替莫唑胺对人脑胶质瘤细胞U251增殖、凋亡的影响及其机制探讨 被引量：1

1

作者 张永森 杨利敏 +2 位作者 杨卫泷 吕林亚 王玉峰 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第47期17-19,共3页

目的观察替莫唑胺对人脑胶质瘤细胞U251增殖、凋亡的影响,并探讨其可能机制。方法取对数生长期U251细胞,分别加入0.02、0.06、0.1 g/L替莫唑胺,空白对照组不加替莫唑胺,分别培养24、48、72 h,MTT实验观察细胞增殖情况;取对数生长期U251... 目的观察替莫唑胺对人脑胶质瘤细胞U251增殖、凋亡的影响,并探讨其可能机制。方法取对数生长期U251细胞,分别加入0.02、0.06、0.1 g/L替莫唑胺,空白对照组不加替莫唑胺,分别培养24、48、72 h,MTT实验观察细胞增殖情况;取对数生长期U251细胞,加入0.06 g/L替莫唑胺(0.06 g/L替莫唑胺组),细胞培养48 h后,用流式细胞技术测算细胞凋亡率,RT-PCR法、Western blotting法检测存活素(Survivin)mRNA、蛋白。结果随着替莫唑胺浓度增加及作用时间延长,U251细胞增殖抑制率越高。0.06 g/L替莫唑胺组细胞凋亡率为22.6%±2.3%,对照组为3.3%±1.1%,两组比较,P<0.05;0.06 g/L替莫唑胺组Survivin mRNA相对表达量为0.65±0.11,对照组为0.96±0.15,两组比较,P<0.05;0.06 g/L替莫唑胺组Survivin蛋白相对表达量为0.25±0.03,对照组为0.49±0.04,两组比较,P<0.05。结论替莫唑胺能有效抑制U251细胞增殖,诱导细胞凋亡,其机制可能与抑制Survivin表达有关。 展开更多

关键词 替莫唑胺 人脑胶质瘤细胞u251 细胞增殖 细胞凋亡 存活素

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柯里拉京对人脑胶质瘤细胞U251生物学特性的影响 被引量：2

2

作者 周广洲 陈俊 靳峰 《济宁医学院学报》 2018年第4期246-249,共4页

目的观察柯里拉京(Corilagin)对人脑胶质瘤细胞U251生物学特性的影响。方法体外培养U251细胞,应用200μg/ml的柯里拉京分别干预U251细胞24、48和72h后收集细胞,应用Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒检测药物干预前后细胞凋亡活性变化;... 目的观察柯里拉京(Corilagin)对人脑胶质瘤细胞U251生物学特性的影响。方法体外培养U251细胞,应用200μg/ml的柯里拉京分别干预U251细胞24、48和72h后收集细胞,应用Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒检测药物干预前后细胞凋亡活性变化;细胞划痕实验检测200μg/ml Corilagin对U251细胞迁移能力的影响。结果 Corilagin可促进U251细胞的凋亡,U251细胞凋亡率随着培养液中Corilagin培养时间的延长而增加(P<0.05);Corilagin可抑制U251细胞的迁移,200μg/ml Corilagin的培养液培养24、48和72h后U251细胞迁移度均低于对照组(P<0.05)。结论 Corilagin对U251细胞有显著的体外细胞毒性作用,能有效促进U251细胞的凋亡和减弱U251细胞的迁移,但其具体的作用机制还有待进一步研究。 展开更多

关键词 柯里拉京 u251细胞 胶质瘤 细胞凋亡 迁移

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MGMT反义RNA对人脑胶质瘤细胞系U251/BCNU耐药性逆转的研究 被引量：2

3

作者 金澎 张庆林 +4 位作者 刘福生 陶荣杰 魏林 王成伟 孔建新 《山东医药》 CAS 北大核心 2001年第19期6-8,共3页

为逆转胶质瘤的耐药性 ,模拟临床亚硝基脲类药物的用药程序 ,在体外建立由 MGMT介导的人脑胶质瘤耐药细胞系 U2 5 1/ BCNU,并进行细胞耐药性检测和细胞中 MGMTm RNA表达的分析 ;观察 MGMT反义RNA对 U2 5 1/ BCNU细胞 MGMT表达的调节作... 为逆转胶质瘤的耐药性 ,模拟临床亚硝基脲类药物的用药程序 ,在体外建立由 MGMT介导的人脑胶质瘤耐药细胞系 U2 5 1/ BCNU,并进行细胞耐药性检测和细胞中 MGMTm RNA表达的分析 ;观察 MGMT反义RNA对 U2 5 1/ BCNU细胞 MGMT表达的调节作用及对 U2 5 1/ BCNU细胞 BCNU敏感性的影响。经过 5次用药过程 ,首次在体外成功地建立了对 BCNU具有稳定抗性的 U2 5 1/ BCNU,其对 BCNU的耐受程度约为 U2 5 1的17倍 ;RT- PCR结果显示 ,U 2 5 1/ BCNU细胞有 MGMTm RNA的表达。 MGMT反义 RNA表达载体 p L a MT5 SN和 p L a MTSN能够在一定程度上降低 U2 5 1/ BCNU细胞中 MGMTm RNA的表达水平 ,提高其对 BCNU的敏感性。认为 MGMT反义 RNA能够在一定程度上抑制 MGMT的表达水平 。 展开更多

