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人肝脏星状细胞的一种改良分离方法
被引量：
3
1
作者
王满
郭津生
+2 位作者
涂传涛
王吉耀
Scott L.Friedman
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第4期617-620,共4页
目的建立和改良人肝脏星状细胞(human-hepatic stellate cells,hu-HSCs)分离方法,使之适于原代培养和研究。方法在传统分离HSCs方法的基础上,省略链霉蛋白酶和DNA酶,用EGTA液促细胞解离,再用Ⅳ型胶原酶消化,差速离心去除肝实质细胞,最后...
目的建立和改良人肝脏星状细胞(human-hepatic stellate cells,hu-HSCs)分离方法,使之适于原代培养和研究。方法在传统分离HSCs方法的基础上,省略链霉蛋白酶和DNA酶,用EGTA液促细胞解离,再用Ⅳ型胶原酶消化,差速离心去除肝实质细胞,最后用Nycodenz密度梯度离心纯化hu-HSCs,台盼蓝染色法计算细胞产量和进行活力评估,α-SMA、desmin免疫荧光染色及油红O脂滴染色鉴定细胞纯度。结果分离得到的原代hu-HSCs数量高达3×106个/克肝脏,纯度达98%;细胞传代后纯度达到100%。结论改良后的方法经济、快捷、高效,细胞得率及纯度大为提高,有利于建立在原代hu-HSCs基础上的研究。
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关键词
人肝脏星状细胞
细胞
分离
原代培养
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题名
人肝脏星状细胞的一种改良分离方法
被引量：
3
1
作者
王满
郭津生
涂传涛
王吉耀
Scott L.Friedman
机构
复旦大学中山医院消化科-复旦大学上海医学院内科学系
西奈山医学院肝病科
出处
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2008年第4期617-620,共4页
基金
国家自然科学基金项目(3570825)
文摘
目的建立和改良人肝脏星状细胞(human-hepatic stellate cells,hu-HSCs)分离方法,使之适于原代培养和研究。方法在传统分离HSCs方法的基础上,省略链霉蛋白酶和DNA酶,用EGTA液促细胞解离,再用Ⅳ型胶原酶消化,差速离心去除肝实质细胞,最后用Nycodenz密度梯度离心纯化hu-HSCs,台盼蓝染色法计算细胞产量和进行活力评估,α-SMA、desmin免疫荧光染色及油红O脂滴染色鉴定细胞纯度。结果分离得到的原代hu-HSCs数量高达3×106个/克肝脏,纯度达98%;细胞传代后纯度达到100%。结论改良后的方法经济、快捷、高效,细胞得率及纯度大为提高,有利于建立在原代hu-HSCs基础上的研究。
关键词
人肝脏星状细胞
细胞
分离
原代培养
Keywords
human hepatic stellate cells
cell isolation
primary culture
分类号
R575.2 [医药卫生—消化系统]
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作者
出处
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被引量
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1
人肝脏星状细胞的一种改良分离方法
王满
郭津生
涂传涛
王吉耀
Scott L.Friedman
《复旦学报（医学版）》
CAS
CSCD
北大核心
2008
3
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