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人结直肠癌细胞HCT116红色和绿色荧光标记肿瘤模型的建立 被引量:6
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作者 李小颖 高凯 +1 位作者 刘学丽 张连峰 《中国比较医学杂志》 CAS 2009年第9期7-10,I0001,I0002,共6页
目的筛选表达绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白基因的人的单克隆结直肠癌细胞系,为体内监测肿瘤的早期生长建立一种新的肿瘤动物模型。方法以脂质体2000介导chickenβ-actin-GFP-neo和chickenβ-actin-DsRed-neo转染人结直肠癌细胞HCT-116,... 目的筛选表达绿色荧光蛋白和红色荧光蛋白基因的人的单克隆结直肠癌细胞系,为体内监测肿瘤的早期生长建立一种新的肿瘤动物模型。方法以脂质体2000介导chickenβ-actin-GFP-neo和chickenβ-actin-DsRed-neo转染人结直肠癌细胞HCT-116,经梯度浓度G418筛选获得稳定表达红色和绿色荧光蛋白的细胞克隆并扩大培养。BALB/CA-nu裸鼠皮下接种1×106个发光细胞使其成瘤,活体荧光成像系统观察肿瘤的生长情况。结果获得了稳定表达GFP、DsRed的人结肠癌细胞株,将其接种到裸鼠体内可成瘤,利用活体成像系统观察了肿瘤的生长过程,肿瘤的发光随着观察时间的延长而增加。结论红色和绿色荧光蛋白能够在人结直肠癌细胞HCT-116中长期稳定表达,用红色和绿色荧光蛋白标记的人结直肠癌细胞HCT-116建立的裸鼠肿瘤模型为进一步研究结肠肿瘤和相应的药物筛选提供了一种简便、可行的新方法。 展开更多
关键词 人结直肠癌细胞 绿色荧光蛋白 红色荧光蛋白 光学影像 小鼠
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mTOR信号通路介导黄芩苷抑制人结肠癌细胞的增殖 被引量:5
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作者 吴登艳 宋娇 +4 位作者 董海良 邢伟 徐祥 黄宏 郝进 《第三军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第23期2399-2402,共4页
目的探讨黄芩苷抑制人结肠癌细胞(HCT116)增殖的分子机制。方法采用MTT比色法检测不同浓度的黄芩苷(0.01~100μg/ml)对体外培养的HCT116细胞增殖的抑制作用;采用Western blot分析检测被黄芩苷干预的HCT 116细胞的增殖相关蛋白的表达。... 目的探讨黄芩苷抑制人结肠癌细胞(HCT116)增殖的分子机制。方法采用MTT比色法检测不同浓度的黄芩苷(0.01~100μg/ml)对体外培养的HCT116细胞增殖的抑制作用;采用Western blot分析检测被黄芩苷干预的HCT 116细胞的增殖相关蛋白的表达。结果与对照组比较,浓度为1~100μg/ml的黄芩苷处理组明显抑制HCT 116细胞的增殖(P<0.05)。用100μg/ml黄芩苷处理后,增殖相关的蛋白mTOR、p70S6K、S6、eIF4E表达明显下调(P<0.05),4E-BP1表达明显上调。p-mTOR(Ser2448)、p-S6(Ser235/236)、p-4E-BP1(Thr37/46)的磷酸化水平下降(P<0.05)。结论黄芩苷能通过抑制mTOR信号通路来抑制人结直肠癌HCT116细胞的增殖。 展开更多
关键词 黄芩苷 人结直肠癌HCT116细胞 增殖 MTOR信号通路
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Glut1基因沉默对人结肠癌HT-29细胞株增殖、分化及凋亡的影响及机制研究 被引量:6
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作者 郭圣超 武雪亮 +4 位作者 薛军 韩磊 孙光源 杨东东 屈明 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2021年第5期790-795,共6页
目的探究葡萄糖转运蛋白1(Glut 1)基因沉默对人结直肠癌HT-29细胞增殖、分化及凋亡的影响及机制。方法将Glut 1干扰序列(siRNA)转染至人结肠癌HT-29细胞作为shGlut 1组,非干扰序列转至HT-29细胞作为NC组,HT-29细胞作为Blank组,癌旁正常... 目的探究葡萄糖转运蛋白1(Glut 1)基因沉默对人结直肠癌HT-29细胞增殖、分化及凋亡的影响及机制。方法将Glut 1干扰序列(siRNA)转染至人结肠癌HT-29细胞作为shGlut 1组,非干扰序列转至HT-29细胞作为NC组,HT-29细胞作为Blank组,癌旁正常组织细胞作为Control组,应用qRT-PCR法和Western blot法检测各组细胞中Glut 1、TGF-β1、PI3K、AKT、PTEN、mTOR mRNA和相应蛋白的表达水平,并检测Bcl-2/Bax比值,p-PI3K、p-S 473-AKT、p-S 389-S6K1、p-T 70-4 EBP1、Cleaved Caspase-3、Cleaved-PARP蛋白的表达;MTT法检测各组细胞增殖能力变化,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡情况,克隆形成实验检测肿瘤细胞体外增殖成瘤能力。