期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到867篇文章
< 1 2 … 44 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
人胰岛素样生长因子-1甄核表达质粒的构建及其在成肌细胞中的表达 被引量：4
1
作者 张鹏 陈世益 +1 位作者 陈疾忤 卫宏图 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期9-12,20,共5页
目的 :构建人胰岛素样生长因子 - 1(hIGF - 1)真核表达质粒pcDNA3.1(- ) /hIGF - 1并通过转染成肌细胞来验证其生物活性。方法 :应用DNA重组方法将编码hIGF - 1cDNA克隆于真核表达载体pcDNA3.1(- )中 ,构建pcDNA3.1(- ) /hIGF - 1真核... 目的 :构建人胰岛素样生长因子 - 1(hIGF - 1)真核表达质粒pcDNA3.1(- ) /hIGF - 1并通过转染成肌细胞来验证其生物活性。方法 :应用DNA重组方法将编码hIGF - 1cDNA克隆于真核表达载体pcDNA3.1(- )中 ,构建pcDNA3.1(- ) /hIGF - 1真核表达质粒 ;应用阳性脂质体介导的基因转染技术 ,将真核表达质粒pcDNA3.1(- ) /hIGF - 1瞬时转染C2C12成肌细胞中 ;采用RT -PCR及免疫组化染色等方法检测hIGF - 1基因在成肌细胞中的表达情况 ;应用MTT法检测转染后细胞上清液中hIGF - 1的生物活性。结果 :将构建好的真核表达质粒pcDNA3.1(- ) /hIGF - 1转染成肌细胞后 ,hIGF - 1mRNA及蛋白表达水平明显增高 ;转染后的成肌细胞培养上清液具有促使成纤维细胞增殖的生物活性。结论 :成功构建了真核表达质粒pcDNA3.1(- ) /hIGF - 1,其转染成肌细胞后可获得较高水平hIGF - 1蛋白的表达 ,所表达出hIGF - 1蛋白具有生物学活性。 展开更多
关键词 IGF-1 成肌细胞 真核表达质粒 转染 PCDNA3 人胰岛素样生长因子-1 蛋白 DNA重组 cDNA克隆 IGF—1
在线阅读 下载PDF
人胰岛素样生长因子-1真核表达载体的构建及在神经干细胞中的表达 被引量：3
2
作者 朱登纳 王军 +3 位作者 贾延劼 牛国辉 张博爱 吴值荣 《郑州大学学报（医学版）》 CAS 北大核心 2012年第2期156-159,共4页
目的:构建人胰岛素样生长因子-1(IGF-1)真核表达载体,并在人脐血神经干细胞(NSCs)中表达。方法:采用RT-PCR法从人胎肝中克隆IGF-1基因,将其导入真核表达载体pcDNA3.1中,用脂质体转染法将重组质粒转染人脐血NSCs。分别采用RT-PCR和免疫... 目的:构建人胰岛素样生长因子-1(IGF-1)真核表达载体,并在人脐血神经干细胞(NSCs)中表达。方法:采用RT-PCR法从人胎肝中克隆IGF-1基因,将其导入真核表达载体pcDNA3.1中,用脂质体转染法将重组质粒转染人脐血NSCs。分别采用RT-PCR和免疫荧光细胞化学法检测转基因NSCs中IGF-1mRNA和蛋白的表达。结果:琼脂糖电泳显示RT-PCR扩增出462bp的条带;重组载体pcDNA3.1-IGF-1经HindⅢ与BamHⅠ双酶切后,得到5428bp和462bp的两个条带;目的基因转染的NSCs经RT-PCR扩增出一条与目的基因一致的条带;免疫荧光细胞化学检测到IGF-1蛋白的表达。结论:成功构建了人IGF-1基因的真核表达载体,转染后IGF-1重组蛋白在人脐血NSCs中能成功表达。 展开更多
关键词 人胰岛素样生长因子-1 基因转染 人脐带血 神经干细胞
在线阅读 下载PDF
携人胰岛素样生长因子-1基因的成肌细胞移植后在体存活及产物表达的研究 被引量：1
3
作者 李宏云 陈世益 +3 位作者 陈疾忤 卫宏图 张鹏 李云霞 《中国运动医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第2期151-155,共5页
