刚地弓形虫细胞培养上清对人结肠癌细胞sw480增殖与凋亡的影响 被引量：9

1

作者 高剑 叶彬 武卫华 《中国人兽共患病学报》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期229-234,共6页

目的观察刚地弓形虫RH株速殖子与人结肠癌sw480细胞系共培养上清对人结肠癌sw480细胞增殖的影响和诱导其凋亡与坏死的情况。方法取对数生长期的人结肠癌sw480细胞(1×106),建立弓形虫RH株速殖子数目分别为2×106、4×106、8... 目的观察刚地弓形虫RH株速殖子与人结肠癌sw480细胞系共培养上清对人结肠癌sw480细胞增殖的影响和诱导其凋亡与坏死的情况。方法取对数生长期的人结肠癌sw480细胞(1×106),建立弓形虫RH株速殖子数目分别为2×106、4×106、8×106、16×106的共培养模型,观察弓形虫速殖子在sw480细胞中的寄生,提取共同孵育72h后的培养上清,以新鲜培养基稀释为半量,体外作用人结肠癌sw480细胞12h、24h、48h、72h,CKK-8法检测吸光度(A450值)并计算抑制率;Annexin-v-FITC/PI染色细胞后上流式细胞仪检测细胞凋亡与坏死率;琼脂糖凝胶电泳观察细胞凋亡DNA条带;透射电镜和荧光显微镜观察细胞形态学改变。结果弓形虫RH株速殖子可在人结肠癌sw480细胞内寄生和增殖。CKK-8法检测结果显示上述共培养上清对sw480细胞增殖抑制率随上清作用时间延长均明显增大,48h最大抑制率达44.55%。流式细胞仪检测显示实验组sw480细胞早期凋亡率和晚期凋亡与坏死率随上清作用时间延长均明显增加,48h早期凋亡率达最高值(11.54%),48h以后早期凋亡率下降,晚期凋亡和坏死率显著上升,72h总死亡率可达46.11%,细胞杀伤效果明显;琼脂糖凝胶电泳显示典型的DNA云梯状条带;荧光显微镜和透射电镜观察到细胞凋亡和坏死典型形态。结论弓形虫RH株速殖子与人结肠癌sw480细胞共培养上清对体外培养的sw480细胞增殖有明显的抑制作用,并可诱导sw480细胞凋亡与坏死。 展开更多

关键词 弓形虫 人结肠癌细胞sw480 培养 细胞凋亡

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九香虫含药血清对人结肠癌细胞SW480凋亡相关因子FADD·p53表达作用的研究 被引量：21

2

作者 范钦 魏辉 +3 位作者 蔡红兵 孙学刚 刁建新 王启瑞 《安徽农业科学》 CAS 北大核心 2011年第13期7828-7831,共4页

[目的]观察九香虫含药血清对人结肠癌细胞SW480增殖及凋亡相关因子FADD、p53表达的影响,初步探讨其诱导结肠癌细胞凋亡的作用机制。[方法]20只雄性SD大鼠按随机数字表法分为2组(生理盐水对照组和九香虫含药血清组),每组10只。其中,九香... [目的]观察九香虫含药血清对人结肠癌细胞SW480增殖及凋亡相关因子FADD、p53表达的影响,初步探讨其诱导结肠癌细胞凋亡的作用机制。[方法]20只雄性SD大鼠按随机数字表法分为2组(生理盐水对照组和九香虫含药血清组),每组10只。其中,九香虫含药血清组给予九香虫煎剂灌胃5 d后,制备九香虫含药血清,按不同浓度体外作用于SW480细胞72 h。CCK8细胞增殖试验检测其对SW480细胞增殖的抑制作用,流式细胞术检测其对SW480细胞凋亡的诱导作用,Western blot法、荧光定量PCR法检测细胞中FADD、p53蛋白及mRNA的表达。[结果]各浓度九香虫含药血清对SW480细胞生长均有抑制作用,且明显促进其凋亡,凋亡率明显高于对照组(P<0.01)。Western bolt及荧光定量PCR结果表明,九香虫含药血清干预可使FADD表达明显增强,p53表达明显减弱。[结论]九香虫含药血清可诱导人结肠癌细胞凋亡,并影响凋亡相关因子p53、FADD的表达,从而达到抗肿瘤作用。 展开更多

关键词 九香虫 含药血清 结肠癌细胞sw480 FADD P53

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大蒜提取液抑制人结肠癌细胞SW480和SW620的增殖和扩散 被引量：3

3

作者 李招发 徐雪松 +5 位作者 孙立文 申兴桂 庄妍 赵志壮 李青山 付学奇 《吉林大学学报（理学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第5期687-690,共4页

