙垂华 蔡颖 +3 位作者 张文亮 谢康玲 刘元 刘遂心 《中国康复医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期134-138,153,共6页
目的:观察游泳训练对ApoE基因敲除小鼠胰岛素抵抗模型血清游离脂肪酸(FFA)、肝脏组织过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)及肉碱棕榈酰转移酶-1(CPT-1)、中链酰基辅酶A脱氢酶(MCAD)mRNA表达的影响,初步探讨游泳训练改善ApoE基因敲... 目的:观察游泳训练对ApoE基因敲除小鼠胰岛素抵抗模型血清游离脂肪酸(FFA)、肝脏组织过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(PPAR-γ)及肉碱棕榈酰转移酶-1(CPT-1)、中链酰基辅酶A脱氢酶(MCAD)mRNA表达的影响,初步探讨游泳训练改善ApoE基因敲除小鼠胰岛素抵抗(IR)的可能机制。方法:选取8周雄性ApoE基因敲除小鼠26只,随机分为:高脂运动组(n=13)和高脂静止组(n=13)。高脂运动组小鼠给予高脂饮食加游泳训练12周,高脂静止组除不进行游泳训练外,余同高脂运动组。另以健康雄性C57BL/6J(n=10)小鼠为正常对照组,普通饲料喂养12周。干预12周后,测各组小鼠空腹胰岛素(FIN)、空腹血糖(FPG)、并以HOMA法计算胰岛素抵抗指数(IRI),确定胰岛素抵抗模型建立;全自动生化分析仪测定血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度胆固醇脂蛋白(HDL)、低密度胆固醇脂蛋白(LDL)、游离脂肪酸(FFA)含量;RT-PCR法测肝脏组织中PPAR-γ、CPT-1、MCADmRNA表达水平。结果:运动训练干预12周以后:①与正常对照组相比较,高脂静止组体重显著增加(P<0.05);与高脂静止组比较,高脂运动组体重显著下降(P<0.05)。②与正常对照组相比较,高脂静止组FIN、FPG、Homa-IRI水平明显升高(P均<0.01);与高脂静止组相比较,高脂运动组FIN、FPG、Homa-IRI明显降低(P分别<0.05、0.01、0.01)。③与正常对照组相比较,高脂静止组TC、LDL、FFA水平明显升高(P均<0.01);与高脂静止组相比较,高脂运动组TC、LDL、FFA水平明显降低(P分别<0.05、0.05、0.01),HDL水平明显升高(P<0.05)。④与正常对照组相比较,高脂静止组PPAR-γ、CPT-1、MCADmRNA表达明显降低(P均<0.01);与高脂静止组相比较,高脂运动组PPAR-γ、CPT-1、MCADmRNA表达明显增加(P均<0.01)。结论:游泳训练可能通过上调肝脏组织PPAR-γ表达、进而上调CPT-1、MCAD的表达,改善小鼠脂代谢,从而改善ApoE基因敲除小鼠胰岛素抵抗。 展开更多
关键词 胰岛素抵抗 运动 过氧化物体增殖物激活受体-Γ 肉碱棕榈转移-1 中链基辅酶a脱氢
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脂肪分化相关蛋白反义寡核苷酸降低乙酰辅酶A:胆固醇酰基转移酶活性
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作者 袁中华 杨永宗 +5 位作者 尹卫东 易光辉 唐朝克 唐显庆 万载阳 吴孟津 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第3期581-585,共5页
目的:已经发现随着细胞内胆固醇酯的积聚,脂肪分化相关蛋白的表达明显增加。本文进一步探讨脂肪分化相关蛋白干预细胞内胆固醇代谢的作用位点。方法:Ox-LDL组为80mg/L氧化低密度脂蛋白与C57BL/6J小鼠腹腔巨噬细胞共同孵育,Ox-LDL+antise... 目的:已经发现随着细胞内胆固醇酯的积聚,脂肪分化相关蛋白的表达明显增加。本文进一步探讨脂肪分化相关蛋白干预细胞内胆固醇代谢的作用位点。方法:Ox-LDL组为80mg/L氧化低密度脂蛋白与C57BL/6J小鼠腹腔巨噬细胞共同孵育,Ox-LDL+antisense组另加1mmol/L脂肪分化相关蛋白反义寡核苷酸,在不同的时点取样,共观察4d。