目的：观察并探讨携人胰岛素样生长因子-1（hIGF-1）基因的成肌细胞移植入雄性C3H小鼠体内后的存活、转归以及移植后hIGF-1基因的表达.方法：84只雄性C3H小鼠随机（20～30g,7～11w）分为A组（正常小鼠转基因细胞移植组）、B组（正常小... 目的：观察并探讨携人胰岛素样生长因子-1（hIGF-1）基因的成肌细胞移植入雄性C3H小鼠体内后的存活、转归以及移植后hIGF-1基因的表达.方法：84只雄性C3H小鼠随机（20～30g,7～11w）分为A组（正常小鼠转基因细胞移植组）、B组（正常小鼠空白成肌细胞移植组）、C组（受伤小鼠转基因细胞移植组）和D组（受伤小鼠空白成肌细胞移植组）,每组20只,另4只作正常对照.A、B两组分别于右侧腓肠肌中段注射转基因成肌细胞或空白成肌细胞;C、D两组以重力打击造成小鼠右侧腓肠肌中段钝挫伤,伤后第3天分别于致伤局部注射转基因成肌细胞或空白成肌细胞.注射细胞后第2、5、10、20、30天,各组随机抽取4只小鼠处死,取右侧腓肠肌中段检测,Br-dU免疫组化染色检测外源细胞在体内的存活情况;4组另行hIGF-1免疫组化染色及实时PCR检测外源转基因细胞在体内表达hIGF-1情况.结果：各组小鼠均有BrdU免疫组化阳性染色,A、C两组均有hIGF-1 mRNA表达及hIGF-1分泌,B、D两组未检测到hIGF-1 mRNA表达及hIGF-1分泌.结论：携hIGF-1基因的成肌细胞移植入正常及钝挫伤小鼠体内后,可存活一段时间,并能稳定地分泌hIGF-1因子. 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子-1 成肌细胞 骨骼肌 损伤 修复 溴脱氧尿嘧啶核苷 携人胰岛素样生长因子-1基因
在线阅读 下载PDF
利用杆状病毒载体高效表达人胰岛素样生长因子-1及其纯化的研究 被引量：1
4
作者 段宇 汪承亚 +1 位作者 赵红 陈家伟 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期173-177,共5页
目的 :利用杆状病毒载体在家蚕幼虫中研制有生物学活性的重组人胰岛素样生长因子 1(rhIGF 1)。方法 :将 15kDhIGF 1前体cDNA基因插入家蚕核型多角体病毒 (BmNPV)转移载体pBakPAK8中 ,构建重组病毒BmNPV/IGF 1。用BmNPV/IGF 1感染家蚕幼... 目的 :利用杆状病毒载体在家蚕幼虫中研制有生物学活性的重组人胰岛素样生长因子 1(rhIGF 1)。方法 :将 15kDhIGF 1前体cDNA基因插入家蚕核型多角体病毒 (BmNPV)转移载体pBakPAK8中 ,构建重组病毒BmNPV/IGF 1。用BmNPV/IGF 1感染家蚕幼虫 ,提取家蚕血淋巴液 ,采用亲和层析法纯化rhIGF 1,ELISA法测定rhIGF 1含量 ,用SDS PAGE和Western blot分析鉴定rhIGF 1纯度及免疫学活性 ,MTT法观察其对MCF 7细胞增殖的影响。结果 :ELISA测定显示 ,BmNPV/IGF 1感染家蚕幼虫 12 0hrhIGF 1含量达最高值 ( 2 3 36 μg/ml)。rhIGF 1纯度为 4 0 % ,Western blot分析发现主要纯化产物为 7 5kD成熟hIGF 1。细胞活性刺激实验显示 ,纯化后rhIGF 1对MCF 7细胞促增殖能力明显优于来源于大肠杆菌的rhIGF 1产品。结论 :实现了具有免疫学活性及生物学活性rhIGF 1在杆状病毒表达系统的高效表达 ,并使rhIGF 展开更多
关键词 人胰岛素样生长因子-1 基因表达 重组家蚕核型多角体病毒 亲和层析 生物学活性
在线阅读 下载PDF
抗人胰岛素样生长因子-1单克隆抗体的制备与鉴定 被引量：1
5
作者 毕立清 刘莉 +3 位作者 程蕴琳 施有为 仇镇宁 姜苏蓉 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期712-716,741,共6页
目的:制备稳定分泌抗人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞系,并对其分泌的mAb进行鉴定。方法:用纯化后的hIGF-1重组蛋白免疫Balb/c小鼠,利用杂交瘤细胞融合技术制备抗hIGF-1的mAb,用Western blot法鉴定mAb的特异性... 目的:制备稳定分泌抗人胰岛素样生长因子-1(hIGF-1)单克隆抗体(mAb)的杂交瘤细胞系,并对其分泌的mAb进行鉴定。方法:用纯化后的hIGF-1重组蛋白免疫Balb/c小鼠,利用杂交瘤细胞融合技术制备抗hIGF-1的mAb,用Western blot法鉴定mAb的特异性,用间接ELISA法检测mAb腹水效价及mAb的亲和力,杂交瘤细胞染色体分析,鉴定Ig亚类。结果:获得2株能稳定分泌抗hIGF-1的mAb杂交瘤细胞系,Western blot分析显示,该mAb能与具有生物学活性的成熟IGF-1蛋白结合。腹水mAb效价可达6×104。mAb相对亲和力为2.1×109/mol～7.8×109/mol。2株单抗属IgM亚类。染色体分析符合杂交瘤细胞特征。结论:成功制备出抗hIGF-1的2株mAb杂交瘤细胞,为进一步用于hIGF-1的临床检测和实验研究创造了条件。 展开更多
