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人血管能抑素抑制小鼠Lewis肺癌移植瘤生长、转移及血管新生
被引量：
1
1
作者
陆卫忠
肖飞
+4 位作者
黄桂君
李玉英
李瑾
陈维中
钱桂生
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期653-657,共5页
目的:探讨人血管能抑素(canstatin)对小鼠Lewis肺癌移植瘤生长、转移和血管新生的影响。方法:将pCMV-Script/canstatin及空载体pCMV-Script通过电穿孔的方法转染A549细胞,G418筛选获得阳性克隆。RT-PCR检测转染后细胞中canstatin mRNA...
目的:探讨人血管能抑素(canstatin)对小鼠Lewis肺癌移植瘤生长、转移和血管新生的影响。方法:将pCMV-Script/canstatin及空载体pCMV-Script通过电穿孔的方法转染A549细胞,G418筛选获得阳性克隆。RT-PCR检测转染后细胞中canstatin mRNA的表达,Western blotting检测转染后细胞中canstatin蛋白的表达。建立Lewis肺癌小鼠移植瘤模型,观察pCMV-Script/canstatin组A549细胞培养上清对小鼠Lewis肺癌移植瘤的治疗作用,免疫组化检测各治疗组荷瘤小鼠移植瘤的微血管密度。结果:pCMV-Script/canstatin转染A549细胞在G418筛选后成功形成克隆,转染的A549细胞能有效表达can-statin mRNA和蛋白。pCMV-Script/canstatin治疗组小鼠肿瘤体积明显小于pCMV-Script组和NS组[(1.47±0.21)cm^3vs(2.43±0.15)cm^3、(2.53±0.18)cm^3,P<0.01);pCMV-Script/canstatin组、pCMV-Script组和NS组的肺转移结节数分别为(3.00±1.00)、(7.80±1.48)、(7.60±2.41)个,pCMV-Script/canstatin组肿瘤转移受到显著的抑制(P<0.01);pCMV-Script/canstatin组小鼠的肿瘤组织微血管数明显少于pCMV-Script组和NS组[(84.40±8.83)vs(188.68±11.15)、(190.24±12.91)个,P<0.01]。结论:pCMV-Script/canstatin能在A549细胞中表达并分泌至细胞外,canstatin可明显抑制Lewis肺癌移植瘤的生长、转移和血管新生。
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关键词
人血管能抑素
转染
血管
生成
LEWIS肺癌
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职称材料
人血管能抑素免疫兔抗血清制备及其特性测定
2
作者
贺国安
罗进贤
+2 位作者
李瑞芳
张添元
吴群悦
《中山大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第6期134-136,共3页
纯化的人血管能抑素包涵体进行SDS＿PAGE分离,切胶回收目的蛋白,与弗氏不完全佐剂充分乳化后,进行多点皮下注射免疫新西兰白兔,制备兔抗人血管能抑素抗血清,抗血清去除交叉反应抗体后,进行WesternBlotting分析抗血清与人血管能抑素及其...
纯化的人血管能抑素包涵体进行SDS＿PAGE分离,切胶回收目的蛋白,与弗氏不完全佐剂充分乳化后,进行多点皮下注射免疫新西兰白兔,制备兔抗人血管能抑素抗血清,抗血清去除交叉反应抗体后,进行WesternBlotting分析抗血清与人血管能抑素及其N端和C端片段的抗原抗体反应特性。结果表明,经过4次加强免疫后,获得了高效价的兔抗人血管能抑素抗血清。抗血清去除交叉反应抗体后,WesternBlotting分析表明,它能与人血管能抑素发生特异的抗原抗体反应,同时还能与人血管能抑素的N端片段和C端片段发生特异性较弱的抗原抗体反应。证明制备的兔抗人血管能抑素抗血清能应用于人血管能抑素及其N端和C端片段免疫学研究中。
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关键词
人血管能抑素
N端片段
C端片段
抗血清
兔
免疫
特性测定
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职称材料
血管能抑素重组基因表达载体抗肺癌效应研究
被引量：
7
3
作者
李玉英
钱桂生
+4 位作者
黄桂君
余时沧
王兴友
陈维中
李淑平
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
2004年第4期257-262,共6页
目的:通过构建人血管能抑制素(Canstatin)真核表达载体,转染裸鼠肿瘤局部,探索其对肺癌治疗作用。方法: RT-PCR法获取Canstatin cDNA全长,定向克隆法构建Canstatin基因表达载体pCMV-Script-Cans。荧光定量PCR法检测转染 细胞Canstatin m...
