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胶原酶脐带灌注消化法在人脐带静脉内皮细胞的原代分离培养中的作用
被引量：
1
1
作者
谢明斌
刘梅林
《山东医药》
CAS
北大核心
2009年第51期10-12,共3页
目的探讨人脐带静脉内皮细胞原代分离培养方法,为血管内皮功能及其相关疾病的研究奠定基础。方法采用0.1%Ⅰ型胶原酶脐带静脉灌注消化法,分离得到血管内皮细胞后,加入M199混合培养液,置于37℃、5%CO2培养箱中培养,以0.25%胰蛋白酶进行...
目的探讨人脐带静脉内皮细胞原代分离培养方法,为血管内皮功能及其相关疾病的研究奠定基础。方法采用0.1%Ⅰ型胶原酶脐带静脉灌注消化法,分离得到血管内皮细胞后,加入M199混合培养液,置于37℃、5%CO2培养箱中培养,以0.25%胰蛋白酶进行消化传代培养。细胞鉴定采用形态学方法、透射电镜法以及细胞Ⅷ因子免疫化学法。结果原代人脐静脉内皮细胞约24h后完全贴壁,第3～4天融合成单层,呈铺路石状镶嵌排列;细胞透射电镜观察可见特征性Weibel-Palade小体以及细胞表面大量微绒毛;细胞Ⅷ因子抗原免疫组化以及荧光显示均呈阳性反应,证实所分离培养细胞为人脐带静脉内皮细胞。结论采用胶原酶脐带静脉灌注消化法可分离得到较为纯化的内皮细胞,并可在体外连续大量增殖传代,5代内的细胞均可用于研究。
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关键词
人脐带静脉内皮细胞
原代培养
Weibel-Palade小体
Ⅷ因子抗原
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职称材料
肺炎衣原体的培养及对人脐带静脉内皮细胞的感染
2
作者
章黎苹
黄元伟
朱建华
《科技通报》
北大核心
2002年第2期89-92,共4页
目的 研究肺炎衣原体的培养及其对人脐带静脉内皮细胞的感染 .方法 以人喉表皮癌(HEP- 2 )细胞培养肺炎衣原体并感染人脐带静脉内皮细胞 ,光镜及电镜下观察感染情况并计包涵体数 .结果 肺炎衣原体能在 HEP- 2细胞内培养并能感染人脐...
目的 研究肺炎衣原体的培养及其对人脐带静脉内皮细胞的感染 .方法 以人喉表皮癌(HEP- 2 )细胞培养肺炎衣原体并感染人脐带静脉内皮细胞 ,光镜及电镜下观察感染情况并计包涵体数 .结果 肺炎衣原体能在 HEP- 2细胞内培养并能感染人脐带静脉内皮细胞 ,感染后 72 h,包涵体数最多 ,96 h后仍可见肺炎衣原体在人脐带静脉内皮细胞内存活 .结论 肺炎衣原体能感染并存活于人脐带静脉内皮细胞 ,能导致动脉内膜感染 .
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关键词
肺炎衣原体
HEP-2
细胞
人脐带静脉内皮细胞
感染
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职称材料
纳米羟基磷灰石人工心脏机械瓣膜对细胞毒性评价
3
作者
程光存
严中亚
+3 位作者
沙自明
罗乐
方晓东
陶汝华
《中国心血管病研究》
CAS
2009年第6期447-449,共3页
目的用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测羟基磷灰石（HA）对人脐带内皮细胞可能存在的细胞毒性。方法用MTT比色方法评价材料的细胞毒性。设常温漫提液组和高温浸提液组。两组均设置各自对应的阳性和阴性对照组。将加入浸提液和材料并培养72...