研究了天然大蒜提取液对人结肠癌细胞SW 480和SW 620的扩散、粘附和增殖的影响.结果表明:将SW 480和SW 620加入1μL/孔大蒜提取液的DMEM中,癌细胞扩散率降低了40%;培养96 h,增殖率分别降低8.6倍和10.8倍.表明大蒜提取液能抑制人结肠癌细... 研究了天然大蒜提取液对人结肠癌细胞SW 480和SW 620的扩散、粘附和增殖的影响.结果表明:将SW 480和SW 620加入1μL/孔大蒜提取液的DMEM中,癌细胞扩散率降低了40%;培养96 h,增殖率分别降低8.6倍和10.8倍.表明大蒜提取液能抑制人结肠癌细胞SW 480和SW 620的增殖和扩散. 展开更多

关键词 大蒜 癌细胞sw480 癌细胞sw620 增殖和扩散

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羽扇豆醇对人共刺激细胞及结肠癌细胞株SW480的影响 被引量：3

4

作者 毕亭亭 刘军权 +2 位作者 陈复兴 刘岩 朱炳喜 《医学研究生学报》 CAS 北大核心 2014年第10期1047-1051,共5页

目的：共刺激细胞是一种对肿瘤细胞有杀伤作用的 NK样T细胞，既往研究表明羽扇豆醇作为一种天然植物提取物，能改变NK细胞、γδT细胞的生长及其对肿瘤细胞的作用。文中主要探讨羽扇豆醇对人共刺激细胞杀伤结肠癌细胞株 SW480的影响。... 目的：共刺激细胞是一种对肿瘤细胞有杀伤作用的 NK样T细胞，既往研究表明羽扇豆醇作为一种天然植物提取物，能改变NK细胞、γδT细胞的生长及其对肿瘤细胞的作用。文中主要探讨羽扇豆醇对人共刺激细胞杀伤结肠癌细胞株 SW480的影响。方法取健康人外周血单个核细胞在体外经多种细胞因子诱导为共刺激细胞；不同浓度的羽扇豆醇在作用于共刺激细胞及结肠癌细胞株不同时间段后，甲基偶唑蓝（ MTT）法检测羽扇豆醇对共刺激细胞及结肠癌细胞株 SW480生长的影响；乳酸脱氢酶（ LDH）法检测共刺激细胞对结肠癌细胞株SW480的杀伤活性。结果羽扇豆醇浓度在0．1～200.0μg/mL时对共刺激细胞的生长有促进作用，对结肠癌细胞株SW480有抑制作用；羽扇豆醇诱导后，共刺激细胞对SW480的杀伤活性增强，浓度为12．5 mg/L时与空白对照比较的差异有统计学意义（76％vs 40％， P＜0．05）。结论羽扇豆醇能促进共刺激细胞的增殖，抑制结肠癌细胞株SW480的生长，并能增加SW480对共刺激细胞的敏感性，增强共刺激细胞对SW480细胞株的杀伤能力。 展开更多

关键词 羽扇豆醇 共刺激细胞 结肠癌细胞株sw480 杀伤活性

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舒林酸对结肠癌细胞SW480FasL蛋白表达及诱导淋巴细胞凋亡的影响 被引量：4

5

作者 吴志刚 马庆久 +5 位作者 何显力 赖大年 李金茂 武永忠 包国强 吴涛 《西安交通大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期374-376,共3页

目的在体外通过细胞培养,探讨舒林酸对结、直肠癌发生、发展的化学预防机制。方法应用Western blot法检测舒林酸作用前后SW480细胞FasL蛋白表达的变化;应用流式细胞术检测舒林酸作用前后SW480细胞诱导淋巴细胞凋亡率的变化。结果舒林酸... 目的在体外通过细胞培养,探讨舒林酸对结、直肠癌发生、发展的化学预防机制。方法应用Western blot法检测舒林酸作用前后SW480细胞FasL蛋白表达的变化;应用流式细胞术检测舒林酸作用前后SW480细胞诱导淋巴细胞凋亡率的变化。结果舒林酸处理后较处理前SW480细胞FasL蛋白表达明显降低,而且FasL蛋白表达随舒林酸作用浓度增加显著降低;随舒林酸作用浓度升高,SW480细胞诱导淋巴细胞凋亡率明显降低,不同浓度组比较均有显著性差异(P<0.01)。结论舒林酸降低结肠癌SW480细胞FasL蛋白表达,使SW480细胞诱导Jurkat细胞凋亡率降低,可能是其对结、直肠癌发生、发展的化学预防机制。 展开更多

关键词 舒林酸 培养的肿瘤细胞 JURKAT细胞 FAS配体 凋亡 淋巴细胞凋亡率 蛋白表达 结肠癌细胞 sw480细胞 流式细胞术检测

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复方肠泰对人结肠癌SW480细胞凋亡caspase-3途径的影响 被引量：2

6

作者 丁永芳 张舒 +1 位作者 王小宁 沈明勤 《南京中医药大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期346-350,共5页

