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L-精氨酸对人肾系膜细胞胞外基质产生的影响 被引量：1
1
作者 马坤岭 刘必成 +2 位作者 叶银英 刘乃丰 阮雄中 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期469-472,共4页
目的 :探讨L -精氨酸 (L -arg)对人肾系膜细胞胞外基质产生的影响及其作用机制。方法 :运用放射免疫分析技术及羟 -脯氨酸比色法分别检测L -arg作用后系膜细胞上清液中Ⅲ型前胶原与总胶原含量 ;运用RT-PCR技术检测L -arg对人肾系膜细胞... 目的 :探讨L -精氨酸 (L -arg)对人肾系膜细胞胞外基质产生的影响及其作用机制。方法 :运用放射免疫分析技术及羟 -脯氨酸比色法分别检测L -arg作用后系膜细胞上清液中Ⅲ型前胶原与总胶原含量 ;运用RT-PCR技术检测L -arg对人肾系膜细胞Ⅳ型胶原基因表达的影响。结果 :L -arg抑制Ⅲ型前胶原产生 ,抑制总胶原分泌 ,并抑制Ⅳ型胶原基因表达。结论 :L -arg抑制人肾系膜细胞胞外基质产生 。 展开更多
关键词 L-精氨酸 人肾系膜细胞胞外基质 影响 肾小球膜 胶原
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槐杞黄颗粒含药血清对高糖培养的肾小球系膜细胞增殖的影响及机制研究 被引量：1
2
作者 刘红 姜南 +1 位作者 邱文慧 薛雪 《世界科学技术-中医药现代化》 北大核心 2025年第3期815-822,共8页
目的 观察槐杞黄颗粒含药血清(以下简称HQH)对高糖培养的肾小球系膜细胞增殖的影响,并探讨其可能机制。方法 用HQH及生理盐水分别对SPF级雄性SD大鼠进行灌胃,制备HQH含药血清与正常血清。将HBZY-1细胞分为正常糖组,高糖组,高糖+低、中... 目的 观察槐杞黄颗粒含药血清(以下简称HQH)对高糖培养的肾小球系膜细胞增殖的影响,并探讨其可能机制。方法 用HQH及生理盐水分别对SPF级雄性SD大鼠进行灌胃,制备HQH含药血清与正常血清。将HBZY-1细胞分为正常糖组,高糖组,高糖+低、中、高浓度HQH含药血清组(HQH含药血清浓度分别为5%、10%、15%),CCK-8法检测各组细胞增殖率,筛选出有效浓度HQH含药血清用于后续实验;倒置光学显微镜下观察各组HBZY-1细胞形态并拍照;流式细胞仪检测各组细胞凋亡率;试剂盒检测各组细胞超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、过氧化氢酶(Catalase,CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(Glutathione peroxidase,GSH-Px)和丙二醛(Malondialdehyde,MDA)活性;Western blot检测各组细胞TLR4/NF-κB/NLRP3炎症通路相关蛋白的表达。结果 与高糖组相比,5%含药血清组细胞增殖率变化不明显,10%含药血清组和15%含药血清组细胞增殖率明显下降(P<0.05或P<0.01),因此,选择10%和15%浓度HQH含药血清作为后续实验用药处理组。对高糖环境下的HBZY-1细胞予以10%含药血清和15%含药血清干预后,与高糖组相比,10%含药血清组和15%含药血清组细胞增殖度降低,细胞凋亡比例逐渐增加,细胞SOD、CAT、GSH-Px活性升高(P<0.05或P<0.01),MDA水平降低(P<0.01),TLR4、NLRP3、p-NF-κB p65和p-IκBα蛋白表达明显下降(P<0.01)。结论 槐杞黄颗粒含药血清能够抑制高糖环境下HBZY-1细胞增殖并诱导其凋亡,其机制可能与抑制细胞氧化应激及TLR4/NF-κB/NLRP3介导的炎症信号通路有关。 展开更多
关键词 槐杞黄颗粒 肾小球系膜细胞 高糖 氧化应激 TLR4/NF-κB/NLRP3信号通路
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miR-27b-3p调控RUNX1对高糖诱导的肾小球系膜细胞增殖及炎症反应的影响
3
作者 韩晓静 布海霞 +2 位作者 王焕 徐可 何国斌 《医学研究与战创伤救治》 北大核心 2025年第3期231-237,共7页
目的探究miR-27b-3p对高糖诱导的肾小球系膜细胞增殖和炎症反应的作用及潜在机制。方法体外培养人肾小球系膜细胞,分为葡萄糖组(含5.6 mmol/L D-葡萄糖的培养基孵育48 h)、高糖组(含25 mmol/L D-葡萄糖的培养基孵育48 h)、miR-NC组(转染... 目的探究miR-27b-3p对高糖诱导的肾小球系膜细胞增殖和炎症反应的作用及潜在机制。方法体外培养人肾小球系膜细胞,分为葡萄糖组(含5.6 mmol/L D-葡萄糖的培养基孵育48 h)、高糖组(含25 mmol/L D-葡萄糖的培养基孵育48 h)、miR-NC组(转染miR-NC)、miR-27b-3p组(转染miR-27b-3p mimics)、miR-27b-3p+pc-NC组(共转染miR-27b-3p mimics和pcD NA3.1-NC)、miR-27b-3p+pc-RUNX1组(共转染miR-27b-3p mimics和pcD NA3.1-RUNX1)。