关键词 MGMT 反义RNA 脑胶质瘤 耐药性 u251/BCNu

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FAM92A1-289对人脑胶质瘤U251细胞增殖、迁移能力的影响及其与Galectin-1的关系

4

作者 吴慕禹 郭兴荣 李东升 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第44期9-13,共5页

目的探讨FAM92A1-289对人脑胶质瘤U251细胞增殖、迁移能力的影响及其与半乳糖凝集素1(Galectin-1)的关系。方法将CMV-SP6-TALEN-GFP-289质粒转染至U251细胞中,通过嘌呤霉素筛选得到稳定过表达FAM92A1-289基因的脑胶质瘤U251/289++细胞... 目的探讨FAM92A1-289对人脑胶质瘤U251细胞增殖、迁移能力的影响及其与半乳糖凝集素1(Galectin-1)的关系。方法将CMV-SP6-TALEN-GFP-289质粒转染至U251细胞中,通过嘌呤霉素筛选得到稳定过表达FAM92A1-289基因的脑胶质瘤U251/289++细胞株。取脑胶质瘤U251/289++细胞作为观察组,未转染质粒的野生型U251细胞作为对照组,采用实时无标记动态细胞分析技术检测两组培养24、48、72、96、120 h的细胞增殖能力(以光密度值表示),采用Transwell小室试验检测两组细胞迁移能力(以穿膜细胞数表示)。构建PCS2-3Flag-Galectin-1质粒,将人脑胶质瘤U251细胞随机分为FAM92A1-289组、Galectin-1组、共转染组及空白对照组,FAM92A1-289组、Galectin-1组均采用Lipofactamine 3000转染法分别转染CMV-SP6-TALEN-GFP-289质粒、PCS2-3Flag-Galectin-1质粒,共转染组同时转染上述两种质粒,空白对照组仅加入Lipofactamine 3000转染试剂。采用免疫共沉淀实验验证FAM92A1-289与Galectin-1是否存在相互作用。结果两组培养24 h光密度值比较差异无统计学意义(P>0.05);观察组培养48、72、96、120 h光密度值均高于对照组(P<0.05或<0.01)。观察组与对照组穿膜细胞数分别为(242.0±11.41)、(65.40±7.92)个,两组比较P<0.01。共转染组抗GFP蛋白相对表达量明显高于FAM92A1-289组、Galectin-1组及空白对照组(P均<0.01)。结论过表达FAM92A1-289可提高人脑胶质瘤U251细胞增殖和迁移能力;FAM92A1-289与Galectin-1之间的相互作用可能为FAM92A1-289调控人脑胶质瘤U251细胞恶性行为的作用机制。 展开更多

关键词 脑胶质瘤 u251细胞 FAM92A1-289 半乳糖凝集素1 细胞增殖 细胞迁移

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塞来昔布对人胶质瘤U251细胞增殖及NF-κB蛋白表达的影响 被引量：4

5

作者 熊一峰 梅金红 +2 位作者 徐林林 王珊珊 涂轶 《山东医药》 CAS 北大核心 2010年第31期26-28,共3页

目的观察塞来昔布对人恶性胶质瘤U251细胞增殖的影响及分子机制。方法将对数生长期人胶质瘤U251细胞随机分为塞来昔布组、TNF-α组,两组均分别加入0、10、25、50、100μmol/L的塞来昔布,其中TNF-α组于1h后加50ng/mlTNF-α。其后采用甲... 目的观察塞来昔布对人恶性胶质瘤U251细胞增殖的影响及分子机制。方法将对数生长期人胶质瘤U251细胞随机分为塞来昔布组、TNF-α组,两组均分别加入0、10、25、50、100μmol/L的塞来昔布,其中TNF-α组于1h后加50ng/mlTNF-α。其后采用甲基噻唑蓝(MTT)法检测两组U251细胞增殖水平及抑制率,采用免疫组化及Western blot检测NF-κB细胞内分布及核内表达情况。结果塞来昔布浓度为10～100μmol/L时两组细胞增殖抑制率均显著高于浓度为0者且呈浓度依赖性,增殖水平则相反,组间比较无显著差异;塞来昔布浓度为50、100μmol/L时NF-κB蛋白在细胞核内的表达显著低于浓度为0者,且呈浓度依赖性。结论塞来昔布可抑制人胶质瘤U251细胞增殖,可能机制为间接抑制NF-κB向核内移位。 展开更多

关键词 胶质瘤 u251细胞 塞来昔布 肿瘤坏死因子-α 核因子-ΚB P65

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沙利度胺增强X射线对胶质瘤U251细胞辐射敏感性机制的研究 被引量：2

6

作者 于静萍 孙美玲 +5 位作者 孙苏平 尹小祥 刘海燕 张昊文 冯爽 刘芬菊 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 2010年第6期368-372,共5页