目的考察复方肠泰(FFCT)对人结肠癌细胞SW480的凋亡作用与主要作用途径。方法建立人结肠癌细胞SW480裸鼠种植瘤模型,观察FFCT对移植瘤瘤质量和凋亡的影响和SW480结肠癌细胞内caspase-3的活性,并考察抑制剂Ac-DEVD-CHO对SW480凋亡的影响... 目的考察复方肠泰(FFCT)对人结肠癌细胞SW480的凋亡作用与主要作用途径。方法建立人结肠癌细胞SW480裸鼠种植瘤模型,观察FFCT对移植瘤瘤质量和凋亡的影响和SW480结肠癌细胞内caspase-3的活性,并考察抑制剂Ac-DEVD-CHO对SW480凋亡的影响。结果 FFCT可以明显提高移植瘤的早期凋亡率和晚期凋亡率(P<0.05,P<0.01);经不同时间的FFCT培养液作用后的SW480结肠癌细胞caspase-3酶活性均有显著性增加,呈先增高而后逐渐降低的趋势;加了caspase-3抑制剂的FFCT各浓度及不同时间组结肠癌细胞SW480的早期凋亡率与空白组比较均有所增加,细胞的死亡率与晚期凋亡率的总和也有所增加,呈一定的量-效、时-效关系。结论 caspase-3途径是FFCT促进人结肠癌细胞SW480凋亡的重要途径,但不是唯一途径,其它的作用途径有待进一步的研究探讨。 展开更多

关键词 复方肠泰 人结肠癌细胞sw480 细胞凋亡 CASPASE-3

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复方肠泰抑制人结肠癌SW480细胞增殖的实验研究 被引量：4

7

作者 张舒 沈明勤 +1 位作者 丁永芳 王小宁 《中成药》 CAS CSCD 北大核心 2010年第3期374-378,共5页

目的:考察复方肠泰(人参、薏苡仁、莪术等)对人结肠癌细胞SW480细胞生长的抑制作用及其对细胞增殖周期和凋亡的影响。方法:采用噻唑蓝比色法测定不同浓度复方肠泰在不同作用时间内对在体外培养SW480细胞增殖的影响,同时应用流式细胞术... 目的:考察复方肠泰(人参、薏苡仁、莪术等)对人结肠癌细胞SW480细胞生长的抑制作用及其对细胞增殖周期和凋亡的影响。方法:采用噻唑蓝比色法测定不同浓度复方肠泰在不同作用时间内对在体外培养SW480细胞增殖的影响,同时应用流式细胞术检测细胞增殖周期及凋亡率的变化。结果:复方肠泰可在G0/G1期以及G2/M期阻滞人结肠癌细胞SW480的增殖,使S期细胞比率降低。结论:复方肠泰在3.51～7.81mg/mL范围内呈现明显的量效关系。 展开更多

关键词 复方肠泰 人结肠癌细胞sw480 细胞周期 细胞增殖 凋亡

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槲皮素对人结肠癌SW480细胞增殖的抑制作用 被引量：14

8

作者 林增海 马涛 孟勇 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2012年第5期699-701,共3页

目的:观察槲皮素对体外培养的人结肠癌SW480细胞的增殖抑制作用。方法:观察不同浓度(5、10、20、40、80、160μmol/L)的槲皮素及50mg/L的5-Fu(阳性对照组)在不同时间(24、48、72h)对SW480细胞增殖的影响。运用细胞计数试剂盒检测法(CCK... 目的:观察槲皮素对体外培养的人结肠癌SW480细胞的增殖抑制作用。方法:观察不同浓度(5、10、20、40、80、160μmol/L)的槲皮素及50mg/L的5-Fu(阳性对照组)在不同时间(24、48、72h)对SW480细胞增殖的影响。运用细胞计数试剂盒检测法(CCK-8)检测槲皮素对SW480细胞生长的影响;光学显微镜和电子显微镜下观察槲皮素处理后SW480细胞形态结构的变化;碘化丙啶(PI)染色流式细胞术(FCM)分析槲皮素对SW480细胞的细胞周期分布及凋亡率的影响。结果:CCK-8法检测显示槲皮素对SW480细胞的增殖有抑制作用,其抑制作用随着作用浓度的增加和作用时间的延长而增强(P<0.05);经槲皮素处理的SW480细胞与阳性对照组比较,呈明显凋亡状态;PI染色FCM分析发现槲皮素以浓度依赖方式诱导SW480细胞G2/M期细胞累积,且细胞凋亡率随药物浓度增加而增加(P<0.05)。结论:槲皮素对人结肠癌SW480细胞的增殖有抑制作用,且能诱导SW480细胞凋亡,是一种高效低毒的药物。 展开更多

关键词 结肠肿瘤 槲皮素 sw480细胞 增殖

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5-ALA光动力疗法对人结肠腺癌SW480细胞的抑制作用 被引量：5