目的:通过构建人血管能抑制素(Canstatin)真核表达载体,转染裸鼠肿瘤局部,探索其对肺癌治疗作用。方法: RT-PCR法获取Canstatin cDNA全长,定向克隆法构建Canstatin基因表达载体pCMV-Script-Cans。荧光定量PCR法检测转染 细胞Canstatin mRNA的表达。台盼蓝拒染法、3H-TdR掺入法检测细胞生长增殖,TUNEL法检测细胞凋亡。基因枪转染重组 载体到荷瘤裸鼠肿瘤局部,CD31单克隆抗体微血管记数检测抗血管生成效应。结果:成功构建pCMV-Script-Cans重组载体, 并在转染的细胞株中检测到Canstatin mRNA的表达。人脐静脉内皮HUV-EC-C细胞株pCMV-Script-Cans质粒转染组比空载 体组3H-FdR掺入量明显减低(P<0.01),细胞凋亡率明显增加(P<0.01),重组载体转染肿瘤生长缓慢,微血管数显著低于对 照组(P<0.01)。结论:pCMV-Script-Cans重组载体能在转染的哺乳动物细胞中表达Canstatin,并抑制内皮细胞增殖,而且有 很好的抗肺癌血管生成作用。
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关键词
人血管能抑素
血管
生成
肿瘤治疗
肺癌
荧光定量PCR
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职称材料
题名
人血管能抑素抑制小鼠Lewis肺癌移植瘤生长、转移及血管新生
被引量：
1
1
作者
陆卫忠
肖飞
黄桂君
李玉英
李瑾
陈维中
钱桂生
机构
解放军
第三军医大学新桥医院全军呼吸内科研究所
出处
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011年第6期653-657,共5页
文摘
目的:探讨人血管能抑素(canstatin)对小鼠Lewis肺癌移植瘤生长、转移和血管新生的影响。方法:将pCMV-Script/canstatin及空载体pCMV-Script通过电穿孔的方法转染A549细胞,G418筛选获得阳性克隆。RT-PCR检测转染后细胞中canstatin mRNA的表达,Western blotting检测转染后细胞中canstatin蛋白的表达。建立Lewis肺癌小鼠移植瘤模型,观察pCMV-Script/canstatin组A549细胞培养上清对小鼠Lewis肺癌移植瘤的治疗作用,免疫组化检测各治疗组荷瘤小鼠移植瘤的微血管密度。结果:pCMV-Script/canstatin转染A549细胞在G418筛选后成功形成克隆,转染的A549细胞能有效表达can-statin mRNA和蛋白。pCMV-Script/canstatin治疗组小鼠肿瘤体积明显小于pCMV-Script组和NS组[(1.47±0.21)cm^3vs(2.43±0.15)cm^3、(2.53±0.18)cm^3,P<0.01);pCMV-Script/canstatin组、pCMV-Script组和NS组的肺转移结节数分别为(3.00±1.00)、(7.80±1.48)、(7.60±2.41)个,pCMV-Script/canstatin组肿瘤转移受到显著的抑制(P<0.01);pCMV-Script/canstatin组小鼠的肿瘤组织微血管数明显少于pCMV-Script组和NS组[(84.40±8.83)vs(188.68±11.15)、(190.24±12.91)个,P<0.01]。结论:pCMV-Script/canstatin能在A549细胞中表达并分泌至细胞外,canstatin可明显抑制Lewis肺癌移植瘤的生长、转移和血管新生。
关键词
人血管能抑素
转染
血管
生成
LEWIS肺癌
Keywords
canstatin
transfection angiogenesis
Lewis lung carcinoma
分类号
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
R730.5 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
人血管能抑素免疫兔抗血清制备及其特性测定
2
作者
贺国安
罗进贤
李瑞芳
张添元
吴群悦
机构
中山大学基因工程教育部重点实验室
出处
《中山大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2003年第6期134-136,共3页