为探讨沙利度胺增强X射线对胶质瘤U251细胞DNA合成抑制及增强辐射敏感性的作用机制,采用甲基噻唑基四氮唑盐(Methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测沙利度胺对胶质瘤U251细胞存活率的影响;H3-胸腺嘧啶(H3-Thymidine,H3-TdR)掺入法研... 为探讨沙利度胺增强X射线对胶质瘤U251细胞DNA合成抑制及增强辐射敏感性的作用机制,采用甲基噻唑基四氮唑盐(Methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法检测沙利度胺对胶质瘤U251细胞存活率的影响;H3-胸腺嘧啶(H3-Thymidine,H3-TdR)掺入法研究沙利度胺单用及联合X射线对U251细胞DNA合成抑制作用;逆转录聚合酶链反应(Reverse transcriptase PCR,RT-PCR)检测与肿瘤发生密切相关的血管内皮生长因子(Vascular endothelia growth factor,VEGF)mRNA的相对表达水平;Western blot分析VEGF蛋白表达变化。结果表明,沙利度胺对胶质瘤细胞的增殖抑制作用随着浓度的增高和时间的延长而缓慢增加。沙利度胺抑制U251细胞DNA合成,联合X射线照射后,具有协同作用;沙利度胺可以抑制VEGFmRNA的表达,随着沙利度胺浓度的增加,表达量减少,联合X线照射,减少更明显;低剂量辐射在24 h内可以诱导VEGF蛋白的表达,随着时间的延长表达减少。实验证明沙利度胺对脑胶质瘤U251细胞属低细胞毒性药物,能够抑制肿瘤细胞DNA合成。 展开更多

关键词 沙利度胺 胶质瘤u251细胞 DNA合成 血管内皮生长因子

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当归多糖(ASP)对脑神经胶质瘤细胞U251的体外抗增殖及促凋亡作用影响 被引量：1

7

作者 马莉 王园 +2 位作者 薛传梅 高小风 杨波 《沈阳药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期334-339,共6页

目的考察当归多糖(ASP)对脑神经胶质瘤细胞U251的促凋亡作用,并通过MTT法检测细胞增殖抑制率、Transwell实验检测细胞侵袭、流式细胞仪检测细胞凋亡率和Western Blot检测蛋白质表达量变化深入研究其促凋亡作用机制。方法取对数生长期的... 目的考察当归多糖(ASP)对脑神经胶质瘤细胞U251的促凋亡作用,并通过MTT法检测细胞增殖抑制率、Transwell实验检测细胞侵袭、流式细胞仪检测细胞凋亡率和Western Blot检测蛋白质表达量变化深入研究其促凋亡作用机制。方法取对数生长期的细胞,运用MTT法检测不同浓度ASP作用于U251细胞不同时间后,U251细胞的体外增殖率;应用Transwell细胞侵袭实验检测ASP作用于U251细胞后,对U251细胞体外侵袭能力的抑制性;应用流式细胞仪检测不同浓度ASP作用于U251后,U251细胞的凋亡率;应用Western Blot方法检测ASP作用于U251细胞后,U251细胞的PI3K,p-PI3K,AKT和p-AKT蛋白的表达。结果 MTT法检测细胞抑制率结果表明,ASP作用于U251细胞后,与空白对照组相比,200.0 mg·L^(-1)药物组在24 h、48 h、72 h对细胞的抑制率升高(P<0.05);400.0 mg·L^(-1)和800.0 mg·L^(-1)药物组在24 h、48 h、72 h对细胞的抑制率显著升高(P<0.001);Transwell细胞侵袭实验结果表明,与空白对照组相比,400.0 mg·L^(-1)药物组在24 h、48 h、72 h对细胞侵袭的抑制率升高(P<0.05);800.0 mg·L^(-1)药物组在24 h、48 h、72 h对细胞侵袭的抑制率显著升高(P<0.001);流式细胞仪检测结果表明,与空白对照组相比,两个药物组(400.0 mg·L^(-1)和800.0 mg·L^(-1))ASP处理U251后,U251细胞的凋亡率均升高;Western Blot检测结果表明,与空白对照组相比,两个药物组(400.0 mg·L^(-1)和800.0 mg·L^(-1))ASP能下调凋亡相关蛋白PI3K、p-PI3K、AKT和p-AKT蛋白的表达,其中800.0 mg·L^(-1)ASP能显著下调p-AKT蛋白质表达,具有显著性差异(P<0.05)。结论 ASP能够显著抑制U251细胞的体外增殖、侵袭能力,且能够诱导细胞凋亡,可能的机制是通过调节PI3K、p-PI3K、AKT、p-AKT蛋白的表达来实现的。 展开更多

关键词 当归多糖 脑神经胶质瘤细胞u251 体外增殖 侵袭能力 细胞凋亡率 凋亡相关蛋白

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藏红花素诱导人脑胶质瘤细胞U87凋亡的作用机制研究 被引量：1