9

作者 肖卫东 葛海燕 陈祖林 《激光杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期87-88,共2页

结直肠癌是当前最常见的消化道恶性肿瘤之一 ,但目前治疗手段单一 ,迫切需要寻找新的解决途径。第二代光敏剂ALA是一种内源性光敏剂 ,我们应用ALA -PDT对人结肠癌细胞SW480进行了体外实验性治疗研究 ,实验表明 :ALA孵育的SW480细胞可产... 结直肠癌是当前最常见的消化道恶性肿瘤之一 ,但目前治疗手段单一 ,迫切需要寻找新的解决途径。第二代光敏剂ALA是一种内源性光敏剂 ,我们应用ALA -PDT对人结肠癌细胞SW480进行了体外实验性治疗研究 ,实验表明 :ALA孵育的SW480细胞可产生PpIX ,ALA -PDT可于PDT后早期明显抑制SW480细胞的生长增殖 ,降低细胞存活率 ,本实验结果显示ALA -PDT作为一种新型肿瘤疗法具有治疗结肠癌的可行性。 展开更多

关键词 5-ALA 光动力疗法 人结肠腺癌 sw480细胞 抑制作用 结直肠癌 5—氨基乙酰丙酸 结肠肿瘤

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四溴苯三唑对人结肠癌SW480细胞凋亡的诱导作用及其机制 被引量：2

10

作者 王玥 刘畅 +7 位作者 朴仙姬 张冬云 孟令旗 王浩 王加茹 罗英花 孙虎男 金成浩 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2017年第6期1148-1154,共7页

目的:探讨4,5,6,7-四溴苯三唑(TBB)对人结肠癌SW480细胞的促凋亡作用,并初步探讨其可能的作用机制。方法:选取处于对数生长期的人结肠癌SW480细胞,将其分为对照组(给予0μmol·L^(-1)TBB)和实验组(给予1、3、10、30和100μmol·... 目的:探讨4,5,6,7-四溴苯三唑(TBB)对人结肠癌SW480细胞的促凋亡作用,并初步探讨其可能的作用机制。方法:选取处于对数生长期的人结肠癌SW480细胞,将其分为对照组(给予0μmol·L^(-1)TBB)和实验组(给予1、3、10、30和100μmol·L^(-1) TBB)。采用MTT比色法检测SW480细胞存活率,采用AnnexinⅤ-FITC/PI双染法及流式细胞术检测SW480细胞凋亡率及细胞中活性氧(ROS)水平,采用Western blotting法检测细胞中抗凋亡蛋白p-Akt、Bcl-2和促凋亡蛋白Bad、pro-caspase-9及cleaved-caspase-3表达水平。结果:MTT法检测,与对照组比较,实验组SW480细胞存活率明显降低(P<0.05),且呈浓度依赖性;AnnexinⅤ-FITC/PI双染法及流式细胞术检测,随着处理时间的增加,与对照组比较,TBB作用3、6、12和24h时SW480细胞凋亡率明显高于作用0h时(P<0.05);流式细胞术检测,TBB作用3、6、12和24h时结肠癌SW480细胞中ROS水平高于作用0h时(P<0.05);Western blotting法检测,SW480细胞中抗凋亡蛋白p-Akt和Bcl-2表达水平逐渐降低,促凋亡蛋白Bad和cleaved-caspase-3表达水平逐渐升高,pro-caspase-9蛋白表达水平逐渐降低,与对照组(0h)比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:TBB对体外培养的人结肠癌SW480细胞有明显的杀伤作用,可诱导细胞凋亡,其机制可能与抑制Akt活性或促进细胞中ROS产生有关。 展开更多

关键词 4 5 6 7四溴苯三唑 结肠肿瘤 sw480细胞 细胞凋亡 活性氧 AKT信号通路

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姜黄素对结肠癌细胞SW620的体外抑制作用及作用靶点的虚拟筛选 被引量：1

11

作者 张云龙 彭彦 姚立 《中华中医药学刊》 CAS 2012年第12期2751-2753,I0030,共4页

目的:探讨姜黄素对结肠癌SW620细胞的增殖抑制效果和诱导凋亡的作用及虚拟筛选相关作用靶点。方法:以不同浓度的姜黄素作用于体外培养的结肠癌SW620细胞,通过MTT法检测姜黄素对细胞生长的抑制作用,倒置显微镜下观察细胞的形态变化,透射... 目的:探讨姜黄素对结肠癌SW620细胞的增殖抑制效果和诱导凋亡的作用及虚拟筛选相关作用靶点。方法:以不同浓度的姜黄素作用于体外培养的结肠癌SW620细胞,通过MTT法检测姜黄素对细胞生长的抑制作用,倒置显微镜下观察细胞的形态变化,透射电镜观察细胞凋亡时的超微形态变化,流式细胞仪检测细胞凋亡情况;计算机辅助设计对作用靶点进行虚拟筛选。结果:MTT实验显示姜黄素可抑制SW620细胞的生长,显微镜下可观察到细胞肿胀、破裂、呈坏死状,透射电镜下观察发现细胞体积缩小,细胞核固缩,核内染色质凝集,内质网扩张,空泡形成增多,出现明显的凋亡现象。流式细胞仪可检测到细胞凋亡率增加,呈时间及浓度依赖性;虚拟筛选出19个可能的作用靶点。结论:姜黄素通过诱导细胞凋亡的方式有效地抑制SW620细胞的生长。 展开更多

