期刊文献+
任意字段
题名或关键词
题名
关键词
文摘
作者
第一作者
机构
刊名
分类号
参考文献
作者简介
基金资助
栏目信息
共找到468篇文章
< 1 2 … 24 >
每页显示 20 50 100
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
显示方式：
基于Keap1-Nrf2-ARE通路探讨补肺益阳化痰方对烟草烟雾诱导的人支气管上皮细胞氧化应激损伤的影响
1
作者 卢丽君 喻媛媛 郑洋 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第9期2214-2219,2225,共7页
目的:探讨补肺益阳化痰方对烟草烟雾(CS)诱导的人支气管上皮细胞氧化应激损伤及Keap1-Nrf2-ARE通路的影响。方法:构建CS诱导的人支气管上皮细胞以及补肺益阳化痰方含药血清,将细胞分为对照组(Control组)、模型组(CS组)、CS+补肺益阳化... 目的:探讨补肺益阳化痰方对烟草烟雾(CS)诱导的人支气管上皮细胞氧化应激损伤及Keap1-Nrf2-ARE通路的影响。方法:构建CS诱导的人支气管上皮细胞以及补肺益阳化痰方含药血清,将细胞分为对照组(Control组)、模型组(CS组)、CS+补肺益阳化痰方含药血清低、中、高剂量组(CS+BFYYHTF-L、CS+BFYYHTF-M、CS+BFYYHTF-H组)、CS+补肺益阳化痰方含药血清高+Nrf2抑制剂组(CS+BFYYHTF-H+ML385组);CCK-8检测细胞活性;DCFH-DA探针检测ROS含量;ELISA检测上清炎症因子及氧化应激水平;流式细胞术检测细胞凋亡;Western blot检测细胞凋亡及Keap1-Nrf2-ARE通路相关蛋白表达。结果:CS组较Control组ROS、MDA、TNF-α、IL-6、IL-1β水平及细胞凋亡率、C-caspase3、C-caspase9、Keap1表达升高,SOD、GSH-Px活性及Nrf2、HO-1表达降低(P<0.05);CS+BFYYHTF-L、CS+BFYYHTF-M、CS+BFYYHTF-H组较CS组ROS、MDA、TNF-α、IL-6、IL-1β水平及细胞凋亡率、C-caspase3、C-caspase9、Keap1表达降低,SOD、GSH-Px活性及Nrf2、HO-1表达升高(P<0.05);CS+BFYYHTF-H+ML385组较CS+BFYYHTF-H组ROS、MDA、TNF-α、IL-6、IL-1β水平及细胞凋亡率、C-caspase3、C-caspase9、Keap1表达升高,SOD、GSH-Px活性及Nrf2、HO-1表达降低(P<0.05)。结论:补肺益阳化痰方可改善CS诱导的人支气管上皮细胞氧化应激损伤,与抑制Keap1-Nrf2-ARE通路相关。 展开更多
关键词 Keap1-Nrf2-ARE通路 补肺益阳化痰方 烟草烟雾 人支气管上皮细胞 氧化应激损伤
在线阅读 下载PDF
β-榄香烯对非小细胞肺癌A549细胞线粒体结构和功能的影响
2
作者 锁惠琴 景晨旭 +6 位作者 赵景明 李驰坤 丁云录 初洪波 成光宇 李庆杰 靳宏光 《吉林大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第5期1204-1210,共7页
目的:探讨β-榄香烯对非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞线粒体结构及功能的影响,并阐明其治疗NSCLC的作用机制。方法:将对数生长期的A549细胞分为空白对照组(0 mg·L^(-1)β-榄香烯),低、中和高剂量β-榄香烯组(10、25和50 mg·L^(... 目的:探讨β-榄香烯对非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞线粒体结构及功能的影响,并阐明其治疗NSCLC的作用机制。方法:将对数生长期的A549细胞分为空白对照组(0 mg·L^(-1)β-榄香烯),低、中和高剂量β-榄香烯组(10、25和50 mg·L^(-1)β-榄香烯)及溶剂对照组(等体积0.5%乙醇)。处理24 h后,采用MTT法检测各组的细胞活性,透射电镜观察各组细胞的线粒体形态表现,比色法检测各组细胞中三磷酸腺苷(ATP)水平,JC-1流式法检测各组细胞的线粒体膜电位,线粒体膜通透性转换孔实验检测各组细胞的线粒体膜通透性。结果:MTT法,与空白对照组比较,低、中和高剂量β-榄香烯组A549细胞活性逐渐降低(P<0.05);溶剂对照组A549细胞活性无明显变化,差异无统计学意义(P<0.05)。透射电镜法,与空白对照组比较,低、中和高剂量β-榄香烯组A549细胞的线粒体出现肿胀、空泡化、峪排列紊乱和溶解等现象;溶剂对照组A549细胞的线粒体形态无明显变化。比色法,与空白对照组比较,低、中和高剂量β-榄香烯组A549细胞中ATP水平逐渐降低(P<0.05);溶剂对照组A549细胞中ATP水平无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05)。JC-1流式法,与空白对照组比较,低、中和高剂量β-榄香烯组A549细胞的线粒体膜电位降低,Q2-4区域细胞百分率升高(P<0.05);溶剂对照组的A549细胞线粒体膜电位与Q2-4区域细胞百分率无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05)。线粒体膜通透性转换孔实验法,与空白对照组比较,低、中、高剂量β-榄香烯组A549细胞线粒体膜通透性增加,各组M4区域细胞百分率升高(P<0.05);溶剂对照组A549细胞的线粒体膜通透性和M4区域细胞百分率均无明显变化,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:β-榄香烯能够抑制A549细胞的增殖,其作用机制可能是通过降低A549细胞中ATP水平和线粒体膜电位、改变细胞线粒体形态以及增加线粒体膜通透性而破坏A549细胞线粒体结构,引起线粒体功能损伤。 展开更多
关键词 Β-榄香烯 癌 非小细胞肺 a549细胞 细胞活性 线粒体 膜电位
在线阅读 下载PDF
葛根素对肺腺癌A549细胞增殖和TOPK活性的抑制作用
3
作者 连艳珍 庄春波 +1 位作者 张文静 邵明伟 《郑州大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第5期628-631,共4页