8

作者 边寰 张磊 +4 位作者 王蓉 校鑫 李娟 王西玲 费舟 《中国医药导报》 CAS 2013年第27期11-13,共3页

目的探讨藏红花素促进人脑胶质瘤细胞U87凋亡的作用及其机制。方法培养U87细胞系,随机分为二甲基亚砜对照组(对照组)和藏红花素治疗组(藏红花素组)。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同剂量藏红花素(低浓度组、中浓度组、高浓度组)对人... 目的探讨藏红花素促进人脑胶质瘤细胞U87凋亡的作用及其机制。方法培养U87细胞系,随机分为二甲基亚砜对照组(对照组)和藏红花素治疗组(藏红花素组)。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测不同剂量藏红花素(低浓度组、中浓度组、高浓度组)对人胶质瘤细胞U87增殖的影响;流式细胞仪观察细胞凋亡情况。Western-blot检测ERK1/2,p-ERK1/2的表达变化。结果与对照组比较,藏红花素组U87细胞的生存率明显降低;随着藏红花素浓度增加,U87细胞的凋亡率显著上升(18.92%→51.68%→70.12%),组间差异有统计学意义(χ2=14.102,P<0.05);Western-blot结果显示,与对照组比较,藏红花素组的p-ERK1/2表达降低,而高浓度藏红花素组p-ERK1/2表达降低最显著,不同组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论藏红花素可能呈剂量依赖性的通过抑制p-ERK1/2促进U87细胞凋亡,发挥重要的抗肿瘤作用。 展开更多

关键词 藏红花素 u87胶质瘤细胞 凋亡 剂量依赖性 p—ERK1 2

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沙培林对U251胶质瘤细胞凋亡及相关基因表达的研究 被引量：1

9

作者 赵长地 倪勇 聂振明 《济宁医学院学报》 2009年第1期17-21,共5页

目的研究沙培林对脑胶质瘤细胞凋亡及相关基因表达的影响。方法20只BALB/C裸小鼠皮下接种U251脑胶质瘤成功后随机分成4组,分别瘤周注射生理盐水0.2ml,沙培林0.2KE、0.4KE、0.8KE,共8次,解瘤实验。用免疫组化法检测Bcl-2、p53(突变型)、... 目的研究沙培林对脑胶质瘤细胞凋亡及相关基因表达的影响。方法20只BALB/C裸小鼠皮下接种U251脑胶质瘤成功后随机分成4组,分别瘤周注射生理盐水0.2ml,沙培林0.2KE、0.4KE、0.8KE,共8次,解瘤实验。用免疫组化法检测Bcl-2、p53(突变型)、Bax、Fas及Bcl-xs基因的表达。结果由对照组至治疗组,且随用药剂量增加,Bcl-2及p53(突变型)表达的阳性率逐渐下降,而Bax、Fas及Bcl-xs表达的阳性率则逐渐增加。结论沙培林局部应用治疗脑胶质瘤,通过对多种基因的调控,促进瘤细胞的凋亡、抑制肿瘤的生长。 展开更多

关键词 沙培林 u251胶质瘤 凋亡 基因表达

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Notch1信号通路在人脑胶质瘤U87细胞增殖、凋亡中的作用及机制探讨

10

作者 刘锋 吕世刚 +3 位作者 祝新根 周椿昊 李建斌 徐文华 《山东医药》 CAS 2012年第2期4-6,共3页

目的观察Notch1信号通路在人脑胶质瘤U87细胞增殖和凋亡中的作用,并探讨其机制。方法将U87细胞随机分为A、B、C组,分别加入Notch信号激活剂rhNF-κB、抑制剂DAPT及PBS共培养48 h。用MTT法检测细胞吸光度值(A值)观察细胞增殖情况,流式细... 目的观察Notch1信号通路在人脑胶质瘤U87细胞增殖和凋亡中的作用,并探讨其机制。方法将U87细胞随机分为A、B、C组,分别加入Notch信号激活剂rhNF-κB、抑制剂DAPT及PBS共培养48 h。用MTT法检测细胞吸光度值(A值)观察细胞增殖情况,流式细胞术检测细胞凋亡率,RT-PCR、Western blot法分别检测U87细胞中的Notch1、Hes1、Bcl-2 mRNA及其蛋白。结果培养24、48、72、96 h,A组细胞A值分别为0.185±0.007、0.398±0.012、0.735±0.015、1.083±0.031,B组分别为0.102±0.003、0.130±0.004、0.161±0.006、0.194±0.003,C组分别为0.167±0.005、0.265±0.008、0.496±0.011、0.737±0.016,A、B组与C组比较,P均<0.05。A、B、C组细胞凋亡率分为0.96%±0.17%、26.51%±3.74%、8.76%±1.40%,A、B组与C组比较,P均<0.05。与C组比较,A组细胞中Notch1、Hes1、Bcl-2 mRNA及其蛋白表达量均显著增加(P均<0.05),B组细胞中Notch1、Hes1、Bcl-2 mRNA及其蛋白表达量均显著降低(P均<0.05)。结论 Notch1信号通路在人脑胶质瘤U87细胞增殖、凋亡中发挥了重要的调控作用,其机制可能与调节靶基因Hes1、抗凋亡蛋白Bcl-2表达有关。 展开更多

关键词 Notch1信号通路 Hes1基因 BCL-2基因 细胞凋亡 细胞增殖 胶质瘤 人脑胶质瘤细胞

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X射线联合沙利度胺对胶质瘤U251细胞的抑制作用

11

作者 孙美玲 于静萍 +2 位作者 刘芬菊 刘海燕 杨辰 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 2009年第6期369-373,共5页