关键词 人胰岛素样生长因子-1 单克隆抗体 重组蛋白
在线阅读 下载PDF
人胰岛素样生长因子-1基因的克隆、表达及生物活性分析 被引量：1
6
作者 祁雅慧 王雅梅 +4 位作者 孙丽翠 司杨 闫豫东 张静宜 邴国英 《首都医科大学学报》 CAS 2004年第2期154-158,共5页
采用RT PCR方法 ,从人扁桃体组织中扩增得到人胰岛素样生长因子 1 (IGF 1 )cDNA ,利用基因重组技术将该基因片段重组于pcDNA3 .1 ( +)真核表达载体上 ,成功构建了 pcDNA/I重组表达载体。应用脂质体介导的基因转移技术将重组质粒体外转... 采用RT PCR方法 ,从人扁桃体组织中扩增得到人胰岛素样生长因子 1 (IGF 1 )cDNA ,利用基因重组技术将该基因片段重组于pcDNA3 .1 ( +)真核表达载体上 ,成功构建了 pcDNA/I重组表达载体。应用脂质体介导的基因转移技术将重组质粒体外转染至人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)。MTT法检测结果表明 :重组质粒转染能明显促进内皮细胞的分裂增生。将重组质粒通过脂质体介导 ,体外转染至人肾细胞 2 93细胞系进行表达 ,经G41 8筛选获得稳定表达的重组质粒细胞克隆 ,表达产物经鸡胚绒毛尿囊膜试验表明有促血管生成活性。此结果为研究IGF 1对血管内皮细胞作用的分子机制 ,以及利用IGF 1基因治疗肢体及冠状动脉缺血性疾病等的研究奠定了实验基础。 展开更多
关键词 人胰岛素样生长因子-1基因 克隆 表达 生物活性
在线阅读 下载PDF
重组人胰岛素样生长因子-1工程菌发酵培养基的优化 被引量：1
7
作者 杨渐 陈理 俞昌喜 《化学与生物工程》 CAS 2013年第4期36-40,共5页
在摇瓶条件下,以M9培养基为基础,采用单因素实验和正交实验,对适合于表达重组人胰岛素样生长因子-1工程菌生长的高密度发酵培养基进行了优化。确定最佳培养基配方为:葡萄糖0.4%、甘油1.5%、酵母粉3%、胰蛋白胨3%、Na2HPO41.2%、KH2PO40... 在摇瓶条件下,以M9培养基为基础,采用单因素实验和正交实验,对适合于表达重组人胰岛素样生长因子-1工程菌生长的高密度发酵培养基进行了优化。确定最佳培养基配方为:葡萄糖0.4%、甘油1.5%、酵母粉3%、胰蛋白胨3%、Na2HPO41.2%、KH2PO40.6%、NH4Cl 0.1%、NaCl 0.20%、MgSO40.048%,在此优化培养基中培养14h,工程菌菌体密度OD600达7.5。 展开更多
关键词 人胰岛素样生长因子-1 大肠杆菌 发酵培养基 优化
在线阅读 下载PDF
人胰岛素样生长因子-1与肠外营养
8
作者 顾岩 《肠外与肠内营养》 CAS 2000年第2期110-113,共4页
人胰岛素样生长因子 - 1是一种对机体生长和代谢具有广泛作用的分泌蛋白 ,与机体的营养调节密切相关。本文综述其对机体代谢的作用、作用机制 。
关键词 肠外营养 人胰岛素样生长因子-1 辅助治疗作用
在线阅读 下载PDF
Sonic hedgehog参与人胰岛素样生长因子-1信号通路促使下颌骨髁突过度生长的实验研究 被引量：4
9
作者 陈宇翔 黄群 +2 位作者 张武阳 马秦 龙星 《口腔医学研究》 CAS 北大核心 2018年第8期866-869,共4页
目的:通过活体动物实验观察人胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor,IGF-1)与Sonic hedgehogxinh(Shh)介导的信号通路促进了髁突过度生长的作用。方法:制备IGF-1高表达表型转基因小鼠模型。将转基因鼠随机分为为5组:Cyclopam... 目的:通过活体动物实验观察人胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor,IGF-1)与Sonic hedgehogxinh(Shh)介导的信号通路促进了髁突过度生长的作用。方法:制备IGF-1高表达表型转基因小鼠模型。将转基因鼠随机分为为5组:Cyclopamine刺激组;NVP-AEW541刺激组;IGF-1刺激组;Cyclopamine+IGF-1刺激组;生理盐水刺激组:空白对照,每组3只。随机选取一侧关节腔自31d起隔天连续进行上述药物注射,共14d,注射结束后收获实验侧髁突,固定,比较两侧髁突大小,分析差异性。结果:Cyclopamine刺激组及生理盐水刺激组实验侧与对照侧髁突大小比较差异无统计学意义。NVP-AEW541刺激组、IGF-1刺激组以及Cyclopamine+IGF-1刺激组实验侧髁突小于对照侧髁突(P<0.05)。结论:IGF-1介导的信号通路促进了髁突肥大髁突的过度生长。 展开更多