关键词 姜黄素 结肠癌细胞sw620 流式细胞仪 细胞凋亡 透射电镜 计算机辅助设计

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siRNA沉默RAD18抑制结肠癌SW480细胞FANCD2蛋白泛素化并增强其对丝裂霉素C的敏感性 被引量：4

12

作者 钟雄平 陈业金 +3 位作者 孔红祥 刘超 乐贻军 王红 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2013年第11期1731-1733,共3页

目的:研究RAD18特异性siRNA对结肠癌SW480细胞FANCD2泛素化和对化疗药物丝裂霉素C敏感性的影响。方法 :RAD18特异性siRNA转染SW480细胞后用丝裂霉素C处理,通过Western blot检测细胞RAD18及FANCD2泛素化的表达,MTT法检测干扰RAD18后细胞... 目的:研究RAD18特异性siRNA对结肠癌SW480细胞FANCD2泛素化和对化疗药物丝裂霉素C敏感性的影响。方法 :RAD18特异性siRNA转染SW480细胞后用丝裂霉素C处理,通过Western blot检测细胞RAD18及FANCD2泛素化的表达,MTT法检测干扰RAD18后细胞对丝裂霉素C的敏感性。结果:RAD18特异性siRNA转染SW480细胞96 h后,RAD18基因的表达明显降低,导致经丝裂霉素C处理后FANCD2泛素化表达明显降低;siRAD18组细胞对丝裂霉素C的敏感性显著增强。结论 :抑制RAD18蛋白表达能延缓结肠癌细胞FANCD2泛素化表达,并增强SW480细胞对丝裂霉素C的敏感性。 展开更多

关键词 结肠肿瘤 RAD18 FANCD2 RNA干扰 sw480

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桦木醇对人结肠癌SW480细胞增殖和凋亡的影响 被引量：4

13

作者 刘晓康 韩欣冶 +3 位作者 林英嘉 胡方舟 李杨 李清 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2015年第1期39-43,I0002,共6页

目的:研究桦木醇对人结肠癌SW480细胞增殖及凋亡的影响,并探讨其相关作用机制。方法:培养结肠癌SW480细胞,传代后用于实验。SW480细胞分为对照组和不同剂量桦木醇(1、5、10、20、50和100mg·L-1)组,MTT法测定各组细胞的增殖抑制率;... 目的:研究桦木醇对人结肠癌SW480细胞增殖及凋亡的影响,并探讨其相关作用机制。方法:培养结肠癌SW480细胞,传代后用于实验。SW480细胞分为对照组和不同剂量桦木醇(1、5、10、20、50和100mg·L-1)组,MTT法测定各组细胞的增殖抑制率;以不加桦木醇的SW480细胞为对照组,DAPI染色观察15mg·L-1桦木醇作用SW480细胞6、12和24h后的形态学变化;流式细胞术分析Sub-G1细胞百分比即细胞凋亡率,体外caspase活力测定法检测凋亡相关蛋白caspase-3、caspase-8和caspase-9的激活情况,Western blotting法检测各组细胞caspase-3底物多聚(ADP-核糖)聚合酶(PARP)断裂和凋亡蛋Bcl-2、Bcl-xL和cytochrome C的表达情况。结果:MTT法检测,与对照组比较,随着桦木醇剂量(1、5、10、20、50和100mg·L-1)增加SW480细胞的增殖抑制率逐渐增加(P<0.05或P<0.01),其增殖抑制率呈剂量效应关系,半数抑制浓度(IC50)为12.875mg·L-1。DAPI染色,与对照组比较,15mg·L-1桦木醇组正常细胞数量减少,在12和24h时呈现出典型的细胞凋亡特征(膜气泡,核固缩、变形及染色质浓缩等)。流式细胞术检测,与对照组比较,随着作用时间的延长,15mg·L-1桦木醇组SW480细胞中处于Sub-G1期的细胞逐渐增多,即细胞凋亡率逐渐增加。caspase活力测定,与对照组比较,caspase-3和caspase-9活性明显增加(P<0.05或P<0.01)。免疫印迹检测,与对照组比较,15mg·L-1桦木醇组SW480细胞中PARP出现断裂,凋亡蛋白Bcl-xL表达下调,cytochrome C表达上调,而Bcl-2蛋白表达无明显变化。结论:桦木醇可抑制结肠癌SW480细胞增殖并诱导其凋亡,其作用机制可能是通过下调Bcl-xL表达启动线粒体介导的cytochrome C释放进而激活caspase-9凋亡途径实现。 展开更多

