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人胰岛素原基因胰外表达重组体的构建及鉴定被引量：7: 1; 作者袁凤山张坤 +2 位作者杨立新王大会尤春暖《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期321-323,共3页; 目的 :构建胰外表达成熟胰岛素的重组体。方法 :将人胰岛素原基因进行二处突变 ,突变后的胰岛素原基因与逆转录病毒载体 pLXSN重组并转染肝癌细胞。提取肝癌细胞基因组DNA ,PCR方法鉴定人胰岛素原基因与载体重组结果及在肝癌细胞基因组... 展开更多; 关键词人胰岛素原基因逆转录病毒载体基因重组基因表达; 在线阅读下载PDF 职称材料

人胰岛素原基因突变体的构建被引量：1: 2; 作者兰丽珍邓华聪 +4 位作者孙辽郑丹郑宏庭刘东方弓军胜《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第19期1714-1716,共3页; 目的　完成人胰岛素原基因的定点突变 ,使之能在普通细胞中被Furin蛋白酶识别去除C肽分泌成熟胰岛素。方法　采用PCR体外定点突变技术 (PCRsite directedmutagenesis ,PCR SDM) ,设计 4对引物 ,引入 5个Furin识别的突变位点 ,通过重叠... 展开更多; 关键词人胰岛素原基因体外定点突变技术 PCR 位点突变 C肽 GCT 密码子突变体 T载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

人胰岛素原基因在转基因小鼠乳汁中的表达被引量：1: 3; 作者黄俊成史洪才 +3 位作者李文蓉武坚杨冬梅郭志勤《西北农业大学学报》 CSCD 北大核心 2000年第4期65-68,共4页; 将构建的绵羊 β-乳球蛋白基因 ( BLG)调控人胰岛素原基因的重组基因通过显微注射生产转基因小鼠。共移植 888枚注射 BLG-胰岛素原基因的小鼠卵 ,移植受体 31只 ,怀孕 1 4只 ,产仔 53只。PCR检测 51只 ,有 5只为阳性 ,并均为雌性 ,其中 ... 展开更多; 关键词人胰岛素原基因转基因小鼠基因表达乳汁糖尿; 在线阅读下载PDF 职称材料

Patatin启动子驱动的人胰岛素原基因的植物表达载体的构建: 4; 作者马建忠马雪青 +3 位作者王永刚宋国伟周贤靖王倩《中国马铃薯》 2009年第6期332-337,共6页; 使用马铃薯的偏爱密码子设计合成人胰岛素原基因,以植物表达载体pCAMBIA1301为基础,构建由patatin启动子调控的人胰岛素原基因植物表达载体p1301Ph,并将导入根癌农杆菌LBA4404中,经PCR鉴定证明,此基因已整合到农杆菌Ti上。表达载体的建... 展开更多; 关键词 patatin启动子人胰岛素原基因植物表达载体; 在线阅读下载PDF 职称材料

人胰岛素原基因的PCR扩增、克隆和鉴定: 5; 作者李文蓉刘明军 +2 位作者武坚杨冬梅郭志勤《草食家畜》 2001年第S2期174-178,共5页; 根据已知的人胰岛素原基因序列设计引物 ,用PCR直接从人基因组DNA中获得天然的人胰岛素原基因 ,并将其克隆到 pUC1 8载体中 ,通过内切酶图谱及序列分析 ,证实所获得的人胰岛素原基因与已报道的序列完全一致。对于已知序列的基因克隆 ,PC... 展开更多; 关键词人胰岛素原基因 PCR克隆序列分析; 在线阅读下载PDF 职称材料

重组人胰岛素原基因质粒在糖尿病鼠体内表达的安全性初步研究: 6; 作者刘囡万勃威袁凤山《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期171-173,共3页; 目的初步研究重组人胰岛素原基因逆转录病毒载体质粒(RHPGP)在糖尿病大鼠体内的安全性。方法将三碘甲腺原氨酸(T3)和肝细胞生长因子(HGF)注射入糖尿病鼠体内后,导入RHIGP,检测血糖、血清谷丙转氨酶(ALT)、白蛋白(ALB)、肌酐(CRE)和尿素... 展开更多; 关键词安全性基因治疗糖尿病人胰岛素原基因; 在线阅读下载PDF 职称材料