目的:研究葛根素对肺腺癌A549细胞增殖的影响及可能机制。方法:采用微尺度热泳实验检测葛根素与TOPK的结合情况;体外激酶实验检测葛根素对TOPK活力的影响。采用MTT法检测0、25、50、100、200μmol/L葛根素处理24 h A549细胞活力,软琼脂... 目的:研究葛根素对肺腺癌A549细胞增殖的影响及可能机制。方法:采用微尺度热泳实验检测葛根素与TOPK的结合情况;体外激酶实验检测葛根素对TOPK活力的影响。采用MTT法检测0、25、50、100、200μmol/L葛根素处理24 h A549细胞活力,软琼脂克隆形成实验检测0、25、50、100μmol/L葛根素处理A549细胞后14 d克隆形成数。Western blot法检测细胞TOPK、Histones H3和ERK1/2的磷酸化水平。A549细胞分为2组,慢病毒感染shTOPK或shMock后,用100μmol/L葛根素处理24 h,同上方法检测细胞活力及细胞中TOPK、Histone H3、ERK1/2蛋白的磷酸化水平。结果:葛根素能结合TOPK并抑制其活性。随着葛根素浓度的增加,细胞活力减弱,克隆形成数减少,TOPK、Histone H3、ERK1/2蛋白磷酸化水平呈降低的趋势(P<0.05)。与shMock组相比,shTOPK组细胞活力下降,TOPK、Histone H3和ERK1/2蛋白磷酸化水平降低(P<0.05)。结论:葛根素可能通过直接靶向结合TOPK并抑制其活性,从而抑制A549细胞增殖。 展开更多
关键词 葛根素 TOPK a549细胞 裸鼠 肺腺癌 细胞增殖
在线阅读 下载PDF
调控NSUN2表达对肺腺癌A549细胞恶性生物学行为及YAP表达的影响
4
作者 邵爽 李睿 +2 位作者 孟玮 金丹 郭纪伟 《郑州大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第2期198-202,共5页
目的:探讨调控NOL1/NOP2/Sun域家族成员2(NSUN2)表达对肺腺癌细胞恶性生物学行为及YAP表达的影响。方法:将对数生长期的A549细胞分为4组,对照组采用Lipofectamine 3000转染pcDNA3.1+shNC,NSUN2组转染pcDNA3.1-NSUN2+shNC,shYAP组转染pcD... 目的:探讨调控NOL1/NOP2/Sun域家族成员2(NSUN2)表达对肺腺癌细胞恶性生物学行为及YAP表达的影响。方法:将对数生长期的A549细胞分为4组,对照组采用Lipofectamine 3000转染pcDNA3.1+shNC,NSUN2组转染pcDNA3.1-NSUN2+shNC,shYAP组转染pcDNA3.1+shYAP,NSUN2+shYAP组转染pcDNA3.1-NSUN2+shYAP。48 h后,CCK-8法检测细胞增殖能力,检测细胞克隆形成能力,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell小室法检测细胞侵袭能力,RT-PCR和Western blot法检测NSUN2、YAP、E-cadherin、Vimentin mRNA和蛋白的表达。采用RNA免疫沉淀和RNA Pulldown实验验证A549细胞中内源性NSUN2蛋白与YAP mRNA的相互作用。结果:上调NSUN2表达,细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力提高,E-cadherin表达降低,Vimentin表达升高(P<0.05);下调YAP表达,细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭能力降低,E-cadherin表达提高,Vimentin表达降低(P<0.05);两者具有拮抗作用(P<0.05)。结论:NSUN2通过上调YAP表达促进肺腺癌A549细胞的增殖、迁移、侵袭和上皮间质转化能力。 展开更多
关键词 NSUN2 YAP 肺腺癌 a549细胞
在线阅读 下载PDF
上皮细胞和巨噬细胞相互作用在肺部疾病中的研究进展
5
作者 李蒙雨 江伟 +2 位作者 张亚飞 潘欣 王媛媛 《中国临床药理学与治疗学》 北大核心 2025年第9期1253-1259,共7页
在肺部疾病发展过程中,肺部的上皮细胞与巨噬细胞的相互作用可发挥免疫防御、调节炎症、促进组织修复与再生等功能。当二者之间的相互作用失衡时,可导致多种肺病的发生。在特发性肺纤维化、慢性阻塞性肺病及肺癌中,受激活的上皮细胞可... 在肺部疾病发展过程中,肺部的上皮细胞与巨噬细胞的相互作用可发挥免疫防御、调节炎症、促进组织修复与再生等功能。当二者之间的相互作用失衡时,可导致多种肺病的发生。在特发性肺纤维化、慢性阻塞性肺病及肺癌中,受激活的上皮细胞可释放细胞因子招募并激活巨噬细胞聚集于病灶,巨噬细胞则可通过分泌细胞因子作用于上皮细胞,促进病程进展,形成正反馈循环。因此,深入探究上皮细胞与巨噬细胞在不同肺病中的相互作用,可为疾病治疗提供潜在靶点和新思路。本文拟对上皮细胞和巨噬细胞在特发性肺纤维化、慢性阻塞性肺病及肺癌中相互作用的机制与功能进行综述,以期为肺部疾病的治疗提供新的研究思路。 展开更多
关键词 上皮细胞 巨噬细胞 相互作用 特发性肺纤维化 慢性阻塞性肺病 肺癌
在线阅读 下载PDF
DUSP26通过抑制TGF-β1/SMAD信号通路抑制肺腺癌A549细胞增殖、迁移和侵袭
6
作者 罗锋珩 吴敏 +2 位作者 周珊 肖亚南 占志强 《中国肿瘤生物治疗杂志》 北大核心 2025年第7期738-745,共8页