使用荧光分光光度计观察细胞内胆固醇酯的改变;使用脂肪分化相关蛋白抗体间标法结合流式细胞术,观察脂肪分化相关蛋白表达量的变化;使用Ox-r[CL-3H]LDL和液体闪烁计数器观察细胞对氧化低密度脂蛋白摄入量的变化,并同时测定乙酰辅酶A:胆固醇酰基转移酶的活性。结果:72h后,Ox-LDL+antisense组细胞内胆固醇酯(19.9±1.9)mg/gprotein显著低于Ox-LDL组(46.6±3.4)mg/gprotein。4d观察期间,脂肪分化相关蛋白蛋白的表达量两组细胞都增加,从12h时点开始,Ox-LDL组大于Ox-LDL+antisense组,在4d时点,Ox-LDL组明显高于Ox-LDL+antisense组。两组细胞摄入Ox-r[CL-3H]LDL的量逐渐增加,但是,Ox-LDL+antisense组摄入量从1d后明显低于Ox-LDL组,在2d和4d时点,两组差别仍有显著性。乙酰辅酶A:胆固醇酰基转移酶相对活性从6h到2d表现为增加,在2d时点,两组比较差别显著,Ox-LDL+antisense组的活性明显低于Ox-LDL组。但从2d到4d,乙酰辅酶A:胆固醇酰基转移酶相对活性稳定。ACAT的活性与脂肪分化相关蛋白蛋白的表达量相关分析表明,Ox-LDL组R2=0.6176(P<0.05),Ox-LDL+antisense组R2=0.8212(P<0.05)。结论:抑制脂肪分化相关蛋白表达能引起细胞摄入外源性脂蛋白减少和乙酰辅酶A:胆固醇酰基转移酶的活性降低,提示脂肪分化相关蛋白与脂滴的代谢功能密切相关,且乙酰辅酶A:胆固醇酰基转移酶有可能是其潜在的位点。 展开更多
关键词 甾醇O-酰基转移 基辅酶a 巨噬细胞 胆固醇 寡核苷酸类 反义
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N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸调节α-微管蛋白乙酰转移酶1抑制矽肺纤维化 被引量:3
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作者 张巧丹 牛思宇 +6 位作者 李耕旭 陈建星 汤庆南 徐洪 杨方 耿玉聪 李世峰 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2019年第23期3597-3601,共5页
目的探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(Ac-SDKP)能否通过对α-微管蛋白乙酰转移酶1(α-TAT1)调节而发挥抗矽肺纤维化作用。方法Wistar大鼠随机分为3组:对照组、矽肺模型组、Ac-SDKP处理组,每组6只。原代培养大鼠的肺成纤维... 目的探讨N-乙酰基-丝氨酰-天门冬酰-赖氨酰-脯氨酸(Ac-SDKP)能否通过对α-微管蛋白乙酰转移酶1(α-TAT1)调节而发挥抗矽肺纤维化作用。方法Wistar大鼠随机分为3组:对照组、矽肺模型组、Ac-SDKP处理组,每组6只。原代培养大鼠的肺成纤维细胞分为5组:对照组、转化生长因子(TGF-β1)诱导组、Ac-SDKP预处理组(TGF-β1+Ac-SDKP)、α-TAT1沉默组(α-TAT1-siRNA+TGF-β1+Ac-SDKP)、α-TAT1过表达组(α-TAT1-cpDNA+TGF-β1+Ac-SDKP)。免疫组化检测大鼠肺组织中α-TAT1的表达与分布,Western blot检测大鼠肺组织及大鼠肺成纤维细胞中I型胶原(Col I)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、乙酰化微管蛋白-α(Ac-Tubα)、α-TAT1蛋白的表达水平。结果矽肺模型组大鼠的肺组织中出现矽结节,α-TAT1在矽结节中表达缺失,Western blot结果显示,矽肺模型组和TGF-β1诱导的肺成纤维细胞中Col I和α-SMA蛋白表达上调,Ac-Tubα和α-TAT1蛋白表达下调。Ac-SDKP治疗可抑制该变化。Ac-SDKP对Col I、α-SMA表达抑制效应可被α-TAT1-siRNA阻断,而α-TAT1过表达可加强Ac-SDKP对Col I、α-SMA表达的抑制作用。结论Ac-SDKP通过调节α-TAT1的表达抑制肌成纤维细胞分化,发挥抑制矽肺大鼠肺纤维化的作用。 展开更多
关键词 矽肺 肺纤维化 N-酰基-丝氨-天门冬-赖氨-脯氨酸 微管蛋白 α-微管蛋白乙转移1 大鼠