采用qR T-PCR检测miR-27b-3p和RUNX1mR NA表达;CCK-8法检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡;ELISA检测上清液炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-6和IL-1β水平;Western blot检测细胞中RUNX1、凋亡[剪切的多聚ADP核糖多聚酶(CleavedPARP)、剪切的半光天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved-caspase 3)]和纤维化[纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原蛋白(CollagenⅣ)、转化生长因子β_(1)(TGF-β_(1))]相关蛋白表达;双荧光素酶报告基因、Pulldown分析系膜细胞细胞中miR-27b-3p和RUNX1的调控作用。结果与葡萄糖组相比,高糖组细胞中miR-27b-3p表达水平、细胞凋亡率、Cleaved-PARP和Cleaved-caspase 3蛋白水平降低,细胞活力、细胞培养上清液TNF-α、IL-6和IL-1β水平、RUNX1 mR NA和蛋白表达、FN、CollagenⅣ、TGF-β_(1)蛋白水平升高(P<0.05);与miR-NC组相比,miR-27b-3p组miR-27b-3p表达水平、细胞凋亡率、Cleaved-PARP、Cleaved-caspase 3蛋白水平升高,细胞活力、细胞培养上清液TNF-α、IL-6和IL-1β水平、RUNX1mR NA和蛋白表达、FN、CollagenⅣ、TGF-β_(1)蛋白水平降低(P<0.05)。上调RUNX1表达部分削弱了miR-27b-3p过表达对高糖诱导的系膜细胞增殖和炎症反应的抑制作用。双荧光素酶报告基因、Pull-down实验证实RUNX1是miR-27b-3p的靶标。结论过表达miR-27b-3p可能通过靶向下调RUNX1表达,抑制高糖诱导的系膜细胞增殖、炎症和纤维化。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 肾小球系膜细胞 高糖 增殖 miR-27b-3p runt相关转录因子1
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糖肾宁抑制系膜增殖改善糖尿病肾病肾纤维化的作用机制
4
作者 卢聪 单晓萌 +3 位作者 王翠婷 朱智耀 邹大威 高彦彬 《世界中医药》 北大核心 2025年第10期1699-1704,1712,共7页
目的:基于Yes相关蛋白(YAP)/PDZ结合基序转录共激活因子(TAZ)探究糖肾宁抑制系膜增殖改善糖尿病肾病(DKD)肾纤维化的作用机制。方法:采用高脂饲料喂养KK-Ay小鼠建立DKD模型,将造模成功的KK-Ay小鼠随机分为模型组、糖肾宁组和缬沙坦组,C5... 目的:基于Yes相关蛋白(YAP)/PDZ结合基序转录共激活因子(TAZ)探究糖肾宁抑制系膜增殖改善糖尿病肾病(DKD)肾纤维化的作用机制。方法:采用高脂饲料喂养KK-Ay小鼠建立DKD模型,将造模成功的KK-Ay小鼠随机分为模型组、糖肾宁组和缬沙坦组,C57BL/6J小鼠作为空白组。连续给药10周后,检测小鼠体质量、血糖、血尿素氮(BUN)、血肌酐(Scr)、尿微量白蛋白/肌酐(UAER);采用苏木精-伊红(HE)、过碘酸-雪夫(PAS)、马松(MASSON)染色观察肾脏组织病理情况;电镜观察肾小球超微结构。蛋白质印迹法(WB)检测肾组织中YAP、TAZ、转录增强关联域转录因子1(TEAD1)、结缔组织生长因子(CTGF)、Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)蛋白表达水平。免疫组化检测肾组织中纤连蛋白(FN)、层粘连蛋白(LN)表达。结果:与模型组比较,糖肾宁组体质量、血糖无明显变化,BUN、Scr明显下降;UAER在治疗后明显下降(P<0.05);肾组织中YAP、TAZ、TEAD1、CTGF、Col-Ⅳ蛋白表达水平显著降低(P<0.05);肾组织中FN、LN表达减少;肾小球系膜基质、系膜增殖、糖原沉积和胶原沉积减少;肾小球基底膜增厚、足突融合、系膜区细胞外基质增生减轻。结论:糖肾宁可能通过抑制YAP/TAZ通路抑制系膜增殖和细胞外基质增生,改善糖尿病肾病肾纤维化。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 糖肾宁 细胞外基质增生 肾纤维化 系膜增殖 Yes相关蛋白/PDZ结合基序转录共激活因子 KK-AY小鼠
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甘草酸对高糖诱导的肾小球系膜细胞炎性因子及纤维化因子的影响 被引量：1
5
作者 李媛 王珍 +1 位作者 曹雪 侯绍章 《解放军医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2024年第2期214-219,共6页
