川芎嗪对人脐静脉内皮细胞株(Eahy926)氯化钴诱导缺氧后纤溶功能的影响 被引量：3

1

作者 吴昊 孙昊 +6 位作者 王军 黄培培 程洁 陈旭峰 陈彦 肖杭 张劲松 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期641-645,共5页

目的:建立人脐静脉内皮细胞株(Eahy926)缺氧细胞模型,探讨川芎嗪在缺氧条件下对血管内皮细胞纤溶功能的影响。方法:细胞分为对照组、缺氧组和川芎嗪(TMP)干预组,利用氯化钴(1.6mmol/L)模拟Eahy926细胞缺氧环境,建立缺氧模型,TMP干预组... 目的:建立人脐静脉内皮细胞株(Eahy926)缺氧细胞模型,探讨川芎嗪在缺氧条件下对血管内皮细胞纤溶功能的影响。方法:细胞分为对照组、缺氧组和川芎嗪(TMP)干预组,利用氯化钴(1.6mmol/L)模拟Eahy926细胞缺氧环境,建立缺氧模型,TMP干预组分别用0.08和0.16g/L的TMP干预。Hoechst法、CCK-8法检测各组细胞活力,RT-PCR观察各组细胞组织型纤溶酶原激活物(tissue-type plasminogen activator,t-PA)、尿激酶型纤溶酶原激活物(urokinase-type plasminogen activator,u-PA)、纤溶酶原激活物抑制物-1(plasminogen activator inhibit ortype-1,PAI-1)mRNA表达,双抗体夹心ELISA法检测各组细胞培养上清液中t-PA、u-PA、PAI-1含量。结果:与对照组相比,缺氧组及TMP干预组均出现细胞活力下降(P<0.01),但与缺氧组相比,TMP干预组细胞活力上升(P<0.01),且高浓度组较低浓度组上升明显(P<0.01);RT-PCR和ELISA结果显示:与对照组相比,缺氧组t-PAmRNA表达量降低(P<0.01),细胞培养上清液t-PA含量减少(P<0.01);与缺氧组比,高低浓度TMP处理组t-PAmRNA表达量及细胞培养上清液t-PA含量均增高,具有统计学差异(P<0.01);而高浓度较低浓度TMP干预组t-PAmRNA表达量升高(P<0.05),细胞培养上清液t-PA含量增加(P<0.01)。结论:川芎嗪能够浓度依赖性减轻Eahy926细胞的缺氧损伤,并通过调节其t-PAmRNA表达及上清液t-PA的分泌,影响内皮细胞的纤溶功能。 展开更多

关键词 川芎嗪 人脐静脉内皮细胞株(eahy926) 氯化钴 缺氧 纤溶

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前列腺素E_2对大鼠巨噬细胞株NR8383合成血管内皮生长因子促进人脐静脉血管内皮细胞成管、迁移的影响 被引量：10

2

作者 刘勉 龚艺 +4 位作者 韦锦燕 谢多 王京 余艳红 全松 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2016年第7期936-940,共5页