关键词 桦木醇 结肠肿瘤 sw480细胞 细胞凋亡 BCL-XL

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RNA干扰STAT3基因对结肠癌细胞sw620凋亡的影响 被引量：4

14

作者 施露 张献全 +2 位作者 蒋国燕 李华 达利隽 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期412-414,共3页

目的 :构建针对信号转导和转录活化因子3(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)的小RNA干扰表达质粒,利用该质粒特异性抑制人结肠癌sw620细胞中STAT3基因的表达,观察RNA干扰STAT3基因对人结肠癌细胞sw620凋亡... 目的 :构建针对信号转导和转录活化因子3(signal transducers and activators of transcription 3,STAT3)的小RNA干扰表达质粒,利用该质粒特异性抑制人结肠癌sw620细胞中STAT3基因的表达,观察RNA干扰STAT3基因对人结肠癌细胞sw620凋亡的影响。方法:将针对STAT3基因的干扰短发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)克隆到pGenesil-1质粒表达载体中,命名为p-shSTAT3。质粒转染sw620细胞48 h后,利用RT-PCR(reverse transcription PCR)和Western blot技术检测STAT3基因mRNA和蛋白水平上的表达情况。利用Hochest 33258染色对转染后sw620细胞的凋亡情况进行检测;利用Western blot技术对STAT3基因调控相关的凋亡信号通路中的p53、Caspase 3、Bax、Bcl-XL和Bcl-2蛋白的表达情况进行检测。结果:转染STAT3干扰质粒能在细胞水平上有效抑制sw620细胞中STAT3基因mRNA和蛋白水平上的表达(P=0.000)。Hochest 33258染色表明在sw620细胞中干扰掉STAT3基因的表达能促进细胞凋亡的发生(P=0.000),乱序对照对细胞无明显的凋亡促进作用(P=0.218)。对作用机理进行研究后发现,在sw620细胞中干扰掉STAT3基因能促进p53、Caspase 3和Bax 3个凋亡诱导蛋白的表达;同时下调Bcl-XL和Bcl-2 2个凋亡抑制蛋白的表达。结论:利用RNA干扰技术干扰掉sw620细胞中STAT3基因的表达能促进sw620细胞凋亡,为结肠癌治疗提供新的研究思路和作用靶点。 展开更多

关键词 信号转导和转录活化因子3 RNA干扰 结肠癌 人结肠癌细胞sw620

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桑椹汁对结肠癌细胞株SW620增殖和凋亡的影响 被引量：2

15

作者 吕欢 闻燕 +3 位作者 王俊 许晓风 吴宇 江明珠 《蚕业科学》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期394-399,共6页

为证实桑椹的抗肿瘤功能,以不同浓度桑椹汁处理结肠癌细胞株SW620,应用MTT法对比绘制生长曲线,调查SW620细胞的增殖情况,通过荧光定量PCR、SDS-PAGE检测SW620细胞凋亡相关基因p53的转录及蛋白质表达变化,分析桑椹汁对SW620细胞增殖、凋... 为证实桑椹的抗肿瘤功能,以不同浓度桑椹汁处理结肠癌细胞株SW620,应用MTT法对比绘制生长曲线,调查SW620细胞的增殖情况,通过荧光定量PCR、SDS-PAGE检测SW620细胞凋亡相关基因p53的转录及蛋白质表达变化,分析桑椹汁对SW620细胞增殖、凋亡的影响机制。结果显示,桑椹汁对SW620细胞增殖的抑制作用随着桑椹汁浓度的升高而明显增强,以花青素质量浓度为6.267 3×10-3mg/mL的桑椹汁处理24 h后SW620细胞发生了以下变化:细胞的生长明显受到抑制,细胞脱落、变形与贴壁性下降,出现凋亡现象;细胞基因组DNA发生较明显的降解;荧光定量PCR检测细胞中p53基因的转录水平较对照组增加约6.5倍,SDS-PAGE检测p53蛋白的表达量也明显高于对照组。研究结果表明,桑椹汁对结肠癌细胞株SW620的增殖有抑制作用,其抑制机制可能是通过其活性物质诱导SW620细胞中p53基因上调表达导致细胞凋亡。 展开更多

关键词 桑椹汁 结肠癌细胞株sw620 增殖 凋亡 P53基因 荧光定量PCR

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miR-126对结肠癌SW480细胞增殖、凋亡、周期及SOX2表达的影响 被引量：8

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作者 孟玮 宗治国 +2 位作者 史晓宇 张敬 赵峻峰 《中国比较医学杂志》 CAS 北大核心 2018年第4期93-97,共5页

