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c-Met siRNA对肝细胞生长因子诱导的人胆管癌QBC939细胞增殖的影响 被引量:10
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作者 张秀华 缪林 +2 位作者 季国忠 范志宁 刘政 《医学研究生学报》 CAS 2009年第11期1154-1158,共5页
目的:近年来胆管癌的发病率和病死率呈上升的趋势,5年生存期低于5%,因此亟需利用现代生物技术探索新的治疗方法。探讨针对肝细胞生长因子(HGF)受体c-Met的RNA干扰对人胆管癌(CCA)QBC939细胞增殖的影响。方法:构建针对人c-Met基因的小干... 目的:近年来胆管癌的发病率和病死率呈上升的趋势,5年生存期低于5%,因此亟需利用现代生物技术探索新的治疗方法。探讨针对肝细胞生长因子(HGF)受体c-Met的RNA干扰对人胆管癌(CCA)QBC939细胞增殖的影响。方法:构建针对人c-Met基因的小干扰RNA(siRNA),转染体外培养的人CCA QBC939细胞,应用MTT法检测细胞增殖,Western blot检测c-Met、细胞周期素(Cyclin)D1和A表达以及磷酸肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/Akt)和胞外信号调节激酶(ERK1/2)信号通路活化。结果:c-Met siRNA显著抑制c-Met蛋白表达,且随着其浓度的增加,c-Met蛋白表达逐渐下降,500 nmol/L c-Met siRNA对c-Met蛋白表达的抑制率达65%。HGF刺激24 h,细胞增殖是对照组的4.54倍,100 nmol/L c-Met siRNA预处理即显著抑制HGF诱导的细胞增殖,其抑制率达26%,且随浓度增加,其抑制作用逐渐增强,500 nmol/L c-Met siRNA对HGF诱导的细胞增殖的抑制率达85%。HGF刺激4h,PI3K和Akt的活性即显著增强,分别是对照组的4.09和4.54倍,c-Met siRNA可呈浓度依赖性的抑制HGF诱导的PI3K/Akt活化,500 nmol/L c-Met siRNA几乎完全抑制HGF诱导的PI3K/Akt活化。HGF显著诱导人CCAQBC939细胞ERK1/2活化,50 ng/ml HGF刺激4 h,磷酸化ERK1/2表达是对照组的3.63倍,c-Met siRNA可呈浓度依赖性的抑制HGF诱导的ERK1/2活化。HGF显著诱导人CCA QBC939细胞细胞周期素D1和A表达,分别是对照组的2.83和3.16倍,c-Met siRNA可呈浓度依赖性的抑制HGF诱导的细胞周期素D1和A表达。结论:针对人c-Met基因的RNA干扰可有效阻断人CCA QBC939细胞c-Met表达,并通过阻断PI3K/Akt和ERK1/2信号通路活化而抑制HGF诱导的细胞增殖。 展开更多
关键词 人胆管癌QBC939细胞 肝细胞生长因子 c—Met 小干扰RNA
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生长抑素类似物诱导人胆管癌细胞株凋亡及对胞内游离钙的影响 被引量:2
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作者 陈华 何振平 +1 位作者 马宽生 王曙光 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期588-590,共3页
目的 探讨生长抑素类似物SMS2 0 1 995 (SMS)是否通过诱导人胆管癌细胞凋亡而抑制肿瘤生长 ,以及与细胞内游离钙的关系。方法 采用人胆管癌细胞系SK ChA 1,应用MMT比色法 ,AnnexinV FITC技术及激光共聚焦显微镜技术等方法进行检测和... 目的 探讨生长抑素类似物SMS2 0 1 995 (SMS)是否通过诱导人胆管癌细胞凋亡而抑制肿瘤生长 ,以及与细胞内游离钙的关系。方法 采用人胆管癌细胞系SK ChA 1,应用MMT比色法 ,AnnexinV FITC技术及激光共聚焦显微镜技术等方法进行检测和观察。结果 在SMS作用下SK ChA 1细胞生长受抑制。SMS处理SK ChA 1细胞后 ,AnnexinV标记的凋亡细胞增多。细胞凋亡的同时细胞内游离钙浓度升高。结论 SMS可能通过诱导SK ChA 1细胞 [Ca2 + ]i依赖性细胞凋亡 ,抑制胆管癌生长。 展开更多
关键词 生长抑素 人胆管癌SK-ChA-1细胞 细胞凋亡 细胞内游离钙
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腺病毒介导凋亡素基因对裸鼠种植性人胆管癌的治疗研究 被引量:1
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作者 陈健 李大江 王曙光 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第11期1036-1038,共3页
目的探讨腺病毒介导凋亡素基因对裸鼠种植性人胆管癌的治疗。方法建立裸鼠皮下种植性人胆管癌模型,观察肿瘤内注射含凋亡素基因的重组腺病毒后种植瘤的体积变化、毒副作用和组织学变化,同时计算抑瘤率。结果在治疗12d后含凋亡素基因的... 目的探讨腺病毒介导凋亡素基因对裸鼠种植性人胆管癌的治疗。方法建立裸鼠皮下种植性人胆管癌模型,观察肿瘤内注射含凋亡素基因的重组腺病毒后种植瘤的体积变化、毒副作用和组织学变化,同时计算抑瘤率。结果在治疗12d后含凋亡素基因的腺病毒治疗组的种植瘤体积为(92.31±28.31)mm,较空病毒组(288.86±113.13)mm和生理盐水组(344.86±113.87)mm相比具有显著差别(P<0.01)。同时抑瘤率达到72.10%,明显高于空病毒治疗组11.9%(P<0.01)。在治疗期间没有观察到毒副作用。组织学结果也提示凋亡素基因是通过引发胆管癌细胞的凋亡来抑制肿瘤生长的。结论含凋亡素基因的重组腺病毒对胆管癌具有治疗作用。 展开更多
关键词 凋亡素基因 腺病毒载体 基因治疗 人胆管癌
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生长抑素类似物对胆管癌SK-ChA-1细胞株及其相关基因表达的影响
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作者 陈华 何振平 +1 位作者 马宽生 杨忠 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第7期598-600,共3页
目的 探讨生长抑素类似物SMS2 0 1 995抑制人胆管癌增殖时对SK ChA 1细胞细胞周期及cyclinD1 和p16蛋白的影响。方法 采用血清饥饿法将SK ChA 1细胞同步化 ,同步化释放后SMS2 0 1 995处理 48h收取不同时相细胞 ,以流式细胞仪 (flowcyt... 目的 探讨生长抑素类似物SMS2 0 1 995抑制人胆管癌增殖时对SK ChA 1细胞细胞周期及cyclinD1 和p16蛋白的影响。方法 采用血清饥饿法将SK ChA 1细胞同步化 ,同步化释放后SMS2 0 1 995处理 48h收取不同时相细胞 ,以流式细胞仪 (flowcytometer)分析细胞周期相分布 ;并同时用免疫组化和原位杂交检测cyclinD1 和p16基因表达水平。结果 SMS处理SK ChA 1细胞后 6、12h可抑制SK ChA 1细胞经血刺激由G0 G1 进入S期。CyclinD1 蛋白表达在SMS处理SK ChA 1细胞后 6h明显减弱。p16蛋白在细胞周期各时相呈稳定性低表达。SK ChA 1细胞cyclinD1 和p16mRNA各时相表达无明显变化。结论 SMS诱导的cyclinD1 蛋白量降低可能与SMS干扰细胞G1 S期转换 ,阻遏SK ChA 展开更多
关键词 生长抑素 人胆管癌SK-ChA-1细胞 细胞周期 基因表达
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