目的探讨甘草酸(GA)对高糖诱导的肾小球系膜细胞(SV40 MES13)炎性因子及纤维化因子的影响。方法将培养的小鼠肾小球系膜细胞(SV40 MES13)分为对照(NG)组(5.6 mmol/L葡萄糖)、高糖(HG)组(30 mmol/L葡萄糖)及HG+GA组(30 mmol/L葡萄糖+200... 目的探讨甘草酸(GA)对高糖诱导的肾小球系膜细胞(SV40 MES13)炎性因子及纤维化因子的影响。方法将培养的小鼠肾小球系膜细胞(SV40 MES13)分为对照(NG)组(5.6 mmol/L葡萄糖)、高糖(HG)组(30 mmol/L葡萄糖)及HG+GA组(30 mmol/L葡萄糖+200μmol/L GA)。采用Western blotting检测各组细胞炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、IL-6、IL-8及纤维化因子α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)蛋白表达水平,免疫荧光检测各组IL-1β、TNF-α、α-SMA在细胞内的荧光表达强度,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测各组细胞培养上清中IL-1β、TNF-α、IL-6及IL-8的表达水平。结果Western blotting检测结果显示,与NG组比较,HG组IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8及α-SMA蛋白的表达水平明显升高(P<0.01);与HG组比较,HG+GA组IL-1β、TNF-α、IL-6、IL-8和α-SMA蛋白表达量降低(P<0.05)。细胞免疫荧光结果显示,与NG组比较,HG组细胞内IL-1β、TNF-α和α-SMA因子的荧光强度明显增强(P<0.05);与HG组相比,HG+GA组细胞内IL-1β、TNF-α和α-SMA因子荧光强度明显降低(P<0.05)。ELISA检测结果显示,与NG组比较,HG组细胞培养上清中IL-1β、IL-6、TNF-α和IL-8蛋白表达水平升高(P<0.01);与HG组比较,HG+GA组IL-1β、IL-6、TNF-α、IL-8表达水平明显降低(P<0.05)。结论甘草酸对高糖诱导的肾小球系膜细胞的炎性因子及纤维化因子的表达均具有不同程度的抑制作用,可能在糖尿病肾病的预防方面发挥重要作用。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 高糖 甘草酸 肾小球系膜细胞 炎性因子 纤维化
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黄芪甲苷与苄达赖氨酸合用对抑制大鼠肾系膜细胞外基质增生的增强作用 被引量：8
6
作者 印晓星 张银娣 +2 位作者 余俊先 沈建平 邱俊 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第10期1237-1241,共5页
目的在大鼠肾系膜细胞上观察黄芪甲苷与苄达赖氨酸合用对细胞外基质(ECM)的影响并探讨其机制。方法大鼠系膜细胞在含不同药物的培养液中孵育后,放免法测定Ⅳ型胶原和层粘蛋白含量;以流式细胞仪测定细胞周期;RT-PCR法测定肾皮质TGFβ-1 m... 目的在大鼠肾系膜细胞上观察黄芪甲苷与苄达赖氨酸合用对细胞外基质(ECM)的影响并探讨其机制。方法大鼠系膜细胞在含不同药物的培养液中孵育后,放免法测定Ⅳ型胶原和层粘蛋白含量;以流式细胞仪测定细胞周期;RT-PCR法测定肾皮质TGFβ-1 mRNA的相对含量;比色法测定各抗氧化指标。结果高剂量ASI与高剂量BDL合用组(AH+BH组)和低剂量ASI与低剂量BDL合用组(AL+BL组)的Ⅳ型胶原和转化生长因子(TGFβ-1)mRNA相对含量较高糖组降低,高剂量ASI组(AH组)和高剂量BDL组(BH组)分别与AH+BH组相比差异都有显著性。AH+BH组和AL+BL组的S期细胞比例分别有不同程度的升高,与单用ASI组和单用BDL组相当。AH组和BH组的总抗氧化能力(T-AOC)水平和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活性分别与AH+BH组相比差异有显著性。结论合用ASI和BDL可增强它们的降低TGFβ-1水平、抑制Ⅳ型胶原生长和抗氧化的作用;从而增强了对高糖引起的ECM增生的抑制作用。 展开更多
关键词 黄芪甲苷 苄达赖氨酸 大鼠肾系膜细胞 细胞外基质
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红参发酵产物对高糖下大鼠肾小球系膜细胞增殖和细胞外基质降解的影响 被引量：8
7
作者 曲萌 董佳婧 +4 位作者 姜锐 崔继春 孙坤洋 董志恒 孙立伟 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第2期245-249,共5页
目的:探讨红参发酵产物(FRGE)对高糖刺激下大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)增殖和细胞外基质(ECM)降解的影响,阐明FRGE对糖尿病肾病(DN)的防治作用及可能机制。方法:将GMCs分为正常对照(NG)组、高糖(HG)组、高糖+不同浓度(3.75、7.50和15.00 m... 目的:探讨红参发酵产物(FRGE)对高糖刺激下大鼠肾小球系膜细胞(GMCs)增殖和细胞外基质(ECM)降解的影响,阐明FRGE对糖尿病肾病(DN)的防治作用及可能机制。方法:将GMCs分为正常对照(NG)组、高糖(HG)组、高糖+不同浓度(3.75、7.50和15.00 mg·L^(-1))FRGE组。四甲基偶氮唑盐(MTT)光吸收法观察各组GMCs的增殖率,酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养细胞上清中Ⅳ型胶原蛋白(ColⅣ)的水平,蛋白免疫印迹技术(Western blotting)检测基质金属蛋白酶2(MMP-2)和基质金属蛋白酶组织抑制物2(TIMP-2)蛋白表达水平。结果:与NG组比较,HG组GMCs增殖率升高(P<0.01),ColⅣ水平升高(P<0.01),TIMP-2蛋白表达水平上调(P<0.01),MMP-2蛋白表达水平下调(P<0.01);与HG组比较,高糖+不同浓度FRGE组GMCs增殖率均降低(P<0.01),ColⅣ水平降低(P<0.01),TIMP-2蛋白表达水平下调(P<0.01),MMP-2蛋白表达水平上调(P<0.01)。结论:FRGE可通过抑制高糖诱导的大鼠GMCs增殖,促进ECM的降解,延缓DN的发生发展。 展开更多