目的:探究双特异性磷酸酶26(DUSP26)在肺腺癌(LUAD)A549细胞增殖、迁移和侵袭中的作用及其分子机制。方法:检索肿瘤数据库GEPIA2网站DUSP26表达数据,分析DUSP26在LUAD患者和正常人肺组织中的表达差异。收集2022年10月至2023年10月期间... 目的:探究双特异性磷酸酶26(DUSP26)在肺腺癌(LUAD)A549细胞增殖、迁移和侵袭中的作用及其分子机制。方法:检索肿瘤数据库GEPIA2网站DUSP26表达数据,分析DUSP26在LUAD患者和正常人肺组织中的表达差异。收集2022年10月至2023年10月期间萍乡市人民医院手术切除的12例LUAD组织和癌旁组织标本,通过免疫组织化学(IHC)和WB法检测DUSP26在LUAD组织和癌旁组织之间的表达差异;通过WB法检测DUSP26在4种LUAD细胞(A549、SK-LU-1、Calu-3、H1299)和2种正常支气管上皮细胞(BEAS-2B、HBEC)中的表达差异。利用慢病毒转染细胞的方法构建稳定过表达DUSP26(DUSP26-OE)及阴性对照(DUSP26-OENC)的A549细胞,通过克隆形成、划痕愈合实验、Transwell实验分别检测DUSP26过表达对细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响,WB法检测各组细胞中TGF-β1/SMAD2/3通路、EMT相关蛋白的表达水平,细胞免疫荧光法检测细胞中Ki-67、cyclin D1表达水平。加入TGF-β1重组蛋白进行回复实验。构建A549细胞裸鼠荷瘤模型,观察DUSP26过表达对移植瘤体内生长的影响,WB法检测移植瘤组织中TGF-β1/SMAD2/3通路、EMT相关蛋白表达水平,免疫荧光染色法检测移植瘤组织中Ki-67、cyclin D1表达水平。结果:DUSP26在LUAD组织和细胞中均呈低表达(P<0.05或P<0.01或P<0.001或P<0.0001)。与DUSP26-OENC组相比,DUSP26-OE组A549细胞的增殖、迁移和侵袭能力均显著降低(P<0.01或P<0.001),TGF-β1、p-SMAD2/3、vimentin、N-cadherin、snail、Ki-67、cyclin D1表达均降低(P<0.01或P<0.001或P<0.0001),E-cadherin表达升高(P<0.0001)。加入5 ng/mL TGF-β1重组蛋白后,可部分逆转在体外实验中由DUSP26过表达导致的结果。成功构建裸鼠A549细胞荷瘤模型,DUSP26-OE组裸鼠移植瘤生长速度缓慢,体积和质量均减小(均P<0.001),移植瘤组织中TGF-β1、p-SMAD2/3、vimentin、N-cadherin、snail、Ki-67、cyclin D1表达均降低(P<0.01或P<0.001),E-cadherin表达升高(P<0.0001)。结论:DUSP26在LUAD组织和细胞中均呈低表达状态,上调DUSP26的表达水平能够通过抑制TGF-β1/SMAD2/3信号通路抑制A549细胞的增殖、迁移和侵袭。 展开更多
关键词 双特异性磷酸酶26 肺腺癌 a549细胞 增殖 迁移 侵袭 TGF-β1/SMAD2/3信号通路
在线阅读 下载PDF
支气管肺发育不良发生机制中肺泡上皮细胞转分化关键信号通路的研究进展
7
作者 张梦玥 周建国 《复旦学报(医学版)》 北大核心 2025年第1期133-138,共6页
支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)是早产儿严重呼吸系统并发症,重症病例仍缺乏有效治疗手段。BPD是多因素疾病,发病机制主要包括肺泡简单化和肺微血管发育障碍。肺泡上皮细胞是肺泡的主要构成部分,包括肺泡Ⅰ型(alveol... 支气管肺发育不良(bronchopulmonary dysplasia,BPD)是早产儿严重呼吸系统并发症,重症病例仍缺乏有效治疗手段。BPD是多因素疾病,发病机制主要包括肺泡简单化和肺微血管发育障碍。肺泡上皮细胞是肺泡的主要构成部分,包括肺泡Ⅰ型(alveolar type 1,AT1)和肺泡Ⅱ型(alveolar type 2,AT2)细胞,其中AT1细胞参与气血屏障构建,发挥气体交换作用,AT2细胞具有增殖分化的干细胞特性,维持肺内环境稳态、修复肺损伤。肺损伤修复的核心是AT2细胞向AT1细胞的转分化,而激活转分化的信号转导机制尚未明确。本文通过文献检索和分类总结,探讨肺泡上皮细胞转分化的关键信号转导通路及研究进展,为阐述BPD发病机制及探索BPD新的治疗方案提供参考。 展开更多
关键词 肺泡上皮细胞 转分化 信号通路 支气管肺发育不良(BPD)
在线阅读 下载PDF
慢性阻塞性肺疾病的气道上皮细胞衰老机制研究进展
8
作者 栗兆靓 王略力 +5 位作者 仪倩 马若秋 郭蓉 徐长莉 杜晓华 杨为民 《中国药理学通报》 北大核心 2025年第5期805-810,共6页
气道上皮细胞(airway epithelial cells,AECs)是分隔呼吸系统内外环境之间的物理屏障,作为呼吸系统的第一道防线对肺部的天然免疫功能至关重要。小气道病变是慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)的重要早期病... 气道上皮细胞(airway epithelial cells,AECs)是分隔呼吸系统内外环境之间的物理屏障,作为呼吸系统的第一道防线对肺部的天然免疫功能至关重要。小气道病变是慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)的重要早期病理,当AECs长期暴露于有害颗粒或气体后,上皮屏障受损,参与分化、修复和促炎反应的信号通路异常,导致上皮细胞周期停滞从而加速衰老。研究发现,COPD患者的AECs表达高水平的衰老标志物,提示AECs衰老与COPD密切相关。该文讨论了COPD中AECs衰老的潜在机制,AECs衰老对疾病发展和严重程度的影响,并强调了调节AECs衰老作为COPD治疗方法的潜在靶点。 展开更多
关键词 慢性阻塞性肺疾病 气道上皮细胞 衰老 DNA损伤 表观遗传修饰 慢性炎症 氧化应激 线粒体自噬 衰老细胞治疗
在线阅读 下载PDF
去氧地胆草素通过诱导活性氧促进人非小细胞肺癌A549细胞凋亡
9
作者 潘莉 张银芳 +1 位作者 邱勇玉 柳金梅 《海军军医大学学报》 北大核心 2025年第1期129-134,共6页