关键词 髁突肥大 音猬因子 人胰岛素样生长因子-1
在线阅读 下载PDF
重组人胰岛素样生长因子-1对急性心肌缺血大鼠血管内皮细胞分泌功能的影响
10
作者 郑娟娟 芮家亮 +1 位作者 杨斌 曹蘅 《中华老年心脑血管病杂志》 CAS 北大核心 2007年第9期637-637,共1页
关键词 重组人胰岛素样生长因子-1 血管内皮细胞功能紊乱 心肌缺血大鼠 细胞分泌功能 急性 病理生理表现 动脉粥样硬化 血管活性物质
在线阅读 下载PDF
人胰岛素样生长因子-1及绿色荧光蛋白双表达载体的构建 被引量：3
11
作者 张绍昆 高萍 +2 位作者 张琪 刘一 徐莘香 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第1期152-154,共3页
目的 :构建绿色荧光蛋白 (GFP)与人胰岛素样生长因子 1(h IGF- 1)基因真核表达载体 ,为基因治疗关节软骨缺损奠定基础。方法 :将 pc DNA3.1 - IGF- 1质粒和 pc DNA3- GFP质粒扩增后 ,经限制性酶切下 pc DNA3-GFP中的含有 CMV启动子的全... 目的 :构建绿色荧光蛋白 (GFP)与人胰岛素样生长因子 1(h IGF- 1)基因真核表达载体 ,为基因治疗关节软骨缺损奠定基础。方法 :将 pc DNA3.1 - IGF- 1质粒和 pc DNA3- GFP质粒扩增后 ,经限制性酶切下 pc DNA3-GFP中的含有 CMV启动子的全长 GFP c DNA片段 ,连接到 pc DNA3.1 - IGF- 1内 ,构建含有两个多克隆位点的 pc-GI真核基因共表达载体。结果 :酶切及琼脂糖电泳分析表明提取及纯化的 pc GI质粒含有 GFP c DNA和 h IGF- 1c DNA碱基片段 ,方向及大小正确。结论 :成功构建了含有 GFP和 h IGF- 1基因的真核表达载体。 展开更多
关键词 绿色荧光蛋白 胰岛素样生长因子-1 真核表达载体 基因疗法 软骨疾病/治疗
在线阅读 下载PDF
人胰岛素样生长因子-1稳定表达细胞株的构建及鉴定 被引量：2
12
作者 张绍昆 刘一 +2 位作者 单玉兴 王刚 徐莘香 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期41-43,T001,共4页
目的 :建立稳定表达人胰岛素样生长因子 - 1 ( h IGF- 1 )的细胞株。方法 :用脂质体转染法将含有 h IGF- 1 c DNA的真核表达载体转染 BHK细胞 ,经 G41 8筛选 ,形成阳性细胞克隆。继续培养4周 ,进行原位杂交和免疫细胞化学检测。结果 :... 目的 :建立稳定表达人胰岛素样生长因子 - 1 ( h IGF- 1 )的细胞株。方法 :用脂质体转染法将含有 h IGF- 1 c DNA的真核表达载体转染 BHK细胞 ,经 G41 8筛选 ,形成阳性细胞克隆。继续培养4周 ,进行原位杂交和免疫细胞化学检测。结果 :原位杂交检测在转染细胞的胞浆中有棕黄色颗粒样阳性杂交信号 ;免疫细胞化学检测在转染细胞的胞浆中有氯化镍蓝色阳性信号。结论 :G41 8筛选后所获得的阳性细胞克隆 ,继续培养 4周 ,原位杂交和免疫细胞化学检测表明 h IGF- 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子-1 基因转染 基因表达
在线阅读 下载PDF
重组人胰岛素样生长因子-1纯化及其鉴定的研究 被引量：3
13
作者 段宇 赵红 +1 位作者 汪承亚 陈家伟 《南京医科大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期557-560,共4页