为探讨X射线联合沙利度胺对胶质瘤U251细胞的抑制作用,采用H3-TdR掺入法和细胞克隆形成法检测沙利度胺增强U251细胞的辐射敏感性;细胞划痕实验观察沙利度胺抑制U251细胞的浸润能力。结果表明,沙利度胺能够抑制U251细胞浸润、DNA合成和... 为探讨X射线联合沙利度胺对胶质瘤U251细胞的抑制作用,采用H3-TdR掺入法和细胞克隆形成法检测沙利度胺增强U251细胞的辐射敏感性;细胞划痕实验观察沙利度胺抑制U251细胞的浸润能力。结果表明,沙利度胺能够抑制U251细胞浸润、DNA合成和克隆形成,与X射线联用后抑制作用增强,表现出协同作用。当细胞存活率为50%时,60μg/mL、100μg/mL沙利度胺的辐射增敏系数为1.18和1.51。实验证明X射线联合沙利度胺能显著提高胶质瘤U251细胞的辐射敏感性,对U251细胞具有辐射增敏作用。 展开更多

关键词 沙利度胺 胶质瘤u251细胞 DNA合成 辐射敏感性

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DCX和SPARC基因共表达增强X射线对人脑胶质瘤细胞U-87MG凋亡的影响 被引量：2

12

作者 蒋昕 徐媛媛 +3 位作者 张昊文 俞家华 杨吉成 刘芬菊 《辐射研究与辐射工艺学报》 CAS CSCD 2013年第1期10-15,共6页

用激光共聚焦显微镜观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达、流式细胞仪检测GFP表达比例确定重组腺病毒对U-87MG细胞的最佳感染剂量;RT-PCR和Western blot法检测DCX和SPARC在U-87MG细胞mRNA和蛋白水平的表达;流式细胞仪检测Ad-GFP、Ad-DCX、Ad-SP... 用激光共聚焦显微镜观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达、流式细胞仪检测GFP表达比例确定重组腺病毒对U-87MG细胞的最佳感染剂量;RT-PCR和Western blot法检测DCX和SPARC在U-87MG细胞mRNA和蛋白水平的表达;流式细胞仪检测Ad-GFP、Ad-DCX、Ad-SPARC和Ad-DCX-SPARC对X射线诱导U-87MG细胞凋亡的影响。实验结果表明:重组腺病毒对U-87MG细胞的最佳感染剂量为50 MOI;目的基因DCX和SPARC可在mRNA和蛋白水平成功表达;Ad-GFP、Ad-DCX、Ad-SPARC和Ad-DCX-SPARC单纯基因组的凋亡率分别为(1.05±0.42)%、(1.11±0.29)%、(1.18±0.37)%和(1.12±0.40)%;8 Gy剂量辐照后,凋亡率分别为(7.54±0.47)%、(23.23±2.72)%、(16.43±1.13)%和(33.01±2.67)%。提示Ad-DCX-SPARC可以增强X射线诱导的U-87MG细胞的凋亡,从而增强放射敏感性。 展开更多

关键词 DCX SPARC X射线 人脑胶质瘤细胞 凋亡

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上调细胞周期相关蛋白-1的表达对脑胶质瘤U251细胞的增殖和迁移能力的影响 被引量：9

13

作者 严立冬 桂卉 +5 位作者 杨卓顺 邹丹丹 王珏 张力 黄宽明 罗杰 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2018年第1期13-18,共6页

目的细胞周期相关蛋白-1(Caprin-1)与肿瘤的发展进程及药物耐受密切相关。文中旨在探讨Caprin-1在脑胶质瘤临床标本中的表达情况及其对脑胶质瘤细胞系生物学特性的影响。方法选取湖北医药学院附属十堰市太和医院神经外科2015年12月至201... 目的细胞周期相关蛋白-1(Caprin-1)与肿瘤的发展进程及药物耐受密切相关。文中旨在探讨Caprin-1在脑胶质瘤临床标本中的表达情况及其对脑胶质瘤细胞系生物学特性的影响。方法选取湖北医药学院附属十堰市太和医院神经外科2015年12月至2017年4月手术切除的29份脑胶质瘤肿瘤组织和2份因外伤死亡尸检的正常脑组织标本。以U251细胞作为实验对象,构建Caprin-1高表达的U251细胞稳转株。实验分为3组:空白对照组(无转染的野生型U251细胞)、阴性对照组(转染p EGFP-C1质粒的U251细胞)、实验组(转染p EGFP-C1-Caprin-1质粒的U251细胞)。RT-PCR和Western blot分别检测3组细胞Caprin-1 mRNA和蛋白的表达水平,检测其增殖能力变化及划痕实验和Transwell小室迁移实验检测其迁移能力的变化。结果正常脑组织Caprin-1表达量(65.04±1.07)低于WHOⅡ、WHOⅢ、WHOⅣ胶质瘤的表达量(145.9±22.0、444.4±110.0、1661.0±54.5),WHOⅡ、WHOⅢ、WHOⅣCaprin-1表达量依次升高,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组Caprin-1 mRNA、Caprin-1蛋白表达[(1.70±0.19)、(1.07±0.09)]明显高于空白对照组[(0.89±0.10)、(0.52±0.04)]、阴性对照组[(0.98±0.08)、(0.58±0.03)],差异有统计学意义(P<0.05)。实验组A值(2.55±0.14)明显高于空白对照组(1.40±0.06)和阴性对照组(1.35±0.04),差异有统计学意义(P<0.001)。实验组在每个视野下迁移的细胞数[(526.00±42.19)个]明显多于空白对照组和阴性对照组[(289.00±29.24)、(279.00±32.48)个],差异有统计学意义(P<0.001)。实验组中Cyclin D1和AKT磷酸化水平表达量明显高于空白对照组和阴性对照组(P<0.000)。结论 Caprin-1在胶质瘤标本中的表达量随肿瘤组织的恶性程度增加而增高,且上调U251细胞Caprin-1的表达则其增殖和迁移能力提高,为胶质瘤的基因靶向治疗及评估胶质瘤的预后提供理论依据。 展开更多