目的探讨去氧地胆草素(Deo)对人非小细胞肺癌A549细胞中活性氧(ROS)调控细胞凋亡途径的影响。方法用不同浓度的Deo分别作用于A549细胞,通过CCK-8法检测细胞活力,2’,7’-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)染色检测细胞产生的ROS含量,Hoechst ... 目的探讨去氧地胆草素(Deo)对人非小细胞肺癌A549细胞中活性氧(ROS)调控细胞凋亡途径的影响。方法用不同浓度的Deo分别作用于A549细胞,通过CCK-8法检测细胞活力,2’,7’-二氯荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)染色检测细胞产生的ROS含量,Hoechst 33342染色检测细胞凋亡小体,流式细胞术检测细胞凋亡情况及线粒体膜电位,qPCR和蛋白质印迹法检测细胞凋亡相关蛋白表达。用A549细胞裸小鼠移植瘤模型评价Deo的体内抗肿瘤效果,通过H-E染色和TUNEL检测观察肿瘤组织坏死和细胞凋亡的变化。结果随着Deo浓度(1、2、4、8、16、32μmol/L)的增加,A549细胞活力呈现出递减趋势;10μmol/L Deo可提高A549细胞内的ROS含量,降低线粒体膜电位,促进细胞凋亡;10、20μmol/L Deo可促进A549细胞中Bax和caspase-3的mRNA及蛋白表达,而抑制Bcl-2的mRNA及蛋白表达;同时细胞质中细胞色素C表达明显增加。10、20 mg·kg^(-1)·d^(-1)Deo给药17 d后,裸小鼠移植瘤的体积和重量均被抑制,并且肿瘤组织中坏死面积和细胞凋亡指数增大。结论Deo能够诱导A549细胞产生ROS,激活线粒体凋亡通路,促进细胞凋亡。 展开更多
关键词 去氧地胆草素 肺肿瘤 a549细胞 活性氧 细胞凋亡
在线阅读 下载PDF
circVMA21靶向miR-497-5p/MUC1轴对LPS诱导的肺上皮细胞炎症因子表达和细胞凋亡的影响
10
作者 刘国元 刘宇花 杨旭芳 《中国免疫学杂志》 北大核心 2025年第2期342-350,共9页
目的:探究环状RNA VMA21(circVMA21)是否靶向miR-497-5p/黏蛋白(MUC1)影响LPS诱导的肺上皮细胞炎症因子表达和细胞凋亡。方法:肺上皮细胞A549分为Con组(对照)、LPS组(LPS损伤)、LPS+pcDNA组、LPS+pcDNA-circ VMA21组、LPS+anti-miR-NC组... 目的:探究环状RNA VMA21(circVMA21)是否靶向miR-497-5p/黏蛋白(MUC1)影响LPS诱导的肺上皮细胞炎症因子表达和细胞凋亡。方法:肺上皮细胞A549分为Con组(对照)、LPS组(LPS损伤)、LPS+pcDNA组、LPS+pcDNA-circ VMA21组、LPS+anti-miR-NC组、LPS+anti-miR-497-5p组、LPS+pcDNA-circVMA21+miR-NC组、LPS+pcDNA-circVMA21+miR-497-5p组。qRT-PCR测定circVMA21和miR-497-5p表达,ELISA测定炎症因子IL-6、IL-1β和TNF-α表达,流式细胞术测定细胞凋亡,Western blot测定MUC1、TLR4/NF-κB通路和凋亡相关cleaved-caspase3、cleaved-caspase9蛋白表达。双荧光素酶报告实验测定circVMA21与miR-497-5p、miR-497-5p与MUC1的靶向关系。结果:与Con组比较,LPS组肺上皮细胞中circVMA21、MUC1表达量减少,miR-497-5p表达量、IL-6、IL-1β、TNF-α表达水平、细胞凋亡率和凋亡蛋白cleaved-caspase3、cleaved-caspase9及TLR4、p-NF-κB p65/NF-κB p65表达增加(P<0.05)。与LPS+pcDNA组比较,LPS+pcDNA-circVMA21组肺上皮细胞中circVMA21、MUC1表达升高,IL-6、IL-1β、TNF-α表达水平、细胞凋亡率和蛋白cleaved-caspase3、cleaved-caspase9及TLR4、p-NF-κB p65/NF-κB p65表达降低(P<0.05)。circVMA21靶向调控miR-497-5p表达。与LPS+anti-miR-NC组比较,LPS+anti-miR-497-5p组肺上皮细胞中MUC1表达升高,IL-6、IL-1β、TNF-α表达水平、细胞凋亡率和蛋白cleaved-caspase3、cleaved-caspase9及TLR4、p-NF-κB p65/NF-κB p65表达量降低(P<0.05)。miR-497-5p靶向调控MUC1表达。与LPS+pcDNA-circVMA21+miR-NC组比较,LPS+pcDNA-circVMA21+miR-497-5p组肺上皮细胞中MUC1表达降低,IL-6、IL-1β、TNF-α表达水平、细胞凋亡率和蛋白cleaved-caspase3、cleaved-caspase9及TLR4、p-NF-κB p65/NF-κB p65表达升高(P<0.05)。结论:circVMA21可能通过靶向下调miR-497-5p促进MUC1表达,抑制TLR-4/NF-κB通路活化,进而减少LPS诱导的肺上皮细胞炎症因子表达和细胞凋亡。 展开更多
关键词 肺上皮细胞 circVMA21 miR-497-5p 黏蛋白1 炎症 细胞凋亡
在线阅读 下载PDF
缝隙连接蛋白β2对肺腺癌患者预后及肺腺癌A549细胞生物学行为的影响
11
作者 王繁 温馨 +1 位作者 王艺璇 王远 《吉林大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第3期716-726,共11页
目的:探讨缝隙连接蛋白β2 (GJB2)在肺腺癌(LUAD) A549细胞中的表达情况和生物学功能,为LUAD治疗提供参考。方法:利用TIMER数据库分析多种肿瘤中GJB2基因表达差异,GEPIA数据库检测LUAD中GJB2 mRNA表达情况,分析GJB2基因与LUAD不同临床... 目的:探讨缝隙连接蛋白β2 (GJB2)在肺腺癌(LUAD) A549细胞中的表达情况和生物学功能,为LUAD治疗提供参考。方法:利用TIMER数据库分析多种肿瘤中GJB2基因表达差异,GEPIA数据库检测LUAD中GJB2 mRNA表达情况,分析GJB2基因与LUAD不同临床分期的相关性,采用Kaplan-Meier plotter数据库分析GJB2蛋白与LUAD患者预后的相关性。收集111例LUAD患者癌组织及癌旁正常肺组织样本,采用免疫组织化学染色法观察LUAD患者癌组织和癌旁正常肺组织中GJB2蛋白表达情况。体外培养人肺腺癌A549细胞,将A549细胞分为GJB2过表达组(OE-GJB2组,转染GJB2过表达质粒)及其阴性对照组(OE-NC组,转染GJB2空载质粒)、小干扰RNA (si-RNA)-GJB2组(si-GJB2组,转染GJB2-siRNA)及其阴性对照组(si-NC组,转染对照si-RNA),采用Western blotting法验证细胞转染效率。