目的:利用亲和层析法将家蚕幼虫中高效表达的重组人胰岛素样生长因子(recombinanthumaninsulin鄄likegrowthfactor鄄1,rhIGF鄄1)纯化并鉴定,以得到具有免疫学活性和生物学活性的rhIGF鄄1生物制品。方法:蚕血淋巴中rhIGF鄄1初步提纯去除... 目的:利用亲和层析法将家蚕幼虫中高效表达的重组人胰岛素样生长因子(recombinanthumaninsulin鄄likegrowthfactor鄄1,rhIGF鄄1)纯化并鉴定,以得到具有免疫学活性和生物学活性的rhIGF鄄1生物制品。方法:蚕血淋巴中rhIGF鄄1初步提纯去除杂质,采用亲和层析法纯化rhIGF鄄1。以ELISA法测定纯化产物中rhIGF鄄1含量,用SDS鄄PAGE和Western鄄blot分析鉴定rhIGF鄄1纯度及免疫学活性,4-甲基偶氮唑蓝(tetrazoliumsalt,MTT)法观察其对MCF鄄7细胞增殖的影响。结果:纯化后rhIGF鄄1纯度约为40%,Westernblot分析发现,主要纯化产物相对分子质量为7.5ku的成熟hIGF鄄1,所含非目的产物与hIGF鄄1无免疫交叉反应。细胞活性刺激实验显示,rhIGF鄄1纯品对MCF鄄7细胞有较好的刺激活性,促增殖能力优于来源于大肠杆菌的rhIGF鄄1产品。结论:蚕血淋巴中的rhIGF鄄1经亲和层析后初步得到纯化,并显示良好的免疫学活性和生物学活性。 展开更多
关键词 重组人胰岛素样生长因子—1 家蚕幼虫 亲和层析 纯化产物 活性
在线阅读 下载PDF
重庆市区健康成人胰岛素样生长因子-1血清浓度测定
14
作者 张华 倪卫东 +1 位作者 陆慧 张弓 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 2008年第5期346-348,共3页
目的了解重庆市区健康成人不同年龄段和不同性别间胰岛素样生长因子-1（insulin-like growth factor-1，IGF-1）血清浓度水平，为研究疾病状态下人体血清1GF-1的浓度变化提供有益的参考数据。方法随机选取重庆市区90名健康成人血清标本... 目的了解重庆市区健康成人不同年龄段和不同性别间胰岛素样生长因子-1（insulin-like growth factor-1，IGF-1）血清浓度水平，为研究疾病状态下人体血清1GF-1的浓度变化提供有益的参考数据。方法随机选取重庆市区90名健康成人血清标本，其中青年组（18～45岁），中年组（46～60岁），老年组（〉60岁）各30例，采用ELISA方法测定IGF-1浓度，将所测值在各年龄组、性别组之间行统计学比较。结果90名健康成人血清IGF-1的浓度平均值为（159．85±77．84）ng·ml^-1；老年组浓度显著低于青、中年组；老年女性组浓度显著低于青、中年女性组；余不同年龄、性别之间未见统计学差异。结论重庆市区老年人，尤其是老年女性，IGF-1血清浓度显著降低。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子-1 健康成人 血清浓度 重庆
在线阅读 下载PDF
人胰岛素样生长因子-1的体外抗肝纤维化活性 被引量：10
15
作者 万爱妮 徐栋生 +3 位作者 蔡燕飞 陈蕴 金坚 李华钟 《中国药科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2017年第4期476-482,共7页
探讨人胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的体外抗肝纤维化作用。检测IGF-1对人正常肝细胞L-02增殖及生长周期的影响;建立CCl_4诱导的肝细胞损伤模型,探究IGF-1抗肝细胞损伤活性;以TGF-β1诱导的肝星状细胞HSC-T6为体外肝纤维化研究模型,检测IG... 探讨人胰岛素样生长因子-1(IGF-1)的体外抗肝纤维化作用。检测IGF-1对人正常肝细胞L-02增殖及生长周期的影响;建立CCl_4诱导的肝细胞损伤模型,探究IGF-1抗肝细胞损伤活性;以TGF-β1诱导的肝星状细胞HSC-T6为体外肝纤维化研究模型,检测IGF-1对HSC-T6细胞中纤维化相关蛋白表达水平及对胞内TGF-β1/Smad信号通路的影响。结果显示,IGF-1可解除TGF-β1对L-02生长的抑制作用,提高CCl4损伤L-02的细胞存活率,降低HSC-T6细胞纤维化相关蛋白表达水平,抑制TGF-β1/Smad信号通路中Smad3的磷酸化。结果表明,IGF-1能够促进肝细胞增殖,保护肝细胞免受损伤,干预TGF-β1/Smad信号通路,抑制胞外基质ECM合成,从而发挥抗肝纤维化效果。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子-1 转化生长因子-Β1 肝细胞 肝星状细胞 肝纤维化