目的探讨miR-126通过靶向调控SOX2表达影响结肠癌细胞的增殖和凋亡。方法脂质体Lipofectamine^(TM)2000将miR-126 mimics和miR-126 NC转入SW480细胞中,RT-PCR法检测miR-126表达,MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期,RT-... 目的探讨miR-126通过靶向调控SOX2表达影响结肠癌细胞的增殖和凋亡。方法脂质体Lipofectamine^(TM)2000将miR-126 mimics和miR-126 NC转入SW480细胞中,RT-PCR法检测miR-126表达,MTT法检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期,RT-PCR法及western blot检测细胞中SOX2蛋白及mRNA表达,并进行荧光素酶报告基因分析。结果与miR-126 NC组比较,miR-126 mimics组miR-126表达量显著提高(P<0.01),细胞活力降低(P<0.01),细胞早期凋亡率及晚期凋亡率均显著提高(P<0.01),细胞周期阻滞于G1期(P<0.01),同时miR-126 mimics能够靶向下调SOX2蛋白及mRNA表达(P<0.01)。结论 miR-126 mimics通过靶向下调SOX2表达进而抑制SW480细胞增殖,并诱导细胞凋亡。 展开更多

关键词 MIR-126 结肠癌细胞sw480 增殖 凋亡 SOX2

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PMS2通过ERK/ERCC1通路对结肠癌SW480细胞生物学行为的影响 被引量：2

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作者 黄雪茹 丁绪浩 +5 位作者 陈素贤 谭琦 吴月明 牛晓敏 王亚帝 佟青 《吉林大学学报（医学版）》 CAS CSCD 北大核心 2023年第4期931-940,共10页

目的:探讨减数分裂后分离蛋白2(PMS2)表达对结肠癌SW480细胞生物学行为的影响,阐明PMS2与切除修复交叉互补组1(ERCC1)和细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号转导通路的关系。方法:将PMS2 siRNA质粒和PMS2过表达质粒分别转染入结肠癌SW480细胞(... 目的:探讨减数分裂后分离蛋白2(PMS2)表达对结肠癌SW480细胞生物学行为的影响,阐明PMS2与切除修复交叉互补组1(ERCC1)和细胞外调节蛋白激酶(ERK)信号转导通路的关系。方法:将PMS2 siRNA质粒和PMS2过表达质粒分别转染入结肠癌SW480细胞(分别为PMS2敲减组和PMS2过表达组),同时设PMS2敲减对照组(siRNA-NC组)和PMS2过表达对照组(PMS2 control组)。采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)法检测各组细胞中PMS2 mRNA表达水平,Western blotting法检测各组细胞中PMS2蛋白表达水平,CCK-8法检测各组细胞增殖活性,细胞划痕实验检测各组细胞迁移率,Transwell小室实验检测各组细胞中侵袭细胞数,流式细胞术检测顺铂作用后各组细胞凋亡率。通过String数据库,对PMS2、ERCC1和ERK上下游蛋白的关系进行生物信息学分析。SW480细胞分别采用3条siRNA进行PMS2和ERCC1敲减,采用RT-qPCR法验证PMS2与ERCC1的相互作用,采用Western blotting法检测各组细胞中PMS2、细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)和磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)蛋白表达水平。结果:RT-qPCR法和Western blotting法检测,PMS2基因敲减和过表达细胞模型构建成功。与siRNA-NC组比较,PMS2敲减组细胞增殖活性和细胞迁移率明显升高(P<0.05或P<0.01),侵袭细胞数明显增加(P<0.01),顺铂作用后细胞凋亡率明显降低(P<0.01);与PMS2 control组比较,PMS2过表达组细胞增殖活性和细胞迁移率明显降低(P<0.01),侵袭细胞数明显减少(P<0.01),顺铂作用后细胞凋亡率明显升高(P<0.01)。蛋白-蛋白互作(PPI)富集P值为2.09e-07,包含ERCC1和ERK1/2等相互作用节点数共有13个,提示PMS2、ERCC1和ERK1/2之间可能存在调控作用。与siRNA-NC组比较,各PMS2敲减组细胞中ERCC1 mRNA表达水平明显降低(P<0.05或P<0.01);与siERCC1-NC组比较,各ERCC1敲减组细胞中PMS2 mRNA表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。与siRNA-NC组比较,PMS2敲减组细胞中PMS2、ERK1/2和p-ERK1/2蛋白表达水平均明显降低(P<0.05或P<0.01);与PMS2 control组比较,PMS2过表达组细胞中PMS2、ERK1/2和p-ERK1/2蛋白表达水平均明显升高(P<0.01)。结论:PMS2表达可影响结肠癌SW480细胞增殖、迁移、侵袭和抗凋亡能力。PMS2与ERCC1存在互相作用关系,并可通过调节ERCC1参与ERK信号转导通路。 展开更多

