【目的】探讨咪喹莫特类似物R848对胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)介导Naive T细胞分化的影响。【方法】从健康志愿者外周血中提取单个核细胞(PBMC),免疫磁珠分选出CD14+PBMC,随后用不同因素诱导分化为成熟树突状细胞(DC);另用免疫磁珠...【目的】探讨咪喹莫特类似物R848对胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)介导Naive T细胞分化的影响。【方法】从健康志愿者外周血中提取单个核细胞(PBMC),免疫磁珠分选出CD14+PBMC,随后用不同因素诱导分化为成熟树突状细胞(DC);另用免疫磁珠阴性分选出Na觙ve T细胞后,将其与诱导分化后的DC共培养,并分组:A组为Naive T+PBS/DC;B组为Naive T+TSLP/DC;C组为Naive T+(TSLP+R848)/DC;D组为Na觙veT+(TSLP+anti-OX40L)/DC。ELISA检测上清液细胞因子IFN-γ、IL-4和IL-13水平,荧光定量RT-PCR测定转录因子GATA-3及T-bet m RNA的表达。【结果】(1)TSLP诱导后DC表达OX40L增加,而R848可抑制OX40L表达(P<0.05)。(2)B、C、D三组T细胞表达细胞因子IL-4和IL-13水平均高于A组;B组IL-4和IL-13均较C组和D组高,而D组高于C组(均P<0.05);C组表达IFN-γ水平明显高于其余三组(均P<0.05);A、B、D三组之间IFN-γ无明显差异(P>0.05)。(3)C组和D组GATA-3 m RNA水平均低于B组,但高于空白对照A组,其中D组GATA-3 m RNA水平高于C组;C组表达T-bet m RNA水平高于其余三组(均P<0.05);A、B、D三组之间T-bet水平无明显差异(P>0.05)。【结论】TSLP通过上调人DC表达OX40L,在转录因子水平介导Na觙ve T细胞向Th2细胞分化;这种TSLP介导的Th2细胞优势反应可被R848所抑制。展开更多
目的:了解胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)在1-氯-2,4-二硝基苯(DNCB)致敏诱导皮炎小鼠中的表达,并评价TSLP在小鼠皮炎免疫反应中的作用。方法:将20只11周龄SPF级BALB/c小鼠随机分为2组(每组10只):致敏组先后接受含1.0%和0.1%DNCB的橄榄...目的:了解胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)在1-氯-2,4-二硝基苯(DNCB)致敏诱导皮炎小鼠中的表达,并评价TSLP在小鼠皮炎免疫反应中的作用。方法:将20只11周龄SPF级BALB/c小鼠随机分为2组(每组10只):致敏组先后接受含1.0%和0.1%DNCB的橄榄油丙酮(4∶1)溶液反复刺激背部皮肤,对照组接受基质溶液(橄榄油∶丙酮=4∶1)涂抹背部皮肤。实验期间观察小鼠皮炎症状,监测小鼠挠痒次数和皮炎症状评分,观察皮肤组织病理改变。21 d后检测2组血浆总Ig E水平;利用实时荧光定量聚合酶链式反应(q PCR)法检测皮肤、肝脏、脾脏和肾脏组织中TSLP m RNA水平,采用western-blot法分析TSLP蛋白表达情况。结果:2组小鼠的抓挠次数和皮炎症状评分分别在致敏第8天和第6天后出现差异(P<0.05);致敏组小鼠血浆总Ig E水平[(132.61±14.89)μg/L]较对照组[(109.13±2.51)μg/L]显著升高(t=4.92,P<0.05)。与对照组(1)相比,致敏组皮肤(1.83)、脾脏(1.06)和肾脏(1.10)组织中TSLP m RNA相对表达量均升高,而肝脏(0.90)组织TSLP m RNA相对表达量降低,但组间比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。Western-blot结果示TSLP蛋白在上述组织中的表达均无差异。结论:TSLP在DNCB致敏诱导皮炎小鼠的皮肤、肝脏、脾脏和肾脏组织中表达均无明显差异,其在小鼠皮炎免疫反应中的作用仍需进一步的研究。展开更多
文摘【目的】探讨咪喹莫特类似物R848对胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)介导Naive T细胞分化的影响。【方法】从健康志愿者外周血中提取单个核细胞(PBMC),免疫磁珠分选出CD14+PBMC,随后用不同因素诱导分化为成熟树突状细胞(DC);另用免疫磁珠阴性分选出Na觙ve T细胞后,将其与诱导分化后的DC共培养,并分组:A组为Naive T+PBS/DC;B组为Naive T+TSLP/DC;C组为Naive T+(TSLP+R848)/DC;D组为Na觙veT+(TSLP+anti-OX40L)/DC。ELISA检测上清液细胞因子IFN-γ、IL-4和IL-13水平,荧光定量RT-PCR测定转录因子GATA-3及T-bet m RNA的表达。【结果】(1)TSLP诱导后DC表达OX40L增加,而R848可抑制OX40L表达(P<0.05)。(2)B、C、D三组T细胞表达细胞因子IL-4和IL-13水平均高于A组;B组IL-4和IL-13均较C组和D组高,而D组高于C组(均P<0.05);C组表达IFN-γ水平明显高于其余三组(均P<0.05);A、B、D三组之间IFN-γ无明显差异(P>0.05)。(3)C组和D组GATA-3 m RNA水平均低于B组,但高于空白对照A组,其中D组GATA-3 m RNA水平高于C组;C组表达T-bet m RNA水平高于其余三组(均P<0.05);A、B、D三组之间T-bet水平无明显差异(P>0.05)。【结论】TSLP通过上调人DC表达OX40L,在转录因子水平介导Na觙ve T细胞向Th2细胞分化;这种TSLP介导的Th2细胞优势反应可被R848所抑制。
文摘目的:了解胸腺基质淋巴细胞生成素(TSLP)在1-氯-2,4-二硝基苯(DNCB)致敏诱导皮炎小鼠中的表达,并评价TSLP在小鼠皮炎免疫反应中的作用。方法:将20只11周龄SPF级BALB/c小鼠随机分为2组(每组10只):致敏组先后接受含1.0%和0.1%DNCB的橄榄油丙酮(4∶1)溶液反复刺激背部皮肤,对照组接受基质溶液(橄榄油∶丙酮=4∶1)涂抹背部皮肤。实验期间观察小鼠皮炎症状,监测小鼠挠痒次数和皮炎症状评分,观察皮肤组织病理改变。21 d后检测2组血浆总Ig E水平;利用实时荧光定量聚合酶链式反应(q PCR)法检测皮肤、肝脏、脾脏和肾脏组织中TSLP m RNA水平,采用western-blot法分析TSLP蛋白表达情况。结果:2组小鼠的抓挠次数和皮炎症状评分分别在致敏第8天和第6天后出现差异(P<0.05);致敏组小鼠血浆总Ig E水平[(132.61±14.89)μg/L]较对照组[(109.13±2.51)μg/L]显著升高(t=4.92,P<0.05)。与对照组(1)相比,致敏组皮肤(1.83)、脾脏(1.06)和肾脏(1.10)组织中TSLP m RNA相对表达量均升高,而肝脏(0.90)组织TSLP m RNA相对表达量降低,但组间比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。Western-blot结果示TSLP蛋白在上述组织中的表达均无差异。结论:TSLP在DNCB致敏诱导皮炎小鼠的皮肤、肝脏、脾脏和肾脏组织中表达均无明显差异,其在小鼠皮炎免疫反应中的作用仍需进一步的研究。