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ABCA1、ACAT1 DNA甲基化在Hcy致THP-1单核源性泡沫细胞胆固醇流出中作用研究 被引量:9
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作者 杨安宁 王磊 +8 位作者 周龙霞 赵丽 王艳华 蔡欣 曹成建 杨程 陈久凯 马文斌 姜怡邓 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期44-48,共5页
目的探讨ABCA1、ACAT1 DNA甲基化在同型半胱氨酸(Hcy)致THP-1单核源性泡沫细胞胆固醇流出中的作用。方法复制泡沫细胞模型,用50、100、200、500μmol·L-1Hcy和100μmol·L-1Hcy+叶酸+维生素B12(100+F+V)干预,并设对照组(0μmol... 目的探讨ABCA1、ACAT1 DNA甲基化在同型半胱氨酸(Hcy)致THP-1单核源性泡沫细胞胆固醇流出中的作用。方法复制泡沫细胞模型,用50、100、200、500μmol·L-1Hcy和100μmol·L-1Hcy+叶酸+维生素B12(100+F+V)干预,并设对照组(0μmol·L-1Hcy)。油红O染色观察泡沫细胞形成,巢式降落式甲基化特异性PCR(nMS-PCR)检测ABCA1、ACAT1 DNA甲基化水平,并分析两者比值变化;ELISA-like法检测DNA甲基转移酶(DNMTs)活性;化学比色法分析细胞内胆固醇含量。结果成功复制了泡沫细胞模型;给予不同浓度Hcy刺激后,ABCA1 DNA甲基化改变呈上升趋势,ACAT1 DNA甲基化改变呈下降趋势,给予100+F+V干预后可逆转上述变化,其中ABCA1 DNA甲基化改变更明显;同时,不同浓度Hcy可使泡沫细胞内DNMTs活性和胆固醇含量增加。结论 ABCA1和ACAT1 DNA甲基化的改变参与了Hcy致THP-1单核源性泡沫细胞胆固醇流出,DNMTs可能起关键调控作用。 展开更多
关键词 同型半胱氨酸 泡沫细胞 三磷酸腺苷-结合转运子A1 基辅酶a 胆固醇酰基转移1 DNA甲基化 胆固醇流出
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叶绿体G 3 PAT酶酰基选择性与植物低温敏感性关系的研究进展
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作者 朱素琴 季本华 赵华 《种子》 CSCD 北大核心 2008年第8期47-51,共5页
叶绿体甘油-3-磷酸酰基转移酶(G 3 PAT)的酰基选择性与植物低温敏感性密切相关。一般来讲,冷敏感植物叶片中PG分子饱和度比抗冷植物中的高。叶绿体G3 PAT酶是决定PG分子种类并影响其分子中脂肪酸饱和度的关键酶,而G 3 PAT酶分子中的关... 叶绿体甘油-3-磷酸酰基转移酶(G 3 PAT)的酰基选择性与植物低温敏感性密切相关。一般来讲,冷敏感植物叶片中PG分子饱和度比抗冷植物中的高。叶绿体G3 PAT酶是决定PG分子种类并影响其分子中脂肪酸饱和度的关键酶,而G 3 PAT酶分子中的关键氨基酸影响了G 3 PAT酶的酰基选择性。 展开更多
关键词 甘油-3-磷酸-1-酰基转移(G 3 PAT) 低温敏感性 磷脂甘油PG
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罗格列酮对RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞内胆固醇含量及SR-BⅠ表达的影响 被引量:3
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作者 徐芳 蒙颖 +6 位作者 王志禄 李万玲 贾军正 郭文芬 谢宛霞 胡海英 胡旭堂 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第12期1792-1795,共4页