在线阅读 下载PDF
硫氧还蛋白促进人胰岛素样生长因子-1在大肠杆菌中高效可溶表达 被引量：3
16
作者 万爱妮 徐栋生 +3 位作者 蔡燕飞 陈蕴 金坚 李华钟 《食品与生物技术学报》 CAS CSCD 北大核心 2019年第4期50-57,共8页
为实现人胰岛素样生长因子-1(Insulin-like growth factor-1,IGF-1)在大肠杆菌中的高效可溶表达,获得大量具生物活性的IGF-1。应用融合PCR技术构建trx-igf1融合基因,克隆至p ET30a载体。重组载体pET30a-Trx-IGF-1转化大肠杆菌C43(DE3),... 为实现人胰岛素样生长因子-1(Insulin-like growth factor-1,IGF-1)在大肠杆菌中的高效可溶表达,获得大量具生物活性的IGF-1。应用融合PCR技术构建trx-igf1融合基因,克隆至p ET30a载体。重组载体pET30a-Trx-IGF-1转化大肠杆菌C43(DE3),并进行条件优化大量表达可溶性蛋白Trx-IGF-1。利用His标签纯化表达产物,对纯化蛋白进行Western blot与生物活性分析。构建的pET30a-Trx-IGF-1重组载体转化大肠杆菌C43(DE3)后,在30℃培养条件下1 mmol/L IPTG诱导表达5 h,获得大量以可溶形式表达的融合蛋白Trx-IGF-1;采用Ni离子亲和层析,获得纯度达90%以上的融合蛋白,经Western blot检测具有IGF-1抗原活性。生物学活性检测显示,融合蛋白Trx-IGF-1能明显促进NIH3T3细胞增殖及细胞周期进展。本研究应用的载体蛋白Trx,能实现在大肠杆菌中高效可溶表达具生物活性的IGF-1,为包涵体蛋白在大肠杆菌中的可溶性表达提供借鉴。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子-1 硫氧还蛋白 大杨杆菌C43(DE3) 可溶 生物活性
在线阅读 下载PDF
细粒棘球绦虫胰岛素样生长因子1受体蛋白的生物信息学分析及多克隆抗体制备
17
作者 夏衣旦木·吐尼牙孜 廖霞 +6 位作者 李婧 贾雨桐 赵金龙 杜韫 方梓屹 林仁勇 吕国栋 《中国畜牧兽医》 北大核心 2025年第11期5393-5402,共10页
【目的】对细粒棘球绦虫的胰岛素样生长因子1受体(insulin-like growth factor 1 receptor of Echinococcus granulosus sensu stricto,EgIGF-1R)蛋白进行生物信息学分析,制备EgIGF-1R的多克隆抗体并定位其在幼虫阶段的表达。【方法】使... 【目的】对细粒棘球绦虫的胰岛素样生长因子1受体(insulin-like growth factor 1 receptor of Echinococcus granulosus sensu stricto,EgIGF-1R)蛋白进行生物信息学分析,制备EgIGF-1R的多克隆抗体并定位其在幼虫阶段的表达。【方法】使用Mega 11.0软件对EgIGF-1R(GenBank登录号:XP_024354248.1)及其同源基因的氨基酸序列进行ClustalW多重比对,并构建系统进化树。通过生物信息学方法分析EgIGF-1R蛋白的理化特征、跨膜区域、蛋白结构等生物学信息。选择EgIGF-1R的优势肽段免疫新西兰大白兔制备其多克隆抗体,并利用ELISA方法检测抗体效价。通过免疫组织化学、免疫荧光试验定位检测EgIGF-1R在细粒棘球绦虫原头蚴和囊泡阶段的表达情况。【结果】氨基酸序列比对结果显示,EgIGF-1R与日本血吸虫、智人IGF-1R同源基因氨基酸序列相似性分别为32.02%和31.57%。进化树分析结果显示,EgIGF-1R与多房棘球绦虫、布氏姜片虫及日本血吸虫的亲缘关系较近;与智人、小鼠等物种的亲缘关系较远。生物信息学分析结果显示,EgIGF-1R蛋白含有1680个氨基酸;EgIGF-1R蛋白分子质量为1.839×10^(5) u,等电点为8.59;具有2个跨膜区域,分别位于第1034-1056和1164-1186位氨基酸,是一种跨膜蛋白;其含有18个酪氨酸磷酸化位点、123个丝氨酸磷酸化位点和60个苏氨酸磷酸化位点。EgIGF-1R蛋白二级结构中α-螺旋、β-折叠、无规则卷曲占比分别为21.19%、16.61%和62.20%;3D结构中N-端和C-端相距较远。EgIGF-1R与人源胰岛素样生长因子1及人源胰岛素的对接分数分别为-1739.46和-1099.10 kJ/mol。ELISA结果显示,EgIGF-1R多克隆抗体效价为1∶64000。免疫组织化学和免疫荧光试验结果显示,EgIGF-1R在原头蚴的顶突、吸盘和被膜表达,在囊泡的生发层表达。【结论】EgIGF-1R蛋白具有结合人源胰岛素生长因子1等细胞因子的结构域,表达于细粒棘球绦虫的原头蚴和囊泡等幼虫阶段,本研究制备的EgIGF-1R多克隆抗体为研究EgIGF-1R在细粒棘球绦虫致病机制中的作用奠定了基础。 展开更多