关键词 脑胶质瘤 u251细胞 Caprin-1 增殖 迁移

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阿维菌素对胶质母细胞瘤U251细胞增殖、凋亡的影响及其机制探讨 被引量：1

14

作者 罗丹 罗亮 +2 位作者 杨志军 黄佛宝 王燕燕 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第27期31-33,共3页

目的观察阿维菌素(AVMs)对胶质母细胞瘤U251细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其相关机制。方法传代培养U251细胞,将细胞分为药物实验组和阴性对照组,药物实验组给予不同浓度的AVMs处理,阴性对照组不加AVMs。取药物实验组细胞,分别给予2、4、... 目的观察阿维菌素(AVMs)对胶质母细胞瘤U251细胞增殖、凋亡的影响,并探讨其相关机制。方法传代培养U251细胞,将细胞分为药物实验组和阴性对照组,药物实验组给予不同浓度的AVMs处理,阴性对照组不加AVMs。取药物实验组细胞,分别给予2、4、6、8、10、12μmol/L的AVMs,采用MTT法测算给药24、48、72 h后U251细胞的增殖抑制率。取药物实验组细胞,分别给予4、8μmol/L的AVMs培养72 h后,测算各组细胞凋亡率,检测各组细胞线粒体膜电位及细胞中的Caspase-3、Bcl-2、Bax蛋白。结果 2、4、6、8、10、12μmol/L的AVMs作用于U251细胞后,细胞增殖抑制率逐渐升高,AVMs作用24、48、72 h后U251细胞增殖抑制率也逐渐升高;AVMs对U251细胞的增殖抑制作用呈时间、剂量依赖性(P均<0.01)。AVMs作用72 h时对U251细胞增殖的IC_(50)为5.220μmol/L。阴性对照组与药物实验组4、8μmol/L亚组的细胞凋亡率分别为5.2%±0.16%、31.5%±0.43%、52.4%±0.72%,细胞线粒体膜电位分别为92.4±2.52、85.2±1.32、45.3±0.75,三组细胞凋亡率和线粒体膜电位相比,P均<0.01。阴性对照组和药物实验组4μmol/L亚组、8μmol/L亚组细胞中Caspase-3、Bax蛋白相对表达量依次升高,Bcl-2蛋白相对表达量依次降低(P均<0.01)。结论 AVMs可抑制U251细胞增殖并促进其凋亡,作用机制可能与降低细胞线粒体膜电位、调节凋亡相关蛋白表达有关。 展开更多

关键词 阿维菌素 胶质瘤 脑胶质母细胞瘤 u251细胞 细胞增殖 细胞凋亡 线粒体膜电位

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胶质瘤细胞系U251中Nanog基因的研究 被引量：1

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作者 刘伟贤 衣服新 《中国医学工程》 2011年第2期3-5,共3页

目的 Nanog作为全能性或多能性干细胞标志物,在胶质瘤细胞系中的研究甚少。本研究通过免疫组织化学来探讨Nanog基因在U251胶质瘤细胞系中的表达情况,以及全反式维甲酸(ATRA)对胶质瘤细胞系U251的诱导分化情况。方法采用免疫组织化学染... 目的 Nanog作为全能性或多能性干细胞标志物,在胶质瘤细胞系中的研究甚少。本研究通过免疫组织化学来探讨Nanog基因在U251胶质瘤细胞系中的表达情况,以及全反式维甲酸(ATRA)对胶质瘤细胞系U251的诱导分化情况。方法采用免疫组织化学染色法从蛋白质水平检测U251胶质瘤细胞系Nanog的表达情况,以及应用化疗药物全反式维甲酸(ATRA)作用前以及作用后1、2、3d Nanog蛋白的表达情况。结果 ATRA作用前免疫组化结果显示大量细胞表达Nanog蛋白,主要位于胞浆内,胞核内有少量表达,少数细胞完全不表达;ATRA作用1、2、3d后的的细胞爬片结果显示有些许细胞变圆,少量的细胞漂浮于培养基内,Nanog蛋白的表达情况同ATRA作用前相比有了减少,并且随着作用时间的延长表达愈来越少。结论 Nanog基因在胶质瘤细胞系U251中表达,诱导分化剂ATRA能够降低Nanog的表达,并且随着作用时间的延长表达越来越少。 展开更多

关键词 u251 胶质瘤 NANOG 肿瘤干细胞

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表皮生长因子受体沉默联合尼美舒利对胶质瘤细胞U251作用及机制

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作者 戴国栋 游兴松 袁玉林 《解剖学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第4期794-799,共6页