目的通过观察罗格列酮对RAW264.7泡沫细胞内胆固醇含量和酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶1(ACAT-1)及B族Ⅰ型清道夫受体(SR-BⅠ)表达的影响,探讨罗格列酮抗动脉粥样硬化的作用机制。方法以RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞为研究对象,分为空白... 目的通过观察罗格列酮对RAW264.7泡沫细胞内胆固醇含量和酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶1(ACAT-1)及B族Ⅰ型清道夫受体(SR-BⅠ)表达的影响,探讨罗格列酮抗动脉粥样硬化的作用机制。方法以RAW264.7巨噬细胞源性泡沫细胞为研究对象,分为空白对照组、泡沫细胞组和罗格列酮组,用不同浓度的罗格列酮(5、10和20μmol/L)对泡沫细胞进行干预。采用油红O染色观察泡沫细胞形成,胆固醇氧化酶法检测泡沫细胞内胆固醇含量的变化;Western blotting技术检测泡沫细胞表面ACAT-1及SR-BⅠ的表达。结果与对照组相比,泡沫细胞组内总胆固醇及游离胆固醇含量升高(P<0.01)、ACAT-1表达增加(P<0.05)、SR-BⅠ表达略有增加(P>0.05);与泡沫细胞组相比,不同浓度罗格列酮干预组细胞内总胆固醇及游离胆固醇含量下降(P<0.05)、ACAT-1表达下降(P<0.05)、SR-BⅠ表达升高(P<0.05),呈现出一定的浓度依赖性。结论罗格列酮可通过下调ACAT-1的表达和上调SR-BⅠ的表达来降低泡沫细胞内胆固醇含量,从而发挥抗动脉粥样硬化作用。 展开更多
关键词 罗格列酮 泡沫细胞 胆固醇 基辅酶a-胆固醇酰基转移1 B族Ⅰ型清道夫受体
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PPAR γ-ACAT1途径在肺炎衣原体诱导巨噬细胞泡沫化中的作用 被引量:5
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作者 梅春丽 何平 +3 位作者 成蓓 刘玮 王彦富 万晶晶 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2009年第7期1312-1318,共7页
目的:观察过氧化物酶体增殖活化受体γ(PPARγ)和酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)在肺炎衣原体(C.pn)诱导巨噬细胞泡沫化中的作用。方法:给予C.pn(1×105-1×106IFU)感染和/或PPARγ的配体罗格列酮(1-20μmol/L)孵育THP-1... 目的:观察过氧化物酶体增殖活化受体γ(PPARγ)和酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)在肺炎衣原体(C.pn)诱导巨噬细胞泡沫化中的作用。方法:给予C.pn(1×105-1×106IFU)感染和/或PPARγ的配体罗格列酮(1-20μmol/L)孵育THP-1源性巨噬细胞48h。运用油红O染色观察细胞浆内脂滴的变化,酶荧光学法检测细胞内胆固醇酯含量的变化。分别运用RT-PCR和Western blotting检测ACAT1、PPARγ mRNA和蛋白表达。结果:高浓度的C.pn(5×105和1×106IFU)感染使THP-1源性巨噬细胞内脂滴明显增多,胆固醇酯与总胆固醇的比值明显增加(>50%)。C.pn感染呈浓度依赖性上调ACAT1 mRNA和蛋白表达,并且浓度依赖性地下调PPARγ mRNA和蛋白表达(P<0.05)。高浓度的罗格列酮(10、20μmol/L)明显抑制C.pn诱导的细胞内脂质滴的增多和胆固醇酯含量的增加,同时罗格列酮呈浓度依赖性抑制C.pn诱导的ACAT1 mRNA和蛋白表达的上调(P<0.05)。结论:C.pn经PPARγ途径上调ACAT1表达,进而诱导巨噬细胞泡沫化,这为进一步阐明C.pn感染促进动脉粥样硬化发生发展提供一个新的理论依据。 展开更多
关键词 肺炎衣原体 基辅酶a 胆固醇酰基转移1 过氧化物体激增剂活化受体γ 巨噬细胞 脉粥样硬化
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缬沙坦对兔动脉粥样硬化斑块中ACAT-1和PPAR-γ表达的影响 被引量:4
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作者 马志强 成蓓 +1 位作者 丁宇慧 曾永利 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第9期1105-1108,共4页