采用细胞计数试剂盒8 (CCK-8)法检测各组A549细胞增殖活性,5-乙炔基-2'-脱氧尿苷(EdU)染色法检测各组A549细胞阳性表达率,克隆形成实验检测各组A549细胞克隆形成数,细胞划痕实验检测各组A549细胞迁移率,Transwell小室实验检测各组A549细胞中侵袭细胞数,Western blotting法检测各组A549细胞中GJB2蛋白和上皮-间质转化(EMT)相关蛋白表达水平。结果:GJB2基因在多种肿瘤中均存在异常表达;与癌旁正常肺组织比较,LUAD患者癌组织中GJB2 mRNA表达水平明显升高(P<0.05),且GJB2的高表达与LUAD患者癌的临床病理分期具有关联性(P<0.05);与GJB2低表达LUAD患者比较,GJB2高表达LUAD患者的总生存期明显减少[风险比(HR)=1.71,95%CI:1.34~2.18,P<0.05];GJB2蛋白在癌旁正常肺泡和支气管上皮细胞中均阴性表达,与癌旁正常肺组织比较,LUAD患者癌组织中GJB2蛋白表达明显增强;LUAD患者癌组织中GJB2蛋白阳性表达与淋巴结转移具有明显关联性(P<0.05),但与患者性别(P=0.626)、年龄(P=0.639)和TNM分期(P=0.837)无关联性(P>0.05)。CCK-8法,与OE-NC组比较,OE-GJB2组A549细胞增殖活性明显升高(P<0.05或P<0.01);与si-NC组比较,si-GJB2组A549细胞增殖活性明显降低(P<0.05或P<0.01)。EdU染色法,与OE-NC组比较,OE-GJB2组A549细胞中EdU阳性表达率明显升高(P<0.01);与si-NC组比较,si-GJB2组A549细胞中EdU阳性表达率明显降低(P<0.01)。克隆形成实验,与OE-NC组比较,OE-GJB2组A549细胞克隆形成数明显增加(P<0.01);与si-NC组比较,si-GJB2组A549细胞克隆形成数明显减少(P<0.01)。Transwell小室实验,与OE-NC组比较,OE-GJB2组A549细胞侵袭细胞数明显增加(P<0.01);与si-NC组比较,si-GJB2组A549细胞侵袭细胞数明显减少(P<0.01)。细胞划痕实验,细胞划痕24 h后,与OE-NC组比较,OE-GJB2组A549细胞迁移率明显升高(P<0.01);与si-NC组比较,si-GJB2组A549细胞迁移率明显降低(P<0.01)。Western blotting法,与OE-NC组比较,OE-GJB2组A549细胞中GJB2和N钙黏蛋白(N-cadherin)蛋白表达水平均明显升高(P<0.01),E钙黏蛋白(E-cadherin)蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与si-NC组比较,OE-GJB2组A549细胞中GJB2和N-cadherin蛋白表达水平均明显降低(P<0.01),E-cadherin蛋白表达水平明显升高(P<0.01)。结论:GJB2在LUAD患者癌组织中高表达,并与LUAD患者的不良预后有关。GJB2可促进A549细胞的增殖、侵袭、迁移和EMT。 展开更多
关键词 缝隙连接蛋白β2 肺腺癌 细胞增殖 细胞侵袭 细胞迁移 上皮-间质转化
在线阅读 下载PDF
NPM3在肺腺癌中的表达及其对肺腺癌细胞生物学功能的影响
12
作者 王韵 舒扬 +3 位作者 武晓白 郭若楠 黄汉鹏 向敏 《华中科技大学学报(医学版)》 北大核心 2025年第1期36-44,共9页
目的探究Nucleophosmin3(NPM3)在肺腺癌中的表达情况及其对肺腺癌细胞系H292生物学功能的影响,为肺腺癌的诊疗提供新的思路。方法首先利用生物信息学数据库TCGA分析NPM3基因在肺腺癌和正常组织中的表达差异及其与肺腺癌患者临床病理特... 目的探究Nucleophosmin3(NPM3)在肺腺癌中的表达情况及其对肺腺癌细胞系H292生物学功能的影响,为肺腺癌的诊疗提供新的思路。方法首先利用生物信息学数据库TCGA分析NPM3基因在肺腺癌和正常组织中的表达差异及其与肺腺癌患者临床病理特征和预后的相关性;通过基因干扰技术构建敲低NPM3的细胞模型(si-NPM3-H292),运用实时荧光定量PCR技术(qRT-PCR)和蛋白免疫印迹技术(Westernblot)检测干扰效率;通过CCK-8及平板克隆实验检测敲低NPM3对肺腺癌细胞增殖能力的改变;运用划痕实验和Transwell实验检测敲低NPM3对H292细胞迁移能力的影响;运用qRT-PCR法和Westernblot检测与上皮间质转化(EMT)相关指标的mRNA及蛋白表达情况;通过Westernblot检测PI3K/Akt信号通路相关蛋白的表达水平。结果TCGA数据库分析结果显示,NPM3在肺腺癌中高表达且与肺腺癌患者临床病理分型密切相关,高表达NPM3的肺腺癌患者的生存预后显著差于低表达NPM3的患者(P<0.05)。成功构建敲低NPM3的细胞模型;敲低NPM3的表达降低了H292细胞的增殖和迁移能力(均P<0.05);与对照组比较,si-NPM3-H292细胞中E-cadherin的mRNA及蛋白表达水平均上调,N-cadherin的mRNA及蛋白表达水平均下调(均P<0.05);与对照组比较,si-NPM3-H292细胞中Akt及PI3K的蛋白表达水平无明显变化,但其磷酸化水平降低,而PTEN的蛋白表达水平有所上升(均P<0.05)。结论NPM3在肺腺癌中高表达且与患者不良预后相关,NPM3可能通过调控PI3K/Akt信号通路发挥对肺腺癌细胞增殖与迁移的促进作用。 展开更多
关键词 NPM3 肺腺癌 上皮间质转化 细胞增殖 细胞迁移
在线阅读 下载PDF
lncSIL通过EZH2/P21/CDK6信号通路负向调控TGF-β1诱导的肺泡上皮细胞间质转化 被引量：3
13
作者 张万方 王琳 +10 位作者 潘鹏涛 李文昕 康瑞丽 朱子任 陈浩勤 方新宇 张星灿 张雨昕 姜依雯 李欣妍 袁本琪 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2024年第4期600-604,共5页