结果免疫荧光结果表明shGlut 1组转染效率较高,符合实验标准;与Control组比较,结肠癌组织中Glut 1、TGF-β1、PI3K、AKT、mTOR、Bcl-2 mRNA和蛋白的表达上调,而PTEN、Bax的mRNA和蛋白的表达下调,p-PI3K、p-S 473-AKT、p-S 389-S6K1和p-T 70-4 EBP1蛋白表达上调,Cleaved Caspase-3、Cleaved-PARP蛋白表达下调(P均<0.05);与Blank组和NC组比较,shGlut 1组Glut 1、TGF-β1、PI3K、AKT、mTORC 1、Bcl-2 mRNA和蛋白的表达下调,PTEN、Bax mRNA和蛋白的表达上调,p-PI3K、p-S 473-AKT、p-S 389-S6K1和p-T 70-4 EBP1表达下调,Cleaved Caspase-3、Cleaved-PARP蛋白的表达上调,增殖率下调,G0/G1期较多而S期较少,凋亡率上调,克隆形成细细胞生长较慢(P均<0.05)。结论Glut 1基因沉默能抑制结直肠癌细胞的增殖与分化,促进其凋亡,考虑为抑制TGF-β/PI3K-AKT-mTOR信号通路。 展开更多
关键词 Glut 1基因沉默 人结直肠癌HT-29细胞 增殖 分化 凋亡 机制
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水牛奶及荷斯坦牛奶对Caco-2细胞抗炎抗氧化能力的影响
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作者 胡馨月 《现代畜牧科技》 2024年第9期44-49,共6页
该试验旨在探究水牛奶及荷斯坦牛奶各组分对人结直肠癌细胞(Caco-2)抗炎抗氧化能力的影响。分别用水牛奶及荷斯坦牛奶各组分预处理细胞,后使用终浓度为1μmol/L的LPS或H2O2诱导细胞,通过CCK-8、qPCR、流式细胞术、ELISA及MDA、SOD、CAT... 该试验旨在探究水牛奶及荷斯坦牛奶各组分对人结直肠癌细胞(Caco-2)抗炎抗氧化能力的影响。分别用水牛奶及荷斯坦牛奶各组分预处理细胞,后使用终浓度为1μmol/L的LPS或H2O2诱导细胞,通过CCK-8、qPCR、流式细胞术、ELISA及MDA、SOD、CAT和GSH-Px试剂盒检测细胞抗炎抗氧化能力的变化。结果显示,与对照组相比,各组Caco-2细胞的存活率显著上升(P<0.05);各组TNF-α、IL-1β、IL-6蛋白及mRNA的表达量均降低,Nrf-2的表达量显著上升(P<0.05),Keap1的表达量显著降低(P<0.05)。水牛奶及荷斯坦牛奶作用于Caco-2细胞后,相比对照组,ROS含量均显著下降(P<0.05);各组SOD含量相比对照组均上升;MDA含量除荷斯坦全奶组和水牛乳清组外,其余各组相比对照组均显著下降(P<0.05);CAT含量相比对照组均显著上升(P<0.05);GSH-Px(GPx)含量相比空白组均显著下降(P<0.05)。试验结果表明,水牛奶及荷斯坦牛奶作用于细胞后,能不同程度的提升Caco-2细胞的抗炎抗氧化能力。 展开更多
关键词 人结直肠癌细胞 炎症 氧化应激
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活性氧抑制剂对绞股蓝皂苷抑癌作用的影响 被引量:2
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作者 肖娅萍 阎晗 +2 位作者 王攀 支欣 张嘉琪 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2014年第7期205-209,共5页
【目的】研究活性氧清除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)对绞股蓝皂苷(Gypenosides,Gyp)作用下人结直肠癌SW620细胞生长抑制的作用。【方法】采用MTT法检测NAC对Gyp作用下SW620细胞增殖的影响;采用流式细胞仪观察NAC对Gyp处理的SW620细胞的线粒... 【目的】研究活性氧清除剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)对绞股蓝皂苷(Gypenosides,Gyp)作用下人结直肠癌SW620细胞生长抑制的作用。【方法】采用MTT法检测NAC对Gyp作用下SW620细胞增殖的影响;采用流式细胞仪观察NAC对Gyp处理的SW620细胞的线粒体膜电位、DNA片段生成及细胞凋亡的影响。【结果】NAC可以对抗Gyp对SW620细胞的增殖抑制;可解除Gyp诱导SW620细胞凋亡过程中引起的线粒体膜电位降低,从而抑制DNA片段生成的增加,进而抑制Gyp诱导的SW620细胞凋亡。【结论】Gyp在诱导SW620细胞凋亡的过程中启动了关键因子活性氧,从而导致线粒体膜电位下降、DNA损伤,并最终诱导细胞凋亡;活性氧抑制剂可以削弱这种影响。 展开更多
关键词 绞股蓝皂苷 人结直肠癌SW620细胞 活性氧抑制剂
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