目的：研究尼美舒利（NIM）与表皮生长因子（EGF）受体沉默联合应用对胶质瘤U251细胞作用及机制.方法：不同浓度的尼美舒利（0、25、50、100、200、400μmol/L）与靶向EGF受体的小分子RNA（siRNA-EGFR）联合应用培养U251胶质瘤细胞,ELIS... 目的：研究尼美舒利（NIM）与表皮生长因子（EGF）受体沉默联合应用对胶质瘤U251细胞作用及机制.方法：不同浓度的尼美舒利（0、25、50、100、200、400μmol/L）与靶向EGF受体的小分子RNA（siRNA-EGFR）联合应用培养U251胶质瘤细胞,ELISA试剂盒检测培养上清中血管内皮生长因子（VEGF）水平,MTT法检测细胞的增殖并计算抑制率,免疫印迹检测细胞增殖、凋亡和血管形成调控相关蛋白,流式细胞仪测定细胞周期和凋亡.结果：siRNA-EGFR浓度小于2μg/ml联合NIM（25～400 μmol/L）处理U251细胞,其生长抑制率与NIM的浓度依赖性增高,流式检测阻滞U251细胞于G2/M期及诱导细胞凋亡,蛋白分析表明,当沉默U251细胞EGF受体时,Bax蛋白表达随尼美舒利浓度增加表达上调,而bcl-2、细胞增殖核抗原（PCNA）和促血管生成素-2（ANG-2）蛋白表达明显下调,促血管生成素-1（ANG1）表达变化不明显；siRNA-EGFR与25 μumol/L的尼美舒利处理U251胶质瘤细胞12 h后,流式细胞仪检测出现典型的凋亡亚二倍体峰,并且随尼美舒利处理时间的延长,凋亡峰增加,随处理尼美舒利剂量的增加而呈现增加趋势,各组间差异具有统计学意义.结论：当siRNA-EGFR浓度为2μg/ml以下和作用时间在48 h之前,EGF受体沉默联合尼美舒利能发挥协同作用,其机制可能与Bax蛋白表达上调和bcl-2、PCNA、VEGF、ANG-2蛋白表达明显下调有关. 展开更多

关键词 尼美舒利 胶质瘤 u251细胞 细胞凋亡 表皮生长因子受体沉默

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银杏提取物(GBE)对人胶质瘤U251细胞增殖凋亡的影响

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作者 李国臣 惠青山 《中国医学工程》 2013年第5期26-26,28,共2页

目的观察利用银杏提取物对人脑胶质瘤U251细胞增殖与凋亡的影响。方法将传代的U251细胞随机分为四组,A组加培养液,B、C、D组分别加浓度为50mg/ml、100mg/ml、200mg/ml的银杏叶提取物;观察倒置显微镜下TrypanBlue染色后各组U251脑胶质瘤... 目的观察利用银杏提取物对人脑胶质瘤U251细胞增殖与凋亡的影响。方法将传代的U251细胞随机分为四组,A组加培养液,B、C、D组分别加浓度为50mg/ml、100mg/ml、200mg/ml的银杏叶提取物;观察倒置显微镜下TrypanBlue染色后各组U251脑胶质瘤细胞形态,用MTT法测算U251细胞增殖率,用流式细胞仪检测U251细胞凋亡率。结果 B、C、D组细胞增殖指数逐渐下降,与A组比较,P均<0.05;A、B、C、D组细胞凋亡率分别为0.3%±0.3%、10.6%±1.7%、21.9%±4.3%、33.5%±2.1%。B、C、D组与A组比较,P均<0.05。结论银杏叶(GBE)可抑制人脑胶质瘤U251细胞增殖,并诱导其凋亡。 展开更多

关键词 银杏提取物(GBE) u251胶质瘤细胞 凋亡

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大蒜素对脑胶质瘤细胞U87细胞侵袭能力的影响及其机制 被引量：12

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作者 蔡青 秦怀洲 陈昆仑 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第2期271-274,284,共5页

目的检测大蒜素对脑胶质瘤细胞U87侵袭能力的影响及其可能机制。方法利用MTT法检测大蒜素对U87细胞增殖能力的抑制作用。利用Transwell小室检测大蒜素对U87细胞侵袭能力的抑制作用。采用Real-time PCR和Western blotting方法检测大蒜素... 目的检测大蒜素对脑胶质瘤细胞U87侵袭能力的影响及其可能机制。方法利用MTT法检测大蒜素对U87细胞增殖能力的抑制作用。利用Transwell小室检测大蒜素对U87细胞侵袭能力的抑制作用。采用Real-time PCR和Western blotting方法检测大蒜素对U87细胞中MMP-2和MMP-9表达水平的影响。采用Western blotting的方法检测大蒜素对p38磷酸化水平的影响。结果大蒜素能够明显抑制U87细胞的增殖(浓度>8μg/mL,P<0.05)。且大蒜素(浓度<8μg/mL)能够明显抑制U87细胞的侵袭能力(P<0.05)。在大蒜素作用24h后,U87细胞中MMP-2和MMP-9的表达水平明显降低(P<0.05)。p38的磷酸化水平在大蒜素作用后明显降低(P<0.05)。结论大蒜素能够抑制脑胶质瘤细胞U87的侵袭能力,其机制可能是通过对p38信号的通路活性的调节进而降低MMP-2和MMP-9的表达来实现的,提示大蒜素在脑胶质瘤的治疗中具有潜在的应用价值。 展开更多