目的研究在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肺泡上皮细胞间质转化(EMT)进程中lncSIL的作用及其相关信号通路。方法采用Western blot法研究沉默lncSIL后对TGF-β1诱导EMT进程中细胞标志蛋白E-钙黏蛋白(E-cad)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)... 目的研究在转化生长因子β1(TGF-β1)诱导肺泡上皮细胞间质转化(EMT)进程中lncSIL的作用及其相关信号通路。方法采用Western blot法研究沉默lncSIL后对TGF-β1诱导EMT进程中细胞标志蛋白E-钙黏蛋白(E-cad)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白(ColⅠ)表达的影响;通过RNA pulldown分析lncSIL相互作用蛋白,并检测过表达或沉默lncSIL后对其靶基因组蛋白赖氨酸N-甲基转移酶(EZH2)以及下游因子P21蛋白(P21)和细胞周期蛋白依赖性激酶6(CDK6)表达的影响,并结合流式细胞术分析lncSIL对细胞周期进程的作用。结果沉默lncSIL后,间质细胞标志蛋白α-SMA和Col I表达升高,肺泡上皮细胞标志蛋白E-cad表达下降;RNA pulldown实验结果显示EZH2是与lncSIL相互作用的靶蛋白,并且沉默lncSIL后EZH2表达升高,其下游基因P21表达下调,CDK6表达上调,同时S期细胞的数量显著升高;过表达lncSIL时,EZH2与CDK6表达下调,P21表达上调,同时S期细胞的数量明显降低。结论lncSIL通过负向调控EZH2/P21/CDK6信号通路抑制细胞周期进程进而抑制TGF-β1诱导的肺泡上皮细胞向间质转化。 展开更多
关键词 lncSIL 长链非编码RNA 特发性肺纤维化 上皮细胞间质转化 转化生长因子β1 Zeste同源物增强子2 细胞标志蛋白
在线阅读 下载PDF
基于Hedgehog通路探讨理肺消积丸对NSCLC A549细胞周期、增殖和迁移的影响 被引量：3
14
作者 刘素晓 张丛丛 +6 位作者 孔德琪 黄慧敏 毛静 王元元 刘学芳 冯素香 李亚 《世界科学技术-中医药现代化》 CSCD 北大核心 2024年第2期320-327,共8页
目的探讨理肺消积丸对A549细胞的影响作用及对Hedgehog通路的调控作用。方法采用MTT实验筛选理肺消积丸含药血清对A549细胞最佳干预浓度后,将细胞分为6组:对照组、理肺消积含药血清组、Hedgehog通路抑制剂组(Vismodegib组)、顺铂组、理... 目的探讨理肺消积丸对A549细胞的影响作用及对Hedgehog通路的调控作用。方法采用MTT实验筛选理肺消积丸含药血清对A549细胞最佳干预浓度后,将细胞分为6组:对照组、理肺消积含药血清组、Hedgehog通路抑制剂组(Vismodegib组)、顺铂组、理肺消积含药血清+Vismodegib组、理肺消积含药血清+顺铂组。不同干预后,分别采用CCK-8实验检测细胞增殖能力,采用克隆形成实验观察细胞克隆形成能力,采用Transwell实验观察A549细胞迁移能力,采用流式细胞术观察细胞周期比例的变化,采用qRT-PCR和Western blot技术检测Hedgehog通路中Gli1、Ptch1、Smo和CyclinD1 mRNA和蛋白表达的变化。结果浓度为10%的理肺消积丸含药血清能显著抑制A549细胞增殖(P<0.05),降低细胞克隆形成和迁移能力(P<0.05),阻滞细胞周期从G1期到S期转变,同时抑制Gli1、Ptch1、Smo和CyclinD1 mRNA和蛋白表达(P<0.05),且与Vismodegib有良好的协同作用。结论理肺消积丸可显著抑制A549增殖和迁移能力,作用机制可能与其调控Hedgehog通路阻滞细胞周期有关。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 理肺消积丸 a549细胞 HEDGEHOG通路 细胞周期
在线阅读 下载PDF
SOX9通过Wnt/β-catenin途径驱动非小细胞肺癌A549细胞的上皮-间充质转化 被引量：5
15
作者 王秋琼 熊弢 +1 位作者 陈江勇 何刚 《中国肿瘤生物治疗杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第12期1345-1349,共5页
目的:探究SRY相关的高迁移率族盒9(SOX9)通过Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)途径促进非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞上皮-间充质转化(EMT)的机制。方法:将A549细胞分为OE-NC组、OE-SOX9组、OE-SOX9+XAV-939组。其中OESOX9组通过转染SOX9pcDN... 目的:探究SRY相关的高迁移率族盒9(SOX9)通过Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)途径促进非小细胞肺癌(NSCLC)A549细胞上皮-间充质转化(EMT)的机制。方法:将A549细胞分为OE-NC组、OE-SOX9组、OE-SOX9+XAV-939组。其中OESOX9组通过转染SOX9pcDNA质粒上调SOX9的表达水平;OE-SOX9+XAV-939组在转染SOX9pcDNA质粒的同时在培养基中加入β-catenin抑制剂XAV-939(1.0μmol/L)。用qPCR检测SOX9 mRNA表达水平,CCK-8法检测A549细胞增殖能力,划痕愈合实验检测A549细胞迁移能力,Transwell小室实验检测A549细胞的侵袭能力,WB实验检测SOX9、β-catenin、E-钙粘蛋白(E-cadherin)、γ-连环蛋白(γ-catenin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、波形蛋白(vimentin)表达水平。结果:转染后OE-SOX9组和OE-SOX9+XAV-939组的SOX9 mRNA和蛋白的水平显著高于OE-NC组(均P<0.05),且OE-SOX9组和OE-SOX9+XAV-939组比较无显著差异(P>0.05)。OE-SOX9组细胞增殖、侵袭和迁移能力显著高于OE-NC组,而OE-SOX9+XAV-939组显著低于OE-SOX9组(均P<0.05)。OE-SOX9组β-catenin蛋白水平显著高于OE-NC组,而OE-SOX9+XAV-939组β-catenin蛋白的水平低于OE-SOX9组(均P<0.05)。与OE-NC组比较,OE-SOX9组的上皮细胞表型标志物E-cadherin、γ-catenin水平下调并且间充质细胞表型标志物N-cadherin、vimentin上调,而OE-SOX9+XAV-939组E-cadherin、y-catenin高于OE-SOX9组,且N-cadherin、vimentin低于OE-SOX9组(均P<0.05)。结论:SOX9可通过激活Wnt/β-catenin通路促进NSCLCA549细胞的增殖、迁移和EMT。 展开更多