关键词 红参发酵产物 糖尿病肾病 肾小球系膜细胞 细胞增殖 基质金属蛋白酶
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鳖甲煎丸对人肾小球系膜细胞增殖及细胞外基质表达的影响 被引量：11
8
作者 范焕芳 陈志强 +3 位作者 张雪娟 张秀君 徐华洲 黄茂 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2007年第2期183-186,共4页
目的:探讨鳖甲煎丸对人肾小球系膜细胞(HMC)增殖及细胞外基质(ECM)不同成分的抑制作用。方法:应用细胞培养技术,进行人HMC培养,采取血清药理学方法,制备鳖甲煎丸药物血清,利用脂多糖(LPS)为刺激因子,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组... 目的:探讨鳖甲煎丸对人肾小球系膜细胞(HMC)增殖及细胞外基质(ECM)不同成分的抑制作用。方法:应用细胞培养技术,进行人HMC培养,采取血清药理学方法,制备鳖甲煎丸药物血清,利用脂多糖(LPS)为刺激因子,应用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测各组系膜细胞的增殖情况,并采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法检测ECM中层黏连蛋白(LN)和Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)的含量。结果:LPS刺激后MC增殖和系膜基质中LN及Col-Ⅳ的分泌增多,与空白组比较有明显差异(P<0.01)。鳖甲煎丸能抑制正常条件及LPS刺激条件下MC增殖,并对ECM中LN、Col-Ⅳ的表达有抑制作用。结论:鳖甲煎丸能够抑制系膜细胞的增殖,抑制肾小球系膜基质中LN及Col-Ⅳ的表达,减少ECM的积聚,这可能是其防治肾小球疾病,延缓肾小球硬化的部分作用机制。 展开更多
关键词 鳖甲煎丸 增殖 层黏连蛋白 Ⅳ型胶原 人肾小球系膜细胞
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丹酚酸B对高糖诱导的肾小球系膜细胞表型转化及细胞外基质分泌的影响 被引量：10
9
作者 朱元美 尹步金 +4 位作者 张旭 唐保露 程宇鹏 杨解人 郑书国 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第2期248-252,共5页
目的:研究丹酚酸对高糖诱导的肾小球系膜细胞表型转化及细胞外基质分泌的影响及其机制。方法:培养人肾小球系膜细胞(HGMCs),随机分为正常对照组、高糖组及高糖+丹酚酸B高、中、低剂量组,高糖组和丹酚酸B各组用含高浓度(33.3 mmol/L)葡... 目的:研究丹酚酸对高糖诱导的肾小球系膜细胞表型转化及细胞外基质分泌的影响及其机制。方法:培养人肾小球系膜细胞(HGMCs),随机分为正常对照组、高糖组及高糖+丹酚酸B高、中、低剂量组,高糖组和丹酚酸B各组用含高浓度(33.3 mmol/L)葡萄糖的培养基培养72 h,丹酚酸B各组同时加人相应浓度丹酚酸B共同孵育。Western blot法检测α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)的表达水平,ELISA法检测细胞Ⅰ型胶原(ColⅠ)、Ⅲ型胶原(ColⅢ)、纤维连接蛋白(FN)和层粘连蛋白(LN)的分泌水平,Western blot法检测转化生长因子β1(TGF-β1)的表达及Smad2和p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的磷酸化水平。结果:高糖孵育72 h后,肾小球系膜细胞α-SMA的蛋白表达水平明显升高,ColⅠ、ColⅢ、FN及LN蛋白的分泌水平显著增加(P <0.01),TGF-β1的表达及Smad2、p38 MAPK的磷酸化水平也明显升高(P <0.01);与丹酚酸B共同孵育可明显降低α-SMA蛋白的表达水平,ColⅠ、ColⅢ、FN和LN的分泌明显减少,TGF-β1的表达及Smad2、p38 MAPK的磷酸化水平显著下降(P <0.01或P <0.05)。结论:丹酚酸B可明显抑制高糖诱导的肾小球系膜细胞表型转化,减少ColⅠ和ColⅢ等细胞外基质分泌,其机制与抑制TGF-β1/Smad信号通路及p38 MAPK活化有关。 展开更多
关键词 丹酚酸B 糖尿病肾病 肾小球系膜细胞 表型转化 细胞外基质
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地骨皮活性成分对高糖致肾小球系膜细胞增殖及细胞外基质的影响 被引量：12