关键词 细粒棘球绦虫 胰岛素样生长因子1受体 生物信息学分析 多克隆抗体
在线阅读 下载PDF
胰岛素样生长因子1及其受体在多囊卵巢综合征发生发展中的作用
18
作者 耿玉迪 何源泉 陈怡任 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 北大核心 2025年第4期479-487,504,共10页
多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是育龄妇女中常见的一种内分泌代谢性疾病,其发病机制尚未明确,且在人群中的临床表现呈现多样性。目前研究已证实,激素分泌异常、卵泡发育异常及卵巢组织的慢性炎症刺激等均与PCOS发病... 多囊卵巢综合征(polycystic ovary syndrome,PCOS)是育龄妇女中常见的一种内分泌代谢性疾病,其发病机制尚未明确,且在人群中的临床表现呈现多样性。目前研究已证实,激素分泌异常、卵泡发育异常及卵巢组织的慢性炎症刺激等均与PCOS发病相关。胰岛素样生长因子(insulin-like growth factor,IGF)是一种天然生长激素,其中,IGF-1与胰岛素的氨基酸序列高度相似,故其能够与胰岛素生长因子受体(insulin-like growth factor 1 receptor,IGF-1 R)或胰岛素受体结合,从而启动PI3K/Akt/mTOR等下游途径,影响胰岛素、雄激素、生长激素等多种重要激素的分泌。同时IGF-1还能够促使细胞摄取葡萄糖,促进葡萄糖转化为糖原,并调节脂质和氨基酸的代谢,在维持PCOS患者体内代谢稳态中发挥着重要作用。此外,IGF-1与IGF-1 R的结合能够促进卵泡颗粒细胞的生长,并有效抑制颗粒细胞凋亡。IGF-1与组织的氧化应激状态和微环境炎症因子的调节密切相关,适量的IGF-1能够改善PCOS患者组织的慢性炎症状态。本综述旨在阐明IGF-1及其受体在PCOS发病和进展中的潜在作用模式和分子机制,为PCOS的研究和临床治疗提供启示。 展开更多
关键词 多囊卵巢综合征 胰岛素样生长因子1 胰岛素样生长因子1受体
在线阅读 下载PDF
胰岛素样生长因子1与结直肠癌因果关系的两样本孟德尔随机化研究
19
作者 穆华夏 卜伟晓 +9 位作者 丁淑婷 高梦瑶 苏维强 张震 薄其付 刘峰 石福艳 王清华 孔雨佳 王素珍 《吉林大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第2期479-485,共7页
目的:基于双向两样本孟德尔随机化(MR)分析,探索胰岛素样生长因子1(IGF-1)与结直肠癌(CRC)之间的因果关联。方法:基于已公开的全基因组关联研究(IEU OpenGWAS)项目的公开汇总数据进行双向两样本MR分析,采用逆方差加权法(IVW)作为主要分... 目的:基于双向两样本孟德尔随机化(MR)分析,探索胰岛素样生长因子1(IGF-1)与结直肠癌(CRC)之间的因果关联。方法:基于已公开的全基因组关联研究(IEU OpenGWAS)项目的公开汇总数据进行双向两样本MR分析,采用逆方差加权法(IVW)作为主要分析方法,采用加权中位数法(WM)、MR-Egger回归法、加权众数法(WME)和简单众数法(SM)进行辅助分析,以评估IGF-1对CRC的因果影响;通过敏感性分析检查结果的稳健性。结果:以IGF-1作为暴露因素共筛选到386个单核苷酸多态性(SNPs)作为工具变量(IVs)。MR分析,IGF-1与CRC之间存在正向因果关联,比值比(OR)为1.178,95%置信区间(CI)为1.092~1.272,P<0.001;且该因果关联在校正了身高后仍然存在[OR(95%CI)=1.214(1.111,1.327),P<0.001]。Cochran's Q检验显示IV之间存在异质性(P<0.05),MR-Egger回归法未发现IV的水平多效性(P>0.05)。留一法逐个剔除SNPs后,结果显示该因果关联稳健。反向MR分析显示IGF-1与CRC之间不存在反向因果关系[OR(95%CI)=1.017(0.997,1.037),P=0.103]。结论:IGF-1水平与CRC之间存在因果关联,高IGF-1水平是CRC的潜在风险因素。 展开更多