关键词 非小细胞肺癌 SRY相关的高迁移率族盒9 a549细胞 上皮-间充质转化 Wnt/β-连环蛋白
在线阅读 下载PDF
金水缓纤方调控CD38/NAD^(+)-SIRT1轴延缓AEC2s细胞衰老抗肺纤维化的机制研究
16
作者 蔡宇 王宇 +3 位作者 沈俊岭 游梦月 韩瑞婷 余海滨 《海南医科大学学报》 北大核心 2025年第15期1153-1162,共10页
目的:探讨金水缓纤方通过CD38/NAD^(+)-SIRT1轴调控AEC2s细胞衰老抗肺纤维化的作用机制。方法:将SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、金水缓纤方组、阳性对照组和CD38抑制剂组,每组10只。采用气管滴注博来霉素诱导大鼠肺纤维化模型;造模... 目的:探讨金水缓纤方通过CD38/NAD^(+)-SIRT1轴调控AEC2s细胞衰老抗肺纤维化的作用机制。方法:将SD大鼠随机分为空白对照组、模型组、金水缓纤方组、阳性对照组和CD38抑制剂组,每组10只。采用气管滴注博来霉素诱导大鼠肺纤维化模型;造模后28 d开始灌胃给药,每日1次,连续给药14 d后取材;采用H&E、Masson染色法观察、评估肺组织炎症和纤维化程度;免疫组化法评估肺组织中αSMA、COLⅢ的蛋白表达情况。免疫荧光法检测大鼠肺组织中p21及SPC的表达;β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色法测定肺组织细胞衰老情况;QPCR检测IL-1α、IL-8、P53、P21、CD38、SIRT1基因水平变化。Western blot法测定肺组织中E-cad、N-cad、p21、p53、CD38、SIRT1的蛋白表达。采用WST-8法检测肺组织中NAD+的表达水平。结果:与空白组比较,模型组的肺组织中炎症及纤维化评分均显著升高;αSMA、COLⅢ蛋白表达显著增加,提示大鼠肺组织纤维化的发生。肺组织N-cad蛋白表达显著上调,E-cad蛋白表达下降,提示肺组织发生了上皮间质转化;肺组织呈现显著SA-β-gal蓝染增多,p53、p21 mRNA水平及蛋白表达显著增加,IL-1α、IL-8 mRNA水平显著上调,肺组织中衰老细胞积累并高表达衰老蛋白及衰老相关分泌表型;同时,免疫荧光结果显示,p21与SPC共表达,p21高表达于AEC2s中。组织CD38 mRNA水平及蛋白表达显著增加,SIRT1 mRNA水平及蛋白表达显著下调,NAD^(+)表达水平显著下降,提示肺纤维化的中可能伴随着NAD+的消耗。与模型组相比,各给药组肺组织中炎症及纤维化评分均明显降低,αSMA、COLⅢ蛋白表达显著下降;N-cad蛋白表达显著下调,E-cad蛋白增加;肺组织SA-β-gal蓝染明显减轻,细胞衰老程度得到明显改善,p53、p21、IL-1α、IL-8衰老相关基因及蛋白水平明显下调;CD38 mRNA水平及蛋白表达下降,SIRT1表达水平及组织NAD+表达水平上升。结论:金水缓纤方能够减轻博来霉素诱导的大鼠肺纤维化及肺组织炎症反应,改善胶原沉积,可能与调控CD38表达,提高组织细胞NAD^(+)水平,激活SIRT1蛋白,延缓组织AEC2s细胞衰老有关。 展开更多
关键词 金水缓纤方 肺纤维化 细胞衰老 CD38/NAD^(+)-SIRT1 Ⅱ型肺泡上皮细胞
在线阅读 下载PDF
NF-κB介导MRP8/14诱导的人肺泡上皮A549细胞凋亡 被引量：4
17
作者 黄林 杨晨 +3 位作者 梁婕 罗海华 姜勇 刘爱华 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2016年第4期701-706,共6页
目的:探讨髓样相关蛋白8/14(MRP8/14)对人肺泡上皮A549细胞存活及凋亡的影响,并研究核因子κB(NF-κB)在其中的作用。方法:MRP8/14以不同剂量或刺激时间处理A549细胞,CCK-8法检测其对细胞活力的影响;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western b... 目的:探讨髓样相关蛋白8/14(MRP8/14)对人肺泡上皮A549细胞存活及凋亡的影响,并研究核因子κB(NF-κB)在其中的作用。方法:MRP8/14以不同剂量或刺激时间处理A549细胞,CCK-8法检测其对细胞活力的影响;流式细胞术检测细胞凋亡率;Western blot法及间接免疫荧光法检测A549细胞内NF-κB p65蛋白核移位情况;Western blot法检测NF-κB p65蛋白磷酸化水平;使用NF-κB特异性抑制剂Bay 11-7082探讨NF-κB在凋亡过程中的作用。结果:MRP8/14能以剂量和时间依赖的方式影响A549细胞的存活(P<0.05),流式细胞技术检测结果表明MRP8/14处理后A549细胞凋亡率明显增加(P<0.01)。此外,MRP8/14能够诱导NF-κB p65蛋白发生显著磷酸化,并移位至细胞核中,NF-κB信号通路明显激活,而NF-κB特异性抑制剂Bay 11-7082能够明显抑制MRP8/14诱导的细胞凋亡(P<0.01)。结论:NF-κB在MRP8/14所导致的肺泡上皮细胞凋亡过程发挥了重要作用。 展开更多
关键词 急性肺损伤 细胞凋亡 髓样相关蛋白8/14 肺泡Ⅱ型上皮细胞 核因子ΚB
在线阅读 下载PDF
高海拔暴露驱动小鼠肺部血管功能、细胞外基质、凋亡与增殖相关基因表达改变并诱导肺损伤
18
作者 张星宇 乐士冠 +2 位作者 李轶 石祥广 王久存 《中国病理生理杂志》 北大核心 2025年第9期1703-1712,共10页
