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人脐动脉内皮细胞-平滑肌细胞共培养模型的建立及鉴定 被引量:7
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作者 陈威中 吴满平 《复旦学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第6期768-775,共8页
目的建立人脐动脉内皮细胞-平滑肌细胞共培养模型,以体外模拟人动脉壁,为动脉粥样硬化及炎症等疾病的发病机制和治疗研究打下基础。方法采用胶原酶灌注消化法从人脐动脉中原代培养获得人脐动脉内皮细胞(human umbilical artery endothel... 目的建立人脐动脉内皮细胞-平滑肌细胞共培养模型,以体外模拟人动脉壁,为动脉粥样硬化及炎症等疾病的发病机制和治疗研究打下基础。方法采用胶原酶灌注消化法从人脐动脉中原代培养获得人脐动脉内皮细胞(human umbilical artery endothelial cell,HUAEC),采用组织块贴块法从人脐动脉中原代培养获得人脐动脉平滑肌细胞(human umbilical artery smooth muscle cell,HUASMC)。用含有抗坏血酸(≥50μg/mL)的培养基孵育平滑肌细胞,使之合成并分泌胶原蛋白,形成内皮细胞的生长基质;然后将内皮细胞以饱和密度接种到平滑肌细胞上,使内皮细胞和平滑肌细胞直接接触并整合形成内皮细胞-平滑肌细胞共培养(EC-SMC co-culture)模型。分别用免疫荧光染色和Dil-Ac-LDL吞噬实验对共培养模型进行形态学和功能学的鉴定。结果形态学鉴定结果显示,两种细胞已成功整合,模拟出体内动脉壁的形态。Dil-Ac-LDL吞噬实验的结果显示共培养模型的内皮细胞中有荧光信号,并且共培养模型中内皮细胞Dil-Ac-LDL的内吞量显著高于单纯内皮细胞(EC monoculture or ECmonolayer),证明共培养模型中内皮细胞与平滑肌细胞已建立联系。结论本实验成功建立人脐动脉内皮细胞-平滑肌细胞共培养模型,可在体外更好地模拟人动脉壁形态和基本功能。 展开更多
关键词 人脐动脉内皮细胞 人脐动脉平滑肌细胞 动脉内皮细胞-平滑肌细胞共培养模型 免疫荧光染色 Dil-Ac-LDL吞噬
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天然和加工产生的两种反油酸对人脐动脉内皮细胞损伤的比较研究
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作者 饶欢 徐婷婷 +2 位作者 邓泽元 范亚苇 李静 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第5期88-93,共6页
为了探讨天然反式脂肪酸11t18∶1和工业反式脂肪酸9t18∶1对人脐动脉内皮细胞损伤及脂肪酸组成的影响。本研究在内皮细胞中加入不同浓度的11t18∶1和9t18∶1,观察其对细胞存活率、细胞凋亡的变化;通过气相色谱测定细胞的脂肪酸组成变化... 为了探讨天然反式脂肪酸11t18∶1和工业反式脂肪酸9t18∶1对人脐动脉内皮细胞损伤及脂肪酸组成的影响。本研究在内皮细胞中加入不同浓度的11t18∶1和9t18∶1,观察其对细胞存活率、细胞凋亡的变化;通过气相色谱测定细胞的脂肪酸组成变化,探讨两种反式脂肪酸对细胞损伤作用的异同。结果显示11t18∶1和9t18∶1均降低细胞活性、增加细胞凋亡率,且存在剂量反应关系。浓度为400μmol/L的11t18∶1和9t18∶1处理细胞后,平均存活率分别下降了9%和11%,平均早期凋亡率为64%和70%。两种反式脂肪酸均可降低细胞内单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸的含量,总反式脂肪酸含量明显增加且和浓度呈正相关。在细胞内有少量11t18∶1可以转化为9c11t-CLA,可能与11t18∶1对细胞损伤稍弱有关。高浓度(200~400μmol/L)的11t18∶1与9t18∶1对内皮细胞均有损伤作用,9t18∶1损伤程度较高,但差异不明显。 展开更多
关键词 人脐动脉内皮细胞 损伤 脂肪酸组成
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