10
作者 周盈 皮文霞 +2 位作者 蔡宝昌 赵文望 黄浦俊 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期465-468,共4页
目的：观察地骨皮中有效成分对高糖刺激的肾小球系膜细胞的增殖以及细胞外基质分泌的影响，研究其对糖尿病肾病的保护机制。方法体外培养肾小球系膜细胞，分为高糖模型组（葡萄糖浓度为30 mmol／L），空白对照组（葡萄糖浓度为5．5 mmol... 目的：观察地骨皮中有效成分对高糖刺激的肾小球系膜细胞的增殖以及细胞外基质分泌的影响，研究其对糖尿病肾病的保护机制。方法体外培养肾小球系膜细胞，分为高糖模型组（葡萄糖浓度为30 mmol／L），空白对照组（葡萄糖浓度为5．5 mmol／L），甜菜碱、山奈酚5个浓度剂量组（0．01、0．1、1、10、100μmol／L），用 MTT 法观察系膜细胞增殖情况，ELISA 法观察细胞外基质分泌情况。结果与高糖模型组比较，不同剂量甜菜碱组和山奈酚组，对高糖致肾小球系膜细胞增殖有不同程度的抑制。甜菜碱、山奈酚均能抑制细胞外基质的分泌，与高糖模型组比较有显著性差异（P ＜0．05～0．01）。结论地骨皮中有效成分甜菜碱和山奈酚均具有抑制高糖刺激下系膜细胞增殖以及细胞外基质分泌的作用，推测地骨皮中有效成分具有治疗糖尿病肾病的作用。 展开更多
关键词 甜菜碱 山奈酚 肾小球系膜细胞 糖尿病肾病 地骨皮
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脂多糖诱导大鼠肾小球系膜细胞增殖和分泌细胞外基质的研究 被引量：4
11
作者 于力 郝志宏 +3 位作者 王丽娜 翁志媛 赵丹 张又祥 《中国全科医学》 CAS CSCD 2007年第18期1499-1501,共3页
目的观察脂多糖(LPS)对大鼠肾小球系膜细胞(GMC)增殖及分泌细胞外基质(ECM)的作用。方法建立体外培养的大鼠GMC,鉴定后用于实验。实验分为两组:对照组和LPS诱导组。甲基噻唑基四唑(MTT)比色法测定24h和48h两个时点两组系膜细胞的增殖情... 目的观察脂多糖(LPS)对大鼠肾小球系膜细胞(GMC)增殖及分泌细胞外基质(ECM)的作用。方法建立体外培养的大鼠GMC,鉴定后用于实验。实验分为两组:对照组和LPS诱导组。甲基噻唑基四唑(MTT)比色法测定24h和48h两个时点两组系膜细胞的增殖情况;ELISA法测定6h、12h和24h系膜细胞培养上清液中ECM蛋白含量;荧光半定量反转录PCR(RT-PCR)法检测ECM中层黏连蛋白(LN)β2 mRNA表达的变化。结果(1)LPS组和对照组GMC增殖情况间差别有显著性意义(P<0.05);(2)正常培养的大鼠GMC可分泌一定量的ECM,LPS组在各时点分泌ECM量与对照组间差别有显著性意义(P<0.01);(3)正常培养的大鼠GMC有微量LNβ2 mRNA表达,LPS组在各时点LNβ2 mRNA表达量与对照组间差别均有显著性意义(P<0.01)。结论从蛋白和 mRNA两个水平同时观察到ECM成分(如FN、LN和ColⅣ)的增加,说明在系膜增殖性肾炎中ECM明显增加并起主要作用。 展开更多
关键词 肾小球肾炎 膜增生性 细胞外基质 系膜细胞 脂多糖
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解聚复肾宁对大鼠肾小球系膜细胞增殖和细胞外基质分泌的影响 被引量：3
12
作者 李慧 曹文富 +1 位作者 汤为学 陈平 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2010年第6期918-921,共4页
目的:探讨解聚复肾宁(黄芪、地黄、黄连、丹参、姜黄、葛根等)(JJFSN)治疗早期糖尿病肾病(DN)的作用机制。方法:高糖诱导系膜细胞(MC)增殖以及细胞外基质(ECM)分泌,制备不同浓度JJFSN含药血清作用于体外培养的MC,用MTT法检测细胞增殖,... 目的:探讨解聚复肾宁(黄芪、地黄、黄连、丹参、姜黄、葛根等)(JJFSN)治疗早期糖尿病肾病(DN)的作用机制。方法:高糖诱导系膜细胞(MC)增殖以及细胞外基质(ECM)分泌,制备不同浓度JJFSN含药血清作用于体外培养的MC,用MTT法检测细胞增殖,放射免疫技术(RIA)检测细胞培养上清中Ⅳ型胶原(ColⅣ)及层黏连蛋白(Ln)的含量。结果:JJFSN含药血清可抑制高糖诱导的MC过度增殖(P<0.05),并且这种作用具有药物剂量和时间依赖关系。同时,JJFSN可逆转高糖对ColⅣ和Ln分泌的影响,降低MC培养上清中ColⅣ和Ln的含量(P<0.05),并且这种作用随着JJFSN剂量的增加而增强。结论:JJFSN抑制高糖诱导的MC过度增殖并减少ECM的过量分泌,可能是其防治DN早期的作用机制。 展开更多
关键词 解聚复肾宁 肾小球系膜细胞 糖尿病肾病 细胞外基质
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降糖通脉片对人肾小球系膜细胞外基质影响的拆方研究 被引量：1
13
作者 郭立中 金妙文 +4 位作者 周仲瑛 尹振祥 林美平 刘彩香 张灿伟 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 2008年第1期34-36,共3页