关键词 脑胶质瘤 大蒜素 侵袭 MMPS P38 u87细胞

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人脑胶质母细胞瘤细胞系U87的单克隆细胞构建及异质性研究

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作者 蒋迎娣 殷莹 +7 位作者 浦浙宁 张博 龚玲丽 胡亚玲 纪丽 汪京京 张真豪 邹健 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2019年第11期1150-1157,共8页

目的人胶质母细胞瘤细胞细胞系U87被作为胶质母细胞瘤(GBM)异质性研究的模型,但从基因水平探讨其异质性来源的研究较少。文章旨在构建人胶质母细胞瘤细胞系U87单克隆细胞株,检测不同单克隆细胞株的表型和遗传背景差异,并探讨产生表型差... 目的人胶质母细胞瘤细胞细胞系U87被作为胶质母细胞瘤(GBM)异质性研究的模型,但从基因水平探讨其异质性来源的研究较少。文章旨在构建人胶质母细胞瘤细胞系U87单克隆细胞株,检测不同单克隆细胞株的表型和遗传背景差异,并探讨产生表型差异的分子机制。方法利用小分子荧光染料羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)作为筛选标记,有限稀释法构建U87单克隆细胞株,并挑选具有典型形态特征的2株单克隆化细胞,经短串联重复序列(STR)鉴定后进行后续研究。采用CCK-8、EdU掺入法增殖实验和和平板克隆形成实验检测细胞增殖能力;肿瘤干细胞成球实验检测细胞成球能力;免疫荧光和CCK-8法黏附实验检测细胞黏附能力;3D侵袭实验检测细胞侵袭能力;Annexin V/PI双染流式细胞术检测细胞对化疗药物的敏感性;转录组测序(RNA-seq)对细胞进行测序及生物信息学分析;qRT-PCR验证富集通路中代表性差异基因mRNA表达量。结果构建了形态较为均一U87单克隆细胞株CF5和G11。其中CF5小而短粗,G11大而细长。CCK-8增殖实验结果显示,CF5细胞增殖能力较U87、G11明显增强,U87较G11明显增强(P<0.001)。EdU掺入法增殖实验结果显示,CF5 EdU阳性细胞比例(0.54±0.05)较G11细胞(0.35±0.03)、U87(0.44±0.03)明显增加,U87较G11明显增强(P<0.01)。肿瘤干细胞成球实验显示,CF5干细胞成球能力较U87、G11明显增强,U87较G11明显增强(P<0.01)。免疫荧光法黏附实验显示,黏附1 h后G11黏附面积较U87、CF5明显增强,U87较CF5明显增强(P<0.001)。3D培养侵袭实验结果显示,G11细胞侵袭能力较U87、CF5明显增强,U87较CF5明显增强(P<0.05)。交互分析发现CF5相对G11和U87均下调的基因159个,均上调的基因303个;G11相对CF5和U87均下调的基因有281个,上调的基因则有116个;通路富集分析显示CF5和G11在细胞外基质相关的通路有最高的富集度,细胞外基质相关通路与肿瘤侵袭、耐药等功能表型密切相关。结论成功构建从形态、功能表型到基因背景具有显著差异的U87单克隆细胞株CF5、G11,为研究GBM异质性和基因功能奠定了基础。 展开更多

关键词 胶质母细胞瘤 人脑胶质母细胞瘤细胞系u87 单克隆细胞株 肿瘤异质性 表型 转录组测序

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恶性脑胶质瘤U87细胞系肿瘤干细胞放疗敏感性的体外实验研究 被引量：2

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作者 赵红宇 徐东 +4 位作者 李帅 王倩 刘海君 金辉 刘云会 《山东医药》 CAS 北大核心 2011年第25期12-14,共3页

目的探讨脑胶质瘤细胞系U87细胞及其肿瘤干细胞(CSCs)对体外放疗的敏感性。方法应用神经干细胞(NSCs)培养基分离培养形成细胞球克隆,检测细胞球细胞的NSCs特性。采用不同剂量放射线照射U87细胞及其CSCs,应用集落形成实验和生存曲线检测... 目的探讨脑胶质瘤细胞系U87细胞及其肿瘤干细胞(CSCs)对体外放疗的敏感性。方法应用神经干细胞(NSCs)培养基分离培养形成细胞球克隆,检测细胞球细胞的NSCs特性。采用不同剂量放射线照射U87细胞及其CSCs,应用集落形成实验和生存曲线检测其生存情况。结果 U87细胞在NSCs培养基中形成悬浮的细胞球克隆,具有自我更新和多向分化能力,表达CD133、Nestin;两种细胞的存活率均随照射剂量增加而下降,且CSCs的存活率明显高于U87细胞(P<0.01)。结论在体外条件下,CSCs的放射敏感性明显低于U87细胞,其可能是恶性脑胶质瘤放疗抵抗的主要原因。 展开更多

关键词 脑胶质瘤 恶性 u87细胞系 肿瘤干细胞 放疗敏感性

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