糖尿病基因治疗的实验研究Ⅰ.人胰岛素基因真核细胞表达质粒的构建: 7; 作者萧新华王姮 +1 位作者方福德孙琦《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期145-149,共5页; 为有效开展糖尿病基因治疗，作为第一步，本研究构建了人胰岛素原基因与表达载体PRC／CMV的重组体。首先，从质粒PBCA中酶切回收260bp的人胰岛素原基因片段，利用中间载体PBS．SK构建了含人胰岛素原基困片段的过渡质粒PBS．INS，在此基... 展开更多; 关键词人胰岛素原基因基因重组糖尿病基因治疗; 在线阅读下载PDF 职称材料

狩猎、野生动物驯养: 8; 《中国农业文摘（畜牧）》 2001年第6期37-39,共3页; S864.4 20012782颗粒饲料在野生动物中的应用/李群力(云南省昆明动物园 650021)//云南畜牧兽医.-2000,(4).-31～32S865.13 20012783人胰岛素原基因在转基因小鼠乳汁中的表达/黄俊成(新疆畜牧科学院农业部畜牧兽医生物技术重点开放实验室... 展开更多; 关键词人胰岛素原基因畜牧兽医转基因小鼠野生动物小鼠胚胎昆明动物园冷冻解冻平衡时间昆明白小鼠动物科学; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人胰岛素原基因胰外表达重组体的构建及鉴定被引量：7: 1; 作者袁凤山张坤杨立新王大会尤春暖; 机构中国医科大学附属第一医院内分泌科; 出处《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第4期321-323,共3页; 基金辽宁省自然科学基金资助项目 ( 962 2 93 ); 文摘目的 :构建胰外表达成熟胰岛素的重组体。方法 :将人胰岛素原基因进行二处突变 ,突变后的胰岛素原基因与逆转录病毒载体 pLXSN重组并转染肝癌细胞。提取肝癌细胞基因组DNA ,PCR方法鉴定人胰岛素原基因与载体重组结果及在肝癌细胞基因组中整合情况。同时测定成熟胰岛素的表达。结果 :胰岛素原基因已整合到肝癌细胞基因组。突变的胰岛素原可被广泛存在的furin酶识别 ,在培养基内检测到较高浓度的成熟胰岛素。结论 :成功构建胰外表达成熟胰岛素的突变人胰岛素原基因逆转录病毒重组体。; 关键词人胰岛素原基因逆转录病毒载体基因重组基因表达; Keywords human proinsulin gene retroviral vector gene recombination gene expression; 分类号 R587.1 [医药卫生—内分泌]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人胰岛素原基因突变体的构建被引量：1: 2; 作者兰丽珍邓华聪孙辽郑丹郑宏庭刘东方弓军胜; 机构重庆医科大学附属第一医院内分泌科山西医科大学第一医院肾病科山西医科大学第一医院整形科; 出处《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第19期1714-1716,共3页; 基金国家自然科学基金资助项目 ( 30 0 70 356 )~~; 文摘目的　完成人胰岛素原基因的定点突变 ,使之能在普通细胞中被Furin蛋白酶识别去除C肽分泌成熟胰岛素。方法　采用PCR体外定点突变技术 (PCRsite directedmutagenesis ,PCR SDM) ,设计 4对引物 ,引入 5个Furin识别的突变位点 ,通过重叠延伸法PCR扩增 ,使人胰岛素原编码基因B10密码子由CAC突变为GAC ;C3密码子由GAA突变为AAA ;C4密码子由GCT突变为CGT ;C3 2密码子由CTT突变为CGT ,将扩增片段克隆入T载体并测序。结果　DNA测序结果表明在预期位点突变符合要求。结论　应用PCR诱导突变技术 ,在体外能准确、简便有效的诱导胰岛素原基因突变 ,使体外应用非内分泌细胞构建高效分泌成熟胰岛素的细胞克隆成为可能。; 关键词人胰岛素原基因体外定点突变技术 PCR 位点突变 C肽 GCT 密码子突变体 T载体; Keywords proinsulin PCR site-directed mutagenesis; 分类号 R587 [医药卫生—内分泌] R512.62 [医药卫生—内科学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人胰岛素原基因在转基因小鼠乳汁中的表达被引量：1: 3; 作者黄俊成史洪才李文蓉武坚杨冬梅郭志勤; 机构新疆畜牧科学院农业部畜牧兽医生物技术重点开放实验室; 出处《西北农业大学学报》 CSCD 北大核心 2000年第4期65-68,共4页; 基金国家 8 63计划资助项目! ( Z 2 1 -0 3 -0 3 ); 文摘将构建的绵羊 β-乳球蛋白基因 ( BLG)调控人胰岛素原基因的重组基因通过显微注射生产转基因小鼠。共移植 888枚注射 BLG-胰岛素原基因的小鼠卵 ,移植受体 31只 ,怀孕 1 4只 ,产仔 53只。