目的探讨降糖通脉片中清化瘀热与滋阴补气两法不同组成部分对人肾小球系膜细胞外基质(ECM)的影响。方法采用体外培养的人肾小球系膜细胞技术和血清药理学方法,观察降糖通脉片清化瘀热与滋阴补气不同组分对ECM的影响。结果降糖通脉片中... 目的探讨降糖通脉片中清化瘀热与滋阴补气两法不同组成部分对人肾小球系膜细胞外基质(ECM)的影响。方法采用体外培养的人肾小球系膜细胞技术和血清药理学方法,观察降糖通脉片清化瘀热与滋阴补气不同组分对ECM的影响。结果降糖通脉片中清化瘀热及滋阴补气两法均具有抑制ECM成分中纤维连接蛋白(FN)、层粘连蛋白(LN)和Ⅳ型胶原(ColⅣ)含量的作用,但清化瘀热法的作用更为明显。结论清化瘀热法与滋阴补气法相比,前者在阻抑肾小球硬化方面发挥着更为重要的作用。 展开更多
关键词 降糖通脉片 系膜细胞 细胞外基质 拆方 肾小球
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TGF-β1调控Cdk5表达在人肾系膜细胞外基质沉积中的作用 被引量：2
14
作者 周毅 杨亚坤 +4 位作者 康平 柳丹 夏顺杰 张悦 刘巍 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第12期1688-1693,共6页
目的研究TGF-β1调控Cdk5表达在人肾系膜细胞外基质沉积中的作用。方法10μg·L^(-1)的TGF-β1刺激体外培养的人肾小球系膜细胞(HMC),检测其对系膜细胞Cdk5、p35/p25表达的影响;转染Cdk5过表达质粒,Western blot、免疫荧光检测胶原... 目的研究TGF-β1调控Cdk5表达在人肾系膜细胞外基质沉积中的作用。方法10μg·L^(-1)的TGF-β1刺激体外培养的人肾小球系膜细胞(HMC),检测其对系膜细胞Cdk5、p35/p25表达的影响;转染Cdk5过表达质粒,Western blot、免疫荧光检测胶原蛋白FN、CollagenⅣ表达的变化;应用Cdk5激酶活性抑制剂Roscovitine或转染Cdk5干扰质粒,Western blot、Real time-PCR、免疫荧光检测抑制Cdk5对TGF-β1刺激HMC后FN、CollagenⅣ蛋白及mRNA表达的影响。结果TGF-β1作用于HMC后,Cdk5、p35/p25蛋白及mRNA表达均呈时间依赖性增高;与正常对照组相比,转染Cdk5过表达质粒,FN、CollagenⅣ蛋白表达增加,FN(绿色荧光)、CollagenⅣ(红色荧光)增强;与TGF-β1刺激组相比,加用10μmol·L^(-1)的Roscovitine或转染Cdk5干扰质粒,FN、CollagenⅣ蛋白及mRNA表达均减少,FN(绿色荧光)、CollagenⅣ(红色荧光)减弱,而空质粒转染组没有明显变化。结论一定浓度的TGF-β1可诱导系膜细胞内Cdk5表达增加,抑制Cdk5可降低系膜细胞外基质沉积。 展开更多
关键词 TGF-Β1 CDK5 系膜细胞 肾纤维化 基质沉积 ROSCOVITINE
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血尿安片对IgA肾病大鼠肾小球系膜细胞增生的影响
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作者 佟彤 叶波 +2 位作者 郎睿 徐建龙 王洪霞 《世界中医药》 北大核心 2024年第22期3473-3478,共6页
目的:观察血尿安片对IgA肾病大鼠的治疗作用及对肾小球系膜细胞增生的影响。方法:30只斯泼累格·多雷(SD)大鼠数字表法随机分为对照组、模型组、中药组,建立免疫球蛋白A肾病(IgAN)模型,从第10周开始,中药组给予血尿安片灌胃,对照组... 目的:观察血尿安片对IgA肾病大鼠的治疗作用及对肾小球系膜细胞增生的影响。方法:30只斯泼累格·多雷(SD)大鼠数字表法随机分为对照组、模型组、中药组,建立免疫球蛋白A肾病(IgAN)模型,从第10周开始,中药组给予血尿安片灌胃,对照组和模型组以等量生理盐水灌胃,检测各组大鼠第10周、11周、12周末24 h尿蛋白定量,第12周末检测各组大鼠的尿肌酐、血肌酐,计算肌酐清除率。取肾组织观察病理变化,免疫荧光检测免疫球蛋白A(IgA);免疫组化检测肾小球系膜细胞增殖核抗原(PCNA)表达。结果:与模型组比较,血尿安片组大鼠24 h蛋白尿定量明显降低,肾小球肌酐清除率增多,肾组织损伤减轻,免疫荧光IgA数量及亮度均减低,肾小球内PCNA表达减少。结论:血尿安片能够降低IgAN大鼠的24 h蛋白定量,延缓肾功能下降,减轻肾脏病理损伤,机制或与抑制系膜细胞增殖有关。 展开更多
关键词 IGA肾病 血尿安片 滋阴益肾 24 h蛋白定量 肌酐清除率 肾脏病理 肾小球系膜细胞增殖核抗原 荧光染色
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普伐他汀对高糖培养肾小球系膜细胞细胞外基质产生和氧化应激的影响
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作者 倪连松 金洁娜 +1 位作者 郑景晨 沈飞霞 《中国药理学与毒理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第6期425-430,共6页