目的探究前列腺素E_2(PGE_2)对大鼠巨噬细胞株NR8383细胞合成血管内皮生长因子(VEGF)的调控作用以及对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)趋化成管的影响。方法分别采用0.1 nmol/L PGE_2、1 nmol/L PGE_2、1 nmol/L PGE_2+10 nmol/L EP2受体抑制剂... 目的探究前列腺素E_2(PGE_2)对大鼠巨噬细胞株NR8383细胞合成血管内皮生长因子(VEGF)的调控作用以及对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)趋化成管的影响。方法分别采用0.1 nmol/L PGE_2、1 nmol/L PGE_2、1 nmol/L PGE_2+10 nmol/L EP2受体抑制剂AH6809+10 nmol/L EP4受体抑制剂AH23848处理的NR8383细胞作为各实验组,选择未经PGE2以及其特异性受体抑制剂处理的NR8383细胞作为对照组,采用Western blot和qPCR方法检测各组NR8383细胞内VEGF蛋白以及m RNA的表达水平;收集以上各处理组的细胞培养上清液分别刺激HUVECs,运用TRANSWELL小室、Matrigel胶细胞成管实验等实验方法,观察PGE_2调控巨噬细胞对HUVEC迁移效应和成管能力的影响。结果随着NR8383细胞培养液中加入PGE_2浓度增高,其VEGF蛋白表达和VEGF mRNA的表达水平显著升高(P<0.05);0.1 nmol/L、1 nmol/L PGE_2处理过的NR8383细胞培养上清液可以显著增加HUVEC细胞形成的小管面积,形成小管面积随着PGE_2处理浓度的增加而增加(P<0.05);HUVECs的迁移运动也随着PGE_2处理浓度的升高不同程度的增强,HUVECs趋化的数量显著升高(P<0.05);研究发现PGE_2特异性的EP2/EP4受体拮抗剂AH6809/AH23848,可以显著抑制PGE_2增强NR8383细胞内VEGF mRNAs表达的作用并且也显著抑制PGE2增强NR8383细胞促进HUVECs成管和趋化能力的效应(P<0.05)。结论 PGE2可以通过作用NR8383细胞表面对应的EP2/EP4受体调控VEGF的合成,促进HUVEC趋化和成管效应。 展开更多

关键词 前列腺素E2 大鼠肺泡巨噬细胞株NR8383 人脐静脉血管内皮细胞 血管内皮生长因子

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小檗碱对人肺癌细胞株与人脐静脉内皮细胞粘附的影响 被引量：3

3

作者 蒋艳 王毅 +3 位作者 郝钰 汪雪峰 邱全瑛 马辉 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第11期1577-1577,共1页

关键词 小檗碱 肺癌 细胞株 人脐静脉内皮细胞 细胞粘附

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乳腺癌细胞exosomes对人脐静脉内皮作用的实验研究 被引量：1

4

作者 谢莹珊 沈宜 +3 位作者 隆霜 孙迪 姜蓉 陈黎 《激光杂志》 CSCD 北大核心 2011年第2期71-73,共3页

目的:观察人乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞源exosomes对人脐静脉内皮细胞株(HUVECs)增殖、迁移能力及血管样结构形成的影响。方法:超速离心及密度梯度离心法提取exosomes;MTT法检测MDA-MB-231细胞源exosomes对HUVECs增殖的影响;Transwell... 目的:观察人乳腺癌细胞株MDA-MB-231细胞源exosomes对人脐静脉内皮细胞株(HUVECs)增殖、迁移能力及血管样结构形成的影响。方法:超速离心及密度梯度离心法提取exosomes;MTT法检测MDA-MB-231细胞源exosomes对HUVECs增殖的影响;Transwell小室法检测HUVECs与exosomes混合培养24h后迁移能力的影响;观察HUVECs与exosomes混合培养24h后管腔样结构形成变化。结果:各浓度exosomes均具有促进HUVECs细胞增殖作用,且以时间剂量依赖性促进HUVEC细胞增殖(P<0.01);200μg/ml exosomes处理HUVECs细胞24小时,HUVEC细胞的迁移能力提高,差异具有显著性(P<0.01),且能显著提高HUVECs体外管腔形成能力,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:MDA-MB-231细胞源exosomes以时间剂量依赖的方式促进HUVECs增殖,且可显著增强HUVECs的迁移能力及其体外管腔形成能力。 展开更多

关键词 乳腺癌细胞株 EXOSOMES 脐静脉内皮细胞株 增殖 迁移 管腔形成

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重组质粒pRNAT-U6.1/CFB siRNA的构建、鉴定及其对人脐静脉内皮细胞增生的影响

5

作者 仝欢 尚庆丽 +2 位作者 马景学 高建 王鑫 《中华实验眼科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第8期686-690,共5页