PCR检测 51只 ,有 5只为阳性 ,并均为雌性 ,其中 2只小鼠泌乳 ,经放免检测小鼠乳汁中人胰岛素原的质量浓度分别为 37.44mg/L和 39.99mg/L。另外 3只异常消瘦而不孕 ,其中; 关键词人胰岛素原基因转基因小鼠基因表达乳汁糖尿; Keywords Human proinsulin gene transgenic mice gene expression; 分类号 TQ467.32 [化学工程—制药化工] Q786 [生物学—分子生物学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名Patatin启动子驱动的人胰岛素原基因的植物表达载体的构建: 4; 作者马建忠马雪青王永刚宋国伟周贤靖王倩; 机构兰州理工大学生命科学与工程学院; 出处《中国马铃薯》 2009年第6期332-337,共6页; 基金甘肃省自然基金马铃薯块茎生产天然人胰岛素的研究资助(3ZS062-B25-023); 文摘使用马铃薯的偏爱密码子设计合成人胰岛素原基因,以植物表达载体pCAMBIA1301为基础,构建由patatin启动子调控的人胰岛素原基因植物表达载体p1301Ph,并将导入根癌农杆菌LBA4404中,经PCR鉴定证明,此基因已整合到农杆菌Ti上。表达载体的建立为日后转基因工作奠定了基础。; 关键词 patatin启动子人胰岛素原基因植物表达载体; Keywords patatin promoter human proinsulin plant expression vector; 分类号 S532 [农业科学—作物学] Q578 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名人胰岛素原基因的PCR扩增、克隆和鉴定: 5; 作者李文蓉刘明军武坚杨冬梅郭志勤; 机构新疆畜牧科学院农业部畜牧兽医生物技术重点开放实验室; 出处《草食家畜》 2001年第S2期174-178,共5页; 文摘根据已知的人胰岛素原基因序列设计引物 ,用PCR直接从人基因组DNA中获得天然的人胰岛素原基因 ,并将其克隆到 pUC1 8载体中 ,通过内切酶图谱及序列分析 ,证实所获得的人胰岛素原基因与已报道的序列完全一致。对于已知序列的基因克隆 ,PCR扩增法操作简捷。; 关键词人胰岛素原基因 PCR克隆序列分析; Keywords human proinsulin gene PCR cloning Sequencing; 分类号 Q578 [生物学—生物化学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名重组人胰岛素原基因质粒在糖尿病鼠体内表达的安全性初步研究: 6; 作者刘囡万勃威袁凤山; 机构中国医科大学临床医药学院中国医科大学附属第一医院内分泌科; 出处《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第2期171-173,共3页; 基金辽宁省自然科学基金资助项目(962293); 文摘目的初步研究重组人胰岛素原基因逆转录病毒载体质粒(RHPGP)在糖尿病大鼠体内的安全性。方法将三碘甲腺原氨酸(T3)和肝细胞生长因子(HGF)注射入糖尿病鼠体内后,导入RHIGP,检测血糖、血清谷丙转氨酶(ALT)、白蛋白(ALB)、肌酐(CRE)和尿素氮(BUN),进行24h饥饿试验以及组织病理学检测和逆转录病毒复制完整型病毒(RCR)的检测。结果实验组大鼠血糖明显下降,饥饿试验中未有低血糖事件发生;实验组动物的ALT、ALB、CRE和BUN与正常组大鼠无统计学差异;病理检测光镜下未见癌细胞及异形核细胞;未检测到野生型逆转录病毒。结论我们构建RHIGP体内表达实现了安全性调控;RHIGP应用于活体动物是安全的。; 关键词安全性基因治疗糖尿病人胰岛素原基因; Keywords safety gene therapy diabetes human proinsulin gene; 分类号 R587.1 [医药卫生—内分泌]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名糖尿病基因治疗的实验研究Ⅰ.人胰岛素基因真核细胞表达质粒的构建: 7; 作者萧新华王姮方福德孙琦; 机构中国医学科学院中国协和医科大学协和医院中国医学科学院基础医学研究所; 出处《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心 1997年第2期145-149,共5页; 基金卫生部基金!94-2-019 中国医学科学院基金; 文摘为有效开展糖尿病基因治疗，作为第一步，本研究构建了人胰岛素原基因与表达载体PRC／CMV的重组体。首先，从质粒PBCA中酶切回收260bp的人胰岛素原基因片段，利用中间载体PBS．SK构建了含人胰岛素原基困片段的过渡质粒PBS．INS，在此基础上构建了真核细胞表达的人胰岛素基因重组体PRC／CMV．INS。; 关键词人胰岛素原基因基因重组糖尿病基因治疗; Keywords human insulin gene DNA recombination; 分类号 R587.105 [医药卫生—内分泌] R394 [医药卫生—医学遗传学]; 在线阅读下载PDF 职称材料