目的研究酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1(ACAT-1)和过氧化体增殖物激活型受体γ(PPAR-γ)在动脉粥样硬化斑块中的表达,以及血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂缬沙坦对ACAT-1和PPAR-γ表达的影响。方法24只雄性日本大耳白兔随机分为对照组、缬沙... 目的研究酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶-1(ACAT-1)和过氧化体增殖物激活型受体γ(PPAR-γ)在动脉粥样硬化斑块中的表达,以及血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂缬沙坦对ACAT-1和PPAR-γ表达的影响。方法24只雄性日本大耳白兔随机分为对照组、缬沙坦干预组和高胆固醇饮食组,每组8只。喂养12周后,抽取静脉血检测血脂水平,并进行主动脉内膜/中膜比值测定,以RT-PCR和Western blotting方法检测各组主动脉ACAT-1、PPAR-γ mRNA及蛋白的表达。结果高胆固醇饮食组及缬沙坦干预组的血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)均无差别(P>0.05),但均高于对照组(P<0.01)。高胆固醇饮食组内膜和内膜/中膜厚度比值显著高于对照组和缬沙坦干预组(P<0.01,P<0.05),而缬沙坦干预组内膜和内膜/中膜厚度比值显著高于对照组(P<0.01)。与对照组比较,高胆固醇饮食组和缬沙坦干预组ACAT-1、PPAR-γ mRNA和蛋白含量显著增加(P<0.01或P<0.05);ACAT-1 mRNA和蛋白在缬沙坦干预组的表达显著低于高胆固醇饮食组(P<0.01或P<0.05),而PPAR-γ mRNA和蛋白在缬沙坦干预组的表达显著高于高胆固醇饮食组(P<0.05)。高胆固醇饮食组和缬沙坦干预组ACAT-1和PPAR-γ mRNA的表达呈明显负相关(P<0.05)。结论缬沙坦可能通过上调PPAR-γ抑制ACAT-1的表达,从而起到抗动脉粥样硬化的作用。 展开更多
关键词 动脉硬化 缬沙坦 基辅酶a 胆固醇酰基转移-1 过氧化体增殖物激活型受体Γ
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可溶性Klotho蛋白抑制THP-1源性泡沫细胞形成 被引量:4
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作者 刘玮 李琳 +3 位作者 刘佳妮 石晶 洪畋 陈秀娟 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第5期816-821,共6页
目的:探讨可溶性Klotho(KL)蛋白对THP-1源性泡沫细胞形成的影响。方法:THP-1单核细胞与160 nmol/L佛波酯孵育48 h后,诱导分化为THP-1源性巨噬细胞,给予THP-1源性巨噬细胞不同浓度(25、50、100和200μg/L)的可溶性KL蛋白预处理后,再由氧... 目的:探讨可溶性Klotho(KL)蛋白对THP-1源性泡沫细胞形成的影响。方法:THP-1单核细胞与160 nmol/L佛波酯孵育48 h后,诱导分化为THP-1源性巨噬细胞,给予THP-1源性巨噬细胞不同浓度(25、50、100和200μg/L)的可溶性KL蛋白预处理后,再由氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导其转变为泡沫细胞。油红O染色观察细胞内脂滴形成情况,通过液体闪烁计数法测定THP-1源性泡沫细胞内胆固醇流出情况,酶荧光法检测细胞内游离胆固醇及胆固醇酯的含量,并分别用Western blot法及RT-qPCR法检测酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)和ATP结合盒转运体A1(ABCA1)的蛋白及mRNA表达。结果:可溶性KL蛋白能增加THP-1源性巨噬细胞内胆固醇流出,抑制THP-1源性泡沫细胞形成,且可溶性KL蛋白呈一定浓度依赖性地抑制ox-LDL诱导的泡沫细胞形成过程中ACAT1表达的上调和ABCA1表达的下调(P<0.05)。结论:可溶性KL蛋白能够抑制THP-1源性泡沫细胞形成,其机制可能与靶向调控细胞内ACAT1和ABCA1的表达有关。 展开更多