背景 脉络膜新生血管（CNV）是多种眼部疾病致盲的原因之一,研究发现补体系统在CNV的发病机制中起重要作用.目的 构建针对补体因子B（CFB）的小干扰RNA（siRNA）重组质粒,体外观察其对人脐静脉内皮细胞ECV-304增生的影响.方法 根据人CF... 背景 脉络膜新生血管（CNV）是多种眼部疾病致盲的原因之一,研究发现补体系统在CNV的发病机制中起重要作用.目的 构建针对补体因子B（CFB）的小干扰RNA（siRNA）重组质粒,体外观察其对人脐静脉内皮细胞ECV-304增生的影响.方法 根据人CFB的基因序列设计引物,经PCR扩增后与质粒pRNAT-U6.1连接,得到重组质粒pRNAT-U6.1/CFB siRNA,并进行测序鉴定和PCR鉴定.ECV-304细胞株进行常规培养,用电转染技术将重组质粒或空质粒分别转染人ECV-304细胞株,分为CFB-siRNA转染组和空质粒转染组,未转染的细胞为空白对照组.细胞转染后继续培养48 h,于倒置荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白（GFP）的表达并计算转染效率;采用半定量逆转录PCR（RT-PCR）法测定各组细胞中CFB mRNA的相对表达量;用MTT法检测各组细胞转染24、48和72 h时细胞的增生值（A）并计算生长抑制率;利用流式细胞技术检测各组细胞的生长周期变化.结果 PCR扩增的目的片段序列与CFB基因序列完全相符,ECV-304细胞转染后,倒置荧光显微镜下可见CFB-siRNA转染组和空质粒转染组的细胞中GFP呈绿色荧光.半定量RT-PCR结果显示,CFB-siRNA转染组、空质粒转染组和空白对照组的CFB mRNA相对表达量分别为0.07±0.04、0.14±0.02和0.14 ±0.03,总体比较差异有统计学意义（F=233.05,P=0.00）;其中CFB-siRNA转染组CFB mRNA相对表达量明显低于空质粒转染组和空白对照组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）.MTT法检测结果显示,各组不同时间细胞增生抑制率总体比较差异有统计学意义（F分组=212.99,P=0.00）;CFB-siRNA转染组细胞转染24、48、72 h后细胞增生的抑制率分别为（23.45±0.01）％、（33.48±0.02）％和（45.49±0.01）％,明显高于同时间点空质粒转染组和空白对照组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）.流式细胞仪检测结果显示,CFB-siRNA转染组、空质粒转染组和空白对照组G1期的细胞数占总细胞数的（44.4±0.5）％、（25.8±0.4）％和（27.9±0.6）％,总体比较差异有统计学意义（F=58.98,P=0.00）;CFB-siRNA转染组G1期和G2期细胞所占百分比显著高于空白对照组和空质粒转染组,差异均有统计学意义（均P＜0.05）.结论 重组质粒pRNAT-U6.1/CFB siRNA可通过将细胞阻滞在G1期而有效抑制人脐静脉内皮细胞的增生. 展开更多

关键词 脉络膜新生血管 小干扰RNA 补体因子B 脐静脉内皮细胞 人 ECV-30细胞株

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升麻鳖甲汤加减方对人急性髓系白血病细胞诱导脐静脉内皮细胞迁移、趋化、管腔形成的影响 被引量：5