题名狩猎、野生动物驯养: 8; 出处《中国农业文摘（畜牧）》 2001年第6期37-39,共3页; 文摘 S864.4 20012782颗粒饲料在野生动物中的应用/李群力(云南省昆明动物园 650021)//云南畜牧兽医.-2000,(4).-31～32S865.13 20012783人胰岛素原基因在转基因小鼠乳汁中的表达/黄俊成(新疆畜牧科学院农业部畜牧兽医生物技术重点开放实验室 830000),史洪才,李文蓉…//西北农业大学学报.-2000,28(4).-65～68将构建的绵羊β-乳球蛋白基因(BLG)调控人胰岛素原基因的重组基因通过显微注射生产转基因小鼠。共移植888枚注射BLG-胰岛素原基因的小鼠卵,移植受体31只,怀孕14只,产仔53只。PCR检测51只,有5只为阳性,并均为雌性,其中2只小鼠泌乳,经放免检测小鼠乳汁中人胰岛素原的质量浓度分别为37.44mg/L和39.99mg/L。另外3只异常消瘦而不孕,其中1只极度衰竭而死亡。图1参16S865.13 20012784植冰前后平衡时间对小鼠胚胎一步细管冷冻解冻效果的影响/高建明(北京农学院动物科技系 102206),; 关键词人胰岛素原基因畜牧兽医转基因小鼠野生动物小鼠胚胎昆明动物园冷冻解冻平衡时间昆明白小鼠动物科学; 分类号 S865.1 [农业科学—野生动物驯养]; 在线阅读下载PDF 职称材料

	题名	作者	出处	发文年	被引量	操作
1	人胰岛素原基因胰外表达重组体的构建及鉴定	袁凤山张坤杨立新王大会尤春暖	《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2004	7	在线阅读下载PDF 职称材料
2	人胰岛素原基因突变体的构建	兰丽珍邓华聪孙辽郑丹郑宏庭刘东方弓军胜	《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2004	1	在线阅读下载PDF 职称材料
3	人胰岛素原基因在转基因小鼠乳汁中的表达	黄俊成史洪才李文蓉武坚杨冬梅郭志勤	《西北农业大学学报》 CSCD 北大核心	2000	1	在线阅读下载PDF 职称材料
4	Patatin启动子驱动的人胰岛素原基因的植物表达载体的构建	马建忠马雪青王永刚宋国伟周贤靖王倩	《中国马铃薯》	2009	0	在线阅读下载PDF 职称材料
5	人胰岛素原基因的PCR扩增、克隆和鉴定	李文蓉刘明军武坚杨冬梅郭志勤	《草食家畜》	2001	0	在线阅读下载PDF 职称材料
6	重组人胰岛素原基因质粒在糖尿病鼠体内表达的安全性初步研究	刘囡万勃威袁凤山	《中国医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心	2008	0	在线阅读下载PDF 职称材料
7	糖尿病基因治疗的实验研究Ⅰ.人胰岛素基因真核细胞表达质粒的构建	萧新华王姮方福德孙琦	《中国医学科学院学报》 CAS CSCD 北大核心	1997	0	在线阅读下载PDF 职称材料
8	狩猎、野生动物驯养		《中国农业文摘（畜牧）》	2001	0	在线阅读下载PDF 职称材料