目的探讨普伐他汀对糖尿病肾病的保护机制。方法大鼠肾小球系膜细胞分别用正常浓度葡萄糖(5.5 mmo.lL-1),高浓度葡萄糖(25 mmo.lL-1)及葡萄糖25 mmo.lL-1+普伐他汀100μmo.lL-1培养。用CCK-8试剂盒测定细胞增殖,比色法检测培养液中超氧... 目的探讨普伐他汀对糖尿病肾病的保护机制。方法大鼠肾小球系膜细胞分别用正常浓度葡萄糖(5.5 mmo.lL-1),高浓度葡萄糖(25 mmo.lL-1)及葡萄糖25 mmo.lL-1+普伐他汀100μmo.lL-1培养。用CCK-8试剂盒测定细胞增殖,比色法检测培养液中超氧化物歧化酶(SOD)活性、谷胱甘肽(GSH)和丙二醛(MDA)含量。ELISA法检测培养上清液Ⅳ型胶原(ColⅣ-)、纤连蛋白(FN)、转化生长因子β1(TGFβ-1)和基质金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP-1)含量;明胶酶谱法检测培养上清明胶酶A及B的活性。结果与对照组比较,高糖组肾小球系膜细胞增殖增加,基质蛋白ColⅣ-和FN合成增多,明胶酶A及B活性下降,TIMP-1含量和TGFβ-1分泌增加,总SOD活性和Cu,Zn-SOD活性下降,GSH含量下降,MDA含量增加。与高糖组比较,普伐他汀干预后可逆转上述变化。结论普伐他汀可抑制高糖培养的肾小球系膜细胞增殖,减少胞外基质合成,增加胞外基质降解,并缓解高糖诱导的氧化应激。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 氧化性应激 普伐他汀 肾小球系膜细胞
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福辛普利对大鼠肾小球系膜细胞β_1整合素表达及细胞外基质分泌的影响
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作者 郝志宏 于力 +2 位作者 王丽娜 温捷 张瑶 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期362-366,共5页
目的观察福辛普利(fosinopril,FOS)对脂多糖(LPS)诱导的大鼠肾小球系膜细胞(GMC)β1整合素表达及分泌细胞外基质(ECM)的影响。方法大鼠GMC原代体外培养,鉴定3～10代后用于实验。实验分为5组:对照组、LPS刺激组(LPS)、FOS高、中、低剂量... 目的观察福辛普利(fosinopril,FOS)对脂多糖(LPS)诱导的大鼠肾小球系膜细胞(GMC)β1整合素表达及分泌细胞外基质(ECM)的影响。方法大鼠GMC原代体外培养,鉴定3～10代后用于实验。实验分为5组:对照组、LPS刺激组(LPS)、FOS高、中、低剂量组(分别为FOS1组、FOS2组、FOS3组)。酶联免疫吸附试验(ELISA)测定6、12和24 h细胞培养上清液中ECM层黏连蛋白(LN),纤维连接蛋白(FN)和Ⅳ型胶原蛋白(ColⅣ)含量;荧光半定量RT-PCR检测β1整合素mRNA表达。结果体外培养的大鼠GMC可分泌一定量的ECM,在各时间点,LPS组GMC的ECM分泌均高于对照组(P<0.01),而FOS各组GMC的ECM分泌均低于LPS组(P<0.01);体外培养的大鼠GMC可表达一定量的β1整合素mRNA,在各时间点,LPS组GMC的β1整合素mRNA表达量均高于对照组,FOS各组GMC的β1整合素mRNA表达量均低于LPS组。结论 LPS可诱导大鼠GMCβ1整合素表达及ECM分泌增加,而FOS可抑制LPS诱导的大鼠GMCβ1整合素表达及ECM分泌增加,FOS可以通过抑制细胞因子及ECM分泌等非血流动力学机制对肾脏起保护作用。 展开更多
关键词 细胞外基质 肾小球系膜细胞 福辛普利 Β1整合素 大鼠
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罗格列酮对高糖培养肾小球系膜细胞胞外基质产生及降解的影响
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作者 倪连松 金洁娜 +1 位作者 郑景晨 沈飞霞 《中国临床药理学与治疗学》 CAS CSCD 2008年第10期1144-1148,共5页
目的:探讨罗格列酮(rosiglitazone maleate)对糖尿病肾病的保护机制。方法:大鼠肾小球系膜细胞分别培养在正常糖浓度(5.5mmol/L),高糖浓度(25mmol/L)及25mmol/L葡萄糖+20μmol/L罗格列酮的培养液中。CCK-8测定系膜细胞增殖;ELISA法检测... 目的:探讨罗格列酮(rosiglitazone maleate)对糖尿病肾病的保护机制。方法:大鼠肾小球系膜细胞分别培养在正常糖浓度(5.5mmol/L),高糖浓度(25mmol/L)及25mmol/L葡萄糖+20μmol/L罗格列酮的培养液中。CCK-8测定系膜细胞增殖;ELISA法检测培养上清液Ⅳ型胶原(Col-Ⅳ)、纤维连接蛋白(FN)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1);明胶酶谱法检测培养上清液基质金属蛋白酶-2,9(MMP-2,9)的活性。结果:高糖组系膜细胞较正常对照组出现增殖增加,合成基质蛋白Col-Ⅳ、FN增多;MMP-2及MMP-9活性下降;TIMP-1含量增加;TGF-β1分泌增加。与高糖组比较,罗格列酮干预后能逆转上述变化。结论:罗格列酮能抑制高糖培养的系膜细胞增殖,减少胞外基质合成,增加胞外基质的降解。 展开更多
关键词 糖尿病肾病 罗格列酮 肾小球系膜细胞
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沉默血小板反应蛋白-1基因对亚溶解型C5b-9诱导肾小球系膜细胞分泌细胞外基质的影响
