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抗人蛋白酶激活受体3单克隆抗体的制备与鉴定
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作者 易婷婷 何韶衡 +3 位作者 陈霖菲 黄阗 付意玲 方泽漫 《郑州大学学报(医学版)》 CAS 北大核心 2007年第6期1082-1085,共4页
目的:制备并鉴定抗人蛋白酶激活受体3(PAR3)单克隆抗体(mAb)。方法:以人PAR3为免疫原免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备抗PAR3 mAb。采用捕获ELISA法鉴定mAb的Ig亚类;通过ELISA、流式细胞分析、激光共聚焦显微镜技术、免疫组织化学染... 目的:制备并鉴定抗人蛋白酶激活受体3(PAR3)单克隆抗体(mAb)。方法:以人PAR3为免疫原免疫BALB/c小鼠,运用杂交瘤技术制备抗PAR3 mAb。采用捕获ELISA法鉴定mAb的Ig亚类;通过ELISA、流式细胞分析、激光共聚焦显微镜技术、免疫组织化学染色法、斑点杂交技术鉴定mAb的特异性。结果:获得2株可稳定分泌抗人PAR3 mAb的杂交瘤细胞,其分泌的mAb均为IgM。斑点杂交技术分析表明,其mAb能与PAR3抗原有效结合。免疫组织化学染色表明,mAb与肺组织中的巨噬细胞、结肠组织中的淋巴细胞及疑似肥大细胞、扁桃体和包皮组织中的淋巴细胞的反应呈阳性。流式细胞仪分析及激光共聚焦显微镜观察显示,2株mAb与人肺腺癌A549细胞胞内及膜上的PAR3均呈阳性反应。结论:成功地制备抗PAR3 mAb,为变态反应性和炎症性疾病的研究提供了有用的试剂。 展开更多
关键词 人蛋白酶激活受体3 单克隆抗体 特性鉴定
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