目的:探究高海拔暴露导致的小鼠肺损伤的类型及其机制。方法:8周龄的雄性C57BL/6小鼠随机分为常氧组和低压低氧暴露组,每组10只,将低压低氧暴露组小鼠持续暴露于6000 m海拔的低压低氧环境中3 d以建立小鼠急性肺损伤模型。取小鼠肺组织;H... 目的:探究高海拔暴露导致的小鼠肺损伤的类型及其机制。方法:8周龄的雄性C57BL/6小鼠随机分为常氧组和低压低氧暴露组,每组10只,将低压低氧暴露组小鼠持续暴露于6000 m海拔的低压低氧环境中3 d以建立小鼠急性肺损伤模型。取小鼠肺组织;HE和Masson染色观察肺脏病理情况;DESeq2和ClusterProfiler分析转录物组差异表达基因和通路;STRING筛选枢纽基因。结果:与常氧对照组相比,低压低氧暴露组小鼠的肺组织中:肺泡间隔厚度、透明膜数、肺泡腔和肺间质内中性粒细胞浸润以及肺损伤评分显著增加(P<0.01),然而未发生显著纤维化;Alas2、Slc4a1、Rhag、Car1、Car2、Hbb、Agtr1b、Bmp2、Bmper、Vegfc、Foxm1、Fgf18、Igf1、Cxcl12和Mmp14基因的mRNA水平显著升高(P<0.01),而Notch1、Notch4和Cxcr4基因的mRNA水平显著下降(P<0.01);诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、cleaved caspase-3、cleaved PARP、纤连蛋白(fibronectin)、弹性蛋白(elastin)、腱生蛋白C(tenascin C)、基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP1)、WNT3a和β-连环蛋白(β-catenin)的蛋白水平显著升高(P<0.05)。结论:短期高海拔低压低氧暴露通过诱导参与细胞凋亡、血管通透性调控、细胞外基质重塑和Ⅱ型肺泡上皮细胞增殖等过程的基因表达发生显著变化从而诱导小鼠发生急性肺损伤。 展开更多
关键词 高海拔 肺损伤 转录物组 Ⅱ型肺泡上皮细胞
在线阅读 下载PDF
牛冠状病毒感染新生犊牛肺上皮细胞模型的建立 被引量：2
19
作者 陈秋会 蒋珊珊 +4 位作者 高萌萌 夏立勇 张国华 任亚超 周玉龙 《中国畜牧兽医》 CAS CSCD 北大核心 2024年第8期3577-3584,共8页
[目的]牛冠状病毒(Bovine coronavirus,BCoV)是犊牛腹泻和上呼吸道疾病的主要病原,目前缺少敏感的适合BCoV体外培养的本动物细胞,限制了BCoV致病机制的深入研究。因此,本研究拟从犊牛肺脏组织中分离出牛肺上皮细胞(bovine lung epitheli... [目的]牛冠状病毒(Bovine coronavirus,BCoV)是犊牛腹泻和上呼吸道疾病的主要病原,目前缺少敏感的适合BCoV体外培养的本动物细胞,限制了BCoV致病机制的深入研究。因此,本研究拟从犊牛肺脏组织中分离出牛肺上皮细胞(bovine lung epithelial cell,BLEC)建立BCoV体外感染本动物细胞模型。[方法]采用胰蛋白酶和Ⅰ型胶原蛋白酶两步酶消化法对新生犊牛肺脏组织进行肺上皮细胞初步提取,再利用上皮细胞贴壁时间不同的差异贴壁法纯化BLEC。通过间接免疫荧光试验(immunofluorescence assay,IFA)检测纯化后细胞中标志细胞角蛋白18(cytokeratin 18,CK-18)的表达来鉴定BLEC,并通过PCR方法对细胞进行病原纯净性检测,包括牛轮状病毒(Bovine rotavirus,BRV)、牛病毒性腹泻病毒(Bovine viral diarrhea virus,BVDV)、牛副流感病毒3型(Bovine parainfluenza virus type 3,BPIV3)、BPIV5、牛传染性鼻气管炎(Infectious bovine rhinotracheitis virus,IBRV)、BCoV和支原体(Mycoplasma)。通过PCR和IFA检测BCoV对BLEC的易感情况,并绘制BCoV在BLEC上的一步生长曲线。[结果]分离纯化培养的BLEC形态均匀稳定、呈菱形或砖块状,无常见病原BRV、BVDV、BPIV3、BPIV5、IBRV、BCoV和支原体污染,上皮细胞标志CK-18呈阳性表达。犊牛腹泻来源的BCoV HLJ-325毒株感染BLEC 24 h后可观察到明显的细胞病变效应(cytopathic effect,CPE);PCR能扩增出BCoV N基因;IFA结果显示,BCoV感染BLEC呈现特异性红色荧光。通过实时荧光定量PCR检测BCoV含量建立病毒生长曲线,BCoV在感染BLEC后20 h时病毒载量最高,为4.46×10^(5)拷贝/mL。[结论]本研究成功分离制备了BLEC,证明BCoV易感染BLEC,构建了BCoV体外感染BLEC模型,为研究BCoV引起牛呼吸道疾病的致病机制奠定基础。 展开更多
关键词 牛冠状病毒(BCoV) 牛肺上皮细胞 分离纯化 感染模型
在线阅读 下载PDF
瑞巴匹特抑制脂多糖诱导肺上皮细胞株A549表达TLR4和释放TNF-α 被引量：1
20
作者 文秀芳 陈霞 周向东 《中南大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期457-460,共4页
目的:研究瑞巴匹特对肺上皮细胞株A549细胞TLR4表达及分泌肿瘤坏死因子(TNF-α)的影响。方法:用脂多糖(LPS)建立体外A549细胞体外炎症损伤模型,实验分为对照组(无干预无刺激)、模型组(LPS刺激)、干预组1(LPS和10mg/L瑞巴匹特)、干预组2(... 目的:研究瑞巴匹特对肺上皮细胞株A549细胞TLR4表达及分泌肿瘤坏死因子(TNF-α)的影响。方法:用脂多糖(LPS)建立体外A549细胞体外炎症损伤模型,实验分为对照组(无干预无刺激)、模型组(LPS刺激)、干预组1(LPS和10mg/L瑞巴匹特)、干预组2(LPS和30mg/L瑞巴匹特)、用ELISA观察A549细胞分泌TNF-α和RT-PCR及蛋白免疫印迹观察A549细胞TLR4的表达。结果:LPS诱导A549细胞分泌TNF-α(与对照组比较,P<0.01),在第6h达高峰;LPS诱导A549细胞表达TLR4(与对照组比较,P<0.01);瑞巴匹特可抑制LPS诱导A549细胞分泌TNF-α和表达TLR4(与模型组比较,P<0.05),但2组干预组间无统计学差异(P>0.05)。结论:瑞巴匹特的抗炎机制可能是通过抑制TLR4的表达,从而减少炎性细胞因子的释放;瑞巴匹特有可能作为一种有价值的抗感染治疗的辅助药物。 展开更多
关键词 瑞巴匹特 TLR4 肿瘤坏死因子Α 脂多糖 肺上皮细胞株
在线阅读 下载PDF
已选择0条
导出题录 引用分析
参考文献
引证文献
 统计分析
检索结果
已选文献
上一页 1 2 … 24 下一页 到第 页
关于我们 | 版权声明 | 联系我们 | 帮助中心| 意见反馈
主办单位：上海市教育委员会
技术支持：重庆维普资讯有限公司
渝公网安备 50019002500403号
使用帮助 返回顶部