6

作者 王静宇 马邦云 +2 位作者 王梦亚 代兴斌 孙雪梅 《辽宁中医杂志》 CAS 2020年第4期143-148,I0001,共7页

目的研究升麻鳖甲汤加减方在体外对人急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞株HL-60以及人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)增殖的影响;随后以人急性髓系白血病细胞HL-60的培养上清对人脐静脉... 目的研究升麻鳖甲汤加减方在体外对人急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)细胞株HL-60以及人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVEC)增殖的影响;随后以人急性髓系白血病细胞HL-60的培养上清对人脐静脉内皮细胞HUVEC进行诱导培养,并加入不同浓度的升麻鳖甲汤加减方进行干预,检测人脐静脉内皮细胞HUVEC迁移、趋化、管腔形成能力的变化,从而揭示升麻鳖甲汤加减方对人急性髓系白血病细胞诱导的脐静脉内皮细胞迁移、趋化、管腔形成的影响。方法体外培养HL-60以及HUVEC细胞,待细胞进入对数生长期后进行相应实验;首先将不同浓度升麻鳖甲汤加减方在体外分别用于干预人急性髓系白血病细胞HL-60和人脐静脉内皮细胞HUVEC,在干预时间达48 h后,采用MTT法分别检测不同浓度升麻鳖甲汤加减方对HL-60以及HUVEC细胞增殖能力的影响;根据MTT实验的数据提示,选择适宜终浓度的升麻鳖甲汤加减方与HL-60细胞培养上清进行混合制备含药条件培养基用于干预HUVEC细胞,并分别运用划痕迁移、Transwell小室趋化以及Matrigel胶小管形成等实验方法观察HUVEC细胞经干预后的迁移、趋化效应以及成管能力的变化。结果不同浓度的升麻鳖甲汤加减方干预48 h后能够分别显著抑制HL-60以及HUVEC细胞的增殖(P<0.01),并且这种增殖抑制效应呈现出明显的时间-浓度依赖性,并且在HL-60和HUVEC两种细胞之间存在差异性细胞毒作用,即对HUVEC细胞的增殖抑制显著高于HL-60细胞(P<0.01);不同终浓度的升麻鳖甲汤加减方对由HL-60细胞上清诱导培养的HUVEC细胞的迁移运动能力均有不同程度的抑制作用(P<0.05),并且细胞迁移率随着药物浓度的增加而下降;细胞Transwell小室趋化实验结果显示,不同终浓度的升麻鳖甲汤加减方可显著降低HL-60细胞上清诱导培养的HUVEC细胞的趋化性(P<0.05);HUVEC细胞小管形成连接点、分支数量等均明显低于阳性对照组(P<0.01),小管形成抑制率随着药物浓度的增加而上升,且HUVEC细胞生成小管的连接点及分支数量与药物浓度呈负相关(P<0.01)。结论升麻鳖甲汤加减方可抑制HL-60及HUVEC细胞的增殖,并存在差异细胞毒作用,提示该复方可能具有抑制急性髓系白血病肿瘤血管形成的效应,而这种效应的产生可能与其抑制肿瘤血管内皮细胞的迁移、趋化及成管能力等相关。 展开更多

关键词 升麻鳖甲汤加减方 人急性髓系白血病细胞株 人脐静脉内皮细胞 抗肿瘤血管生成

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黑果枸杞花色苷纳米颗粒的制备及其对氧化低密度脂蛋白诱导的人脐静脉融合细胞氧化损伤的保护作用 被引量：7

7

作者 冉林武 米佳 +6 位作者 禄璐 陈菲 罗青 李晓莺 闫亚美 曹有龙 黄庆荣 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2019年第17期162-168,共7页