关键词 胰岛素样生长因子1 结直肠癌 孟德尔随机化 身高 单核苷酸多态性
在线阅读 下载PDF
胰岛素样生长因子1对人RPE细胞分泌TGF-β2、MMP-2的影响及机制研究 被引量：4
20
作者 晁荣荣 郑柳 +1 位作者 范晶 丁芝祥 《眼科新进展》 CAS 北大核心 2024年第7期512-517,共6页
目的研究胰岛素样生长因子1(IGF-1)对人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)表达转化生长因子β2(TGF-β2)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)的影响,并探索其作用机制。方法ARPE-19细胞分别按不同浓度IGF-1和不同浓度LY294002培养6 h、12 h、24 h、48 h... 目的研究胰岛素样生长因子1(IGF-1)对人视网膜色素上皮细胞(ARPE-19)表达转化生长因子β2(TGF-β2)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)的影响,并探索其作用机制。方法ARPE-19细胞分别按不同浓度IGF-1和不同浓度LY294002培养6 h、12 h、24 h、48 h,采用CCK-8法检测细胞活力,确定IGF-1、LY294002的最佳作用浓度与时间。细胞划痕法检测细胞迁移活性。ELISA法检测细胞培养上清液中TGF-β2浓度。将ARPE-19细胞分为对照组、IGF-1组(80μg·L^(-1) IGF-1)、IGF-1+LY294002组(80μg·L^(-1) IGF-1+30 mmol·L^(-1) LY294002)、LY294002组(30 mmol·L^(-1) LY294002),使用无血清DMEM/F12培养基培养,对照组不做任何处理,分别采用RT-PCR、Western blot检测细胞中TGF-β2、MMP-2、磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)的mRNA和蛋白表达量。结果与0μg·L^(-1) IGF-1比较,80μg·L^(-1) IGF-1的细胞活力24 h变化显著(P<0.05),故确定其为IGF-1最佳作用浓度和时间。与0 mmol·L^(-1) LY294002比较,24 h的30 mmol·L^(-1) LY294002接近半数抑制浓度,故确定其为LY294002最佳作用时间和浓度。细胞划痕法检测结果显示,0μg·L^(-1) IGF-1组、40μg·L^(-1) IGF-1组、80μg·L^(-1) IGF-1组细胞迁移率整体比较及两两比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。ELISA检测结果显示,0μg·L^(-1) IGF-1组、40μg·L^(-1) IGF-1组、80μg·L^(-1) IGF-1组细胞上清液中TGF-β2浓度整体比较及两两比较差异均有统计学意义(均为P<0.05)。RT-PCR、Western blot检测结果显示,IGF-1、LY294002培养24 h,与对照组比较,IGF-1组细胞中TGF-β2、MMP-2、PI3K、AKT的mRNA与蛋白表达水平均升高,而LY294002组细胞中TGF-β2、MMP-2、PI3K、AKT的mRNA与蛋白表达水平均下降(均为P<0.05);与IGF-1组比较,IGF-1+LY294002组细胞中TGF-β2、MMP-2、PI3K、AKT的mRNA与蛋白表达水平均下降(均为P<0.05)。结论IGF-1能促进ARPE-19细胞增殖、迁移;IGF-1可能通过PI3K/AKT信号通路上调ARPE-19细胞中TGF-β2、MMP-2的表达,参与近视的发生与发展。 展开更多
关键词 近视 视网膜色素上皮细胞 胰岛素样生长因子1 磷脂酰肌醇-3-激酶/蛋白激酶B通路 转化生长因子Β2 基质金属蛋白酶2
在线阅读 下载PDF
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 2 … 44 下一页 到第 页
关于我们 | 版权声明 | 联系我们 | 帮助中心| 意见反馈
主办单位：上海市教育委员会
技术支持：重庆维普资讯有限公司
渝公网安备 50019002500403号
使用帮助 返回顶部