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作者 邱文 李妍 +2 位作者 周建博 赵聃 王迎伟 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期29-34,47,共7页
目的研究沉默血小板反应蛋白-1(thrombospondin-1,TSP-1)基因对于亚溶解型(sublytic)C5b-9复合物诱导大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)分泌细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的影响。方法设计合成针对TSP-1基因4... 目的研究沉默血小板反应蛋白-1(thrombospondin-1,TSP-1)基因对于亚溶解型(sublytic)C5b-9复合物诱导大鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cell,GMC)分泌细胞外基质(extracellular matrix,ECM)的影响。方法设计合成针对TSP-1基因4个靶点的小发夹RNA(small hair RNA,shRNA),并构建相应的表达质粒,筛选沉默效率最佳的TSP-1shRNA(shTSP-1)后,将shTSP-1转染体外培养的大鼠GMC,再给予sublytic C5b-9刺激。以Westernblot检查TSP-1、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)及Ⅳ型胶原蛋白(collagenⅣ)的表达情况。另用ELISA法测定培养上清中总转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)和活化TGF-β1的含量。结果核酸序列分析证明,4种TSP-1shRNA重组质粒均构建成功。Western blot实验证实,构建的shTSP-1-3(Thbs1-3)具有最佳的沉默效率。将shTSP-1-3转染大鼠GMC后,在沉默TSP-1基因表达的同时,能明显抑制由sublytic C5b-9诱导的TGF-β1活化及细胞外基质(FN和collagenⅣ)的合成。结论 TSP-1基因表达在sublytic C5b-9刺激大鼠GMC诱导TGF-β1活化及ECM分泌的过程中,发挥了重要的促进作用。 展开更多
关键词 肾小球系膜细胞 亚溶解型C5b-9复合物 血小板反应蛋白-1 细胞外基质 小发夹RNA
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外源性硫化氢对肾小球系膜细胞缺氧/复氧损伤的影响及其机制
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作者 林真亭 田华 李鸿珠 《中国药理学通报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第1期133-138,共6页
目的探讨外源性硫化氢(hydrogen sulfide,H_(2)S)对肾小球系膜细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤的影响,并阐明其相关作用机制。方法H/R诱导小鼠肾小球系膜细胞系(SV40MES13)建立细胞损伤模型。细胞增殖试剂盒(CCK8)检测细... 目的探讨外源性硫化氢(hydrogen sulfide,H_(2)S)对肾小球系膜细胞缺氧/复氧(hypoxia/reoxygenation,H/R)损伤的影响,并阐明其相关作用机制。方法H/R诱导小鼠肾小球系膜细胞系(SV40MES13)建立细胞损伤模型。细胞增殖试剂盒(CCK8)检测细胞活力,荧光探针技术分别检测H_(2)S和活性氧(ROS)含量,生化试剂盒检测超氧化物歧化酶(SOD)活性和丙二醛(MDA)含量,Hoechst 33342染色检测细胞凋亡率;Western blot检测胱硫醚-γ-裂解酶(cystathione-gamma-lyase,CSE)、细胞凋亡相关蛋白(cleaved-caspase-3、Cyt c和Bcl-2)表达及信号通路相关蛋白(ERK1/2、Phospho-ERK1/2)活性。结果与对照(Control)组相比,缺氧/复氧(H/R)组细胞活力、内源性H_(2)S含量CSE蛋白表达、SOD活性及Bcl-2蛋白表达均明显降低;细胞凋亡率、MDA和ROS含量、Cyt c及cleaved caspase-3蛋白表达均显著升高;同时,磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)活性明显降低。与H/R比较,H/R+NaHS(外源性H_(2)S供体)逆转了H/R对上述指标的影响。另外,PD98059(ERK1/2抑制剂)减弱了NaHS对磷酸化ERK1/2的作用。结论肾小球系膜细胞H/R损伤与内源性CSE/H_(2)S系统下调有关;外源性H_(2)S通过上调ERK1/2通路抑制氧化应激和细胞凋亡,减轻肾小球系膜细胞H/R损伤。 展开更多
关键词 硫化氢 缺氧/复氧 肾小球系膜细胞 ERK1/2通路 细胞凋亡 CSE/H_(2)S系统
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