为了提高黑果枸杞花色苷的稳定性和活性,利用壳聚糖(chitosan,CS)与酪蛋白磷酸肽(caseinphosphopeptide,CPP)复合凝胶体系制备CS-CPP黑果枸杞花色苷纳米颗粒。所得最佳制备条件为:pH 4、室温条件下搅拌,2 mg/mL黑果枸杞花色苷溶液等体... 为了提高黑果枸杞花色苷的稳定性和活性,利用壳聚糖(chitosan,CS)与酪蛋白磷酸肽(caseinphosphopeptide,CPP)复合凝胶体系制备CS-CPP黑果枸杞花色苷纳米颗粒。所得最佳制备条件为:pH 4、室温条件下搅拌,2 mg/mL黑果枸杞花色苷溶液等体积添加到质量分数0.5%CPP溶液中,然后添加等体积0.20~0.30 mg/mL CS溶液至上述花色苷-CPP溶液中,由离子凝胶机制自发形成CS-CPP黑果枸杞花色苷纳米颗粒。所得CS-CPP黑果枸杞花色苷纳米颗粒粒径为215.3 nm,表面电势为36 mV,包封率为65.0%~72.2%;体外释放实验结果表明,在pH 7.0时该CS-CPP黑果枸杞花色苷纳米颗粒的释放率为24.3%~64.2%。体外细胞实验结果表明,黑果枸杞花色苷质量浓度为100~200μg/L的CS-CPP黑果枸杞花色苷纳米颗粒能够显著提高氧化低密度脂蛋白诱导的氧化损伤人脐静脉融合EAhy926细胞的存活率(P<0.05)。因此,CS-CPP复合凝胶体系能够包封黑果枸杞花色苷,其制备的CS-CPP黑果枸杞花色苷纳米颗粒具有较好的体外抗氧化能力。 展开更多

关键词 黑果枸杞 花色苷 纳米颗粒 氧化损伤 人脐静脉融合eahy926细胞

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六君子汤对食管癌细胞株EC9706致血管生成的影响 被引量：9

8

作者 周凌 尹素改 +2 位作者 吴耀松 王慧慧 陈玉龙 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2015年第6期1165-1169,共5页

目的研究六君子汤对食管癌血管生成的影响。方法 MTT法检测六君子汤醇提物对食管癌细胞株EC9706生长抑制作用,收集其500μg/m L质量浓度的EC9706细胞条件培养基用于鸡胚绒毛尿囊膜的血管生成、人脐静脉内皮细胞增殖、迁移和小管形成的... 目的研究六君子汤对食管癌血管生成的影响。方法 MTT法检测六君子汤醇提物对食管癌细胞株EC9706生长抑制作用,收集其500μg/m L质量浓度的EC9706细胞条件培养基用于鸡胚绒毛尿囊膜的血管生成、人脐静脉内皮细胞增殖、迁移和小管形成的观察。ELISA法检测EC9706细胞和人脐静脉内皮细胞培养基上清中VEGF和IL-6含有量。结果六君子汤醇提物可明显抑制EC9706细胞增殖,具一定剂量依赖性,其IC50值为505.28μg/m L。六君子汤醇提物可减少EC9706细胞条件培养基所致鸡胚绒毛尿囊膜血管生成、人脐静脉内皮细胞增殖、迁移和小管形成。六君子汤醇提物可减少EC9706细胞和内皮细胞IL-6及内皮细胞VEGF分泌。结论六君子汤醇提物可能通过干预EC9706细胞信号通路从而抑制血管生成的效应。 展开更多

关键词 六君子汤 食管癌细胞株EC9706 人脐静脉内皮细胞 鸡胚绒毛尿囊膜 血管生成 VEGF IL-6

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人参皂甙对肺癌细胞和血管内皮细胞增生、凋亡及其周期的影响 被引量：20

9

作者 陈明伟 马爱群 +3 位作者 倪磊 黄晨 张殿增 牛小英 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第2期149-152,共4页

目的:探讨中药20(R) 人参皂甙Rg3(Rg3)对肺癌细胞和血管内皮细胞增生、凋亡以及细胞周期的影响。方法:进行人肺腺癌细胞株A549、人脐静脉血管内皮HUVEC304细胞培养,不同浓度Rg3干预,采用MTT法、流式细胞术、透射电镜等技术,了解不同浓度... 目的:探讨中药20(R) 人参皂甙Rg3(Rg3)对肺癌细胞和血管内皮细胞增生、凋亡以及细胞周期的影响。方法:进行人肺腺癌细胞株A549、人脐静脉血管内皮HUVEC304细胞培养,不同浓度Rg3干预,采用MTT法、流式细胞术、透射电镜等技术,了解不同浓度Rg3对上述细胞增生、凋亡以及细胞周期的影响。结果: 3×10 6mol/L的Rg3可导致A549细胞明显凋亡,凋亡率为29. 8%,与对照组( 15. 0% )相比差异有统计学意义(P<0. 05)。Rg3对A549细胞周期的影响无显著差异。1×10 4 mol/L的Rg3对内皮细胞的生长抑制率为12. 53%,显著高于其它组(P<0. 05),不同浓度Rg3对条件培养液(CM)诱导的血管内皮细胞的增生均有明显的抑制作用(P<0. 05),电镜下可见10 6 mol/L浓度的Rg3可使CM诱导的内皮细胞出现凋亡小体。结论:适当浓度的Rg3有抗肿瘤作用和抑制肿瘤新生血管生成的作用。 展开更多