关键词 结肠肿瘤 sw480细胞 减数分裂后分离蛋白2 切除修复交叉互补组1 细胞外调节蛋白激酶1/2 信号通路

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具有相同遗传背景的人结肠癌细胞系生物学特性的鉴定 被引量：7

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作者 张艳飞 刘莉 丁彦青 《临床与实验病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期86-90,共5页

目的对三种取自不同转移部位的结肠癌细胞系进行生物学特性的鉴定。方法从体内成瘤性、原位移植后的自发性转移能力,以及体外生长、克隆形成率、粘附、运动、侵袭能力等方面,探讨具有相同遗传背景的SW480、SW620以及SW480/M5三种细胞系... 目的对三种取自不同转移部位的结肠癌细胞系进行生物学特性的鉴定。方法从体内成瘤性、原位移植后的自发性转移能力,以及体外生长、克隆形成率、粘附、运动、侵袭能力等方面,探讨具有相同遗传背景的SW480、SW620以及SW480/M5三种细胞系生物学特性的差异。结果体内实验证明SW480具有多器官转移的潜能,SW620只具有淋巴结转移的能力,SW480/M5只具有肝脏转移的能力,SW480/M5的皮下瘤生长速度最快,其次是SW620细胞;体外实验证明W480/M5和SW620的体外生长、克隆形成能力均强于SW480细胞,而两者对纤维黏连蛋白的粘附能力较SW480细胞弱,SW480/M5的运动及侵袭能力强于SW480及SW620细胞。结论与SW480细胞相比,SW480/M5和SW620细胞具有一定的器官亲和力,三者的遗传背景一致,是研究结肠癌晚期演进的遗传改变的重要资源。 展开更多

关键词 结肠肿瘤 原位接种 sw480 sw620

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REV3基因对结肠癌细胞遗传信息表达的影响 被引量：4

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作者 隋御 李元杰 +1 位作者 金彩霞 徐方 《遗传》 CAS CSCD 北大核心 2010年第5期467-472,共6页

利用RNA干扰技术降低REV3基因在人类结肠癌细胞(SW480)中的表达,以荧光实时定量PCR检测REV3表达量的降低情况,选择低表达效率具有统计学意义的细胞作为实验组细胞。运用细胞生长曲线、MTT、微核和姐妹染色单体交换等方法,对实验组和对... 利用RNA干扰技术降低REV3基因在人类结肠癌细胞(SW480)中的表达,以荧光实时定量PCR检测REV3表达量的降低情况,选择低表达效率具有统计学意义的细胞作为实验组细胞。运用细胞生长曲线、MTT、微核和姐妹染色单体交换等方法,对实验组和对照组细胞进行细胞生长周期、增殖变化情况和遗传信息表达等指标的检测。结果显示:REV3低表达的结肠癌实验组细胞在细胞增殖以及细胞的微核和姐妹染色单体交换等遗传信息表达均明显低于结肠癌对照组细胞,实验结果具有统计学意义(P<0.05);结肠癌的两对照组间(阴性和空白)的结果虽然有一定的差异,但没有统计学意义。研究结果提示,REV3低表达时,可能对结肠癌细胞(SW480)的生长与增殖产生影响,并对微核和姐妹染色单体交换等遗传不稳定现象的产生有一定的抑制作用。 展开更多

关键词 REV3基因 RNA干扰 结肠癌细胞(sw480) 荧光实时定量PCR 遗传不稳定

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MTT检测超声激活血卟啉对SW-480细胞的杀伤作用 被引量：1

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作者 张坤 齐浩 +3 位作者 刘全宏 张军平 李清 李萌 《陕西师范大学学报（自然科学版）》 CAS CSCD 北大核心 2003年第1期94-98,共5页

采用1.1、1.6、2.3MHz频率聚焦超声结合血卟啉的方式对体外培养的人结肠癌细胞SW 480进行照射,其介质分别为NaCl溶液、RPMI1640、完全培养基,用MTT法测试了SDT对肿瘤细胞的杀伤效果.结果表明,SW 480细胞在声照强度为1.5W/cm2,频率2.3MH... 采用1.1、1.6、2.3MHz频率聚焦超声结合血卟啉的方式对体外培养的人结肠癌细胞SW 480进行照射,其介质分别为NaCl溶液、RPMI1640、完全培养基,用MTT法测试了SDT对肿瘤细胞的杀伤效果.结果表明,SW 480细胞在声照强度为1.5W/cm2,频率2.3MHz条件下,介质为NaCl溶液、RPMI1640和完全培养基中都存在超声激活血卟啉增强杀伤肿瘤细胞的效果,且在RPMI1640和完全培养基中这种效果和处理后细胞孵育的时间有一定的相关性. 展开更多

关键词 MTT检测 sw-480细胞 杀伤作用 微量培养四唑氮盐检测 聚焦超声 血卟啉 人结肠癌细胞 光动力学疗法

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