基金
广东省自然科学基金资助项目(011207)
文摘
纯化的人血管能抑素包涵体进行SDS＿PAGE分离,切胶回收目的蛋白,与弗氏不完全佐剂充分乳化后,进行多点皮下注射免疫新西兰白兔,制备兔抗人血管能抑素抗血清,抗血清去除交叉反应抗体后,进行WesternBlotting分析抗血清与人血管能抑素及其N端和C端片段的抗原抗体反应特性。结果表明,经过4次加强免疫后,获得了高效价的兔抗人血管能抑素抗血清。抗血清去除交叉反应抗体后,WesternBlotting分析表明,它能与人血管能抑素发生特异的抗原抗体反应,同时还能与人血管能抑素的N端片段和C端片段发生特异性较弱的抗原抗体反应。证明制备的兔抗人血管能抑素抗血清能应用于人血管能抑素及其N端和C端片段免疫学研究中。
关键词
人血管能抑素
N端片段
C端片段
抗血清
兔
免疫
特性测定
Keywords
human canstatin
N-terminal domain
C-terminal domain
antiserum
分类号
R392 [医药卫生—免疫学]
R338 [医药卫生—人体生理学]
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职称材料
题名
血管能抑素重组基因表达载体抗肺癌效应研究
被引量：
7
3
作者
李玉英
钱桂生
黄桂君
余时沧
王兴友
陈维中
李淑平
机构
第三军医大学新桥医院呼吸内科研究所
出处
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
2004年第4期257-262,共6页
文摘
目的:通过构建人血管能抑制素(Canstatin)真核表达载体,转染裸鼠肿瘤局部,探索其对肺癌治疗作用。方法: RT-PCR法获取Canstatin cDNA全长,定向克隆法构建Canstatin基因表达载体pCMV-Script-Cans。荧光定量PCR法检测转染 细胞Canstatin mRNA的表达。台盼蓝拒染法、3H-TdR掺入法检测细胞生长增殖,TUNEL法检测细胞凋亡。基因枪转染重组 载体到荷瘤裸鼠肿瘤局部,CD31单克隆抗体微血管记数检测抗血管生成效应。结果:成功构建pCMV-Script-Cans重组载体, 并在转染的细胞株中检测到Canstatin mRNA的表达。人脐静脉内皮HUV-EC-C细胞株pCMV-Script-Cans质粒转染组比空载 体组3H-FdR掺入量明显减低(P<0.01),细胞凋亡率明显增加(P<0.01),重组载体转染肿瘤生长缓慢,微血管数显著低于对 照组(P<0.01)。结论:pCMV-Script-Cans重组载体能在转染的哺乳动物细胞中表达Canstatin,并抑制内皮细胞增殖,而且有 很好的抗肺癌血管生成作用。
关键词
人血管能抑素
血管
生成
肿瘤治疗
肺癌
荧光定量PCR
Keywords
canstatin
angiogenesis
tumor therapy
lung cancer
real-time PCR
分类号
R979.1 [医药卫生—药品]
R734.2 [医药卫生—肿瘤]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
人血管能抑素抑制小鼠Lewis肺癌移植瘤生长、转移及血管新生
陆卫忠
肖飞
黄桂君
李玉英
李瑾
陈维中
钱桂生
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2011
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
人血管能抑素免疫兔抗血清制备及其特性测定
贺国安
罗进贤
李瑞芳
张添元
吴群悦
《中山大学学报（自然科学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2003
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
血管能抑素重组基因表达载体抗肺癌效应研究
李玉英
钱桂生
黄桂君
余时沧
王兴友
陈维中
李淑平
《中国肿瘤生物治疗杂志》
CAS
CSCD
2004
7
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职称材料
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