关键词 血管内皮细胞增生 肺癌细胞 人参皂甙 肿瘤新生血管生成 细胞株A549 mol/L 细胞周期 不同浓度 A549细胞 流式细胞术 生长抑制率 条件培养液 moL/L 抗肿瘤作用 Rg3 人肺腺癌 细胞培养 人脐静脉 MTT法 透射电镜 抑制作用

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人真核表达质粒载体pcDNA3/HA-moesin的构建及其在内皮细胞中的表达 被引量：1

10

作者 刘红霞 罗卓章 +2 位作者 杜静 郭晓华 黄巧冰 《海南医学院学报》 CAS 2014年第1期1-4,7,共5页

目的:构建人膜突蛋白(moesin)的真核表达质粒pcDNA3/HA-moesin,并检测其在内皮细胞中的表达。方法:采用RT-PCR法从人脐静脉内皮细胞株(HUVECs)中克隆得到moesin cDNA全长序列,经双酶切后连接到真核表达载体pcDNA/HA中,挑选出的阳性克隆... 目的:构建人膜突蛋白(moesin)的真核表达质粒pcDNA3/HA-moesin,并检测其在内皮细胞中的表达。方法:采用RT-PCR法从人脐静脉内皮细胞株(HUVECs)中克隆得到moesin cDNA全长序列,经双酶切后连接到真核表达载体pcDNA/HA中,挑选出的阳性克隆经双酶切和测序鉴定后,经脂质体转染法转入HUVECs中,采用Realtime PCR及Western blot等方法检测目的基因mRNA及蛋白的表达。结果:pcDNA3/HA-moesin质粒经双酶切鉴定和DNA测序证实,目的基因moesin的序列完全正确,真核表达质粒构建成功。Realtime PCR检测显示,转染pcDNA3/HA-moesin组的moesin mRNA表达水平明显高于未转染组和转染pcDNA3/HA空载体组,后2组间无明显差异。Western blot结果显示转染pcDNA3/HA-moesin组有HA-moesin蛋白表达,而未转染组和转染pcDNA3/HA空载体组未检测到HA-moesin表达。结论:成功构建pcDNA3/HA-moesin真核表达载体,在体外转染HUVECs后可使moesin mRNA表达增加,并成功表达HA-moesin,为进一步鉴定内皮细胞中晚期糖基化终产物(AGEs)引起的moesin的磷酸化位点奠定了实验基础。 展开更多

关键词 人膜突蛋白 真核表达质粒 人脐静脉内皮细胞株

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双黄连注射液对血管内皮细胞NF-κB信号通道靶分子活性抑制作用的研究 被引量：1

11

作者 李绚 阎蓉华 +3 位作者 罗照田 吴琦 贺荣华 王伯瑶 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第8期1652-1653,共2页

目的:探讨中药复方双黄连注射液对血管内皮细胞作用. 方法:用双黄连注射液与人脐静脉血管内皮细胞株(ECV-304)共同培养后,采用MTT法及形态学法观察双黄连注射液对人脐静脉血管内皮细胞的作用及细胞脱氧酶的活性,用Sandwich ELISA法定量... 目的:探讨中药复方双黄连注射液对血管内皮细胞作用. 方法:用双黄连注射液与人脐静脉血管内皮细胞株(ECV-304)共同培养后,采用MTT法及形态学法观察双黄连注射液对人脐静脉血管内皮细胞的作用及细胞脱氧酶的活性,用Sandwich ELISA法定量分析法和定量免疫细胞技术,检测NF-κB活性及胞浆内IκB含量. 展开更多