关键词 KLOTHO蛋白 基辅酶a:胆固醇酰基转移1 ATP结合盒转运体A1 泡沫细胞 动脉粥样硬化
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ACAT1基因干扰对人结肠癌细胞增殖及侵袭转移的影响 被引量:3
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作者 陈心 梁慧玲 +5 位作者 徐细明 张一桥 陈能 林丹丹 冯翎 郑勇斌 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2017年第7期1074-1077,共4页
目的:利用小干扰RNA(si RNA)技术干扰酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)基因在人结肠癌HT29细胞中的表达,观察ACAT1基因表达下降对于人结肠癌HT29细胞增殖和侵袭迁移能力的影响,了解ACAT1在结肠癌发生发展中的作用。方法:通过脂质体Hi... 目的:利用小干扰RNA(si RNA)技术干扰酰基辅酶A-胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)基因在人结肠癌HT29细胞中的表达,观察ACAT1基因表达下降对于人结肠癌HT29细胞增殖和侵袭迁移能力的影响,了解ACAT1在结肠癌发生发展中的作用。方法:通过脂质体Hiper Fect将ACAT1 si RNA转染至人结肠癌HT29细胞中干扰ACAT1基因的表达,利用Real time PCR检测转染前后ACAT1基因表达的变化,利用ACAT1基因干扰前后的HT29细胞,采用CFSE染色法检测HT29细胞增殖能力的变化;Transwell小室法检测HT29细胞侵袭和迁移能力的变化。结果:ACAT1 si RNA转染HT29细胞后ACAT1 m RNA的表达明显下降,ACAT1 si RNA转染后的HT29细胞与转染前比较,增殖及侵袭转移的能力均受到明显抑制,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:ACAT1基因干扰使HT29细胞的增殖减慢,侵袭迁移能力降低,为结肠癌治疗提供新的靶点。 展开更多
关键词 结肠肿瘤 基辅酶a-胆固醇酰基转移1 小干扰RNA
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内脂素通过上调ACAT1诱导THP-1源性泡沫细胞形成 被引量:2
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作者 康静 成蓓 姜蕾 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第3期213-216,共4页
目的:观察酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)在内脂素(visfatin)诱导THP-1源性泡沫细胞形成中的作用,以初步探讨visfatin诱导泡沫细胞形成的分子机制。方法:THP-1单核细胞诱导分化为巨噬细胞,予不同浓度的visfatin(1×10-... 目的:观察酰基辅酶A:胆固醇酰基转移酶1(ACAT1)在内脂素(visfatin)诱导THP-1源性泡沫细胞形成中的作用,以初步探讨visfatin诱导泡沫细胞形成的分子机制。方法:THP-1单核细胞诱导分化为巨噬细胞,予不同浓度的visfatin(1×10-71×10-5mol/L)分别作用048小时,运用油红O染色观察细胞浆脂滴变化,酶荧光法检测细胞内总胆固醇(TC)和游离胆固醇(FC)含量,TC与FC之差为胆固醇酯(CE)含量。分别运用RT-PCR和Western blot检测ACAT1 mRNA和蛋白表达。结果:与对照组比较,visfatin干预组细胞浆脂滴明显增多,CE与TC的比值明显增加(〉50%)。visfatin呈浓度和时间依赖性地上调ACAT1 mRNA和蛋白表达(P〈0.05)。结论:ACAT1表达上调是visfatin诱导THP-1源性泡沫细胞形成的机制之一,这可能为visfatin致动脉粥样硬化发病机制的研究提供一个新的理论依据。 展开更多
关键词 内脂素 基辅酶a 胆固醇酰基转移1 泡沫细胞 动脉粥样硬化
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