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脆性X智力低下蛋白与NDK/Nm23-H2的相互作用
被引量：
2
1
作者
楼蓉
梅品超
+4 位作者
贡金英
朱宁
寇朝辉
吴冠芸
沈岩
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第6期580-584,共5页
目的筛选与脆性X智力低下蛋白(FMRP)相互作用的蛋白,为FMRP生理功能的阐释提供新线索。方法以5月龄人胚海马mRNA为模板制备cDNA,重组于DNA激活结构域载体pGAD10,构建酵母双杂交文库,从中筛选与FMRP相互作用的蛋白。应用酵母双杂交体系对...
目的筛选与脆性X智力低下蛋白(FMRP)相互作用的蛋白,为FMRP生理功能的阐释提供新线索。方法以5月龄人胚海马mRNA为模板制备cDNA,重组于DNA激活结构域载体pGAD10,构建酵母双杂交文库,从中筛选与FMRP相互作用的蛋白。应用酵母双杂交体系对FMRP的相互作用区域进行定位。结果(1)所构建的5月龄人胚海马cDNA酵母双杂交文库含1×106克隆,插入片段平均长度约1.5kb,有效克隆90%;(2)在该文库中筛选到一个与FMRP相互作用的阳性克隆。序列分析表明:该克隆为人的核苷酸二磷酸激酶亚基B(NDK/Nm23-H2)cDNA;(3)NDK/Nm23-H2与缺少外显子12、14-17的FMRP异构体,以及含FMRP外显子1-12的克隆相互作用,而与FMRP外显子1-6、外显子2-7不能直接结合。结论人Nm23-H2在酵母细胞内能与FMRP结合,其相互作用区域定位于FMRP的前1-11个外显子。Nm23-H2具反式调控因子特性,FMRP与Nm23-H2的相互作用提示FMRP参与基因表达调控。这一发现有助于进一步研究FMRP在细胞核内的生物学功能。
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关键词
酵母双杂交体系
脆性X智力低下蛋白
人胚海马文库
脆性X综合征
遗传性疾病
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职称材料
题名
脆性X智力低下蛋白与NDK/Nm23-H2的相互作用
被引量：
2
1
作者
楼蓉
梅品超
贡金英
朱宁
寇朝辉
吴冠芸
沈岩
机构
中国医学科学院中国协和医科大学基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室
出处
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001年第6期580-584,共5页
基金
国家自然科学基金(39625007
39993420)
+1 种基金
国家高技术研究发展计划863重点项目基金(102-10-03-05)
国家重点基础性研究973项目基金(G1998051003)资助
文摘
目的筛选与脆性X智力低下蛋白(FMRP)相互作用的蛋白,为FMRP生理功能的阐释提供新线索。方法以5月龄人胚海马mRNA为模板制备cDNA,重组于DNA激活结构域载体pGAD10,构建酵母双杂交文库,从中筛选与FMRP相互作用的蛋白。应用酵母双杂交体系对FMRP的相互作用区域进行定位。结果(1)所构建的5月龄人胚海马cDNA酵母双杂交文库含1×106克隆,插入片段平均长度约1.5kb,有效克隆90%;(2)在该文库中筛选到一个与FMRP相互作用的阳性克隆。序列分析表明:该克隆为人的核苷酸二磷酸激酶亚基B(NDK/Nm23-H2)cDNA;(3)NDK/Nm23-H2与缺少外显子12、14-17的FMRP异构体,以及含FMRP外显子1-12的克隆相互作用,而与FMRP外显子1-6、外显子2-7不能直接结合。结论人Nm23-H2在酵母细胞内能与FMRP结合,其相互作用区域定位于FMRP的前1-11个外显子。Nm23-H2具反式调控因子特性,FMRP与Nm23-H2的相互作用提示FMRP参与基因表达调控。这一发现有助于进一步研究FMRP在细胞核内的生物学功能。
关键词
酵母双杂交体系
脆性X智力低下蛋白
人胚海马文库
脆性X综合征
遗传性疾病
Keywords
yeast two -hybrid system
fragile X mental retardation protein
human fetal hippocampus cDNA library
分类号
Q342.2 [生物学—遗传学]
R596.1 [医药卫生—内科学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
脆性X智力低下蛋白与NDK/Nm23-H2的相互作用
楼蓉
梅品超
贡金英
朱宁
寇朝辉
吴冠芸
沈岩
《中国医学科学院学报》
CAS
CSCD
北大核心
2001
2
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