关键词 人脐静脉血管内皮细胞 双黄连注射液 NF-ΚB活性 活性抑制作用 信号通道 靶分子 定量分析法 ELISA法 内皮细胞株

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三七总皂苷对缺氧再给氧血管内皮细胞钙离子浓度及肌浆网Ca^(2+)-ATP酶活性的影响 被引量：8

12

作者 江小萍 李海全 +4 位作者 潘少霞 方永奇 刘桂娥 欧阳永红 沈祖泓 《中华中医药学刊》 CAS 2011年第4期758-760,共3页

目的:探讨人脐静脉内皮细胞株(ECV304)缺氧再给氧(H/R)损伤的发生机制及三七总皂苷(tPNS)对该病理生理过程的影响。方法:将体外培养的ECV304分为七组,正常组;模型组;tPNS高、中、低浓度组;维拉帕米组;吡咯烷二硫氨基甲酸酯(PDTC)组,对... 目的:探讨人脐静脉内皮细胞株(ECV304)缺氧再给氧(H/R)损伤的发生机制及三七总皂苷(tPNS)对该病理生理过程的影响。方法:将体外培养的ECV304分为七组,正常组;模型组;tPNS高、中、低浓度组;维拉帕米组;吡咯烷二硫氨基甲酸酯(PDTC)组,对各组进行相应处理后,分别检测各组细胞内钙离子浓度[Ca2+]i、肌浆网Ca2+-ATP酶活性、一氧化氮(NO)及前列环素(PGI2)含量、细胞活力的变化。结果:模型组、tPNS高、中、低浓度组、维拉帕米组及PDTC组肌浆网Ca2+-ATP酶活性、一氧化氮(NO)及前列环素(PGI2)含量、细胞活力明显低于正常组,[Ca2+]i明显高于正常组,其中tPNS高、中、低浓度组、维拉帕米组及PDTC组肌浆网Ca2+-ATP酶活性、一氧化氮(NO)及前列环素(PGI2)含量、细胞活力明显高于H/R组,[Ca2+]i明显低于H/R组,且呈浓度依赖性改变,tPNS高浓度组肌浆网Ca2+-ATP酶活性、一氧化氮(NO)及前列环素(PGI2)含量、细胞活力明显高于维拉帕米组及PDTC组,[Ca2+]i明显低于维拉帕米组及PDTC组。结论:H/R可激活ECV304,使细胞肌浆网Ca2+-ATP酶活性、一氧化氮(NO)及前列环素(PGI2)含量、细胞活力明显降低,[Ca2+]i明显升高;tPNS能有效改善肌浆网Ca2+-ATP酶活性,减轻细胞内钙超载,减轻H/R损伤,且高浓度tPNS效果优于维拉帕米、PDTC。 展开更多

关键词 人脐静脉内皮细胞株ECV304 缺氧再给氧损伤 钙离子 CA2+-ATP酶 三七总皂苷

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油菜蜂花粉总黄酮对体外TBHP诱导细胞氧化损伤的保护作用 被引量：5

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作者 杨悦 刘鸣畅 +3 位作者 王凯 吴黎明 杨艳歌 吴亚君 《沈阳农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2018年第1期108-113,共6页