目的用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测羟基磷灰石（HA）对人脐带内皮细胞可能存在的细胞毒性。方法用MTT比色方法评价材料的细胞毒性。设常温漫提液组和高温浸提液组。两组均设置各自对应的阳性和阴性对照组。将加入浸提液和材料并培养72h后的各组样品分别在倒置相差显微镜下观察细胞在浸提液中及在材料边缘的形态变化及生长状况，以细胞毒性实验来评价生物材料生物相容性。参照国际标准化组织（ISO）制定的细胞毒性实验的标准，即ISO10993—5：1992（医疗器械生物学评价细胞毒性实验体外法》之评价标准和要求。结果材料浸提液与细胞共培养组24h时观察常温浸提液、高温浸提液及阴性对照组的HUVEC细胞形态、数量，各实验组与阴性对照组差异无统计学意义。结论HA材料对人脐带内皮细胞生长抑制反应级别为1级或0级，无明显毒性作用，有良好的细胞相容性。
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关键词
羟基磷灰石
人脐带静脉内皮细胞
四甲基偶氮唑蓝
细胞
毒性
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职称材料
题名
胶原酶脐带灌注消化法在人脐带静脉内皮细胞的原代分离培养中的作用
被引量：
1
1
作者
谢明斌
刘梅林
机构
北京大学第一医院
出处
《山东医药》
CAS
北大核心
2009年第51期10-12,共3页
基金
人事部留学回国人员科技活动择优资助项目(200133)
文摘
目的探讨人脐带静脉内皮细胞原代分离培养方法,为血管内皮功能及其相关疾病的研究奠定基础。方法采用0.1%Ⅰ型胶原酶脐带静脉灌注消化法,分离得到血管内皮细胞后,加入M199混合培养液,置于37℃、5%CO2培养箱中培养,以0.25%胰蛋白酶进行消化传代培养。细胞鉴定采用形态学方法、透射电镜法以及细胞Ⅷ因子免疫化学法。结果原代人脐静脉内皮细胞约24h后完全贴壁,第3～4天融合成单层,呈铺路石状镶嵌排列;细胞透射电镜观察可见特征性Weibel-Palade小体以及细胞表面大量微绒毛;细胞Ⅷ因子抗原免疫组化以及荧光显示均呈阳性反应,证实所分离培养细胞为人脐带静脉内皮细胞。结论采用胶原酶脐带静脉灌注消化法可分离得到较为纯化的内皮细胞,并可在体外连续大量增殖传代,5代内的细胞均可用于研究。
关键词
人脐带静脉内皮细胞
原代培养
Weibel-Palade小体
Ⅷ因子抗原
Keywords
human umbilical vein endothelial cells
primary culture
identification
Weibel-Palade body
Ⅷ factor antigen
分类号
R329 [医药卫生—人体解剖和组织胚胎学]
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职称材料
题名
肺炎衣原体的培养及对人脐带静脉内皮细胞的感染
2
作者
章黎苹
黄元伟
朱建华
机构
浙江大学医学院附属第一医院心内科
出处
《科技通报》
北大核心
2002年第2期89-92,共4页
基金
浙江省自然科学基金资助项目 (397479)
文摘
目的 研究肺炎衣原体的培养及其对人脐带静脉内皮细胞的感染 .方法 以人喉表皮癌(HEP- 2 )细胞培养肺炎衣原体并感染人脐带静脉内皮细胞 ,光镜及电镜下观察感染情况并计包涵体数 .结果 肺炎衣原体能在 HEP- 2细胞内培养并能感染人脐带静脉内皮细胞 ,感染后 72 h,包涵体数最多 ,96 h后仍可见肺炎衣原体在人脐带静脉内皮细胞内存活 .结论 肺炎衣原体能感染并存活于人脐带静脉内皮细胞 ,能导致动脉内膜感染 .
关键词
肺炎衣原体
HEP-2
细胞
人脐带静脉内皮细胞
感染
Keywords
Chlamydia pneumoniae
HEP-2 cell
human umbilical vein endothelial cell
atherogenesis
分类号
R543.6 [医药卫生—心血管疾病]
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职称材料
题名
纳米羟基磷灰石人工心脏机械瓣膜对细胞毒性评价
3
作者
程光存
严中亚
沙自明
罗乐
方晓东
陶汝华
机构
安徽医科大学附属省立医院胸心外科
巢湖市人民医院胸心外科
合肥工业大学理学院
中国科学院安徽光学精密机械研究所
出处
《中国心血管病研究》
CAS
2009年第6期447-449,共3页
基金
安徽省人才培养及科研带头人专项基金（2005）58号
文摘
目的用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法检测羟基磷灰石（HA）对人脐带内皮细胞可能存在的细胞毒性。方法用MTT比色方法评价材料的细胞毒性。设常温漫提液组和高温浸提液组。两组均设置各自对应的阳性和阴性对照组。将加入浸提液和材料并培养72h后的各组样品分别在倒置相差显微镜下观察细胞在浸提液中及在材料边缘的形态变化及生长状况，以细胞毒性实验来评价生物材料生物相容性。参照国际标准化组织（ISO）制定的细胞毒性实验的标准，即ISO10993—5：1992（医疗器械生物学评价细胞毒性实验体外法》之评价标准和要求。结果材料浸提液与细胞共培养组24h时观察常温浸提液、高温浸提液及阴性对照组的HUVEC细胞形态、数量，各实验组与阴性对照组差异无统计学意义。结论HA材料对人脐带内皮细胞生长抑制反应级别为1级或0级，无明显毒性作用，有良好的细胞相容性。
关键词
羟基磷灰石
人脐带静脉内皮细胞
四甲基偶氮唑蓝
细胞
毒性
Keywords
Hydroxyapatite
Human HUVEC
Methyl thiazolyl tetrazolium
Cytotoxieity
分类号
R318.2 [医药卫生—生物医学工程]
R654.2 [医药卫生—外科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
胶原酶脐带灌注消化法在人脐带静脉内皮细胞的原代分离培养中的作用
谢明斌
刘梅林
《山东医药》
CAS
北大核心
2009
1
在线阅读
下载PDF
职称材料
2
肺炎衣原体的培养及对人脐带静脉内皮细胞的感染
章黎苹
黄元伟
朱建华
《科技通报》
北大核心
2002
0
在线阅读
下载PDF
职称材料
3
纳米羟基磷灰石人工心脏机械瓣膜对细胞毒性评价
程光存
严中亚
沙自明
罗乐
方晓东
陶汝华
《中国心血管病研究》
CAS
2009
0
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职称材料
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