为研究油菜蜂花粉总黄酮(rape bee pollen flavonoids,RBPF)抗心血管疾病的作用机制,以RBPF为研究对象,利用人工建立的血管内皮细胞氧化损伤模型,对RBPF的抗氧化活性进行初步研究,在体外水平探索RBPF对血管内皮细胞氧化损伤的保护作用... 为研究油菜蜂花粉总黄酮(rape bee pollen flavonoids,RBPF)抗心血管疾病的作用机制,以RBPF为研究对象,利用人工建立的血管内皮细胞氧化损伤模型,对RBPF的抗氧化活性进行初步研究,在体外水平探索RBPF对血管内皮细胞氧化损伤的保护作用。采用超声醇提及大孔树脂纯化的方法提取富集RBPF,同时采用过氧化氢叔丁醇(tert-Butyl hydroperoxide,TBHP)诱导细胞氧化损伤,建立人脐静脉内皮融合细胞系EA.hy926的氧化损伤模型,并利用此模型研究RBPF在细胞水平的抗氧化作用,以公认抗氧化性质良好的黄酮类化合物槲皮素作为阳性对照,CCK8法检测细胞活力。首先,用梯度稀释的RBPF及槲皮素作用于正常培养细胞,分析其细胞毒性,确定毒性阈值;然后,在毒性阈值范围内设置梯度浓度的槲皮素溶液作用于细胞损伤模型,确定槲皮素最佳抗氧化浓度剂量,并以此剂量组作为阳性对照组,与毒性阈值范围内梯度浓度的RBPF同时作用于细胞损伤模型,研究RBPF对血管内皮细胞氧化损伤的保护情况。结果表明:其一,体外血管内皮细胞EA.hy926氧化损伤模型的最佳建模条件确定为500μmol·L^(-1)TBHP作用3h;其二,细胞毒性试验结果表明,对于血管内皮细胞EA.hy926,RBPF的毒性阈值为24mg·L^(-1),阳性对照品槲皮素的毒性阈值为50mg·L^(-1);其三,CCK8法测定RBPF对细胞氧化损伤模型的保护作用,结果显示在6~18mg·L^(-1)剂量范围内,RBPF预处理对EA.hy926细胞氧化损伤模型具有明显的保护作用(p≤0.05),其抗氧化作用在低浓度(≤10mg·L^(-1))范围内呈上升趋势,在高浓度(≥14mg·L^(-1))范围内呈下降趋势,在10,12,14mg·L^(-1)3个剂量组其抗氧化性优于槲皮素(25mg·L^(-1)),RBPF浓度为10mg·L^(-1)时效果最佳。综上所述得出结论,对于血管内皮细胞氧化损伤模型,RBPF表现出了极好的体外抗氧化效果,可作为优质的预防心血管疾病的天然产物资源进行深入开发利用。 展开更多

关键词 油菜蜂花粉总黄酮 TBHP 人脐静脉内皮融合细胞EA.hy926 抗氧化

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淫羊藿苷在体内外对血管生成的抑制作用 被引量：6

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作者 叶玉荷 胡芳华 +3 位作者 邹佳萍 湛亚 王淑琪 刘姬艳 《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第3期264-268,共5页

目的观察淫羊藿苷(ICA)对血管生成的影响。方法采用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)实验检测ICA对CAM血管生成的影响,MTT法检测ICA对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)生长的影响,流式细胞术分析ICA对HUVEC周期的影响,聚碳酸酯膜小室趋化运动模型检测ICA对HU... 目的观察淫羊藿苷(ICA)对血管生成的影响。方法采用鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)实验检测ICA对CAM血管生成的影响,MTT法检测ICA对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)生长的影响,流式细胞术分析ICA对HUVEC周期的影响,聚碳酸酯膜小室趋化运动模型检测ICA对HUVEC细胞运动能力的影响。结果 ICA能明显抑制CAM血管生成;抑制HUVEC生长,其抑制效果与剂量和作用时间相关;ICA作用下HUVEC细胞可出现周期阻滞,180μg/ml ICA处理HUVEC 6 h对细胞迁移抑制率为78.0%。结论 ICA能抑制血管生成,但其体内抑血管生成作用还有待于进一步证实。 展开更多

关键词 淫羊藿苷 人脐静脉内皮细胞株 鸡胚绒毛尿囊膜 抗血管生成

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